EBER及HPV原位雜交試劑盒及相關(guān)產(chǎn)品知識(shí)ppt課件

1、原位雜交產(chǎn)品知識(shí)介紹原位雜交產(chǎn)品知識(shí)介紹原位雜交 vs 免疫組化n原位雜交：核酸水平，堿基互補(bǔ)配對(duì)n免疫組化：蛋白水平，抗原抗體反應(yīng)n雜交更具特異性原位雜交的應(yīng)用原位雜交的應(yīng)用n沒有好的抗體沒有好的抗體n核酸量遠(yuǎn)多于蛋白核酸量遠(yuǎn)多于蛋白n蛋白為分泌型蛋白為分泌型n抗體背景高度著色抗體背景高度著色探 針 主 要 類 型n雙鏈DNA探針：如HPVn單鏈DNA探針：如EBERn寡核苷酸探針nRNA探針EBER原位雜交原理nEBER：EBV編碼的小RNA，胞核內(nèi)nEBER表達(dá)量很高，各期均可表達(dá)，最適用于臨床診斷EBV感染n原理：?jiǎn)捂淒NA探針與小RNA雜交n定位：細(xì)胞核EBER的臨床應(yīng)用價(jià)值一）診斷

2、EBV感染性疾病，如：傳染性單核細(xì)胞增多癥、慢性活動(dòng)性EBV感染 協(xié)助診斷特殊部位腫瘤，如：鼻型NK/T細(xì)胞淋巴瘤 ，鼻咽癌協(xié)助診斷免疫缺陷狀態(tài)下的淋巴組織增生，如：器官移植后淋巴增生性疾患 協(xié)助識(shí)別EBV陽性細(xì)胞，如：RS細(xì)胞協(xié)助臨床診斷：EBER的臨床應(yīng)用價(jià)值二）nEBV感染性疾?。嚎共《局委?，預(yù)后好n器官移植后淋巴增生性疾患：早期預(yù)后較好nEBV(+)的非霍奇金淋巴瘤比EBV(-)的預(yù)后差nEBV(+)的霍奇金淋巴瘤比EBV(-)的預(yù)后好或無顯著差異n鼻型NK/T細(xì)胞淋巴瘤：預(yù)后很差協(xié)助了解預(yù)后和指導(dǎo)治療：EBER原位雜交的主要過程n酶消化n變性：55Cn雜交：37Cn雜交：?jiǎn)捂淒NA探

3、針與RNA病毒互補(bǔ)配對(duì)n顯色：細(xì)胞核著色圖圖1 傳染性單核細(xì)胞增多癥傳染性單核細(xì)胞增多癥圖圖2 經(jīng)典霍奇金淋巴瘤經(jīng)典霍奇金淋巴瘤, RS細(xì)胞細(xì)胞（摘自周小鴿教授資料）（摘自周小鴿教授資料）目錄 背景知識(shí)臨床應(yīng)用價(jià)值原位雜交原理市場(chǎng)定位和優(yōu)勢(shì)HPV產(chǎn)品的：一般介紹nHPVHuman Papilloma Virus，人乳，人乳頭瘤病毒）：雙鏈頭瘤病毒）：雙鏈DNA病毒，病毒，110種以種以上上nHPV可感染多種器官和組織可感染多種器官和組織nHPV主要分為皮膚型和生殖道粘膜型主要分為皮膚型和生殖道粘膜型n男女生殖系統(tǒng)均可感染男女生殖系統(tǒng)均可感染HPVn宮頸宮頸HPV感染最為常見，舉例介紹感染最為常

4、見，舉例介紹 HPV與宮頸癌的關(guān)系一）與宮頸癌的關(guān)系一）HPVHPV主要分為高危、低危型主要分為高危、低危型高危型：高危型： 16, 18, 31, 33, 35, 45, 51, 52, 16, 18, 31, 33, 35, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 68, 73, W123B56, 58, 59, 68, 73, W123B，與宮頸癌關(guān)系，與宮頸癌關(guān)系密切密切低危型：低危型：6,116,11等等HPVHPV平均感染期為平均感染期為8 8個(gè)月，大多數(shù)感染可以自然消個(gè)月，大多數(shù)感染可以自然消退。退。HPV16,18HPV16,18最易感染，且感染期最長。最易感染，且感染

