2015版藥典培養(yǎng)基適用性驗(yàn)證

1、培養(yǎng)基驗(yàn)證文件驗(yàn)證文件名稱驗(yàn)證文件編碼計(jì)數(shù)培養(yǎng)基適用性檢查驗(yàn)證方案TS-YZ-2522-01制藥有限公司制藥有限公司驗(yàn)證立項(xiàng)申請(qǐng)表驗(yàn)證立項(xiàng)題目計(jì)數(shù)培養(yǎng)基適用性檢查的驗(yàn)證立項(xiàng)編號(hào)TS-YZ-2522-01驗(yàn)證形式驗(yàn)證立項(xiàng)部門質(zhì)量部申請(qǐng)日期年 月日驗(yàn)證對(duì)象計(jì)數(shù)培養(yǎng)基適用性驗(yàn)證目的 及驗(yàn)證內(nèi)容需氧菌、霉菌及醉母菌計(jì)數(shù)用的培養(yǎng)基應(yīng)進(jìn)行培養(yǎng)基的適用 性檢查。本次驗(yàn)證的目的是確認(rèn)胰酪大豆陳瓊脂培養(yǎng)基和沙氏葡 萄糖瓊脂培養(yǎng)基是否適合需氧菌、霉菌及靜母菌數(shù)測(cè)定。主管部門 審核意見同意對(duì)計(jì)數(shù)培養(yǎng)基適用性檢查試驗(yàn)方案進(jìn)行驗(yàn)證。年 月 日對(duì)驗(yàn)證方案 的編制及 實(shí)施要求驗(yàn)證方案編制應(yīng)科學(xué)，合埋，方法應(yīng)切實(shí)可行，實(shí)施必

2、須按照方 案進(jìn)行。驗(yàn)證總負(fù)責(zé)人批準(zhǔn)經(jīng)審核批準(zhǔn)對(duì)計(jì)數(shù)培養(yǎng)基適用性檢查進(jìn)行驗(yàn)證。簽字：年 月日驗(yàn)證方案的審批起草部門簽名日期化驗(yàn)室質(zhì)量部批準(zhǔn)部門簽名日期質(zhì)量部驗(yàn)證總負(fù)責(zé)人12345678驗(yàn)證方案目錄、概述、驗(yàn)證目的、驗(yàn)證范圍、驗(yàn)證項(xiàng)目小組成員及職責(zé)、驗(yàn)證合格標(biāo)準(zhǔn)、試驗(yàn)材料、菌液制備、適用性檢查9、驗(yàn)證記錄10、驗(yàn)證結(jié)論及綜合評(píng)價(jià)計(jì)數(shù)培養(yǎng)基適用性檢查的驗(yàn)證方案1 .驗(yàn)證目的：需氧菌、霉菌及酵母菌計(jì)數(shù)用的培養(yǎng)基應(yīng)進(jìn)行培養(yǎng)基的適用性檢查。本次驗(yàn)證的 目的是確認(rèn)胰酪大豆陳瓊脂培養(yǎng)基和沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基是否適合需氧菌、霉菌及 酵母菌總數(shù)測(cè)定。2 .參照標(biāo)準(zhǔn)：中國(guó)藥典2015年版四部1105非無(wú)菌產(chǎn)品微生物

3、限度檢查法。3 .驗(yàn)證項(xiàng)目：胰酪大豆陳瓊脂培養(yǎng)基和沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基的適用性檢查。4.驗(yàn)證小組人員及職責(zé)：人員組成姓名部門職務(wù)/職稱職責(zé)組長(zhǎng)質(zhì)量部副部長(zhǎng)負(fù)責(zé)驗(yàn)證期間各部門的協(xié)調(diào)及整個(gè)驗(yàn)證過(guò)程的具體實(shí)施。成員化驗(yàn)室主任負(fù)責(zé)驗(yàn)證方案的起草及具體實(shí)施，確 保驗(yàn)證過(guò)程能按方案規(guī)定的程序進(jìn) 行，負(fù)責(zé)各種驗(yàn)證資料（檢查結(jié)果） 的整理，負(fù)責(zé)驗(yàn)證報(bào)告的編寫?；?yàn)室化驗(yàn)員化驗(yàn)室化驗(yàn)員負(fù)責(zé)驗(yàn)證方案的審核及批準(zhǔn)； 負(fù)責(zé)出具檢驗(yàn)報(bào)告；審查驗(yàn)證報(bào)告及發(fā)放驗(yàn)證報(bào)告；負(fù)責(zé)驗(yàn)證文件的管理化驗(yàn)室化驗(yàn)員負(fù)責(zé)驗(yàn)證報(bào)告的編寫規(guī)范；審查驗(yàn)證報(bào)告及發(fā)放驗(yàn)證報(bào)告。5 .合格標(biāo)準(zhǔn)：被檢固體培養(yǎng)基上的菌落平均數(shù)與對(duì)照培養(yǎng)基上的菌落平均數(shù)的比

