人教版高中生物選修一講義專題2課題2土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)

1、課題2 土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)學(xué)習(xí)目標(biāo)：1.明確用培養(yǎng)基對(duì)微生物進(jìn)行選擇的原理。（重點(diǎn)）2.學(xué)會(huì)統(tǒng)計(jì)微 生物數(shù)量的方法。（重點(diǎn)）3.能進(jìn)行實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與操作，并對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析和評(píng) 價(jià)。（難點(diǎn)）自主預(yù)習(xí)合福新MlW匚卡礎(chǔ)知識(shí)填充n1.研究思路（1）篩選菌株的思路自然界中目的菌株的篩選i依據(jù)：根據(jù)它對(duì)生存環(huán)境的要求、到相應(yīng)的環(huán)境中去尋找。ii實(shí)例：PCR技術(shù)過程中用到的耐高溫的 TacDNA聚合酶,就是從熱泉中篩 選出來的Taq細(xì)菌中提取出來的。實(shí)驗(yàn)室中目的菌株的篩選i原理：人為提供有利于目的菌株生長的條件 （包括營養(yǎng)、溫度、pH等），同 時(shí)抑制或阻止其他微牛物的牛長。ii方法：利用選擇培

2、養(yǎng)基分離。a.選擇培養(yǎng)基：允許特定種類的微牛物牛長.同時(shí)阻一或抑制其他種類微牛 物生長的培養(yǎng)基。b.實(shí)例：選擇分解尿素的細(xì)菌的培養(yǎng)基，以尿素作為唯一氮源，只有能合成 月尿酶的微生物才能分解尿素。（2）統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目常用方法：稀釋涂布平板法。< a.當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)、培養(yǎng)基表面 生長的一個(gè)菌落，來源于樣品稀釋液中的i原理 一個(gè)活血| b.通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)來推測樣品中、 大約含有的活菌數(shù)ii計(jì)算公式：每克樣品中的菌株數(shù)=(CW)XM。C:代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù)。V:代表涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積(mL)。M :代表稀釋倍數(shù)。iii注意事項(xiàng)a.為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般

3、設(shè)置三個(gè)平板，選擇菌落數(shù)在30300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，并取平均值。b.統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目低.原因是當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一 起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落。因此,統(tǒng)計(jì)結(jié)果一般用菌落數(shù)而不是用活菌數(shù)來表示。c.設(shè)置對(duì)照：主要目的是排除實(shí)驗(yàn)組中非測試因素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響、提高 實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度。其他方法：利用顯微鏡直接計(jì)數(shù)。2.實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及操作提示(1)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)土壤取樣從富含有機(jī)質(zhì)、酸堿度接近中性且潮濕的土壤取樣。先鏟去表層土，在距地 表約3r8 cm的土壤層取樣。樣品的稀釋i稀釋原因：樣品的稀釋度直接影響平板上生長的菌落數(shù)目。ii稀釋標(biāo)準(zhǔn)：選用一定稀釋范圍的樣品液進(jìn)行培養(yǎng)，保證獲得菌落

4、數(shù)在30二300之間，便于計(jì)數(shù)。iii微生物的培養(yǎng)與觀察a.培養(yǎng)：不同種類的微生物，往往需要不同的培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時(shí)間。b.觀察：每隔24_h統(tǒng)計(jì)一次菌卷數(shù)目，最后選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)的記錄作 為結(jié)果。(2)操作提示無菌操作i取土樣的用具在使用前都需要滅菌一ii應(yīng)在火購旁稱取土壤，并在火焰附近將稱好的土樣倒入錐形瓶中，塞好棉 iii在稀釋土壤溶液的過程中，每一步都要在火焰旁操作。做好標(biāo)記：本實(shí)驗(yàn)使用的平板和試管比較多。為避免混淆，最好使用前就 做好標(biāo)記。制定計(jì)劃：對(duì)于耗時(shí)較長的生物實(shí)驗(yàn)，要事先制定計(jì)劃，以便提高工作效 率。（3）菌種鑒定原理：分解尿素的細(xì)菌合成的月尿酶將尿素分解為氨，使培養(yǎng)基的堿性

