分子生物學(xué)試題及答案(重點(diǎn)版)(共35頁)

1、精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上廣石化分子生物學(xué)試題及答案一、名詞解釋1cDNA與cccDNA：cDNA是由mRNA通過反轉(zhuǎn)錄酶合成的雙鏈DNA；cccDNA是游離于染色體之外的質(zhì)粒雙鏈閉合環(huán)形DNA。2標(biāo)準(zhǔn)折疊單位：蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)單元螺旋與折疊通過各種連接多肽可以組成特殊幾何排列的結(jié)構(gòu)塊，此種確定的折疊類型通常稱為超二級(jí)結(jié)構(gòu)。幾乎所有的三級(jí)結(jié)構(gòu)都可以用這些折疊類型，乃至他們的組合型來予以描述，因此又將其稱為標(biāo)準(zhǔn)折疊單位。3CAP：環(huán)腺苷酸（cAMP）受體蛋白CRP（cAMP receptor protein ），cAMP與CRP結(jié)合后所形成的復(fù)合物稱激活蛋白CAP（cAMP activated p

2、rotein ）4回文序列：DNA片段上的一段所具有的反向互補(bǔ)序列，常是限制性酶切位點(diǎn)。5micRNA：互補(bǔ)干擾RNA或稱反義RNA，與mRNA序列互補(bǔ)，可抑制mRNA的翻譯。6核酶：具有催化活性的RNA，在RNA的剪接加工過程中起到自我催化的作用。7模體：蛋白質(zhì)分子空間結(jié)構(gòu)中存在著某些立體形狀和拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)頗為類似的局部區(qū)域8信號(hào)肽：在蛋白質(zhì)合成過程中N端有1536個(gè)氨基酸殘基的肽段，引導(dǎo)蛋白質(zhì)的跨膜。9弱化子：在操縱區(qū)與結(jié)構(gòu)基因之間的一段可以終止轉(zhuǎn)錄作用的核苷酸序列。10魔斑：當(dāng)細(xì)菌生長(zhǎng)過程中，遇到氨基酸全面缺乏時(shí)，細(xì)菌將會(huì)產(chǎn)生一個(gè)應(yīng)急反應(yīng)，停止全部基因的表達(dá)。產(chǎn)生這一應(yīng)急反應(yīng)的信號(hào)是鳥苷四磷

3、酸(ppGpp)和鳥苷五磷酸（pppGpp）。PpGpp與pppGpp的作用不只是一個(gè)或幾個(gè)操縱子，而是影響一大批，所以稱他們是超級(jí)調(diào)控子或稱為魔斑。11上游啟動(dòng)子元件：是指對(duì)啟動(dòng)子的活性起到一種調(diào)節(jié)作用的DNA序列，-10區(qū)的TATA、-35區(qū)的TGACA及增強(qiáng)子，弱化子等。12DNA探針：是帶有標(biāo)記的一段已知序列DNA，用以檢測(cè)未知序列、篩選目的基因等方面廣泛應(yīng)用。13SD序列：是核糖體與mRNA結(jié)合序列，對(duì)翻譯起到調(diào)控作用。14單克隆抗體：只針對(duì)單一抗原決定簇起作用的抗體。15考斯質(zhì)粒：是經(jīng)過人工構(gòu)建的一種外源DNA載體，保留噬菌體兩端的COS區(qū)，與質(zhì)粒連接構(gòu)成。16藍(lán)-白斑篩選：含La

4、cZ基因（編碼半乳糖苷酶）該酶能分解生色底物X-gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-D-半乳糖苷)產(chǎn)生藍(lán)色，從而使菌株變藍(lán)。當(dāng)外源DNA插入后，LacZ基因不能表達(dá)，菌株呈白色，以此來篩選重組細(xì)菌。稱之為藍(lán)-白斑篩選。17順式作用元件：在DNA中一段特殊的堿基序列，對(duì)基因的表達(dá)起到調(diào)控作用的基因元件。18Klenow酶：DNA聚合酶I大片段，只是從DNA聚合酶I全酶中去除了5 3外切酶活性19錨定PCR：用于擴(kuò)增已知一端序列的目的DNA。在未知序列一端加上一段多聚dG的尾巴，然后分別用多聚dC和已知的序列作為引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增。20融合蛋白：真核蛋白的基因與外源基因連接，同時(shí)表達(dá)翻譯出的原基因蛋

5、白與外源蛋白結(jié)合在一起所組成的蛋白質(zhì)。二、填 空1 DNA的物理圖譜是DNA分子的（限制性內(nèi)切酶酶解 ）片段的排列順序。2 RNA酶的剪切分為（自體催化 ）、（異體催化 ）兩種類型。3原核生物中有三種起始因子分別是（IF-1）、（ IF-2 ）和（IF-3 ）。4蛋白質(zhì)的跨膜需要（ 信號(hào)肽 ）的引導(dǎo)，蛋白伴侶的作用是（輔助肽鏈折疊成天然構(gòu)象的蛋白質(zhì)）。5啟動(dòng)子中的元件通常可以分為兩種：（核心啟動(dòng)子元件 ）和（上游啟動(dòng)子元件 ）。6分子生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容主要包含（結(jié)構(gòu)分子生物學(xué) ）、（基因表達(dá)與調(diào)控 ）、（ DNA重組技術(shù) ）三部分。7證明DNA是遺傳物質(zhì)的兩個(gè)關(guān)鍵性實(shí)驗(yàn)是（肺炎球菌感染小鼠 ）、