4、值應(yīng) 在0.52范圍內(nèi)，且菌落形態(tài)大小與對(duì)照培養(yǎng)基上的菌落一致。6 .試驗(yàn)材料：6.1. 被驗(yàn)證產(chǎn)品：胰酪大豆陳瓊脂培養(yǎng)基、沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基。6.2.1. YXQ-LS-100G型立式壓力蒸汽滅菌器6.2.2. GHT-00雙人凈化工作臺(tái)6.2.3. BSC-110011A2-X 生物安全柜6.2.4. MJ-250I型霉菌培養(yǎng)箱 （2025C ）6.2.5. LRH-250 生化培養(yǎng)箱（3035 c ）6.2.6. 電熱恒溫干燥箱6.2.7. 波爐6.3.驗(yàn)證用培養(yǎng)基名稱生產(chǎn)廠家批號(hào)6.4.驗(yàn)證用菌株：（第代）驗(yàn)證菌株1口4 L工培療溫度培療時(shí)間（小時(shí)）7.菌液制備按6.4規(guī)定程序培養(yǎng)各

5、試驗(yàn)菌株。取金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽抱 桿菌、白色念珠菌的新鮮培養(yǎng)物，用pH7.0無(wú)菌氯化鈉-蛋白凍緩沖液制成約為50100cfu/ml的菌懸液；取黑曲霉的新鮮培養(yǎng)物加入 35ml含0.05% （ml/ml ）聚山 梨酯80的pH7.0無(wú)菌氯化鈉-蛋白凍緩沖液，將抱子洗脫。然后，采用適宜的方法吸 出抱子懸液至無(wú)菌試管內(nèi)，用含 0.05% （ml/ml ）聚山梨酯80的pH7.0無(wú)菌氯化鈉-蛋 白凍緩沖液制成約為50100cfu/ml的黑曲霉抱子懸液。8 .適用性檢查：8.1. 取金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽抱桿菌的菌液(50100cfu/ml )各1ml, 每株試驗(yàn)菌平行制

6、備2個(gè)平皿，分別注入2個(gè)無(wú)菌平皿中，立即傾注胰酪大豆陳瓊脂 培養(yǎng)基，并作陰性對(duì)照，混勻，凝固，置 3035c培養(yǎng)24小時(shí)，計(jì)數(shù)；取白色念珠菌 的菌液(50100cfu/ml )各1ml,分別注入2個(gè)無(wú)菌平皿中，立即傾注沙氏葡萄糖瓊 脂培養(yǎng)基，并作陰性對(duì)照，混勻，凝固，置 2025c培養(yǎng)72小時(shí)，計(jì)數(shù)；取黑曲霉菌 的菌液(50100cfu/ml ) 1ml,注入無(wú)菌平皿中，立即傾注沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基， 每株試驗(yàn)菌平行制備2個(gè)平皿，并作陰性對(duì)照，混勻，凝固，置2025c培養(yǎng)168小時(shí)，計(jì)數(shù)。8.2. 取金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽抱桿菌的菌液(50100cfu/ml )各1ml, 分別注

7、入無(wú)菌平皿中，立即傾注胰酪大豆陳瓊脂對(duì)照培養(yǎng)基，每株試驗(yàn)菌平行制備2個(gè)平皿，并作陰性對(duì)照，混勻，凝固，置 3035c培養(yǎng)24小時(shí)，計(jì)數(shù)；取白色念珠菌 的菌液(50100cfu/ml )各1ml,分別注入無(wú)菌平皿中，立即傾注沙氏葡萄糖瓊脂對(duì) 照培養(yǎng)基，每株試驗(yàn)菌平行制備 2個(gè)平皿，并作陰性對(duì)照，混勻，凝固，置 2025 C 培養(yǎng)72小時(shí)，計(jì)數(shù)；取黑曲霉菌的菌液(50100cfu/ml )各1ml,分別注入無(wú)菌平皿 中，立即傾注沙氏葡萄糖瓊脂對(duì)照培養(yǎng)基，每株試驗(yàn)菌平行制備2個(gè)平皿，并作陰性對(duì)照，混勻，凝固，置2025c培養(yǎng)168小時(shí)，計(jì)數(shù)。9 .驗(yàn)證記錄10 .驗(yàn)證結(jié)論及綜合評(píng)價(jià)日期:評(píng)價(jià)人:附表