5、增強(qiáng)。方法：在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑培養(yǎng)細(xì)菌,若指示 劑變紋，可初步鑒定該種細(xì)菌能夠分解尿素。預(yù)習(xí)效果驗(yàn)收】1.判斷對(duì)錯(cuò)（1）因?yàn)橥寥乐懈黝愇⑸锏臄?shù)量不同，所以，為獲得不同類型的微生物要按 不同的稀釋倍數(shù)進(jìn)行分離。（）（2）測定土壤中細(xì)菌的總量和測定土壤中能分解尿素的細(xì)菌的數(shù)量，選用的稀釋范圍不同。（）（3）如果得到了兩個(gè)或兩個(gè)以上菌落數(shù)目在 30300的平板，則說明稀釋操作 比較成功，并能夠進(jìn)行菌落的計(jì)數(shù)。（）（4）牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基上的菌落數(shù)目明顯少于選擇培養(yǎng)基上的菌落數(shù)目，說明選擇培養(yǎng)基已篩選出一些菌種。（）提示：（1），（2），（3），（4）X 牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基上

6、的菌落數(shù)目明顯大 于選擇培養(yǎng)基上的菌落數(shù)目，才說明選擇培養(yǎng)基具有篩選作用。2,產(chǎn)生每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)菌落的細(xì)菌的最初數(shù)目和培養(yǎng)基分別是（）A. 一個(gè)細(xì)菌，液體培養(yǎng)基B.許多細(xì)菌，液體培養(yǎng)基C. 一個(gè)細(xì)菌，固體培養(yǎng)基D.許多細(xì)菌，固體培養(yǎng)基C 在微生物的培養(yǎng)中產(chǎn)生每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)菌落的細(xì)菌的最初數(shù)目是一個(gè)細(xì)菌，使 用的培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基。合作探究。及重德H EZUCTA N.“ U MON G 藝 HQZC IN AN探究點(diǎn)1微生物的篩選與計(jì)算1 r合作交流1 .根據(jù)選擇培養(yǎng)基的原理，如何篩選出耐酸菌？提示：可將培養(yǎng)基的pH調(diào)至酸性，再接種培養(yǎng)。2 .如何從平板上的菌落數(shù)推測出每克樣品中的菌落數(shù)？提示：統(tǒng)計(jì)某一稀

7、釋度下平板上的菌落數(shù)，最好能統(tǒng)計(jì) 3個(gè)平板，計(jì)算出平 板上菌落數(shù)的平均值，然后按照公式進(jìn)行計(jì)算。3 .稀釋涂布平板法和顯微計(jì)數(shù)法對(duì)微生物計(jì)數(shù)產(chǎn)生的實(shí)驗(yàn)誤差如何？試分析 原因。提示：稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)的值比實(shí)際值偏小，原因是當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連 在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落；顯微計(jì)數(shù)法計(jì)數(shù)的結(jié)果比實(shí)際值偏大， 原因是顯微鏡下無法區(qū)分細(xì)胞的死活，計(jì)數(shù)時(shí)包括了死細(xì)胞。歸納總結(jié)4 .選擇培養(yǎng)基 的選擇作用(1)原理：根據(jù)不同微生物的特殊營養(yǎng)要求或其對(duì)某化學(xué)、物理因素的抗性不 同而制備培養(yǎng)基。(2)方法：在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)。例如，加入青霉素可以分離出酵母菌和霉 菌；加入高濃度的食鹽可以得到

8、金黃色葡萄球菌。改變培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分。例如，缺乏氮源時(shí)可以分離固氮微生物；石油 作為唯一碳源時(shí)，可以分離出能消除石油污染的微生物；用含無機(jī)碳源的培養(yǎng)基 分離自養(yǎng)型微生物。改變微生物的培養(yǎng)條件。例如，將培養(yǎng)基放在高溫環(huán)境中培養(yǎng)可以得到耐 高溫的微生物；用普通培養(yǎng)基在無氧條件下分離厭氧型和兼性厭氧型微生物。5 .統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的方法微生物生長量的測定有計(jì)數(shù)法、重量法、生理指標(biāo)法等方法，但是一般使用 計(jì)數(shù)法，計(jì)數(shù)法可分為直接計(jì)數(shù)法和間接計(jì)數(shù)法。二者的比較如下表所示：項(xiàng)目直接計(jì)數(shù)法間接計(jì)數(shù)法原理利用特定細(xì)菌計(jì)數(shù)板 或血細(xì)胞計(jì)數(shù)板，在顯 微值T計(jì)算一定容積 的樣品中微生物的數(shù) 量當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，