6、（ T2噬菌體感染大腸桿菌 ）這兩個(gè)實(shí)驗(yàn)中主要的論點(diǎn)證據(jù)是：（生物體吸收的外源DNA改變了其遺傳潛能 ）。8hnRNA與mRNA之間的差別主要有兩點(diǎn)：（ hnRNA在轉(zhuǎn)變?yōu)閙RNA的過程中經(jīng)過剪接，）、（ mRNA的5末端被加上一個(gè)m7pGppp帽子，在mRNA3末端多了一個(gè)多聚腺苷酸(polyA)尾巴）。9蛋白質(zhì)多亞基形式的優(yōu)點(diǎn)是（亞基對(duì)DNA的利用來說是一種經(jīng)濟(jì)的方法 ）、（可以減少蛋白質(zhì)合成過程中隨機(jī)的錯(cuò)誤對(duì)蛋白質(zhì)活性的影響）、（活性能夠非常有效和迅速地被打開和被關(guān)閉 ）。10蛋白質(zhì)折疊機(jī)制首先成核理論的主要內(nèi)容包括（成核 ）、（結(jié)構(gòu)充實(shí)）、（最后重排）。 11半乳糖對(duì)細(xì)菌有雙重作用；一

7、方面（可以作為碳源供細(xì)胞生長(zhǎng) ）；另一方面（它又是細(xì)胞壁的成分 ）。所以需要一個(gè)不依賴于cAMPCRP的啟動(dòng)子S2進(jìn)行本底水平的永久型合成；同時(shí)需要一個(gè)依賴于cAMPCRP的啟動(dòng)子S1對(duì)高水平合成進(jìn)行調(diào)節(jié)。有G時(shí)轉(zhuǎn)錄從（ S2 ）開始，無G時(shí)轉(zhuǎn)錄從（ S1 ）開始。12DNA重組技術(shù)也稱為（基因克?。┗颍ǚ肿涌寺?）。最終目的是（把一個(gè)生物體中的遺傳信息DNA轉(zhuǎn)入另一個(gè)生物體）。典型的DNA重組實(shí)驗(yàn)通常包含以下幾個(gè)步驟：提取供體生物的目的基因（或稱外源基因），酶接連接到另一DNA分子上（克隆載體），形成一個(gè)新的重組DNA分子。將這個(gè)重組DNA分子轉(zhuǎn)入受體細(xì)胞并在受體細(xì)胞中復(fù)制保存，這個(gè)過程稱為

8、轉(zhuǎn)化。對(duì)那些吸收了重組DNA的受體細(xì)胞進(jìn)行篩選和鑒定。對(duì)含有重組DNA的細(xì)胞進(jìn)行大量培養(yǎng)，檢測(cè)外援基因是否表達(dá)。13、質(zhì)粒的復(fù)制類型有兩種：受到宿主細(xì)胞蛋白質(zhì)合成的嚴(yán)格控制的稱為（嚴(yán)緊型質(zhì)粒 ），不受宿主細(xì)胞蛋白質(zhì)合成的嚴(yán)格控制稱為（ 松弛型質(zhì)粒 ）。14PCR的反應(yīng)體系要具有以下條件：a、被分離的目的基因兩條鏈各一端序列相互補(bǔ)的 DNA引物（約20個(gè)堿基左右）。b、具有熱穩(wěn)定性的酶如：TagDNA聚合酶。c、dNTPd、作為模板的目的DNA序列15PCR的基本反應(yīng)過程包括：（變性）、（退火）、（延伸 ）三個(gè)階段。16、轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的基本過程通常包括：將克隆的外源基因?qū)氲揭粋€(gè)受精卵或胚胎干細(xì)胞

9、的細(xì)胞核中；接種后的受精卵或胚胎干細(xì)胞移植到雌性的子宮；完成胚胎發(fā)育，生長(zhǎng)為后代并帶有外源基因；利用這些能產(chǎn)生外源蛋白的動(dòng)物作為種畜，培育新的純合系。17雜交瘤細(xì)胞系的產(chǎn)生是由（脾B）細(xì)胞與（骨髓瘤 ）細(xì)胞雜交產(chǎn)生的，由于（脾細(xì)胞）可以利用次黃嘌呤，（ 骨細(xì)胞 ）提供細(xì)胞分裂功能，所以能在HAT培養(yǎng)基中生長(zhǎng)。18隨著研究的深入第一代抗體稱為（多克隆抗體）、第二代（單克隆抗體）、第三代（基因工程抗體 ）。19目前對(duì)昆蟲病毒的基因工程改造主要集中于桿狀病毒，表現(xiàn)在引入（外源毒蛋白基因 ）；（ 擾亂昆蟲正常生活周期的基因 ）；（ 對(duì)病毒基因進(jìn)行修飾 ）。20哺乳類RNA聚合酶啟動(dòng)子中常見的元件TAT

10、A、GC、CAAT所對(duì)應(yīng)的反式作用蛋白因子分別是（ TFIID ）、（ SP-1 ）和（ CTF/NF1 ）。21RNA聚合酶的基本轉(zhuǎn)錄因子有、TF-A、TF-B、TFII-D、TF-E他們的結(jié)合順序是： （ D、A、B、E ）。其中TFII-D的功能是（與TATA盒結(jié)合 ）。22與DNA結(jié)合的轉(zhuǎn)錄因子大多以二聚體形式起作用，轉(zhuǎn)錄因子與DNA結(jié)合的功能域常見有以下幾種（ 螺旋-轉(zhuǎn)角-螺旋 ）、（ 鋅指模體 ）、（堿性-亮氨酸拉鏈模體 ）。23限制性內(nèi)切酶的切割方式有三種類型分別是（在對(duì)稱軸5 側(cè)切割產(chǎn)生5 粘端 ）、（在對(duì)稱軸3 側(cè)切割產(chǎn)生3 粘端）（在對(duì)稱軸處切割產(chǎn)生平段）。24質(zhì)粒DNA具

