創(chuàng)傷患者早期T淋巴細(xì)胞亞群的變化及臨床意義

1、創(chuàng)傷患者早期T淋巴細(xì)胞亞群的變化及臨床意義    目的 探討創(chuàng)傷患者早期T細(xì)胞亞群的變化規(guī)律以及與創(chuàng)傷后發(fā)生感染的關(guān)系。方法 60例創(chuàng)傷患者按損傷嚴(yán)重度評(píng)分(ISS)分為2組     作者：甘磊磊，呂德超，王家寶    作者單位：安徽醫(yī)科大學(xué)附屬省立醫(yī)院 急診外科，安徽 合肥 230001   【摘要】  目的 探討創(chuàng)傷患者早期T細(xì)胞亞群的變化規(guī)律以及與創(chuàng)傷后發(fā)生感染的關(guān)系。方法 60例創(chuàng)傷患者按損傷嚴(yán)重度評(píng)分(ISS)分為2組，即嚴(yán)重創(chuàng)傷組(A組，ISS

2、16)和非嚴(yán)重創(chuàng)傷組(B組，8ISS<16)，A、B組在傷后第1、4、7天抽取外周靜脈血2 ml，健康對(duì)照組20例(C組)一次性抽取外周靜脈血2 ml，分別檢測(cè)各標(biāo)本T細(xì)胞亞群的值并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果 A組在傷后的第1、4天CD3+, CD4+，CD4+/CD8+值及第7天CD4+/CD8+值顯著低于C組(P<0.05)，第7天的CD8+值顯著高于C組(P<0.05)，而第1、4天的CD8+及第7天的CD3+, CD4+與C組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。B組在傷后的第1、4、7天內(nèi)CD3+, CD4+,CD8+,CD4+/CD8+值與C組的差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。此外，A組第7天的CD3+,

3、 CD4+比第1天的CD3+, CD4+ 顯著下降(P<0.05)，而B(niǎo)組第4、7天的CD3+, CD4+,CD8+,CD4+/CD8+值與第1天均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。A組第1天CD3+、 CD4+、CD4+/CD8+值與ISS呈負(fù)相關(guān)(P<0.05)，其余的各組值與ISS均無(wú)明顯線性相關(guān)(P>0.05)。結(jié)論 嚴(yán)重創(chuàng)傷患者在傷后早期存在細(xì)胞免疫抑制，而非嚴(yán)重創(chuàng)傷患者無(wú)明顯細(xì)胞免疫抑制，傷后細(xì)胞免疫功能下降及發(fā)生感染的機(jī)率與創(chuàng)傷的嚴(yán)重程度有密切的關(guān)系。 【關(guān)鍵詞】  創(chuàng)傷; T淋巴細(xì)胞亞群; 免疫抑制 Variation and significance of T lym

4、phocyte subsets early in patients with trauma GAN leilei, LV Dechao, WANG Jiabao.(Department of Emergency Surgery,Anhui Provincial Hospital,Hefei 230001, China) 【Abstract】 Objective To study the change of T lymphocyte subsets and its relation with infection after trauma.Methods 60 traumatic victims

5、is divided into two groups by ISS:a severe traumatic group (group A，ISS16) and a nonsevere traumatic group (group B，8ISS<16). T lymphocytes from the peripher blood of 60 patients with trauma on the 1st day,4th day,7th day and 20 health control subjects(group C) were assessed by quantitative flow

6、cytometry and analyzed by SPSS.Results CD3+, CD4+ lymphocyte counts on the 1st day,4th day and CD4+/CD8+ value on the 1st day,4th day,7th day were significantly lower in group A than in the control subjects(P<0.05). The difference between CD8+ lymphocyte counts on the 4th day, CD3+, CD4+ lymphocy

7、te counts on the 7th day in group A and in group C was insignificant(P>0.05).Compared to group C, CD8+ lymphocyte counts on the 7th day indecreased significantly(P<0.05). Compared to the 1st day in group A,CD3+,CD4+ lymphocyte counts decreased significantly(P<0.05). The difference of T lymp

