T淋巴細胞結果的解讀ppt課件

1、1T T細胞亞群結果的解讀細胞亞群結果的解讀 2淋巴細胞分化圖淋巴細胞分化圖3u按按T T細胞所處的活化階段細胞所處的活化階段 初始初始T細胞（細胞（naive T cell） 效應效應T細胞（細胞（effector T cell） 記憶性記憶性T細胞（細胞（memory T cell）u按按T T細胞表面受體（細胞表面受體（TCRTCR）分類）分類 + T細胞細胞 + T細胞細胞u按按T T細胞細胞CD4CD4和和CD8CD8分子表型分子表型 CD4+ T細胞細胞 CD8+ T細胞細胞 u按按T T細胞的功能分類細胞的功能分類 Th（輔助（輔助T細胞）細胞） TS（抑制（抑制T細胞）細胞）

2、Tr（調節(jié)（調節(jié)T細胞）細胞）T T淋巴細胞的分類方法淋巴細胞的分類方法4外周血中各亞群占淋巴細胞總數(shù)的比例外周血中各亞群占淋巴細胞總數(shù)的比例60-80%27-51%15-44%T淋巴細胞CD4T淋巴細胞CD8T淋巴細胞5淋巴細胞監(jiān)測注重數(shù)量、比例、功能相結合淋巴細胞監(jiān)測注重數(shù)量、比例、功能相結合血液分析常規(guī)檢測血液分析常規(guī)檢測依據(jù)白細胞、淋巴細胞比例及依據(jù)白細胞、淋巴細胞比例及計數(shù)綁定機體免疫狀況，無法計數(shù)綁定機體免疫狀況，無法精確判斷。精確判斷。T T淋巴細胞亞群比淋巴細胞亞群比例檢測例檢測臨床常用，但較片面臨床常用，但較片面T T淋巴細胞亞群數(shù)量淋巴細胞亞群數(shù)量觀察免疫細胞數(shù)值變化，評估

3、免疫觀察免疫細胞數(shù)值變化，評估免疫狀況，通常采用流式細胞儀法，特狀況，通常采用流式細胞儀法，特別針對別針對CD4CD4的檢測，已成為的檢測，已成為“金標金標準準”。功能、數(shù)量、比例功能、數(shù)量、比例結合結合更精確評估機體免疫更精確評估機體免疫狀態(tài)狀態(tài)12346目前臨床主要可以做以下項目的檢測目前臨床主要可以做以下項目的檢測n淋巴細胞亞群(T+B+NK)的比例和計數(shù)nT細胞亞群(CD4+細胞、CD8+細胞、CD4+/CD8+比值）nMHLA-DR（單核細胞HLA-DR)nCD4CD25Treg（調節(jié)細胞）及Th17細胞（我們工作）目前國內絕大多數(shù)醫(yī)院沒有開展淋巴細胞計數(shù)項目7項項 目目百分含量（百

4、分含量（%淋巴細胞）淋巴細胞）Total B lymphocyte (CD19+) 5-18%NK cell (CD3-/CD16+56+) 7-40%Total T lymphocyte (CD3+) 50-84%T helper/inducer cell (CD3+/CD4+) 27-51%T supressor/cytotoxic cell (CD3+/CD8+) 15-44%CD4/CD80.71-2.78(BD)(BD)健康中國人參考范圍健康中國人參考范圍項項 目目百分含量百分含量（% T淋淋巴細胞）巴細胞）絕對含量絕對含量（cells/ L）Total T lymphocyte (

5、CD3+)770-2041Thelper/inducer cell (CD3+/CD4+/CD8-)34-70%414-1123Tsupressor/cytotoxic cell (CD3+/CD4-/CD8+25-54%238-874CD3+CD4+CD8+ cell0.5-4.0%6-568CD4+CD4+、 CD8+ TCD8+ T淋巴細胞的計數(shù)方法一（淋巴細胞的計數(shù)方法一（FCM)FCM)n取取100l100l全血，加三種不同熒光素標記的鼠全血，加三種不同熒光素標記的鼠抗人抗人CD3CD3、CD4CD4、CD8McAbCD8McAb，陰性對照。，陰性對照。n加紅細胞裂解液，溶血，離心，