11、有三種不同的構(gòu)型分別是：（ SC構(gòu)型 ）、（ oc構(gòu)型 ）、（ L構(gòu)型 ）。在電泳中最前面的是（ SC構(gòu)型 ）。25外源基因表達(dá)系統(tǒng)，主要有（大腸桿菌 ）、（ 酵母）、（ 昆蟲 ）和（ 哺乳類細(xì)胞表 ）。26轉(zhuǎn)基因動(dòng)物常用的方法有：（逆轉(zhuǎn)錄病毒感染法）、（DNA顯微注射法）、（胚胎干細(xì)胞法 ）。三、簡(jiǎn) 答1 分別說出5種以上RNA的功能？轉(zhuǎn)運(yùn)RNA tRNA 轉(zhuǎn)運(yùn)氨基酸 ；核蛋白體RNA rRNA 核蛋白體組成成 ；信使RNA mRNA 蛋白質(zhì)合成模板 ；不均一核RNA hnRNA 成熟mRNA的前體 ；小核RNA snRNA 參與hnRNA的剪接；小胞漿RNA scRNA/7SL-RNA 蛋

12、白質(zhì)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)定位合成的信號(hào)識(shí)別體的組成成分；反義RNA anRNA/micRNA 對(duì)基因的表達(dá)起調(diào)節(jié)作用；核酶 Ribozyme RNA 有酶活性的RNA2原核生物與真核生物啟動(dòng)子的主要差別？原核生物TTGACA - TATAAT-起始位點(diǎn) -35 -10真核生物增強(qiáng)子-GC -CAAT-TATAA5mGpp起始位點(diǎn) -110 -70 -253對(duì)天然質(zhì)粒的人工構(gòu)建主要表現(xiàn)在哪些方面？天然質(zhì)粒往往存在著缺陷，因而不適合用作基因工程的載體，必須對(duì)之進(jìn)行改造構(gòu)建：a、加入合適的選擇標(biāo)記基因，如兩個(gè)以上，易于用作選擇,通常是抗生素基因。b、增加或減少合適的酶切位點(diǎn)，便于重組。 c、縮短長(zhǎng)度，切去不必要的

13、片段，提高導(dǎo)入效率，增加裝載量。d、改變復(fù)制子，變嚴(yán)緊為松弛，變少拷貝為多拷貝。e、根據(jù)基因工程的特殊要求加裝特殊的基因元件 4舉例說明差示篩選組織特異cDNA的方法？制備兩種細(xì)胞群體，目的基因在其中一種細(xì)胞中表達(dá)或高表達(dá)，在另一種細(xì)胞中不表達(dá)或低表達(dá)，然后通過雜交對(duì)比找到目的基因。 例如：在腫瘤發(fā)生和發(fā)展過程中，腫瘤細(xì)胞會(huì)呈現(xiàn)與正常細(xì)胞表達(dá)水平不同的mRNA，因此，可以通過差示雜交篩選出與腫瘤相關(guān)的基因。也可利用誘導(dǎo)的方法，篩選出誘導(dǎo)表達(dá)的基因。 5雜交瘤細(xì)胞系的產(chǎn)生與篩選？脾B細(xì)胞+骨髓瘤細(xì)胞，加聚乙二醇（PEG）促進(jìn)細(xì)胞融合，HAT培養(yǎng)基中培養(yǎng)（內(nèi)含次黃嘌呤、氨基蝶呤、T）生長(zhǎng)出來的脾B

14、-骨髓瘤融合細(xì)胞繼續(xù)擴(kuò)大培養(yǎng)。 細(xì)胞融合物中包含：脾-脾融合細(xì)胞：不能生長(zhǎng)，脾細(xì)胞不能體外培養(yǎng)。骨-骨融合細(xì)胞：不能利用次黃嘌呤，但可通過第二途 徑利用葉酸還原酶合成嘌呤。氨基蝶呤對(duì)葉酸還原酶有抑制作用，因此不能生長(zhǎng)。骨-脾融合細(xì)胞：在HAT中能生長(zhǎng)，脾細(xì)胞可以利用次黃嘌呤，骨細(xì)胞提供細(xì)胞分裂功能。 6、利用雙脫氧末端終止法（Sanger法）測(cè)定DNA一級(jí)結(jié)構(gòu)的原理與方法？原理是采用核苷酸鏈終止劑2，3，-雙脫氧核苷酸終止DNA的延長(zhǎng)。由于它缺少形成3/5/磷酸二脂鍵所需要的3-OH，一旦參入到DNA鏈中，此DNA鏈就不能進(jìn)一步延長(zhǎng)。根據(jù)堿基配對(duì)原則，每當(dāng)DNA聚合酶需要dNMP參入到正常延長(zhǎng)

15、的DNA鏈中時(shí)，就有兩種可能性，一是參入ddNTP,結(jié)果導(dǎo)致脫氧核苷酸鏈延長(zhǎng)的終止；二是參入dNTP,使DNA鏈仍可繼續(xù)延長(zhǎng)，直至參入下一個(gè)ddNTP。根據(jù)這一方法，就可得到一組以ddNTP結(jié)尾的長(zhǎng)短不一的DNA片段。 方法是分成四組分別為ddAMP、ddGMP、ddCMP、ddTMP反應(yīng)后，聚丙烯酰胺凝膠電泳按泳帶可讀出DNA序列。 7、激活蛋白（CAP）對(duì)轉(zhuǎn)錄的正調(diào)控作用？環(huán)腺苷酸（cAMP）受體蛋白CRP（cAMP receptor protein），cAMP與CRP結(jié)合后所形成的復(fù)合物稱激活蛋白CAP（cAMPactivated protein ）。當(dāng)大腸桿菌生長(zhǎng)在缺乏葡萄糖的培養(yǎng)基中

