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1、代寫(xiě)外科論文 不同部位紫玉盤(pán)總黃酮的含量測(cè)定 【關(guān)鍵詞】 紫玉盤(pán);,總黃酮;,分光光度法摘要:目的建立紫玉盤(pán)總黃酮的含量測(cè)定方法并檢測(cè)其不同部位總黃酮的含量。方法以蘆丁為對(duì)照品,采用分光光度法于500 nm處測(cè)定艾納香中總黃酮的含量。結(jié)果蘆丁在00.076 mg/ml(r=0.999 5)范圍內(nèi)線性關(guān)系良好,平均回收率為99.7%,RSD2.3%(n=5),其葉、枝條、根含總黃酮分別為10.53%,5.60%,3.87%。結(jié)論該方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、可靠,可作為該藥材中總黃酮含量檢測(cè)的方法。關(guān)鍵詞:紫玉盤(pán); 總黃酮;
2、分光光度法Determination of Total Flavonoids in Different Sections of Uvaria microcarpaHUANG Yonglin,RUAN Jun,WEN Yongxin,XU Qing(Guangxi Institute of Botany, Guangxi Zhuangzu Autonomous Region and the Chinese Academy of Sciences, Guilin 541006, China;Guilin Medical College, Guilin 541004, China)Abstract
3、:ObjectiveTo develop a quantitative method for the determination of total flavonoid in different sections in Uvaria microcarpa.MethodsUsing rutin as a reference substance, the total flavonoids in Uvaria microcarpa was determined by UV absorption at 500 nm. ResultsThe linearity of rutin was obtained
4、within the range of 0 to 0.076 mg/ml(r=0.999 5). The average recovery was 99.7% and RSD was 2.3%. The content of total flavonoid in Uvaria microcarpa from leaf was 10.53%,branch was 5.60%, root was 3.87%(n=5).ConclusionThe method is convenient and reliable. It can be used as a quality control method
5、 to determine total flavonoids of Uvaria microcarpa.Key words:Uvaria microcarpa; Total flavonoid; Determination 紫玉盤(pán)Uvaria microcarpa為番荔枝科紫玉盤(pán)屬植物,分布于我國(guó)廣西、廣東和臺(tái)灣等省區(qū)。紫玉盤(pán)味苦、性甘,微溫,民間用于治療消化不良,腹脹腹瀉,跌打損傷,腰腿疼痛等癥1,是常用的中藥之一。近幾十年來(lái)國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)紫玉盤(pán)屬植物中黃酮類成分進(jìn)行了大量的研究,發(fā)現(xiàn)了該類化合物具有較強(qiáng)的細(xì)胞毒、抗腫瘤、抗瘧、抗微生
6、物等活性2,3。由于其具有很好的藥理活性、藥用價(jià)值高,市場(chǎng)開(kāi)發(fā)前景好,因此對(duì)其黃酮類化合物含量進(jìn)行測(cè)定,掌握其分布基本規(guī)律具有十分重要的意義,目前還未見(jiàn)有該藥材總黃酮含量測(cè)定方法的文獻(xiàn)報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)采用分光光度法,用蘆丁為對(duì)照品,以亞硝酸鈉硝酸鋁為顯色劑,測(cè)定紫玉盤(pán)不同部位中總黃酮的含量,方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、可靠,可作為該藥材中總黃酮的含量檢測(cè)方法,結(jié)果為合理開(kāi)發(fā)利用紫玉盤(pán)植物資源提供基礎(chǔ)資料。1 儀器與材料1.1 材料藥材采自廣西防城,經(jīng)廣西植物研究所分類室劉演副研究員鑒定為番荔枝科紫玉盤(pán)屬植物紫玉盤(pán)Uvaria microcarpa。1.2 儀器T6新世紀(jì)紫外
7、可見(jiàn)光分光光度計(jì)(北京普析通用儀器有限公司);瑞士Precisa Bailnces Series XS電子天平(Precisa儀器有限公司)。1.3 試劑蘆丁對(duì)照品(購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所)。亞硝酸鈉、硝酸鋁、氫氧化鈉、甲醇等均為分析純。2 方法與結(jié)果2.1 供試液的制備2.1.1 對(duì)照品溶液的制備 精密稱取120干燥至恒重的蘆丁對(duì)照品19 mg置100 ml容量瓶中,加甲醇70 ml,置水浴上微熱使溶解,放冷,加甲醇至刻度,搖勻,即得對(duì)照品溶液(每毫升溶液中含蘆丁0.19 mg),待用。2.1.2