9、培養(yǎng)基表 面生長的一個(gè)菌落，來源于樣品稀釋 液中的一個(gè)活菌。通過統(tǒng)計(jì)平板上的 菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有 多少活菌主要用具顯微鏡、細(xì)菌計(jì)數(shù)板A口加工計(jì)數(shù)數(shù)據(jù)菌體本身培養(yǎng)基上菌落數(shù)優(yōu)點(diǎn)計(jì)數(shù)方便、操作簡單計(jì)數(shù)的是活菌缺點(diǎn)死困、活困徘計(jì)算在內(nèi)操作較復(fù)雜，有f誤差計(jì)算公式每毫升原液含菌數(shù)-每小格平均菌體數(shù)X 400X10 000X稀釋倍數(shù)每毫升原液含菌數(shù)培養(yǎng)基上平均菌落數(shù)X稀釋倍數(shù) 葡布液體積特別提醒：能在選擇培養(yǎng)基上生長的不一定是所需要的目的菌原則上選擇培養(yǎng)基只能允許特定種類的微生物生長，但實(shí)際上，微生物的培 養(yǎng)是一個(gè)非常復(fù)雜的問題，有些微生物可以利用其他微生物的代謝產(chǎn)物生長繁殖， 因此能在選

10、擇培養(yǎng)基上生長的微生物不一定都是所需的微生物，還需進(jìn)一步的鑒 定。典題通關(guān)自然界中的微生物往往是混雜生長的。人們在研究微生物時(shí)一般要將它們分 離提純，然后進(jìn)行數(shù)量的測定。下面是對(duì)大腸桿菌進(jìn)行數(shù)量測定的實(shí)驗(yàn)，請回答 有關(guān)問題。步驟如下：制備稀釋倍數(shù)為102、103、104、105、106的系列稀釋液。為了得到更加準(zhǔn)確的結(jié)果，應(yīng)選用 法接種樣品。適宜溫度下培養(yǎng)。結(jié)果分析：(1)測定大腸桿菌數(shù)時(shí)，在對(duì)應(yīng)稀釋倍數(shù)為 106的培養(yǎng)基中，得到以下幾種統(tǒng)計(jì)結(jié)果，與事實(shí)更加接近的是。A. 一個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)是 230B.兩個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)是 220和260,取平均值240C,三個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別

11、是 400、212和256,取平均值289D.四個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是 210、260、240和250,取平均值240(2)一同學(xué)在稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基上測得平板上菌落數(shù)的平均值為212,那么每毫升樣品中的菌落數(shù)約是(涂布平板時(shí)所用的稀釋液體積為 0.2 mL)。(3)用這種方法測定菌體密度時(shí)，實(shí)際活菌數(shù)量要比測得的數(shù)量 (填“多”或“少”)，因?yàn)榧记牲c(diǎn)撥(1)因?yàn)轭}中操作的目的需要對(duì)大腸桿菌進(jìn)行數(shù)量的測定，所以 接種的方法是稀釋涂布平板法。(2)測定活菌數(shù)量時(shí)，選擇的平板越多誤差越小，且選擇的平板要能形成30300個(gè)菌落。(3)所做的多個(gè)平板中，如果其中一個(gè)平板中菌落的數(shù)目明顯多于或

12、少于其他 幾個(gè)平板，則說明該平板不符合要求，應(yīng)重做或舍棄。解析若對(duì)大腸桿菌進(jìn)行計(jì)數(shù)，則需要用稀釋涂布平板法接種樣品。(1)應(yīng)選取多個(gè)菌落數(shù)相差不大的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，取其平均值。(2)212 6.2X106 =1.06X 109(個(gè))。(3)因?yàn)橐粋€(gè)菌落可能由兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌連在一起生長而成，所以 實(shí)際活菌數(shù)量要比測得的數(shù)量多。答案步驟：稀釋涂布平板結(jié)果分析：(1)D (2)1.06X 109個(gè)(3)多 當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌連在一起時(shí)，平 板上觀察到的只是一個(gè)菌落深訛探究1 (1)如果某同學(xué)的稀釋倍數(shù)僅為104,則測定的數(shù)值要比題中操作的 數(shù)值高還是低？為什么？(2)第(1)小題C項(xiàng)中菌落數(shù)為400的平

