海水—揮發(fā)性酚的測定—4-氨基安替比林分光光度法

1、FHZDZHS0039 海水 揮發(fā)性酚的測定 4 氨基安替比林分光光度法F-HZ-DZ-HS-0039海水揮發(fā)性酚的測定 4-氨基安替比林分光光度法1 范圍本方法適用于海水及工業(yè)排污口水體中低于 10mg/L 酚含量的測定。酚含量超過此值，可 用溴化滴定法。檢出限：1.1卩g/L。2 原理被蒸餾出的揮發(fā)酚類在 pH10.0±0.2 和以鐵氰化鉀為氧化劑的溶液中，與 4-氨基安替比林 反應(yīng)形成有色的安替比林染料。此染料的最大吸收波長在 510nm 處，顏色在 30min 內(nèi)穩(wěn)定，用三氯甲烷萃取，可穩(wěn)定 4h 并能提高靈敏度，但最大吸收波長移至460nm 。本方法不能區(qū)別不同類型的酚，而

2、在每份試樣中各種酚類化合物的百分組成是不確定的。 因此，不能提供含有混合酚的通用標(biāo)準(zhǔn)參考物，本方法選用苯酚作為參比標(biāo)準(zhǔn)。來自水體的干擾可能有分解酚的細(xì)菌、氧化及還原物質(zhì)和樣品的強堿性條件。在分析前除 去干擾化合物的處理步驟中可能有一部分揮發(fā)酚類被除去或損失。因此，對一些高污染海水， 為消除干擾和定量回收揮發(fā)酚類，需要較嚴(yán)格的操作技術(shù)。干擾物質(zhì)的消除：氧化劑： 水樣中的氧化劑能將酚類氧化而使結(jié)果偏低。 采樣后取一滴酸化了的水樣于淀粉 - 碘化鉀試紙上，若試紙變藍(lán)則說明水中有氧化劑。采樣后應(yīng)立即加入硫酸亞鐵溶液或抗壞血酸 溶液以除去所有的氧化性物質(zhì)。過剩的硫酸亞鐵或抗壞血酸在蒸餾步驟中被除去。油類

3、和焦油：如水樣中含有石油制品等低沸點污染物，可使蒸餾液渾濁，某些酚類化合物 還可能溶于這些物質(zhì)中。采樣后用分液漏斗分離出浮油，在沒有硫酸銅存在的條件下，先用粒 狀氫氧化鈉將pH調(diào)節(jié)至1212.5，使酚成為酚鈉，以避免萃取酚類化合物。盡快用四氯化碳 從水相中提出雜質(zhì) （每升廢水用 40mL 四氯化碳萃取兩次 ）。并將 pH 調(diào)到 4.0（見 6.1）。用三氯甲烷萃取時，須用無酚水作一試劑空白，或先用 1g/L 氫氧化鈉溶液洗滌三氯甲烷， 以除去可能存在的酚。二氯甲烷可代替三氯甲烷，尤其在用氫氧化鈉提純?nèi)燃淄槿芤盒纬扇?濁液時。硫的化合物酸化時釋放出硫化氫能干擾酚的測定，用磷酸將水樣酸化至pH4

4、.0,短時間攪拌曝氣即可除去硫化氫及二氧化硫的干擾。然后加入足夠的硫酸銅溶液，使樣品呈淡藍(lán)色或不 再有硫化銅沉淀產(chǎn)生。然后將 pH調(diào)到4.0。銅（n ）離子抑制了生物降解，酸化保證了銅 （H ）離 子的存在并消除樣品為強堿性時的化學(xué)變化。3 試劑除非另作說明，所用試劑均為分析純，水為不含酚和氯的蒸餾水。3.1 無酚水置普通蒸餾水于全玻璃蒸餾器中，加氫氧化鈉至強堿性，滴入高錳酸鉀溶液至深紫紅色，放入少許無釉瓷片（浮石或玻璃毛細(xì)管亦可），加熱蒸餾。棄去初餾份。收集無酚水于硬質(zhì)玻璃瓶中，或于每升蒸餾水中加入 0.2g經(jīng)280C活化4h的活性炭粉末，充分振搖后用0.45卩m濾膜 過濾。3.2 三氯甲烷