8、0; 供試品溶液的制備精密稱取紫玉盤(pán)藥材粉末(40目)1 g,至燒瓶中,加甲醇100 ml,冷浸30 min后,在水浴上加熱回流60 min,分取濾液,藥渣加甲醇100 ml,繼續(xù)水浴加熱回流30 min,濾過(guò),濾渣用30 ml甲醇洗滌,合并濾液,濾液置250 ml量瓶中,放冷,加甲醇至刻度,搖勻,作供試品溶液,待用。2.2 含量測(cè)定2.2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 精密量取對(duì)照品溶液0.0, 2.0, 4.0, 6.0, 8.0,10.0 ml分別置于25 ml量瓶中,各加水至10 ml,加5%亞硝酸鈉溶液1 ml,使混勻,放
9、置6 min,加10%硝酸鋁溶液1 ml,搖勻,放置6 min,加4%氫氧化鈉溶液10 ml,再加水至刻度,搖勻,放置15 min,以相應(yīng)的試劑溶液為空白,在500 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度。以吸收度 A為縱坐標(biāo),以對(duì)照品濃度為橫坐標(biāo)(mg/ml),求得回歸方程:A=11.079C+0.008 4 (r=0.999 5) ,線性范圍 00.076 mg/ml。2.2.2 樣品的測(cè)定分別精密吸取上述供試品溶液2 ml于25 ml量瓶中,按標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制項(xiàng)下操作,分別加入5%亞硝酸鈉溶液,10%硝酸鋁溶液,4%氫氧化鈉溶液10 ml及水,經(jīng)放置顯色后,于500 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸
10、收度,代入回歸方程,計(jì)算總黃酮的含量。結(jié)果見(jiàn)表1。表1 不同部位紫玉盤(pán)中總黃酮的含量(略)2.2.3 精密度實(shí)驗(yàn) 取某一濃度對(duì)照品溶液2 ml,按標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制項(xiàng)下操作,依法顯色后測(cè)定吸收度,連續(xù)6次,RSD值為1.70%,表明儀器精密度較好。結(jié)果見(jiàn)表2。2.2.4 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)取某一供試品溶液2 ml,按標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制項(xiàng)下操作,依法顯色后每隔5 min測(cè)定其吸收度,共計(jì)30 min,其測(cè)得值基本保持不變,RSD值為1.49%,表明供試品溶液在顯色后30 min內(nèi)基本穩(wěn)定。2.2.5 重復(fù)性實(shí)驗(yàn)取同一
11、批藥材樣品按供試品溶液的制備項(xiàng)下方法平行制備供試品溶液5份,分別取供試品溶液2 ml,按標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制項(xiàng)下操作,依法顯色后測(cè)定吸收度,計(jì)算總黃酮平均含量為3.91%,RSD為1.13%,表明實(shí)驗(yàn)重現(xiàn)性良好。結(jié)果見(jiàn)表3。表2 精密度實(shí)驗(yàn)結(jié)果(略)表3 重復(fù)性實(shí)驗(yàn)結(jié)果(略)2.2.6 回收率測(cè)定 精密稱取已知總黃酮含量的藥材樣品5份,分別加入一定量蘆丁對(duì)照品,按供試品溶液的制備項(xiàng)下方法制備供試品溶液,按樣品的測(cè)定項(xiàng)下方法依法顯色后測(cè)定吸收度,計(jì)算平均回收率為99.7%,RSD為2.3%。3 討論3.1 采用紫外分光
12、光度法建立測(cè)定紫玉盤(pán)藥材中總黃酮含量的方法,該方法快速、簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、可靠,為今后紫玉盤(pán)中總黃酮含量的檢測(cè)提供了便捷方法,同時(shí)為深入開(kāi)發(fā)利用紫玉盤(pán)中黃酮類成分的研究奠定了基礎(chǔ)。經(jīng)檢測(cè)的紫玉盤(pán)中,葉與枝中的總黃酮含量分別高達(dá)10.53%和5.60%,因此,藥材紫玉盤(pán)中黃酮類化合物具有非常重要的開(kāi)發(fā)利用價(jià)值。3.2 本實(shí)驗(yàn)僅考察了不同部位對(duì)紫玉盤(pán)中總黃酮含量的影響,產(chǎn)地、采收期等因素對(duì)紫玉盤(pán)中總黃酮及其它活性物質(zhì)的動(dòng)態(tài)變化影響還有待進(jìn)一步研究 。參考文獻(xiàn):1 江蘇新醫(yī)學(xué)院, 中藥大辭典M.上海: 上海人民出版社, 1997: 3955.2 Li Huuang, Maonroe, E. Wall, Mansukh C.Wai. et al. New Compounds with DNA StrandScission Activity from the Combined leaf and Stem of Uvaria hamiltoniiJ.J Nat Prod. 1998,61(4):446.3 Nkunya M
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