13、板不符合要求，試分析該平板中菌落數(shù) 目多于其他平板的可能的原因。提示：(1)低，因?yàn)橄♂尡稊?shù)太低，則大部分菌落是多個(gè)細(xì)菌繁殖而成，所以 觀察到的菌落的數(shù)值要低于由單一細(xì)菌形成的菌落數(shù)值。（2）培養(yǎng)基被污染，一些菌落是由雜菌繁殖而成的；接種過程中由于操作 不當(dāng)感染了雜菌；取菌液時(shí)沒有搖晃，所取菌液中細(xì)菌個(gè)體濃度偏大等。、活學(xué)活用1 .分離土壤中分解尿素的細(xì)菌，對(duì)培養(yǎng)基的要求是（）加尿素不加尿素加瓊脂不加瓊脂加葡萄糖不加葡萄 糖加硝酸鹽不加硝酸鹽A.B. C.D.C 要分離土壤中分解尿素的細(xì)菌，培養(yǎng)基中尿素應(yīng)是唯一的氮源，不能加 硝酸鹽；在固體培養(yǎng)基上形成菌落，要加瓊脂作凝固劑；分解尿素的細(xì)菌是異

14、養(yǎng) 生物，要加有機(jī)碳源（如葡萄糖）。2 .某同學(xué)在稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基上測得平板上的菌落數(shù)的平均值為234,那么每毫升樣品中菌落數(shù)是（涂布平板時(shí)所用稀釋液的體積為 0.1 mL）（ ）A. 2.34X 108個(gè)B. 2.34X 109個(gè)C. 234個(gè)D. 23.4個(gè)B 平板上菌落的平均數(shù)X稀釋倍數(shù)平積=每毫升樣品中的菌落數(shù)，即234X 10X 106= 2.34X 109個(gè)。探究點(diǎn)2實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與操作1合作交流1 .為什么分離不同的微生物要采用不同的稀釋度？當(dāng)測定時(shí)為什么要將稀釋 的范圍放寬一些？提示：這是因?yàn)橥寥乐懈黝愇⑸锏臄?shù)量（單位：株/kg）是不同的；為確保能 從中選擇出菌落數(shù)在303

15、00之間的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。2 .在稀釋涂布平板法中，為何需涂布 3個(gè)平板？提示：作為重復(fù)實(shí)驗(yàn)，統(tǒng)計(jì)時(shí)取平均值，以減少偶然因素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響， 增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的說服力。3 .統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的理論依據(jù)是什么？提示：當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長的一個(gè)菌落，來源于樣品 稀釋液中的一個(gè)活菌。4 .為什么要選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)的記錄作為結(jié)果?提示：盡量縮小統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)與實(shí)際活菌數(shù)的差值，因?yàn)榉敝陈木w開始 看不出明顯的菌落。歸納總結(jié)1 .實(shí)驗(yàn)流程土壤取樣葡備培養(yǎng)基樣品的稀釋法布平板培養(yǎng) 觀察 五 菌落 計(jì)數(shù)逐原地瓦:短福的王S7再無雷不轉(zhuǎn)鏟鏟去去 層土，迅速取土填并裝入無菌信封中密封,并 記錄好來土

16、時(shí)間、地點(diǎn)、植被等情況南落就庠猴系蠢:正盛米萬延二區(qū)湎曲曲9不' 平板培養(yǎng)基益雙蛤秀麻殺王地歷7：散云盛百。3 mL無因 水的三角燒瓶中，振蕩使土樣與水充分孤者， 將期菌分散，制成1。1倍土端稀拜液口用】支 1 mL無菌吸管從中吸收】mL 土壤懸液注入 盛行9 mL無曲水的試管中，收吸三次，充分混 勾.制成102倍土壤稀釋液，依次類推，制成 JOIO 10 105倍土腹稀群藏近工法瓦隹訴蒸瓦面6不可袤應(yīng)由:將三不 蛆分別用記號(hào)臂寫上】。，】?！康诒兜娜N 稀釋度，然后用3支I eL無菌吸管分別由 101010«倍的三管土壤稀釋附中吸取 G.ImL,對(duì)應(yīng)放人已寫好稀釋度的平板中

