代寫醫(yī)學(xué)論文 高效液相色譜法測(cè)定復(fù)方黃酮膠囊中熊果酸的含量

1、代寫醫(yī)學(xué)論文 高效液相色譜法測(cè)定復(fù)方黃酮膠囊中熊果酸的含量    【摘要】  目的建立復(fù)方黃酮膠囊中熊果酸的含量測(cè)定方法。方法高效液相色譜法，C18柱，以甲醇水磷酸（90100.03）為流動(dòng)相，流速為0.5 ml/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為220 nm。結(jié)果熊果酸在0.9829.82 g /ml范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)為0.999 8，平均回收率為98.32%，RSD為0.56%（n=6）。結(jié)論該方法簡(jiǎn)便，準(zhǔn)確，重現(xiàn)性好，適用于復(fù)方黃酮膠囊的質(zhì)量控制?！娟P(guān)鍵詞】  復(fù)方黃酮膠囊 熊果酸 高效液相色譜法 含量測(cè)定Determinat

2、ion of Ursolic Acid in Compound Flavone Capsule by HPLCWEI Hualing1，LI  Hui1，LU Wensheng21. The People's Hospital of Guangxi Zhuang Autonomous Region, Nanning 530021，China；2. The Third Affiliated Hospital of Guangxi Medical University, Nanning 530031，ChinaAbstract：ObjectiveTo establish the

3、method for determining the content of ursolic acid in Compound Flavone Capsules .MethodsThe C18 column with methanol- water- phosphorous acid (90100.03) as the mobile phase was used. The flow rate was 0.5 ml/min and the detective wavelength was 220 nm . ResultsThe linear range of calibration curve w

4、as 0.9829.82 g/ml (r = 0.999 8). The average recovery was 98.32% and the RSD was 0.56% (n= 6).ConclusionThe method is simple and accurate with a good reproducibility. It can be used for the quality control of Compound Flavone Capsules.Key words：Compound Flavone Capsules;   Ursolic acid ；&#

5、160; HPLC；  Determination    復(fù)方黃酮膠囊為銀杏葉提取物和山楂葉提取物的復(fù)方制劑，可用于治療心腦血管疾病，效果良好。此黃酮類制劑多以總黃酮作為質(zhì)量控制指標(biāo)，已報(bào)道的測(cè)定方法主要有絡(luò)合比色法，此法易受雜質(zhì)干擾，定量誤差較大。熊果酸為山楂葉提取物的主要成分，本實(shí)驗(yàn)采用高效液相色譜法測(cè)定復(fù)方黃酮膠囊中熊果酸的含量，以進(jìn)一步完善該制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。結(jié)果表明此方法操作簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好。1  儀器與試藥     Waters600E型高效液相色譜儀，Waters996型PDA二極管陣列檢測(cè)器，Wa

6、tersM32色譜工作站(美國(guó))。METTLER AE-240型電子天平（瑞士）；熊果酸對(duì)照品由中國(guó)藥品生物制品檢定所提供；甲醇為色譜純；水為重蒸水；其余為分析純。2  方法與結(jié)果2.1  色譜條件色譜柱：NovaPak C18柱（4.0 mm×250 mm，4 m）；流動(dòng)相：甲醇水磷酸（90100.03）；檢測(cè)波長(zhǎng)220 nm；柱溫35；流速為0.5 ml/min。在此條件下熊果酸峰與雜質(zhì)峰能得到較好分離。見圖12。    檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇：在三維圖譜上查看熊果酸對(duì)照品的紫外吸收，并綜合考慮檢測(cè)波長(zhǎng)的穩(wěn)定性，選擇其測(cè)定波長(zhǎng)為220 n

7、m。2.2  溶液的制備2.2.1  對(duì)照品溶液制備精密稱取熊果酸對(duì)照品約1 mg，置10 ml量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，作為對(duì)照品溶液。2.2.2  供試品溶液制備取樣品膠囊20粒，傾出內(nèi)容物，研細(xì)，精密稱取平均粒重約0.25 g，精密加入甲醇50 ml，稱定重量，超聲處理(150 W，50 kHz)30 min，取出，放冷。用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻。離心(1 200 r/min)10 min，取上清液作為供試品溶液。2.3  線性關(guān)系考察精密吸取熊果酸對(duì)照品儲(chǔ)備液（0.982 mg/ml）1，2，4，6，8，10 ml分別置于10 ml量瓶中

