菌落總數(shù)的測定ppt課件

1、1食品檢樣經(jīng)過處理，在一定條件下（如培養(yǎng)基、培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時間等）培養(yǎng)后，所得每g（mL）檢樣中形成的微生物菌落總數(shù)。 21 1、判定食品被細(xì)菌污染的程度及衛(wèi)生質(zhì)量、判定食品被細(xì)菌污染的程度及衛(wèi)生質(zhì)量。2 2、預(yù)測食品存用的期限長短。、預(yù)測食品存用的期限長短。3 3、了解細(xì)菌在食品中的繁殖動態(tài)。、了解細(xì)菌在食品中的繁殖動態(tài)。3 除微生物實驗室常規(guī)滅菌及培養(yǎng)設(shè)備外，其他設(shè)備和材料如下：恒溫培養(yǎng)箱：36 1 ，30 1 。冰箱：2 5 。恒溫水浴箱：46 1 。天平：感量為0.1 g。均質(zhì)器。振蕩器。無菌吸管：1 mL（具0.01 mL 刻度）、10 mL（具0.1 mL 刻度）或微量移液器及吸頭

2、。無菌錐形瓶：容量250 mL、500 mL。無菌培養(yǎng)皿：直徑90 mm。pH 計或pH 比色管或精密pH 試紙。放大鏡或/和菌落計數(shù)器。4檢驗步驟檢驗步驟(程序程序)： 檢樣檢樣稀釋處理稀釋處理做平板做平板培養(yǎng)培養(yǎng)菌菌落計數(shù)落計數(shù)報告結(jié)果報告結(jié)果51、固體和半固體樣品：稱取25 g 樣品置盛有225 mL 磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的無菌均質(zhì)杯內(nèi)，8000 r/min10000 r/min 均質(zhì)1 min2 min，或放入盛有225 mL 稀釋液的無菌均質(zhì)袋中，用拍擊式均質(zhì)器拍打1 min2 min，制成1:10 的樣品勻液。62、液體樣品：以無菌吸管吸取25 mL 樣品置盛有225 mL 磷酸

3、鹽緩沖液或生理鹽水的無菌錐形瓶（瓶內(nèi)預(yù)置適當(dāng)數(shù)量的無菌玻璃珠）中，充分混勻，制成1:10 的樣品勻液。（一）、樣品的稀釋及做平板（一）、樣品的稀釋及做平板73、用、用1 mL 無菌吸管或微量移液器吸取無菌吸管或微量移液器吸取1:10 樣品勻液樣品勻液1 mL，沿管壁緩慢注于盛，沿管壁緩慢注于盛有有9 mL 稀釋液的無菌試管中（注意吸管稀釋液的無菌試管中（注意吸管或吸頭尖端不要觸及稀釋液面），振搖試或吸頭尖端不要觸及稀釋液面），振搖試管或換用管或換用1 支無菌吸管反復(fù)吹打使其混合支無菌吸管反復(fù)吹打使其混合均勻，制成均勻，制成1:100 的樣品勻液。的樣品勻液。4、上述、上述 操作程序，制備操作程

4、序，制備10 倍系列稀釋樣倍系列稀釋樣品勻液。每遞增稀釋一次，換用品勻液。每遞增稀釋一次，換用1 次次1 mL 無菌吸管或吸頭。無菌吸管或吸頭。（一）、樣品的稀釋及做平板（一）、樣品的稀釋及做平板85、根據(jù)對樣品污染狀況的估計，選擇2 個3 個適宜稀釋度的樣品勻液（液體樣品可包括原液），在進行10 倍遞增稀釋時，吸取1 mL 樣品勻液于無菌平皿內(nèi)，每個稀釋度做兩個平皿。同時，分別吸取1 mL 空白稀釋液加入兩個無菌平皿內(nèi)作空白對照。（一）、樣品的稀釋及做平板（一）、樣品的稀釋及做平板96、及時將15 mL20 mL 冷卻至46 的平板計數(shù)瓊脂培養(yǎng)基（可放置于46 1 恒溫水浴箱中保溫）傾注平皿

5、，并轉(zhuǎn)動平皿使其混合均勻。（一）、樣品的稀釋及做平板（一）、樣品的稀釋及做平板101ml1ml1ml1:101:10001:1001:100001ml1ml1ml1ml加入加入46營養(yǎng)瓊脂營養(yǎng)瓊脂1215ml25g/ml樣品生理鹽水11 注意：注意：檢樣從開始稀釋到檢樣從開始稀釋到傾注最后一個平皿所用時間傾注最后一個平皿所用時間不宜超過不宜超過20min，以防止細(xì)，以防止細(xì)菌有所死亡或繁殖。菌有所死亡或繁殖。 121、待瓊脂凝固后，將平板翻轉(zhuǎn)，、待瓊脂凝固后，將平板翻轉(zhuǎn)，36 1 培養(yǎng)培養(yǎng)48 h2 h。水產(chǎn)品。水產(chǎn)品30 1 培養(yǎng)培養(yǎng)72 h3 h。2、如果樣品中可能含有在瓊脂培養(yǎng)基表面、如