16、時(shí)，CAP合成量增加，CAP具有激活乳糖（Lac）等啟動(dòng)子的功能。一些依賴于CRP的啟動(dòng)子缺乏一般啟動(dòng)子所具有的典型的-35區(qū)序列特征（TTGACA）。因此RNA聚合酶難以與其結(jié)合。 CAP的存在（功能）：能顯著提高酶與啟動(dòng)子結(jié)合常數(shù)。主要表現(xiàn)以下二方面：CAP通過改變啟動(dòng)子的構(gòu)象以及與酶的相互作用幫助酶分子正確定向,以便與-10區(qū)結(jié)合，起到取代-35區(qū)功能的作用。CAP還能抑制RNA聚合酶與DNA中其它位點(diǎn)的結(jié)合，從而提高與其特定啟動(dòng)子結(jié)合的概率。8、典型的DNA重組實(shí)驗(yàn)通常包括哪些步驟？a、提取供體生物的目的基因（或稱外源基因），酶接連接到另一DNA分子上（克隆載體），形成一個(gè)新的重組DN

17、A分子。 b、將這個(gè)重組DNA分子轉(zhuǎn)入受體細(xì)胞并在受體細(xì)胞中復(fù)制保存，這個(gè)過程稱為轉(zhuǎn)化。 c、對(duì)那些吸收了重組DNA的受體細(xì)胞進(jìn)行篩選和鑒定。 d、對(duì)含有重組DNA的細(xì)胞進(jìn)行大量培養(yǎng)，檢測(cè)外援基因是否表達(dá)。 9、基因文庫(kù)的構(gòu)建對(duì)重組子的篩選舉出3種方法并簡(jiǎn)述過程。抗生素抗性篩選、抗性的插入失活、蘭-白斑篩選 或PCR篩選、差式篩選、DNA探針 多數(shù)克隆載體均帶有抗生素抗性基因（抗氨芐青霉素、四環(huán)素）。當(dāng)質(zhì)粒轉(zhuǎn)入大腸桿菌中后，該菌便獲得抗性，沒有轉(zhuǎn)入的不具有抗性。但不能區(qū)分是否已重組。 在含有兩個(gè)抗性基因的載體中，如果外源DNA片段插入其中一個(gè)基因并導(dǎo)致該基因失活，就可用兩個(gè)分別含不同藥物的平板

18、對(duì)照篩選陽性重組子。 如pUC質(zhì)粒含LacZ基因（編碼半乳糖苷酶）該酶能分解生色底物X-gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-D-半乳糖苷)產(chǎn)生藍(lán)色，從而使菌株變藍(lán)。當(dāng)外源DNA插入后，LacZ基因不能表達(dá)，菌株呈白色，以此來篩選重組細(xì)菌。 10、說明通過胚胎干細(xì)胞獲得轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的基本過程？胚胎干細(xì)胞（embryonic stem cell,ES）：是胚胎發(fā)育期的胚細(xì)胞，可以人工培養(yǎng)增殖并具有分化成其它類型細(xì)胞的功能。ES細(xì)胞的培養(yǎng)：分離胚泡的內(nèi)層細(xì)胞團(tuán)進(jìn)行培養(yǎng)。ES在無飼養(yǎng)層中培養(yǎng)時(shí)會(huì)分化為肌細(xì)胞、N細(xì)胞等多種功能細(xì)胞，在含有成纖維細(xì)胞中培養(yǎng)時(shí)ES將保持分化功能。 可以對(duì)ES進(jìn)行基因操作，不影響

19、它的分化功能可以定點(diǎn)整合，解決了隨機(jī)整合的問題。向胚胎干細(xì)胞導(dǎo)入外源基因，然后植入到待孕雌鼠子宮，發(fā)育成幼鼠，雜交獲得純合鼠。蛋白質(zhì)的生物合成(一)名詞解釋1翻譯(translation)：以mRNA為模板，氨酰-tRNA為原料直接供體，在多種蛋白質(zhì)因子和酶的參與下，在核糖體上將mRNA分子上的核苷酸順序表達(dá)為有特定氨基酸順序的蛋白質(zhì)的過程。2密碼子(codon)：mRNA中堿基順序與蛋白質(zhì)中氨基酸順序的對(duì)應(yīng)關(guān)系是通過密碼實(shí)現(xiàn)的， mRNA中每三個(gè)相鄰的堿基決定一個(gè)氨基酸，這三個(gè)相鄰的堿基稱為一個(gè)密碼子。3密碼的簡(jiǎn)并性(degeneracy)：個(gè)氨基酸具有兩個(gè)以上密碼子的現(xiàn)象。4同義密碼子(s

20、ynonym codon)：為同種氨基酸編碼的各個(gè)密碼子，稱為同義密碼了。5變偶假說(wobble hypothesis)：指反密碼子的前兩個(gè)堿基(3-端)按照標(biāo)準(zhǔn)與密碼子的前兩個(gè)堿基(5-端)配對(duì)，而反密碼子中的第三個(gè)堿墓則有某種程度的變動(dòng)，使其有可能與幾種不同的堿基配對(duì)。6移碼突變(frame-shift mutation)：在mRNA中，若插入或刪去一個(gè)核苷酸，就會(huì)使讀碼發(fā)錯(cuò)誤，稱為移碼，由于移碼而造成的突變、稱移碼突變。 7，同功受體(isoacceptor)：轉(zhuǎn)運(yùn)同一種氨基酸的幾種tRNA稱為同功受體。8反密碼子(anticodon)：指tRNA反密碼子環(huán)中的三個(gè)核苷酸的序列，在蛋白