8、hocyte counts between group B and group C was insignificant(P>0.05). CD3+, CD4+ lymphocyte counts and CD4+ /CD8+ value on the 1st day negatively correlated with ISS (P< 0.05).Conclusion The severe traumatic patients are in cellular immunosuppression early after trauma and the nonsevere traumat

9、ic patients are not obvious. The intensity of cellular immune function decline and the severity of the illness are closely correlated. 【Key words】 Trauma; T lymphocyte subsets; Immunosuppression 近年來(lái)創(chuàng)傷患者的數(shù)量呈明顯的上升趨勢(shì)。對(duì)創(chuàng)傷患者的救治是急救醫(yī)學(xué)中的重點(diǎn)和難點(diǎn)之一，其中感染問(wèn)題成為影響患者預(yù)后的主要原因，而創(chuàng)傷后機(jī)體受到的免疫抑制越來(lái)越受到人們的重視1。本文前瞻性觀察我院60例創(chuàng)傷患者的T

10、細(xì)胞亞群的變化，對(duì)患者創(chuàng)傷后免疫功能的變化規(guī)律及與損傷嚴(yán)重度的相關(guān)性進(jìn)行研究，以探討創(chuàng)傷后患者發(fā)生感染的內(nèi)部機(jī)制。 1 資料與方法 1.1 一般資料 選取2008年5月2009年10月期間我院急救醫(yī)學(xué)中心收住的創(chuàng)傷患者60例，男29例，女31例，年齡1650歲，平均年齡(36.4±11.3)歲。損傷嚴(yán)重度評(píng)分(ISS)8分，無(wú)腫瘤及其他慢性疾病，無(wú)服用激素及免疫抑制劑等。根據(jù)損傷嚴(yán)重度評(píng)分(ISS)分為嚴(yán)重創(chuàng)傷組30例(A組，ISS16)及非嚴(yán)重創(chuàng)傷組30例(B組，ISS<16)。另選取同期健康體檢人群20例為對(duì)照組(C組)，男11例，女9例，年齡1848歲，平均年齡(35.2

11、±12.3)歲。無(wú)腫瘤及其他慢性疾病，無(wú)服用激素及免疫抑制劑等。對(duì)照組在年齡、性別等方面與嚴(yán)重創(chuàng)傷組及非嚴(yán)重創(chuàng)傷組差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。 1.2 研究方法 創(chuàng)傷組患者在傷后24 h內(nèi)及第4、7天抽取外周血2 ml，肝素抗凝管保存;健康對(duì)照組一次性抽取外周血2 ml，肝素抗凝管保存。采用直接熒光免疫法檢測(cè)淋巴細(xì)胞亞群CD3+, CD4+,CD8+,CD4+/CD8+值。所用單抗均為I 型單抗，試劑盒購(gòu)自法國(guó)Immunoteeh公司，在EPICS XL型流式細(xì)胞儀(Beckman Coulter公司，美國(guó))上機(jī)測(cè)定。同時(shí)詳細(xì)記錄患者相關(guān)信息并根據(jù)傷情嚴(yán)格按

12、照AIS 90評(píng)分體系進(jìn)行損傷評(píng)分，計(jì)算ISS分值。 1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 將收集的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)輸入電腦，采用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分組對(duì)比分析。計(jì)量資料以±s表示，組間比較用t檢驗(yàn)，淋巴細(xì)胞亞群與ISS之間作Pearson相關(guān)分析，以P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 2 結(jié)果 2.1 T淋巴細(xì)胞亞群的變化 A組在傷后的第1、4天CD3+, CD4+，CD4+/CD8+值及第7天CD4+/CD8+值顯著低于C組(P<0.05)，第7天的CD8+值顯著高于C組(P<0.05)，而第1、4天的CD8+及第7天的CD3+, CD4+與C組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。B組在傷后的第1、

13、4、7天內(nèi)CD3+, CD4+,CD8+,CD4+/CD8+值與C組的差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。此外，A組的第7天CD3+, CD4+比第1天CD3+, CD4+ 顯著下降(P<0.05)，而B(niǎo)組的第4、7天CD3+, CD4+,CD8+,CD4+/CD8+值與第1天均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，見(jiàn)表1。表1 3組患者淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)結(jié)果 (%，±s)注：與C組比較，*P<0.05;傷后第4、7天與第1天比較，P<0.05。 2.2 T淋巴細(xì)胞亞群與損傷嚴(yán)重度評(píng)分(ISS)相關(guān)性 A組第1天CD3+值與ISS呈負(fù)相關(guān)(r=-0.518，P=0.003)，CD4+值與ISS呈負(fù)相關(guān)(r=