6、棄上清。加紅細胞裂解液，溶血，離心，棄上清。n用用PBSPBS洗洗1 1次，次，PBSPBS重懸細胞，上機檢測。重懸細胞，上機檢測。nFCMFCM分析分析 電子計算機自動計算出陽性細胞百電子計算機自動計算出陽性細胞百分率及總細胞計數(shù)。分率及總細胞計數(shù)。簡單、快速、相對精確簡單、快速、相對精確9nCD3+T細胞正常范圍為：50-84%nCD4+T細胞正常范圍為： 27-51% nCD8+T細胞正常范圍為： 15-44%nCD19+B細胞正常范圍為：5-18%n與血細胞計數(shù)儀聯(lián)用，得出各淋巴細胞百分比后乘以淋巴細胞數(shù)量，得出各淋巴細胞的絕對濃度。CD4TCD4T淋巴細胞的計數(shù)方法二（推算）淋巴細胞

7、的計數(shù)方法二（推算）不精確、繁瑣不精確、繁瑣省錢省錢舉例如下舉例如下10患者血常規(guī)中淋巴細胞計數(shù)為患者血常規(guī)中淋巴細胞計數(shù)為0.63 0.63 109 /L,109 /L,淋巴細胞比例測定結果淋巴細胞比例測定結果CD3 CD3 為為64.9%,CD464.9%,CD4為為32.5%,CD832.5%,CD8為為31.1%31.1%CD3CD3細胞計數(shù)為細胞計數(shù)為0.630.6310109 9/L/L64.9%0.41 64.9%0.41 10109 9 /L /LCD4CD4細胞計數(shù)為細胞計數(shù)為0.630.63109/L109/L32.5%0.20 32.5%0.20 10109 9 /L /

8、LCD8CD8細胞計數(shù)為細胞計數(shù)為0.630.63109/L109/L31.1%0.19 31.1%0.19 10109 9 /L /L推推算算1112單核細胞人類白細胞抗原單核細胞人類白細胞抗原DRDR（ CD14/HLA-DRCD14/HLA-DR）nCD14CD14為為LPSLPS復合物受體復合物受體, ,主要分布在單核細胞，主要分布在單核細胞，HLA-DRHLA-DR為活化標志。為活化標志。nCD14/HLA-DRCD14/HLA-DR可反映人體細胞免疫功能，可反映人體細胞免疫功能，30%30%提示免疫麻痹。也有人認為提示免疫麻痹。也有人認為HLA-DRHLA-DR濃度如濃度如果連續(xù)兩

9、天低于果連續(xù)兩天低于8000AB/C8000AB/C可認為存在免疫麻痹?？烧J為存在免疫麻痹。n廣泛應用于臨床。廣泛應用于臨床。13T T淋巴細胞亞群研究淋巴細胞亞群研究研究逐年增多研究逐年增多14淋巴細胞亞群變化的常見臨床意義淋巴細胞亞群變化的常見臨床意義nCD4CD4淋巴細胞減少：見于惡性腫瘤、遺傳性免疫缺陷病、艾滋病、應用免疫抑制劑的淋巴細胞減少：見于惡性腫瘤、遺傳性免疫缺陷病、艾滋病、應用免疫抑制劑的患者患者nCD8CD8淋巴細胞增多：見于自身免疫性疾病，如系統(tǒng)性紅斑狼瘡（淋巴細胞增多：見于自身免疫性疾病，如系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLESLE）、艾滋病初期、）、艾滋病初期、慢性活動性肝炎、腫瘤

10、及病毒感染等慢性活動性肝炎、腫瘤及病毒感染等nCD4CD4CD8CD8比值異常：比值異常： 比值降低：一般被稱為比值降低：一般被稱為“免疫抑制免疫抑制”狀態(tài)，常見于免疫缺陷病、惡性腫瘤、再生障狀態(tài)，常見于免疫缺陷病、惡性腫瘤、再生障礙性貧血、白血病、某些病毒感染等礙性貧血、白血病、某些病毒感染等 比值增高：表明細胞免疫功能處于比值增高：表明細胞免疫功能處于“過度活躍過度活躍”狀態(tài)，容易出現(xiàn)自體免疫反應。狀態(tài)，容易出現(xiàn)自體免疫反應。此外還可用于監(jiān)測器官移植的排斥反應，若移植后此外還可用于監(jiān)測器官移植的排斥反應，若移植后CD4/CD8CD4/CD8較移植前明顯增加，較移植前明顯增加，則可能發(fā)生排異