5、期最長。 HPV與宮頸癌的關(guān)系二）與宮頸癌的關(guān)系二）n宮頸癌的發(fā)生率在女性惡性腫瘤中排第二位，僅次于乳腺癌。n99.7%的宮頸癌患者體內(nèi)存在HPV。n好發(fā)部位：宮頸鱗狀上皮和柱狀上皮的交界處。宮頸癌演變過程宮頸癌演變過程n尖銳濕疣，CIN I CIN II CIN IIIn（重度非典型增生+CIS） 早期浸潤癌 n 浸潤癌 n概念：nCIN：宮頸上皮內(nèi)瘤，包括非典型增生和原位癌；病變n 局限于上皮細(xì)胞層內(nèi)，未突破全層n CIN I： 輕度非典型增生病變不到上皮1/3）n CIN II： 中度非典型增生病變達(dá)到1/3，不到2/3）n CIN III：重度非典型增生病變達(dá)到2/3，但未及全層 ）n

6、 及原位癌nCIS：原位癌，病變累及全層，但未突破基底膜宮頸病變的治療宮頸病變的治療 病病 變變 名名 稱稱 治治 療療 方方 法法 重度宮頸炎 CIN I CIN II 激光 冷凍 LEEP 重度非典型增生 CIS 錐切 浸潤癌 子宮全切術(shù) 放療 化療宮頸癌術(shù)后存活率宮頸癌術(shù)后存活率n宮頸浸潤癌5年存活率：67%n宮頸早期浸潤癌：90%n宮頸原位癌：100%結(jié)結(jié) 論論 HPV是宮頸癌的主要致病因素是宮頸癌的主要致病因素 宮頸癌早期診斷、早期治療意義重大宮頸癌早期診斷、早期治療意義重大 對(duì)宮頸病變不同階段的診斷，決定了臨對(duì)宮頸病變不同階段的診斷，決定了臨床治療方式、隨診方案床治療方式、隨診方案

7、目錄 背景知識(shí)臨床應(yīng)用價(jià)值原位雜交原理市場(chǎng)定位和優(yōu)勢(shì)HPV產(chǎn)品的：宮宮 頸頸 癌癌 篩篩 查查n巴氏涂片巴氏涂片PAPPAP涂片）涂片）nCCTCCT電腦輔助宮頸細(xì)胞學(xué)檢測(cè)系統(tǒng)）電腦輔助宮頸細(xì)胞學(xué)檢測(cè)系統(tǒng)）nTCTTCT膜氏液基超薄細(xì)胞學(xué)檢測(cè)系統(tǒng)）膜氏液基超薄細(xì)胞學(xué)檢測(cè)系統(tǒng)）n CCTCCT、TCTTCT都是都是PAPPAP方法的改進(jìn)方法的改進(jìn)nHPV-DNAHPV-DNA病毒學(xué)檢測(cè)病毒學(xué)檢測(cè)n TCT+HPVTCT+HPV檢測(cè)檢測(cè)HCHC）n陰道鏡下活檢陰道鏡下活檢n 即病理切片檢查，嚴(yán)格說，已不屬篩查范即病理切片檢查，嚴(yán)格說，已不屬篩查范圍圍雜交捕獲雜交捕獲 vs 原位雜交原位雜交n雜交捕

8、獲(HC)：定性，分型，臨床，篩查n原位雜交(ISH)：定性，定位，分型，病理，n 診斷nHC與ISH在應(yīng)用上互補(bǔ)HPV原位雜交產(chǎn)品的臨床應(yīng)用價(jià)值原位雜交產(chǎn)品的臨床應(yīng)用價(jià)值n病因?qū)W診斷n協(xié)助病變分期n作為預(yù)測(cè)因素n指導(dǎo)疫苗應(yīng)用目錄 背景知識(shí)臨床應(yīng)用價(jià)值原位雜交原理市場(chǎng)定位和優(yōu)勢(shì)HPV產(chǎn)品的：HPV原位雜交的主要過程n微波修復(fù)：暴露核酸n變性：打開雙鏈DNA探針、雙鏈DNA病毒n雜交：?jiǎn)捂淒NA探針與單鏈DNA病毒互補(bǔ)配對(duì)n顯色：細(xì)胞核著色操 作 要 點(diǎn)n微波高火，30分鐘n變性95C，8分鐘n雜交：37Cn雜交液與蓋玻片大小匹配n條件匹配，充分洗滌尖銳濕疣尖銳濕疣 ，H P V通用型泰普試劑盒