14、-0.596，P=0.001)，CD4+/CD8+值與ISS呈負(fù)相關(guān)(r=-0.433，P=0.017)。其余的各組值與ISS均無(wú)明顯線性相關(guān)。 3 討論 T淋巴細(xì)胞數(shù)量和功能的變化在很大程度上影響機(jī)體的免疫功能。T淋巴細(xì)胞根據(jù)表面的標(biāo)志物可分為CD3+, CD4+,CD8+等不同的亞群。CD3+T細(xì)胞代表所有外周血成熟的T細(xì)胞。CD3+分子的作用是協(xié)助T淋巴細(xì)胞抗原受體(TCR)識(shí)別抗原提呈細(xì)胞(APC)上的MHC抗原決定簇復(fù)合物。CD3+T細(xì)胞的減少，一方面表示成熟的T細(xì)胞減少，另一方面也會(huì)影響T細(xì)胞對(duì)APC上MHC抗原復(fù)合物的識(shí)別。因此，CD3+T細(xì)胞的減少是免疫功能受抑制的總體反映。C

15、D4+T細(xì)胞是輔助/誘導(dǎo)性T淋巴細(xì)胞亞群(Th細(xì)胞)，是T淋巴細(xì)胞中最多且最重要的，CD4+T細(xì)胞總數(shù)的減少，其輔助其他細(xì)胞參與免疫應(yīng)答的能力減弱;CD4+T細(xì)胞在免疫應(yīng)答的全面調(diào)節(jié)中起關(guān)鍵性作用，Th細(xì)胞在不同的細(xì)胞因子調(diào)節(jié)下進(jìn)行增殖分化為T(mén)h1和Th2細(xì)胞。當(dāng)Th1和Th2細(xì)胞的比列出現(xiàn)紊亂時(shí)，即Th1向Th2漂移，就表現(xiàn)為免疫抑制。CD8+T細(xì)細(xì)包括Tc(細(xì)胞毒T細(xì)胞)和Ts(抑制T細(xì)胞)， CD8+ T細(xì)胞除具有細(xì)胞毒性作用外，最近的研究發(fā)現(xiàn)CD8+ T細(xì)胞在免疫應(yīng)答的調(diào)節(jié)過(guò)程中具有更為活躍的作用。Ts(抑制T細(xì)胞)具有抑制體液免疫與細(xì)胞免疫的功能。在正常有序的機(jī)體內(nèi)CD4+的輔助T細(xì)

16、胞(Th)和CD8+的抑制T細(xì)胞(Ts)/殺傷性T細(xì)胞(Tc)二者在體內(nèi)維持一定的比例、共同參與免疫應(yīng)答過(guò)程，其生理平衡失調(diào)將導(dǎo)致免疫功能紊亂。故CD4+/CD8+比值降低是機(jī)體發(fā)生免疫抑制的重要標(biāo)志之一。 由于在對(duì)創(chuàng)傷患者傷情的評(píng)估，早期救治等方法的不斷成熟與完善，已使創(chuàng)傷患者的死亡率大大下降，然而傷后繼發(fā)感染2，及感染后出現(xiàn)的一系列合并癥已經(jīng)成為現(xiàn)階段影響患者預(yù)后的首要問(wèn)題。感染的發(fā)生發(fā)展與機(jī)體的免疫功能密切相關(guān)，近年來(lái)國(guó)內(nèi)外許多學(xué)者從80年代以來(lái)不斷從各方面研究創(chuàng)傷后機(jī)體免疫功能的變化，從中得出一些結(jié)論，但也存在不少爭(zhēng)議。Bender3等檢測(cè)了實(shí)驗(yàn)性燒傷動(dòng)物T淋巴細(xì)胞亞群中發(fā)現(xiàn)創(chuàng)傷后機(jī)體