8、1:計(jì)數(shù)培養(yǎng)基適用性檢查驗(yàn)證記錄試驗(yàn)時(shí)間 年 月 日完成時(shí)間 年 月 日驗(yàn)證菌株平皿號(hào)驗(yàn)證培養(yǎng)基組（cfu/ ml）陰性對(duì)照（cfu/ ml）對(duì)照培養(yǎng)基組（cfu / ml）陰性對(duì)照(cfu / ml)菌落平均數(shù)的比值（應(yīng)在0.52范圍內(nèi)）大腸埃希菌（培養(yǎng)3天計(jì)數(shù)）1-2-平均值金黃色葡穩(wěn)球菌（培養(yǎng)3天計(jì)數(shù)）1-2-平均值枯草芽抱桿菌（培養(yǎng)3天計(jì)數(shù)）1-2-平均值白色念珠菌（培養(yǎng)5天開始計(jì)數(shù)）1-2-平均值黑曲霉菌1-（培養(yǎng)5天開始計(jì)數(shù)）2-平均值結(jié)論復(fù)核人試驗(yàn)人復(fù)核人試驗(yàn)人驗(yàn)證報(bào)告的審批起草部門簽名日期化驗(yàn)室質(zhì)量部批準(zhǔn)部門簽名日期質(zhì)量部驗(yàn)證總負(fù)責(zé)人驗(yàn)證報(bào)告1 .驗(yàn)證目的：需氧菌、霉菌及酵母菌

9、計(jì)數(shù)用的培養(yǎng)基應(yīng)進(jìn)行培養(yǎng)基的適用性檢查。本次驗(yàn)證的 目的是確認(rèn)胰酪大豆陳瓊脂培養(yǎng)基和沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基是否適合需氧菌、霉菌及 酵母菌總數(shù)測(cè)定。2 .參照標(biāo)準(zhǔn)：中國(guó)藥典2015年版四部1105非無(wú)菌產(chǎn)品微生物限度檢查法。3 .驗(yàn)證項(xiàng)目：胰酪大豆陳瓊脂培養(yǎng)基和沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基的適用性檢查。4.驗(yàn)證小組人員及職責(zé)：人員組成姓名部門職務(wù)/職稱職責(zé)組長(zhǎng)質(zhì)量部副部長(zhǎng)負(fù)責(zé)驗(yàn)證期間各部門的協(xié)調(diào)及整個(gè)驗(yàn)證過(guò)程的具體實(shí)施。成員化驗(yàn)室主任負(fù)責(zé)驗(yàn)證方案的起草及具體實(shí)施，確 保驗(yàn)證過(guò)程能按方案規(guī)定的程序進(jìn) 行，負(fù)責(zé)各種驗(yàn)證資料（檢查結(jié)果） 的整理，負(fù)責(zé)驗(yàn)證報(bào)告的編寫。化驗(yàn)室化驗(yàn)員化驗(yàn)室化驗(yàn)員負(fù)責(zé)驗(yàn)證方案的審核及批

10、準(zhǔn)； 負(fù)責(zé)出具檢驗(yàn)報(bào)告；審查驗(yàn)證報(bào)告及發(fā)放驗(yàn)證報(bào)告；負(fù)責(zé)驗(yàn)證文件的管理化驗(yàn)室化驗(yàn)員負(fù)責(zé)驗(yàn)證報(bào)告的編寫規(guī)范；審查驗(yàn)證報(bào)告及發(fā)放驗(yàn)證報(bào)告。5 .合格標(biāo)準(zhǔn)：被檢固體培養(yǎng)基上的菌落平均數(shù)與對(duì)照培養(yǎng)基上的菌落平均數(shù)的比值應(yīng) 在0.52范圍內(nèi)，且菌落形態(tài)大小與對(duì)照培養(yǎng)基上的菌落一致。6 .試驗(yàn)材料：6.1. 被驗(yàn)證產(chǎn)品：胰酪大豆陳瓊脂培養(yǎng)基、沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基。6.2.1. YXQ-LS-100G型立式壓力蒸汽滅菌器6.2.2. GHT-00雙人凈化工作臺(tái)6.2.3. BSC-110011A2-X 生物安全柜6.2.4. MJ-250I型霉菌培養(yǎng)箱 （2025C ）6.2.5. LRH-250 生化培養(yǎng)