21、質(zhì)合成過程中通過堿基配對(duì)，識(shí)別并結(jié)合到mRNA的特殊密碼上。9多核糖體(polysome)：mRNA同時(shí)與若干個(gè)核糖體結(jié)合形成的念珠狀結(jié)構(gòu)，稱為多核糖體。(二)問答題1參與蛋白質(zhì)生物合成體系的組分有哪些?它們具有什么功能?mRNA：蛋白質(zhì)合成的模板；tRNA：蛋白質(zhì)合成的氨基酸運(yùn)載工具；核糖體：蛋白質(zhì)合成的場(chǎng)所；輔助因子：(a)起始因子-參與蛋白質(zhì)合成起始復(fù)合物形成；(b)延長(zhǎng)因子-肽鏈的延伸作用；(c)釋放因子一-終止肽鏈合成并從核糖體上釋放出來。2遺傳密碼是如何破譯的?提示：三個(gè)突破性工作 (1)體外翻譯系統(tǒng)的建立；(2)核糖體結(jié)合技術(shù)；(3)核酸的人工合成。3遺傳密碼有什么特點(diǎn)?(1)密

22、碼無標(biāo)點(diǎn)：從起始密碼始到終止密碼止，需連續(xù)閱讀，不可中斷。增加或刪除某個(gè)核苷酸會(huì)發(fā)生移碼突變。 (2)密碼不重疊：組成一個(gè)密碼的三個(gè)核苷酸只代表一個(gè)氨基酸，只使用一次，不重疊使用。 (3)密碼的簡(jiǎn)并性：在密碼子表中，除Met、Trp各對(duì)應(yīng)一個(gè)密碼外，其余氨基酸均有兩個(gè)以上的密碼，對(duì)保持生物遺傳的穩(wěn)定性具有重要意義。 (4)變偶假說：密碼的專一性主要由頭兩位堿基決定，第三位堿基重要性不大，因此在與反密碼子的相互作用中具有一定的靈活性。 (5)通用性及例外：地球上的一切生物都使用同一套遺傳密碼，但近年來已發(fā)現(xiàn)某些個(gè)別例外現(xiàn)象，如某些哺乳動(dòng)物線粒體中的UGA不是終止密碼而是色氨酸密碼子。 (6)起始

23、密碼子AUG，同時(shí)也代表Met，終止密碼子UAA、UAG、UGA使用頻率不同。4簡(jiǎn)述三種RNA在蛋白質(zhì)生物合成中的作用。(1)mRNA：DNA的遺傳信息通過轉(zhuǎn)錄作用傳遞給mRNA，mRNA作為蛋白質(zhì)合成模板，傳遞遺傳信息，指導(dǎo)蛋白質(zhì)合成。 (2)tRNA：蛋白質(zhì)合成中氨基酸運(yùn)載工具，tRNA的反密碼子與mRNA上的密碼子相互作用，使分子中的遺傳信息轉(zhuǎn)換成蛋白質(zhì)的氨基酸順序是遺傳信息的轉(zhuǎn)換器。 (3)rRNA 核糖體的組分，在形成核糖體的結(jié)構(gòu)和功能上起重要作用，它與核糖體中蛋白質(zhì)以及其它輔助因子一起提供了翻譯過程所需的全部酶活性。5簡(jiǎn)述核糖體的活性中心的二位點(diǎn)模型及三位點(diǎn)模型的內(nèi)容。(1)二位點(diǎn)

24、模型 A位：氨酰-tRNA進(jìn)入并結(jié)合的部位；P位：起始氨酰-tRNA或正在延伸的肽基-tRNA結(jié)合部位，也是無載的tRNA從核糖體上離開的部位。(2)三位點(diǎn)模型 大腸桿菌上的70S核糖體上除A位和P位外，還存在第三個(gè)結(jié)合tRNA的位點(diǎn)，稱為E位，它特異地結(jié)合無負(fù)載的tRNA及無負(fù)載的tRNA最后從核糖體上離開的位點(diǎn)。6氨基酸在蛋白質(zhì)合成過程中是怎樣被活化的?催化氨基酸活化的酶稱氨酰-tRNA合成酶，形成氨酰-tRNA，反應(yīng)分兩步進(jìn)行： (1)活化 需Mg2+和Mn2+，由ATP供能，由合成酶催化，生成氨基酸-AMP-酶復(fù)合物。 ， (2)轉(zhuǎn)移 在合成酶催化下將氨基酸從氨基酸AMP酶復(fù)合物上轉(zhuǎn)移

25、到相應(yīng)的tRNA上，形成氨酰-tRNA。 7簡(jiǎn)述蛋白質(zhì)生物合成過程。蛋白質(zhì)合成可分四個(gè)步驟，以大腸桿菌為例： (1)氨基酸的活化：游離的氨基酸必須經(jīng)過活化以獲得能量才能參與蛋白質(zhì)合成，由氨酰-tRNA合成酶催化，消耗1分子ATP，形成氨酰-tRNA。 (2)肽鏈合成的起始：由起始因子參與，mRNA與30S小亞基、50S大亞基及起始甲酰甲硫氨酰-tRNA(fMet-tRNAt)形成70S起始復(fù)合物，整個(gè)過程需GTP水解提供能量。 (3)肽鏈的延長(zhǎng)：起始復(fù)合物形成后肽鏈即開始延長(zhǎng)。首先氨酰-tRNA結(jié)合到核糖體的A位，然后，由肽酰轉(zhuǎn)移酶催化與P位的起始氨基酸或肽?；纬呻逆I，tRNAf或空載tRN