17、,用 尤曲徐布器在培養(yǎng)基衣面除布均勻?qū)⒍峰说挂灿?。丁藥工時(shí)密幣赭養(yǎng)i二3, 每隔24卜統(tǒng)計(jì)一次值落數(shù)目普面靜藏目前死正:坂高二福旌S FK 3不年一 板進(jìn)行計(jì)數(shù)，求出平均值，并根據(jù)所對(duì)應(yīng)的稀 釋度計(jì)算出樣品中細(xì)苗的數(shù)目f填入表中)稀釋度104/ Q 10- -6 10123平均值123平均值123平均值菌落數(shù)/平板菌數(shù)/克 土壤2 .實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)原則(1)設(shè)立重復(fù)組：統(tǒng)計(jì)某一稀釋度下平板上的菌落數(shù)時(shí)，要至少涂布 3個(gè)平板 作重復(fù)組，以增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的說服力與準(zhǔn)確性。(2)設(shè)立兩種對(duì)照組：判斷培養(yǎng)基中是否有雜菌污染，需同時(shí)將未接種的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。判斷選擇培養(yǎng)基是否具有篩選作用，需同時(shí)設(shè)立牛肉膏

18、蛋白陳培養(yǎng)基進(jìn)行 接種后培養(yǎng)，觀察兩種培養(yǎng)基上的菌落數(shù)目，進(jìn)行對(duì)比得出結(jié)論3 .結(jié)果分析與評(píng)價(jià)內(nèi)容結(jié)果分析白無雜菌污染的判斷對(duì)照的培養(yǎng)皿中無菌落生長> 未被雜菌污染培養(yǎng)基中菌落數(shù)偏高一一被雜菌污染菌落形態(tài)多樣，菌落數(shù)偏高>培養(yǎng)物中混入其他雜菌選擇培養(yǎng)基的篩選作用牛肉膏蛋白月東培養(yǎng)基的菌落數(shù)目大于選擇培養(yǎng)基的數(shù) 目一一選擇培養(yǎng)基具有篩選作用樣品的稀釋操作得到2個(gè)或2個(gè)以上菌落數(shù)目在30300的平板->操作成功重復(fù)組的結(jié)果若選取同一種土樣，統(tǒng)計(jì)結(jié)果應(yīng)接近典題通關(guān)尿素是一種重要的氮肥，農(nóng)作物不能將其直接吸收利用，而是通過土壤中的 細(xì)菌將其分解為氨和CO2后才能被農(nóng)作物利用。請回答下

19、列問題：(1) 土壤中的某些細(xì)菌能分解尿素是因?yàn)樵摲N細(xì)菌能合成 。(2)為篩選尿素分解菌而制備的培養(yǎng)基中含有的營養(yǎng)物質(zhì)除尿素外，還包括水、碳源 等，該培養(yǎng)基能篩選出目的菌株的原因是(3)一般依據(jù)尿素分解菌菌落的:隆起程度和顏色等特征來統(tǒng)計(jì)菌落 數(shù)目?，F(xiàn)將10 mL尿素分解菌懸液進(jìn)行梯度稀釋，分別取 0.1 mL稀釋倍數(shù)為106 的樣液接種到3個(gè)培養(yǎng)基上，培養(yǎng)一段時(shí)間后，統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)分別為39、42、45,則1 mL懸液中活細(xì)菌數(shù)量為 個(gè)。上述過程采用的接種方法是為檢驗(yàn)培養(yǎng)基及培養(yǎng)皿滅菌是否合格，可采取的措施是解析(1)分解尿素的細(xì)菌中含有月尿酶，能將尿素分解。(2)微生物的培養(yǎng)基中需含有水、無機(jī)