8、，加甲醇稀釋至刻度。精密吸取上述溶液各10 l，注入液相色譜儀，測(cè)定峰面積Y。以進(jìn)樣量（g）為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并以最小二乘法計(jì)算，得回歸方程Y3 665 512X122 141，r0.999 8。結(jié)果表明熊果酸在0.9829.82 g/ml范圍內(nèi)與峰面積有良好的線性關(guān)系。2.4  精密度實(shí)驗(yàn)取供試品溶液，按以上色譜條件重復(fù)進(jìn)樣6次，測(cè)定峰面積，結(jié)果RSD為 0.36%(n6)。2.5  穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)取供試品溶液，按以上色譜條件每隔一定時(shí)間進(jìn)樣 1 次，測(cè)定峰面積，結(jié)果RSD為0.68%，顯示供試品溶液至少在 48 h內(nèi)穩(wěn)定。2.6  重現(xiàn)性實(shí)驗(yàn)

9、精密稱取同一批號(hào)（20060109）樣品6 份，按2.2.2項(xiàng)下方法操作，測(cè)定峰面積并計(jì)算熊果酸含量，結(jié)果熊果酸的平均含量為2.35 mg/粒，RSD=2.1%(n6)。2.7  空白實(shí)驗(yàn)取不含主藥的各種輔料，按制備工藝制得不含主藥的空白試樣。取相當(dāng)于平均粒重的空白試樣，按2.2.2項(xiàng)所述方法操作，對(duì)空白樣品進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果表明，在對(duì)照品相應(yīng)位置無(wú)干擾。2.8  回收率實(shí)驗(yàn)精密稱取已知含量樣品（20060109）6 份，精密加入熊果酸對(duì)照品適量，按“2.2.2”項(xiàng)下方法操作 ，測(cè)得峰面積并計(jì)算含量。結(jié)果顯示，平均回收率為98.32%，RSD=0.56%（n6)。2.9

10、0; 樣品測(cè)定取本品3批，按“2.2.2”項(xiàng)下方法操作，并按上述色譜條件，吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10 l，注入液相色譜儀，測(cè)定含量，結(jié)果每粒膠囊含熊果酸分別為2. 35，2.32，2.38 mg。3  討論    復(fù)方黃酮膠囊為銀杏葉提取物和山楂葉提取物的復(fù)方制劑，熊果酸為山楂提取物的主要成分。熊果酸的含量測(cè)定采用HPLC法24，專屬性強(qiáng)，因此，文中建立了HPLC法測(cè)定復(fù)方黃酮膠囊中熊果酸含量的方法，以進(jìn)一步完善該制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。    在三維圖譜上查看熊果酸對(duì)照品的光譜掃描圖，208 nm處有最大吸收，但考慮到波長(zhǎng)(

11、208 nm)接近末端吸收，而且溶劑甲醇截止吸收波長(zhǎng)為205 nm，從檢測(cè)波長(zhǎng)的穩(wěn)定性方面考慮，為了減小溶劑的短波吸收干擾，選擇220 nm為檢測(cè)波長(zhǎng)。在此檢測(cè)波長(zhǎng)下對(duì)照品和樣品都能得到較好的光譜圖。    分離條件的選擇曾先后試驗(yàn)甲醇水(855)、甲醇水冰醋酸(85150. 04)等流動(dòng)相系統(tǒng)，結(jié)果分離效果不好。水的比例調(diào)高時(shí)熊果酸色譜峰已嚴(yán)重變形成為饅頭峰。采用本文中的流動(dòng)相，熊果酸色譜峰峰形良好，并且柱效高，陰性對(duì)照無(wú)干擾，經(jīng)用二極管陣列檢測(cè)器分析，得到熊果酸對(duì)照品及供試品中熊果酸的色譜圖及光譜圖，其光譜吸收相同，峰純度良好。    對(duì)3批樣品測(cè)定：每粒膠囊的熊果酸含量均在2 mg以上，故本品的含量測(cè)定限度擬定為2 mg/粒以上。 【參考文獻(xiàn)】  1張 妍，李厚偉，張永春，等.山楂中總黃酮幾種提取分離方法的考察及含量測(cè)定J.哈爾濱醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2001，35（3）：183.2姬生國(guó)，王 東，付 蕾，等. 健胃口服液中熊果酸的