26、A仍留在P位最后核糖體沿mRNA53方向移動(dòng)一個(gè)密碼子距離，A位上的延長(zhǎng)一個(gè)氨基酸單位的肽酰-tRNA轉(zhuǎn)移到P位，全部過程需延伸因子EF-Tu、EF-Ts，能量由GTP提供。 (4)肽鏈合成終止，當(dāng)核糖體移至終止密碼UAA、UAG或UGA時(shí)，終止因子RF-1、RF-2識(shí)別終止密碼，并使肽酰轉(zhuǎn)移酶活性轉(zhuǎn)為水解作用，將P位肽酰-tRNA水解，釋放肽鏈，合成終止。8蛋白質(zhì)合成中如何保證其翻譯的正確性?提示：(1)氨基酸與tRNA的專一結(jié)合，保證了tRNA攜帶正確的氨基酸；(2)攜帶氨基酸的tRNA對(duì)mRNA的識(shí)別，mRNA上的密碼子與tRNA上的反密碼子的相互識(shí)別，保證了遺傳信息準(zhǔn)確無誤地轉(zhuǎn)譯；(3

27、)起始因子及延長(zhǎng)因子的作用，起始因子保證了只有起始氨酰-tRNA能進(jìn)入核糖體P位與起始密碼子結(jié)合，延伸因子的高度專一性，保證了起始tRNA攜帶的fMet不進(jìn)入肽鏈內(nèi)部；(4)核糖體三位點(diǎn)模型的E位與A位的相互影響，可以防止不正確的氨酰-tRNA進(jìn)入A位，從而提高翻譯的正確性；(5)校正作用：氨酰-tRNA合成酶和tRNA的校正作用；對(duì)占據(jù)核糖體A位的氨酰-tRNA的校對(duì)；變異校對(duì)即基因內(nèi)校對(duì)與基因間校對(duì)等多種校正作用可以保證翻譯的正確。9原核細(xì)胞和真核細(xì)胞在合成蛋白質(zhì)的起始過程有什么區(qū)別。(1)起始因子不同：原核為IF-1，IF-2，IF-2，真核起始因子達(dá)十幾種。 (2)起始氨酰-tRNA不

28、同：原核為fMet-tRNAf，真核Met-tRNAi(3)核糖體不同：原核為70S核粒體，可分為30S和50S兩種亞基，真核為80S核糖體，分40S和60S兩種亞基10蛋白質(zhì)合成后的加工修飾有哪些內(nèi)容?提示：(1)水解修飾；(2)肽鍵中氨基酸殘基側(cè)鏈的修飾；(3)二硫鍵的形成；(4)輔基的連接及亞基的聚合。11蛋白質(zhì)的高級(jí)結(jié)構(gòu)是怎樣形成的? 提示：蛋白質(zhì)的高級(jí)結(jié)構(gòu)是由氨基酸的順序決定的，不同的蛋白質(zhì)有不同的氨基酸順序，各自按一定的方式折疊而成該蛋白質(zhì)的高級(jí)結(jié)構(gòu)。折疊是在自然條件下自發(fā)進(jìn)行的，在生理?xiàng)l件下，它是熱力學(xué)上最穩(wěn)定的形式，同時(shí)離不開環(huán)境因素對(duì)它的影響。對(duì)于具有四級(jí)結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)，其亞基

29、可以由一個(gè)基因編碼的相同肽鏈組成，也可以由不同肽鏈組成，不同肽鏈可以通過一條肽鏈加工剪切形成，或由幾個(gè)不同單順反子mRNA翻譯，或由多順反子mRNA翻譯合成。12真核細(xì)胞與原核細(xì)胞核糖體組成有什么不同?如何證明核糖體是蛋白質(zhì)的合成場(chǎng)所?原核細(xì)胞：70S核糖體由30S和50S兩個(gè)亞基組成；真核細(xì)胞：80S核糖體由40S和60S兩個(gè)亞基組成。利用放射性同位素標(biāo)記法，通過核糖體的分離證明之。13.已知一種突變的噬菌體蛋白是由于單個(gè)核苷酸插入引起的移碼突變的，將正常的蛋白質(zhì)和突變體蛋白質(zhì)用胰蛋白酶消化后，進(jìn)行指紋圖分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn)只有一個(gè)肽段的差異，測(cè)得其基酸順序如下： 正常肽段 Met-Val-Cys

30、-Val-Arg 突變體肽段 Met-Ala-Met-Arg（1）什么核苷酸插入到什么地方導(dǎo)致了氨基酸順序的改變？（2）推導(dǎo)出編碼正常肽段和突變體肽段的核苷酸序列.提示：有關(guān)氨基酸的簡(jiǎn)并密碼分別為 Val: GUU GUC GUA GUG Arg: CGU CGC CGA CG AGA AGG Cys: UGU UGC Ala: GCU GCC GCA CGC提示：(1)在正常肽段的第一個(gè)Val的密碼GUA的G后插入了一個(gè)C ；(2)正常肽段的核苷酸序列為：AUG GUA UGC GU CG；突變體肽段的核苷酸序列為：AUG GCU AUG CGU 。14. 試列表比較核酸與蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)。核酸

31、（Nucleic acids） 蛋白質(zhì)（Proteins）DNARNA一級(jí)結(jié)構(gòu)Primary structure核苷酸序列AGTTCT 或AGUUCU 的排列順序3，5，- 磷酸二酯鍵氨基酸排列順序肽鍵二級(jí)結(jié)構(gòu)Secondarystructure雙螺旋主要是氫鍵，堿基堆積力配對(duì)（莖-環(huán)結(jié)構(gòu)）（同左）有規(guī)則重復(fù)的構(gòu)象（-helix ，sheet，-turn）氫鍵三級(jí)結(jié)構(gòu)Tertiary structure超螺旋RNA空間構(gòu)象一條肽鏈的空間構(gòu)象 范德華力 氫鍵 疏水作用 鹽橋 二硫鍵等四級(jí)結(jié)構(gòu)Quaternarystructure多條肽鏈（或不同蛋白）15. 試比較原核生物與真核生物的翻譯。原核生

