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文檔簡介

1、肌酸肌酶測定實驗?zāi)繕?biāo)掌握血清肌酸激酶（CK）測定（速率法）的原理，測定參數(shù)的設(shè)置及酶活性單位的計算。能及時發(fā)現(xiàn)和解決實驗中出現(xiàn)的問題。實驗原理CK催化磷酸肌酸與二磷酸腺苷（ADP）反應(yīng)產(chǎn)生三磷酸腺苷（ATP）與肌酸，偶聯(lián)己糖激酶（HK）及葡萄糖-6-磷酸脫氫酶（G6PD）的催化反應(yīng)。HK催化葡萄糖與ATP反應(yīng)，形成葡萄糖-6-磷酸，G6PD催化葡萄糖-6-磷酸氧化，形成6-磷酸葡萄糖內(nèi)酯及NADPH?？稍?40nm波長下測定NADPH生成速率而計算CK活性濃度。其反應(yīng)式如下實驗原理ATP 肌酸 ADP 磷酸肌酸CKADP 磷酸-6-葡萄糖 葡萄糖 ATPHKH NADPH 磷酸葡萄糖內(nèi)酯-6

2、NADP 磷酸葡萄糖-6G6PDH+實驗方法1、試劑準(zhǔn)備：一定量的R2（參看R1瓶簽）溶解一瓶R1，配制成工作液后方可使用。2、檢測步驟（波長：340，溫度：37）空白管空白管樣本管樣本管樣本-0.02ml生理鹽水0.02ml工作液1ml1ml分別混勻，在37度保溫2分鐘后，以空白管校零，計算每分鐘吸光度變化率。半自動生化參數(shù)設(shè)置表項目名稱項目名稱CKCK測定方法速率法波長340試劑樣本體積比250l:5l溫度37保溫時間2分鐘測定時間1分鐘K因子8095計算【參考范圍】成年男性參考范圍上限為38U/L174U/L（37），女性為26U/L140U/L（37）6300809520102010min/)/(6KKALUCK【臨床意義】CK主要存在于骨骼肌和心肌細胞中，正常人血漿中CK活性很低。血清中CK活性增高主要見于：1.心肌梗死 心肌梗死發(fā)病早期，即發(fā)病后24h血清CK活性開始升高，1218h達最高峰值，可達正常上限的1012倍，在24d降至正常水平。CK對診斷心肌梗死較其他的心肌酶譜AST、LDH的陽性率高，特異性強，是用于心肌梗死早期診斷、估計病情和判斷預(yù)后的較好指標(biāo)。病毒性心肌炎CK也有明顯升高。2.其他疾病 肌營養(yǎng)不良癥、皮肌炎、骨骼肌損傷、腦血管意外、腦膜炎、

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