20、鹽、碳源和氮源，尿素作為氮源。因?yàn)橹挥泻性履蛎傅募?xì)菌才能利用尿素作為氮源生長，因此該培養(yǎng)基能篩選出分解尿素的細(xì)菌。(3)一個(gè)菌落為一個(gè)細(xì)菌繁殖的后代，不同的微生物的菌落不同，菌落的特征包括形狀、大小、 隆起程度，據(jù)此來統(tǒng)計(jì)菌落的數(shù)目。微生物計(jì)數(shù)的方法采用稀釋涂布平板法接種， 1 m懸液中細(xì)菌的數(shù)目為(39 + 42+45) W匍.1X 106=4.2X 108個(gè)。(4)單獨(dú)設(shè)置一個(gè) 滅菌后不接種樣液的含培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿進(jìn)行培養(yǎng)，觀察該培養(yǎng)基上是否出現(xiàn)菌落，從而判斷滅菌是否合格。答案(1)月尿酶(2)無機(jī)鹽只有以尿素作為唯一氮源的細(xì)菌才能在該培養(yǎng)基上生長(3)形態(tài)、大小 4.2X 108稀釋涂布

21、平板法(4)單獨(dú)設(shè)置一個(gè)滅菌后不接種樣液的培養(yǎng)皿(含培養(yǎng)基)進(jìn)行培養(yǎng) 金學(xué)活用.下列是關(guān)于“檢測土壤中細(xì)菌總數(shù)”實(shí)驗(yàn)操作的敘述，其中錯(cuò)誤的是 ()A.用蒸儲(chǔ)水配制牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基，經(jīng)高溫、高壓滅菌后倒平板 B,取104、105、106倍的土壤稀釋液和無菌水各 0.1 mL,分別涂布于各組平 板上C.將實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組平板倒置，37 C恒溫培養(yǎng)2448 hD.確定對(duì)照組無菌后，選擇菌落數(shù)在 300以上的實(shí)驗(yàn)組平板進(jìn)行計(jì)數(shù)D 檢測細(xì)菌總數(shù)，用蒸儲(chǔ)水配制培養(yǎng)基，常用高壓蒸汽滅菌法滅菌后，取 104、105、106倍的土壤稀釋液和無菌水各0.1 mL,分別涂布于各組平板上，將實(shí) 驗(yàn)組和對(duì)照組放置在適宜

22、條件下培養(yǎng)， 在確定對(duì)照組無菌后，選擇菌落在30300 的平板為代表進(jìn)行計(jì)數(shù)，D錯(cuò)誤。A是培養(yǎng)基的滅菌方法，B設(shè)置了一系列對(duì)照 實(shí)驗(yàn)，C是細(xì)菌的培養(yǎng)方法，A、B、C三個(gè)選項(xiàng)均是正確的。故選 Do 課堂小結(jié)中屎福身外 解的的與 £分有甫高思1 .選擇培養(yǎng)基是指允許特定種類的微生物生長，同時(shí)抑制或阻止其他種類微生物 生長的培養(yǎng)基。2 .設(shè)置對(duì)照的主要目的是排除實(shí)驗(yàn)中非測試因素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，提高實(shí)驗(yàn)結(jié) 果的可信度。3 .在標(biāo)記培養(yǎng)皿時(shí)，應(yīng)注明培養(yǎng)基種類、培養(yǎng)日期以及平板上培養(yǎng)樣品的稀釋度 等。4 .為確保結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在 30300的平板上進(jìn)行計(jì)數(shù)。5 .只有能合成月尿酶的微生物才能分解尿素，因此可用尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng) 基分離能分解尿素的細(xì)菌。6 .鑒定分解尿素細(xì)菌的方法是在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑， 根據(jù)是否變紅進(jìn)行判斷。當(dāng)堂達(dá)標(biāo)1 . 土壤中的細(xì)菌能分解尿素，是因?yàn)樗鼈兡芎铣梢环N （）A.尿素酶B.月尿酶C.蛋白酶D.肽酶B 能夠分解利用尿素的細(xì)菌，其細(xì)胞內(nèi)含有月尿酶，可以把尿素分解成氨, 然后進(jìn)一步利用。2 .分離土壤中分解尿素的細(xì)菌，對(duì)培養(yǎng)基的要求是 （）選項(xiàng)尿素瓊脂葡錮糖硝酸鹽A十十十十B一一一一C十十十一