紅細胞膜蛋白結(jié)構(gòu)測定_第1頁
紅細胞膜蛋白結(jié)構(gòu)測定_第2頁
紅細胞膜蛋白結(jié)構(gòu)測定_第3頁
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文檔簡介

1、紅細胞膜蛋白結(jié)構(gòu)測定(紅細胞抗體)方法流式細胞儀(BeckmanCoulter,貝克曼庫爾特)原理:直接免疫熒光法。FITC標記的各型多克隆抗體,加到全血中,與紅細胞膜上 的相應的IgG-Fc片段結(jié)合,經(jīng)過洗滌(和固定)等步驟后,在流式細胞儀上進 行分析。標本采集與處理受檢者的準備 檢查對象生活飲食處于日常狀態(tài),空腹采血。 采集部位靜脈采血抗凝劑 EDTA 或肝素抗凝血 要求 1 .樣本量至少1ml。2 .樣本應在采集后6小時內(nèi)處理,冷凍的標本不能用3 .溶血樣本不能用。試劑品牌 聯(lián)科劑型規(guī)格貯存成分1 :單克隆抗體液體1ML2 8C2:全血溶血試劑液體A:甲酸液體70ML室溫B:碳酸鈉等液體

2、32ML室溫C:多聚甲醛液體14ML室溫3鞘液液體20L室溫4清洗液液體5L室溫5熒光微球液體10ML2-8C質(zhì)控品BEKAMANCOULTER品,未開瓶的試劑于2-8 C保存,可在有效期內(nèi)保 持穩(wěn)定,稀釋的試劑于2-8 °C可穩(wěn)定2周;每天校準一次:遇特殊情 況隨時進行校準。儀器Beckma nCoulter EPICS XL/FC500/Altra操作:1)按照要求,分別向已編好號的試管中加入10 ul單克隆抗體和同型對照(IgG-FITC)2)分別向試管中加入混勻的100u1抗凝血(1: 200稀釋后)。3)混勻,避光,室溫孵育20-30分鐘4)上機測樣報告結(jié)果報告百分數(shù)操作性能精密度批內(nèi)五次重復CV<%靈敏度 500 1000個熒光素分子參考值lgA<2.78%lgG<2.98%lgM<2.52%IgD<2.88%臨床意義自身溶血性貧血的分型診斷方案(Protocol)|Jn腳時外聊砒Lo目甘Ml FU LDH1叫a*A 01i1 1 a- « 1li10ii1 1 .io1iaT: |i i | i gP i i h ii |i

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