5、（CHCI3）或二氯甲烷（CH2CI2）。3.3精制苯酚將苯酚（C6H5OH）置于50C70C熱水浴中溶化，小心地移入100mL蒸餾水中，用包有鋁箔的軟木塞塞緊，其中插有一支250 C水銀溫度計，蒸餾瓶的支管與空氣冷凝管連接，用一干燥的錐形燒瓶接受器。如圖1所示。電爐加熱蒸餾，棄去帶色的初餾出液，收集182C184 C餾份（無色）密封避光保存。3.4 鹽酸（p 1.19 g/mL）。3.5磷酸溶液，1+9。3.6 硫酸銅溶液100 g/L :稱取10g硫酸銅（CuSO4 5出0）溶解于水中并稀釋至 100mL。3.7 溴酸鹽-溴化物溶液，C（1/6KBrO 3）=0.100mol/L :稱取2

6、.7848g無水溴酸鉀（KBrO 3）溶于水中， 加10g溴化鉀（KBr）溶解后稀釋至1000mL。3.8 緩沖溶液，pH 9.8 :稱取20g氯化銨（NH4CI）溶于100mL濃氨水（NH 3 出0,卩0.90g/mL） 中。此溶液pH為9.8。3.9 4-氨基安替比林溶液，20g/L :稱取2g 4-氨基安替比林C6H5NN （CH3） C （CH3） ： C （ NH2） C: O溶于水中，并稀釋至100mL，貯于棕色瓶中，置冰箱內(nèi)。有效期一周。3.10鐵氰化鉀溶液，80g/L :稱取8g鐵氰化鉀K3 Fe （CN ） 6溶于水中，并稀釋至 100mL。貯 于棕色瓶中。置冰箱內(nèi)。可穩(wěn)定一

7、周。顏色變深時，應(yīng)重新配制。3.11 硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定液，C（Na2S2O3）=0.0250mol/L3.11.1 稱取6.21g硫代硫酸鈉（Na2S2O3 5H2O）用剛煮沸冷卻的水溶解，加入約 0.2g碳酸鈉 （Na2CO3），待全部溶解后，移入 1000mL容量瓶中，搖勻。移入棕色試劑瓶中。置于陰涼處。其準(zhǔn)確濃度用重鉻酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)定。13.11.2 重鉻酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶，C（K2C2O7）=0.0250mol/L:稱取1.2258g預(yù)先在110C烘2h的光譜6純重鉻酸鉀（KzChO?）,用水溶解，移入 1000mL容量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻。13.11.3 硫代硫酸鈉溶液的標(biāo)定：取20

8、.00mL重鉻酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液C （K262O7） =0.0250mol/L61三份，分別置于三個 250mL具塞三角瓶中，加 50mL硫酸溶液C （ H2SO4） =3mol/L , 1g碘化2鉀（KI ）,于暗處放置5min。用硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至淺黃色，加1mL淀粉溶液（10g/L ）繼續(xù)滴定至藍(lán)色剛消失（終點顯示三價鉻離子的綠色）。記錄消耗的硫代硫酸鈉溶液的毫升數(shù)。同時用水作試劑空白用硫代硫酸鈉滴定。按公式（1）計算硫代硫酸鈉溶液的濃度：C(Na2S2O3)= C 7 式（1）中：C（Na2S2O3）硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度，mol/L ;C 重鉻酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度，mol/L ;Vi