11、反應則可能發(fā)生排異反應1515The shift from a pro-in-flammatory to an anti-inflammatory immune response predominant at the systemic level likely occurs before 24 h after diagnosis of shock.膿毒癥休克期存在免疫麻痹膿毒癥休克期存在免疫麻痹16存在免疫麻痹的存在免疫麻痹的SepticSeptic患者死亡率大大增加患者死亡率大大增加100100名名septicseptic患者患者28天死亡天死亡無免疫麻痹無免疫麻痹免疫麻痹免疫麻痹17膿毒癥

12、休克患者膿毒癥休克患者T T淋巴細胞凋亡、存在免疫紊亂淋巴細胞凋亡、存在免疫紊亂18存活與死亡存活與死亡SepticSeptic中中T T淋巴細胞亞群的變化淋巴細胞亞群的變化一項對院內感染的老年膿毒癥患者的前瞻性對照研究一項對院內感染的老年膿毒癥患者的前瞻性對照研究19Injury, Int. J. Care Injured (2007) 38, 13461357嚴重多發(fā)傷患者免疫細胞的變化特點嚴重多發(fā)傷患者免疫細胞的變化特點CD4/CD8降低降低MHLA-DR降低降低T細胞及單核細胞凋亡增加細胞及單核細胞凋亡增加20燒傷患者早期外周血淋巴細胞亞群的變化特點燒傷患者早期外周血淋巴細胞亞群的變化

13、特點n燒傷患者白細胞低于正常組燒傷患者白細胞低于正常組n早期早期CD3CD3、CD4CD4、CD8CD8細胞計數(shù)細胞計數(shù) 均明顯下降。均明顯下降。nHLA-DRHLA-DR表達降低。表達降低。nCD4/CD8CD4/CD8比值下降。比值下降。21CD4T細胞亞群新分類：細胞亞群新分類：Th1 、Th2 、Treg 、Th17我們的研究我們的研究22抗炎細胞抗炎細胞TregTreg及其分泌的抗炎介質及其分泌的抗炎介質IL-10IL-10；促炎細胞；促炎細胞Th17Th17及分泌的促炎介質及分泌的促炎介質IL-17IL-17、IL-6IL-6在人體的炎性免疫穩(wěn)態(tài)中發(fā)揮重要作用。在人體的炎性免疫穩(wěn)態(tài)

14、中發(fā)揮重要作用。2323中國呼吸與危重監(jiān)護雜志中國呼吸與危重監(jiān)護雜志, 2010, 09(04): 416-418.結論一：膿毒癥患者中結論一：膿毒癥患者中TregTreg明顯升高，表明抗炎反應的增強明顯升高，表明抗炎反應的增強2424 結論二：在膿毒癥患者中結論二：在膿毒癥患者中Th17表達明顯升高表達明顯升高吳鐵軍吳鐵軍,亢翠翠亢翠翠, 中華急診醫(yī)學雜志中華急診醫(yī)學雜志, 2012, 21(04): 378-380.膿膿毒毒癥癥組組對對照照組組膿毒癥患者中膿毒癥患者中Th17Th17表達明顯升高，提示促炎反應的增強。表達明顯升高，提示促炎反應的增強。2525重癥膿毒癥患者淋巴細胞增殖能力低

15、下、凋亡重癥膿毒癥患者淋巴細胞增殖能力低下、凋亡淋巴細胞淋巴細胞Ag-NoR在健康組中的表達在健康組中的表達 淋巴細胞淋巴細胞Ag-NoR在在Sepsis組中的表達組中的表達吳鐵軍，張麗娜吳鐵軍，張麗娜 中國呼吸與危重監(jiān)護雜志中國呼吸與危重監(jiān)護雜志, 2010, 09(04): 416-418.膿毒癥組膿毒癥組對照組對照組26重癥膿毒癥患者存在免疫麻痹重癥膿毒癥患者存在免疫麻痹中國急救醫(yī)學雜志中國急救醫(yī)學雜志, 2011, 31(9): 836-838.CD14+單核細胞人類白細胞抗原單核細胞人類白細胞抗原-DR(HLA-DR) 表達情況表達情況對對照照組組膿膿毒毒癥癥組組272728T T淋巴細胞亞群的研究越來越多淋巴細胞亞群的研究越來越多某種某種T T細胞亞群過高或過低，都提示存在免疫功能紊亂，主要用于了解惡性腫瘤、免疫缺細胞亞群過高或過低，都提示存在免疫功能紊亂，主要用于了解惡性腫瘤、免疫缺陷、重癥病毒感染、自身免疫病等患者機體的免疫功能是處于什么狀態(tài)。陷、重癥病毒感染、自身