9、）通用型泰普試劑盒）尖銳濕疣，尖銳濕疣，HPV 6/11型泰普試劑盒）型泰普試劑盒）尖銳濕疣，尖銳濕疣，HPV 16/18 （泰普試劑盒）（泰普試劑盒）宮頸癌，宮頸癌，HPV 16/18 （泰普試劑盒）（泰普試劑盒）宮頸癌，宮頸癌，HPV 16/18 （泰普試劑盒）（泰普試劑盒）目錄 背景知識(shí)臨床應(yīng)用價(jià)值原位雜交原理市場(chǎng)定位和優(yōu)勢(shì)HPV產(chǎn)品的：市市 場(chǎng)場(chǎng) 定定 位位n目標(biāo)科室：病理科n目標(biāo)客戶：病理醫(yī)生n產(chǎn)品目的：協(xié)助病因診斷及病理分期產(chǎn)產(chǎn) 品品 類類 型型n高危型：16/18型n通用型28種亞型）n低危型：6/11型使使 用用 指指 導(dǎo)一）導(dǎo)一） n生殖道炎癥與尖銳濕疣的鑒別診斷及預(yù)后生殖道

10、炎癥與尖銳濕疣的鑒別診斷及預(yù)后n 選用：通用型選用：通用型28種亞型）、種亞型）、16/18型、型、6/11型原位雜交型原位雜交n 通用型（通用型（+）：）： 尖銳濕疣尖銳濕疣n 16/18型（型（+）：）： 提示癌變趨向提示癌變趨向n 6/11型（型（+）：）： 病因診斷、提示預(yù)后病因診斷、提示預(yù)后使使 用用 指指 導(dǎo)二）導(dǎo)二） n尖銳濕疣、CIN I、CIN II、CIN IIIn 首選：16/18型原位雜交n 參考：通用型原位雜交避免漏診）n 目的：16/18型陽性，可提高病變?cè)\斷級(jí)別使使 用用 指指 導(dǎo)三）導(dǎo)三）nCIS、宮頸癌n 首選：16/18型原位雜交或PCR分型n 參考：通用型

11、原位雜交HPV陽性，輔助診斷）n 原因：采用PCR分型，防止因原位雜交靈敏度不夠而n 可能導(dǎo)致的漏診泰普泰普HPV原位雜交原位雜交 vs PCR宮頸癌組織：宮頸癌組織：原位雜交：原位雜交：20例（）例（）PCR：20例（）（臨床禁）例（）（臨床禁）免疫組化：免疫組化：15例（）例（） 5例（例（） （北（北 醫(yī)醫(yī) 病病 理理 系系 提提 供）供）產(chǎn)品比較產(chǎn)品比較HPV通用型）通用型） 公司名稱公司名稱 TIB Dako Panpath亞型亞型28 種種10種6種5,6,8,11,16,18,26,27,30,31,33,35,39,40,41,42,43,45,47,48,51,52,53,54,55,57,58,596,11,16,18,3133,35,45,51,5216,18,6,11,3133規(guī)格（人份）規(guī)格（人份）20，50試劑150探針5040價(jià)格價(jià)格最適合中國市場(chǎng)最適合中國市場(chǎng)進(jìn)口進(jìn)口送貨送貨即即 時(shí)時(shí)等待等待我我 們們 的的 優(yōu)優(yōu) 勢(shì)勢(shì)n通用型產(chǎn)品覆蓋面廣(28種亞型)，包含HPV52/58型；n高危型靈敏度高；n微波修復(fù)，容易掌握；n除了普通規(guī)