9、重鉻酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液體積，mL ;V滴定消化硫代硫酸鈉溶液的體積（減空白），mL。3.12酚標(biāo)準(zhǔn)溶液3.12.1 酚標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液，1.00g/L :稱取I.OOOOg精制苯酚溶于水中，移入1000mL容量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻。此溶液1.00mL含1.00mg酚。通常直接稱取精制的苯酚即可配標(biāo)準(zhǔn)溶液，若為非精制苯酚可按下法標(biāo)定：移取10.00mL待標(biāo)定的酚貯備溶液于250mL碘量瓶中，加入 50mL水，力口 10.0mL溴酸鹽-1溴化鉀溶液C （ KBrO3） =0.100mol/L及5mL鹽酸（p 1.19g/mL）,立即蓋緊瓶塞，搖勻。避光6放置5min后用硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液C（Na2S2

10、O3）=0.0250mol/L滴定至呈淡黃色時，加入 1mL淀 粉溶液（10g/L ）繼續(xù)滴定至藍(lán)色剛好消失為止，記下硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定體積V2。同時用水作試劑空白滴定，消耗硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液體積為V1。按公式（2）計算酚標(biāo)淮貯備溶液的濃度：Pf=zX0.0250 X15.68 X100010(2)式（2）中：p f酚溶液濃度，卩g/mL ;V1試劑空白消耗硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的毫升數(shù)，mL ;V2 酚貯備溶液消耗硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的毫升數(shù)，mL。3.12.2 酚標(biāo)準(zhǔn)溶液，10.0g/mL :移取10.0mL （或相當(dāng)于10.0mg酚的體積）酚標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液（1.00mg/mL ）于1000m

11、L容量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻。此溶液1.00mL含10.0卩g酚，當(dāng)天配制。3.12.3 酚標(biāo)準(zhǔn)使用溶液，1.001 g/mL :移取10.0mL酚標(biāo)準(zhǔn)溶液（10.0 i g/mL ）于100mL容量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻。此溶液1.00mL含1.00i g酚。現(xiàn)用現(xiàn)配。3.13甲基橙指示劑溶液，2g/L。3.14淀粉溶液，10g/L :稱取1.0g可溶性淀粉，盛于200mL燒杯中，加少量水調(diào)成糊狀，加入100mL沸水?dāng)嚢瑁浜蠹尤?0.4g氯化鋅（ZnCI 2）或0.1g水楊酸（C7H6O3）防腐。4儀器設(shè)備4.1 分光光度計。4.2蒸餾裝置：全玻璃，包括 500mL玻璃蒸餾器和蛇形

12、冷凝管。如圖1所示。3圖1苯酚蒸餾裝置示意圖1 10mm或25mm微量蒸餾燒瓶；2空氣冷凝管；3250 C水銀溫度計；4電爐；5鐵架后；6 軟木 塞；7三角燒瓶（收集苯酚）5試樣制備5.1海水樣品用玻璃或金屬采樣器采集，水樣現(xiàn)場預(yù)處理方法：加H3PO4至pH V 4,每升水樣加入2g硫酸銅（CUSO45出0），貯存于硬質(zhì)玻璃瓶中， 在4C保存。保存時間24h，詳見GB17378.3 1998。5.2試樣量測定水樣用量200mL 06操作步驟6.1水樣前處理量取200mL海水樣（若酚量高可少量取水樣，記下體積V,加純水至200mL ,置于500mL全玻璃蒸餾器中，用磷酸溶液（1+9）調(diào)節(jié)pH到4

13、.0左右以甲基橙作指示劑（2g/L），使水樣由 桔色變?yōu)槌燃t色。加入5mL硫酸銅溶液（100g/L ）,放入少許無釉瓷片（浮石或玻璃毛細(xì)管），加熱。蒸出150mL左右時，停止蒸餾，在沸騰停止后，向蒸餾瓶內(nèi)加入約 50mL水，繼續(xù)蒸餾， 直到收集餾出液（D）大于或等于200mL為止。若樣品已按 5.1條所述的方法加磷酸和硫酸銅 保存，則可直接蒸餾（若水樣經(jīng)稀釋則須補加磷酸及硫酸銅溶液）。用磷酸將樣品酸化到pH4.0以防止酚類化合物分解加入硫酸銅抑制生物對酚的氧化作用。注1：將水樣蒸餾，餾出液清亮、無色，從而消除渾濁和顏色的干擾，鐵（山）能與鐵氰酸根生成棕色產(chǎn)物而干擾測定，蒸餾將排除這一干擾。注2