32、物與真核生物的翻譯比較如下：僅述真核生物的，原核生物與此相反。（1）.起始Met不需甲?；唬?）.無SD序列，但需要一個(gè)掃描過程；（3）.tRNA先于mRNA與核糖體小亞基結(jié)合；（4）.起始因子比較多；（5）.只一個(gè)終止釋放因子。(三)填空題1蛋白質(zhì)的生物合成是以_ mRNA 為模板，以_ 氨酰-tRNA _為原料直接供體，以_核糖體_為合成楊所。2生物界共有_64_個(gè)密碼子，其中_61_個(gè)為氨基酸編碼，起始密碼子為_AUG _；終止密碼子為_ UAA _、_ UAG _、_ UGA_。3原核生物的起始tRNA以_ tRNAf _表示，真核生物的起始tRNA以_ tRNAi _表示，延伸中的

33、甲硫氨酰tRNA以_ tRNAm _表示。4植物細(xì)胞中蛋白質(zhì)生物合成可在_核糖體_、_線粒體_和_葉綠體_三種細(xì)胞器內(nèi)進(jìn)行。5延長(zhǎng)因子T由Tu和Ts兩個(gè)亞基組成，Tu為對(duì)熱_不穩(wěn)定_蛋白質(zhì)，Ts為對(duì)熱_ 穩(wěn)定_蛋白質(zhì)。6原核生物中的釋放因子有三種，其中RF-1識(shí)別終止密碼子_UAA_、_UAG_；RF-2識(shí)別_UAA_、_UGA_；真核中的釋放因子只有_RF_一種。7氨酰-tRNA合成酶對(duì)_氨基酸_和相應(yīng)的_tRNA_有高度的選擇性。8原核細(xì)胞的起始氨基酸是_甲酰甲硫氨酸_，起始氨酰-tRNA是_甲酰甲硫氨酰-tRNA_。9原核細(xì)胞核糖體的_小_亞基上的 _16SrRNA_協(xié)助辨認(rèn)起始密碼子。

34、l0每形成一個(gè)肽鍵要消耗_4_個(gè)高能磷酸鍵，但在合成起始時(shí)還需多消耗_1_個(gè)高能磷酸鍵。11肽基轉(zhuǎn)移酶在蛋白質(zhì)生物合成中的作用是催化_肽鍵_形成和_ 肽酰-tRNA _的水解。12肽鏈合成終止時(shí)，_終止因子_進(jìn)人“A”位，識(shí)別出_終止密碼子_，同時(shí)終止因子使_肽基轉(zhuǎn)移酶_的催化作用轉(zhuǎn)變?yōu)開水解作用_。13原核生物的核糖體由_30S_小亞基和_50S_大亞基組成，真核生物核糖體由_40S_小亞基和_60S_大亞基組成。14.蛋白質(zhì)中可進(jìn)行磷酸化修飾的氨基酸殘基主要為_Ser_、_Thr_、_Tyr_。(四)選擇題1蛋白質(zhì)生物合成的方向是( )。 從CN端 定點(diǎn)雙向進(jìn)行 從N端、C端同時(shí)進(jìn)行 從N

35、C端2不能合成蛋白質(zhì)的細(xì)胞器是( )。 線粒體 葉綠體 高爾基體 核糖體3真核生物的延伸因子是( )。 EFTu EF一2 EF-G EF一1 4真核生物的釋放因子是( )。 RF RF一1 RF一2 RF一3 5能與tRNA反密碼子中的I堿基配對(duì)的是( )。 A、G C、U U U、C、A 6蛋白質(zhì)合成所需能量來自( )。 ATP GTP ATP、GTP GTP 7tRNA的作用是( )。 將一個(gè)氨基酸連接到另一個(gè)氨基酸上 把氨基酸帶到mRNA位置上 將mRNA接到核糖體上 增加氨基酸的有效濃度8關(guān)于核糖體的移位，敘述正確的是( )。 空載tRNA的脫落發(fā)生在“A”位上 核糖體沿mRNA的3

36、5方向相對(duì)移動(dòng) 核糖體沿mRNA的53方向相對(duì)移動(dòng) 核糖體在mRNA上一次移動(dòng)的距離相當(dāng)于二個(gè)核苷酸的長(zhǎng)度9在蛋白質(zhì)合成中，下列哪一步不需要消耗高能磷酸鍵( )。 肽基轉(zhuǎn)移酶形成肽鍵 氨酰一tRNA與核糖體的“A，位點(diǎn)結(jié)合 核糖體沿mRNA移動(dòng) fMettRNAf與mRNA的起始密碼子結(jié)合以及與大、小亞基的結(jié)合10在真核細(xì)胞中肽鏈合成的終止原因是( )。 已達(dá)到mRNA分子的盡頭 具有特異的tRNA識(shí)別終止密碼子 終止密碼子本身具有酯酶作用，可水解肽酰與tRNA之是的酯鍵 終止密碼子被終止因子(RF)所識(shí)別11蛋白質(zhì)生物合成中的終止密碼是( )。 UAA UAU UAC UAG UGA12根據(jù)

37、擺動(dòng)假說，當(dāng)tRNA反密碼子第1位堿基是I時(shí)，能夠識(shí)別哪幾種密碼子( ) A C G T U13下列哪些因子是真核生物蛋白質(zhì)合成的起始因子( )。 IF1 IF2 eIF2 eIF4 elF4A14蛋白質(zhì)生物合成具有下列哪些特征( )。 氨基酸必須活化 需要消耗能量 每延長(zhǎng)一個(gè)氨基酸必須經(jīng)過進(jìn)位、轉(zhuǎn)肽、移位、稅落四個(gè)步驟 合成肽鏈由C端向N端不斷延長(zhǎng) 新生肽鏈需加工才能成為活性蛋白質(zhì)15下列哪些內(nèi)容屬于蛋白質(zhì)合成后的加工、修飾( )。切除內(nèi)含子，連接外顯子 切除信號(hào)肽 切除N-端Met形成二硫鍵 氨的側(cè)鏈修飾16蛋白質(zhì)生物合成過程中，下列哪些步驟需要消耗能量( )。 氨基酸分子的活化 70S起