17、免疫功能存在障礙，國(guó)內(nèi)的一些學(xué)者45也得出同樣結(jié)論。然而也有學(xué)者持不同的觀點(diǎn)如Heizmann O6等在對(duì)創(chuàng)傷患者的Th1和Th2類細(xì)胞因子水平監(jiān)測(cè)，并沒(méi)有發(fā)現(xiàn)Th1/Th2漂移現(xiàn)象。 本研究發(fā)現(xiàn)，A組在傷后的14天CD3+, CD4+，CD4+/CD8+值顯著低于C組，而B(niǎo)組和C組的組間對(duì)照差異無(wú)顯著意義(P>0.05)，表明嚴(yán)重創(chuàng)傷患者在早期(14天)免疫功能處于抑制狀態(tài);在第7天時(shí)CD3+, CD4+值與第1天的值比較顯著地升高，反映出嚴(yán)重創(chuàng)傷患者經(jīng)規(guī)范有效治療后在第7天后免疫功能有所恢復(fù);然而第7天的CD4+/CD8+值仍然顯著低于正常對(duì)照組，而此時(shí)CD8+值顯著高于正常對(duì)照組，

18、故可以解釋為雖然在第7天CD3+, CD4+值恢復(fù)接近正常值，但是此時(shí)機(jī)體免疫功能仍處于免疫抑制狀態(tài)，CD8+值的升高可以解釋這一現(xiàn)象，因?yàn)镃D8+ T淋巴細(xì)胞具有抑制體液免疫與細(xì)胞免疫的功能。另在B組中T淋巴細(xì)胞亞群并沒(méi)有發(fā)現(xiàn)以上的各種變化。由此，我們發(fā)現(xiàn)在嚴(yán)重創(chuàng)傷早期14天內(nèi)，患者出現(xiàn)免疫功能低下，是由于免疫細(xì)胞的急劇減少所致，具體表現(xiàn)在CD3+T細(xì)胞,CD4+T細(xì)胞數(shù)量的減少，從而體內(nèi)具有免疫呈遞，免疫效應(yīng)的等各類免疫細(xì)胞數(shù)量減少，在臨床上表現(xiàn)為患者易合并感染或感染難以糾正。而在傷后的第7天左右時(shí)患者的T細(xì)胞總數(shù)雖然恢復(fù)接近正常，但抑制性T淋巴細(xì)胞的比例增加，機(jī)體雖有數(shù)量正常的T細(xì)胞，但

19、這些T細(xì)胞的功能是受抑制的，難以發(fā)揮正常的免疫功能，因此機(jī)體仍處于免疫抑制的狀態(tài)。以上在T細(xì)胞亞群與損傷嚴(yán)重度(ISS)的相關(guān)性研究中發(fā)現(xiàn)A組在傷后24 h內(nèi)CD3+, CD4+,CD4+/CD8+值與ISS值呈負(fù)相關(guān)，其余的檢驗(yàn)值與ISS 無(wú)相關(guān)性。 從以上的結(jié)果及分析中我們發(fā)現(xiàn)，嚴(yán)重創(chuàng)傷后患者T淋巴細(xì)胞亞群數(shù)值下降，存在細(xì)胞免疫抑制，而非嚴(yán)重創(chuàng)傷患者無(wú)明顯細(xì)胞免疫抑制，傷后細(xì)胞免疫功能下降與傷情的嚴(yán)重程度有密切的關(guān)系。若在臨床上根據(jù)傷情程度和時(shí)限變化主動(dòng)給予適當(dāng)?shù)拿庖哒{(diào)控，并制訂有效的抗感染治療方案，有望減輕損傷后T細(xì)胞亞群數(shù)量的降低及比例的失調(diào)，最大程度地減輕細(xì)胞免疫抑制和降低由此所致的創(chuàng)傷感染率及嚴(yán)重度，以為救治嚴(yán)重創(chuàng)傷患者提供新的思路和方法。 【參考文獻(xiàn)】   1 樊 宏，周雪慧，歐陽(yáng)海騖，等.多發(fā)傷患者紅細(xì)胞免疫功能及調(diào)節(jié)因子的變化及其臨床意義J.中華創(chuàng)傷雜志，2001，17(2);119120.    2