14、:測定酚的水樣必須用全玻璃蒸餾器蒸餾，如用橡皮塞，膠皮管等聯(lián)接蒸餾燒瓶及冷凝管，都能使結(jié) 果偏高和出現(xiàn)假陽性而產(chǎn)生誤差。注3:停止蒸餾時，須防電爐余熱引起的爆沸，以免將瓶塞沖起砸碎或沾污冷凝管。6.2工作曲線的繪制移取 0、0.50、1.00、2.00、4.00、7.00、10.00、15.00mL 酚標(biāo)準(zhǔn)使用溶液（1.00 卩 g/mL）， 分別置于預(yù)先盛有100mL水的250mL分液漏斗中，最后加水至200mL系列各點含酚濃度分別 為 0、2.50、5.00、10.0、20.0、35.0、50.0、75.0 卩 g/L。向各分液漏斗內(nèi)加入 I.OOmL緩沖溶液（pH9.8）,混勻。再各加入

15、1.0mL4-氨基安替比林溶 液（20g/L），混勻。力口 1.0mL鐵氰化鉀溶液，混勻。放置10min。力口 10.0mL三氯甲烷（CHCl 3），振搖2min，靜置分層。有機層于波長 460nm處，用三氯甲烷作參比，測定吸光度（AJ和標(biāo)準(zhǔn)空白（A。）。以吸光度（Ai-Ao）為縱坐標(biāo)，酚濃度（卩g/L）為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。注1: pH在8.010.0范圍內(nèi)顯示的顏色都可以，但為了防止芳香胺（苯胺、甲苯胺、乙酰苯胺）的干擾，以pH9.8 10.2最合適，因為此范圍內(nèi) 20mg/L苯胺所產(chǎn)生的顏色僅相當(dāng)于 O.1mg/L酚的顏色。注2: NH4OH-NH4CI體系的緩沖溶液比較穩(wěn)定，由于增大了

16、溶液NH3的濃度，可以抑制4-氨基安替比林被氧化為安替比林紅的反應(yīng)。注3:游離氯能氧化4-氨基安替比林，還能與酚起取代反應(yīng)生成氯酚。注4 :主試劑在空氣中易變質(zhì)而使底色加深，此外，4-氨基安替比林的純度越高，靈敏度越高，如配制的 4-氨基安替比林溶液顏色較深時，可用活性炭處理脫色。注5:過硫酸銨（NH4） 2S2O8可代替鐵氰化鉀K3Fe（CN）6。注6:各種試劑加入的順序很重要，不能隨意更改。注7:吸收皿在連續(xù)使用過程中，宜用氯仿蕩洗，揮發(fā)至干。6.3水樣測定將餾出液（D）轉(zhuǎn)入250mL分液漏斗中，按標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制操作步驟（6.2）測定試樣吸光度Aw和試樣空白吸光度Ab。結(jié)果計算g/L )。由Aw Ab.查標(biāo)準(zhǔn)曲線或用線性回歸方程計算水樣中揮發(fā)酚的濃度（卩 若是經(jīng)稀釋后再蒸餾的水樣則按公式（3）計算水樣中揮發(fā)酚的濃度:(3)pf =C 導(dǎo)式（3）中:p f 海水中揮發(fā)性酚的濃度，卩g/L ；C 查標(biāo)準(zhǔn)曲線得揮發(fā)性酚的濃度，卩g/L ；W餾出液（D）體積，mL ;V量取水樣體積,mL。171#