6、果樣品中可能含有在瓊脂培養(yǎng)基表面彌漫生長的菌落時，可在凝固后的瓊脂表彌漫生長的菌落時，可在凝固后的瓊脂表面覆蓋一薄層面覆蓋一薄層3、瓊脂培養(yǎng)基（約、瓊脂培養(yǎng)基（約4 mL），凝固后翻轉(zhuǎn)），凝固后翻轉(zhuǎn)平板，按平板，按1、條件進行培養(yǎng)。、條件進行培養(yǎng)。13 到達(dá)規(guī)定培養(yǎng)時間，應(yīng)立即到達(dá)規(guī)定培養(yǎng)時間，應(yīng)立即計數(shù)。如果不能立即計數(shù)，應(yīng)將計數(shù)。如果不能立即計數(shù)，應(yīng)將平板放置于平板放置于0 044，但不得超過，但不得超過24h24h。14（1 1）、單個菌做一個菌落計）、單個菌做一個菌落計（2 2）、呈鏈狀生長的菌落之間無任何明顯界限，作為）、呈鏈狀生長的菌落之間無任何明顯界限，作為一個菌落計，如存在有幾

7、條不同來源的鏈，則每條一個菌落計，如存在有幾條不同來源的鏈，則每條鏈均應(yīng)按一個菌落計算。鏈均應(yīng)按一個菌落計算。（3 3）、如片狀菌落不到平板一半，而另一半又分布均）、如片狀菌落不到平板一半，而另一半又分布均勻，則可以半個平板的菌落數(shù)乘勻，則可以半個平板的菌落數(shù)乘2 2代表全平板的菌落代表全平板的菌落數(shù)。數(shù)。15 （1 1）、選取菌落數(shù)在）、選取菌落數(shù)在30300之間的之間的平板平板，若有二個稀釋度均在若有二個稀釋度均在30300之間時，比值小于或等于之間時，比值小于或等于2取平均數(shù)，取平均數(shù)，比值大于比值大于2則其較小數(shù)字。則其較小數(shù)字。16（2 2）、如均大于）、如均大于300300，則取最

8、高稀釋度的平均，則取最高稀釋度的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告（3 3）、如均小于）、如均小于3030，則以最低稀釋度的平均菌，則以最低稀釋度的平均菌落數(shù)乘稀釋倍數(shù)報告落數(shù)乘稀釋倍數(shù)報告（4 4）、如菌落數(shù)有的大于）、如菌落數(shù)有的大于300300，有的又小于，有的又小于3030，不在不在3030300300之間，以最接近之間，以最接近300300或或3030的平均的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告（5 5）、如所有稀釋度均無菌落生長，則應(yīng)按?。⑷缢邢♂尪染鶡o菌落生長，則應(yīng)按小于于1 1乘以最低稀釋倍數(shù)報告。乘以最低稀釋倍數(shù)報告。 17菌落數(shù)在菌落數(shù)在110

9、0時，按實有數(shù)字報告，時，按實有數(shù)字報告，1)1)如大于如大于100時，則報告前面兩位有效數(shù)字，第時，則報告前面兩位有效數(shù)字，第三位數(shù)按四舍五入計算。三位數(shù)按四舍五入計算。2)2)固體檢樣以克（固體檢樣以克（g)為單位報告，為單位報告，3)3)液體檢樣以毫升（液體檢樣以毫升（ml）為單位報告，）為單位報告，4)4)表面涂擦則以平方厘米（表面涂擦則以平方厘米（cm2）報告。）報告。 181、對照平板出現(xiàn)幾個菌落時，要追加對照平板；、對照平板出現(xiàn)幾個菌落時，要追加對照平板；2、吸管進出瓶子或試管時，吸管口不得觸及瓶口、吸管進出瓶子或試管時，吸管口不得觸及瓶口、管口的外圍部分；管口的外圍部分；3、吸管插入試樣液內(nèi)的深度不得小于、吸管插入試樣液內(nèi)的深度不得小于2.5cm,調(diào)整調(diào)整時要使管尖與容器內(nèi)壁緊貼時要使管尖與容器內(nèi)壁緊貼;4、進行稀釋時、進行稀釋時,吸管口不得與稀釋液接觸吸管口不得與稀釋液接觸;195 5、檢樣從開始稀釋到傾注最后一個平、檢樣從開始稀釋到傾注最后一個平皿所用時間不宜超過皿所用時間不宜超過20min.6 6、稀釋倍數(shù)愈高菌落數(shù)愈少，稀釋倍、稀釋倍數(shù)愈高菌落數(shù)愈少，稀釋倍數(shù)愈低菌落數(shù)愈多。如出現(xiàn)逆反現(xiàn)數(shù)愈低菌落數(shù)愈多。如出現(xiàn)逆反現(xiàn)象，不可作為檢樣計數(shù)報告的依據(jù)。象，不可作為檢樣計數(shù)報告的依據(jù)。201、什么是菌落總數(shù)菌落總數(shù)？2、測定食