11、箱（3035 c ）6.2.6. 電熱恒溫干燥箱6.2.7. 波爐6.3.驗(yàn)證用培養(yǎng)基名稱生產(chǎn)廠家批號(hào)6.4.驗(yàn)證用菌株：（第代）驗(yàn)證菌株A口加工培療溫度培療時(shí)間（小時(shí)）7.菌液制備按6.4規(guī)定程序培養(yǎng)各試驗(yàn)菌株。取金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽抱 桿菌、白色念珠菌的新鮮培養(yǎng)物，用pH7.0無(wú)菌氯化鈉-蛋白凍緩沖液制成約為50100cfu/ml的菌懸液；取黑曲霉的新鮮培養(yǎng)物加入35ml含0.05% （ml/ml ）聚山梨酯80的pH7.0無(wú)菌氯化鈉-蛋白凍緩沖液，將抱子洗脫。然后，采用適宜的方法吸 出抱子懸液至無(wú)菌試管內(nèi)，用含 0.05% （ml/ml ）聚山梨酯80的pH7.0無(wú)菌氯化

12、鈉-蛋 白凍緩沖液制成約為50100cfu/ml的黑曲霉抱子懸液。8 .適用性檢查：8.1. 取金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽抱桿菌的菌液(50100cfu/ml )各1ml, 每株試驗(yàn)菌平行制備2個(gè)平皿，分別注入2個(gè)無(wú)菌平皿中，立即傾注胰酪大豆陳瓊脂 培養(yǎng)基，并作陰性對(duì)照，混勻，凝固，置 3035c培養(yǎng)24小時(shí)，計(jì)數(shù)；取白色念珠菌 的菌液(50100cfu/ml )各1ml,分別注入2個(gè)無(wú)菌平皿中，立即傾注沙氏葡萄糖瓊 脂培養(yǎng)基，并作陰性對(duì)照，混勻，凝固，置 2025c培養(yǎng)72小時(shí)，計(jì)數(shù)；取黑曲霉菌 的菌液(50100cfu/ml ) 1ml,注入無(wú)菌平皿中，立即傾注沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)

13、基， 每株試驗(yàn)菌平行制備2個(gè)平皿，并作陰性對(duì)照，混勻，凝固，置2025c培養(yǎng)168小時(shí)，計(jì)數(shù)。8.2. 取金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽抱桿菌的菌液(50100cfu/ml )各1ml, 分別注入無(wú)菌平皿中，立即傾注胰酪大豆陳瓊脂對(duì)照培養(yǎng)基，每株試驗(yàn)菌平行制備2個(gè)平皿，并作陰性對(duì)照，混勻，凝固，置 3035c培養(yǎng)24小時(shí)，計(jì)數(shù)；取白色念珠菌 的菌液(50100cfu/ml )各1ml,分別注入無(wú)菌平皿中，立即傾注沙氏葡萄糖瓊脂對(duì) 照培養(yǎng)基，每株試驗(yàn)菌平行制備 2個(gè)平皿，并作陰性對(duì)照，混勻，凝固，置 2025 C 培養(yǎng)72小時(shí)，計(jì)數(shù)；取黑曲霉菌的菌液(50100cfu/ml )各1ml,分

14、別注入無(wú)菌平皿 中，立即傾注沙氏葡萄糖瓊脂對(duì)照培養(yǎng)基，每株試驗(yàn)菌平行制備2個(gè)平皿，并作陰性對(duì)照，混勻，凝固，置2025c培養(yǎng)168小時(shí)，計(jì)數(shù)。9 .驗(yàn)證記錄10 .驗(yàn)證結(jié)論及綜合評(píng)價(jià)附表1:計(jì)數(shù)培養(yǎng)基適用性檢查驗(yàn)證記錄驗(yàn)證菌株平皿號(hào)驗(yàn)證培養(yǎng)基組（cfu/ ml）陰性對(duì)照（cfu/ ml）對(duì)照培養(yǎng)基組（cfu / ml）陰性對(duì)照(cfu / ml)菌落平均數(shù)的比值（應(yīng)在0.52范圍內(nèi)）大腸埃希菌（培養(yǎng)3天計(jì)數(shù)）1-2-平均值金黃色葡穩(wěn)球菌（培養(yǎng)3天計(jì)數(shù)）1-2-平均值枯草芽抱桿菌（培養(yǎng)3天計(jì)數(shù)）1-2-平均值白色念珠菌（培養(yǎng)5天開始計(jì)數(shù)）1-2-平均值黑曲霉菌1-試驗(yàn)時(shí)間年 月 日完成時(shí)間 年 月 日（培養(yǎng)5天開始計(jì)數(shù)）2-平均值結(jié)論復(fù)核人試驗(yàn)人復(fù)核人試驗(yàn)人制藥有限公司驗(yàn)證證書驗(yàn)證文件名稱計(jì)數(shù)培養(yǎng)基適用性檢查的驗(yàn)證驗(yàn)證文件編號(hào)TS-YZ-2522