38、始復(fù)合物的形成 氨酰tRNA進(jìn)入核糖體A位 肽鍵形成 核糖體移位17原核生物的肽鏈延伸過程有下列哪些物質(zhì)參與( )。肽基轉(zhuǎn)移酶 鳥苷三磷酸 mRNA 甲酰甲硫氨酰-tRNAEF-Tu、EF-Ts、 EF-G18.Shine-Dalgarno順序(SD-順序)是指: ( )在mRNA分子的起始碼上游8-13個(gè)核苷酸處的順序在DNA分子上轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)前8-13個(gè)核苷酸處的順序16srRNA3端富含嘧啶的互補(bǔ)順序 啟動(dòng)基因的順序特征 以上都正確19.在研究蛋白合成中,可利用嘌呤霉素,這是因?yàn)樗? ( )使大小亞基解聚 使肽鏈提前釋放 抑制氨基酰-tRNA合成酶活性 防止多核糖體形成 以上都正確20.氨

39、基酸活化酶：( )活化氨基酸的氨基 利用GTP作為活化氨基酸的能量來源催化在tRNA的5磷酸與相應(yīng)氨基酸間形成酯鍵每一種酶特異地作用于一種氨基酸及相應(yīng)的tRNA 以上都不正確(五)是非題1DNA不僅決定遺傳性狀，而且還直接表現(xiàn)遺傳性狀。( )2密碼子在mRNA上的閱讀方向?yàn)? 3。( )3每種氨基酸都有兩種以上密碼子。( )4一種tRNA只能識(shí)別一種密碼子。( )5線粒體和葉綠體的核糖體的亞基組成與原核生物類似。( )6大腸桿菌的核糖體的小亞基必須在大亞基存在時(shí)，才能與mRNA結(jié)合。( )7大腸桿菌的核糖體的大亞基必須在小亞存在時(shí)，才能與mRNA結(jié)合。( )8在大腸桿菌中，一種氨基酸只對(duì)應(yīng)于一

40、種氨酰-tRNA合成酶。( )9氨基酸活化時(shí)，在氨酰-tRNA合成酶的催化下，由ATP供能，消耗個(gè)高能磷酸鍵。( )10線粒體和葉綠體內(nèi)的蛋白質(zhì)生物合成起始與原核生物相同。( )11每種氨基酸只能有一種特定的tRNA與之對(duì)應(yīng)。( )12AUG既可作為fMet-tRNAf和Met-tRNAi的密碼子，又可作為肽鏈內(nèi)部Met的密碼子。( )13構(gòu)成密碼子和反密碼子的堿基都只是A、U、C、G。( )14核糖體大小亞基的結(jié)合和分離與Mg2+，的濃度有關(guān)。( )15核糖體的活性中心“A”位和“P”位都主要在大亞基上。( )16. E.coli中，DnaA與復(fù)制起始區(qū)DNA結(jié)合，決定復(fù)制的起始。( ) 核

41、酸的生物合成(一)名詞解釋1中心法則(central dogma)：生物體遺傳信息流動(dòng)途徑。最初由Crick(1958)提出，經(jīng)后人的不斷補(bǔ)充和修改，現(xiàn)包括反轉(zhuǎn)錄和RNA復(fù)制等內(nèi)容。2半保留復(fù)制(簡(jiǎn)稱復(fù)制)（semiconservative replication)：親代雙鏈DNA以每條鏈為模板，按堿基配對(duì)原則各合成一條互補(bǔ)鏈，這樣一條親代DNA雙螺旋，形成兩條完全相同的子代DNA螺旋，子代DNA分子中都有一條合成的“新”鏈和一條來自親代的舊鏈，稱為半保留復(fù)制。3DNA聚合酶(DNA polymerase)：指以脫氧核苷三磷酸為底物，按5 3方向合成DNA的一類酶，反應(yīng)條件：4種脫氧核苷三磷酸

42、、Mg+、模板、引物。DNA聚合酶是多功能酶，除具有聚合作用外，還具有其它功能，不同DNA聚合酶所具有的功能不同。4解旋酶(helicase)：是一類通過水解ATP提供能量，使DNA雙螺旋兩條鏈分開的酶，每解開一對(duì)堿基，水解2分子ATP。5拓?fù)洚悩?gòu)酶(topoisomerase)：是一類引起DNA拓?fù)洚悩?gòu)反應(yīng)的酶，分為兩類：類型I的酶能使DNA的一條鏈發(fā)生斷裂和再連接，反應(yīng)無需供給能量，類型的酶能使DNA的兩條鏈同時(shí)發(fā)生斷裂和再連接，當(dāng)它引入超螺旋時(shí)，需要由ATP供給能量。6單鏈DNA結(jié)合蛋白(single-strandbinding protein ,SSB)：是一類特異性和單鏈區(qū)DNA結(jié)合

43、的蛋白質(zhì)。它的功能在于穩(wěn)定DNA解開的單鏈，阻止復(fù)性和保護(hù)單鏈部分不被核酸酶降解。 7DNA連接酶(DNA ligase)：是專門催化雙鏈DNA中缺口共價(jià)連接的酶，不能催化兩條游離的單鏈DNA鏈間形成磷酸二酯鍵。反應(yīng)需要能量。8引物酶及引發(fā)體(primase primosome)：以DNA為模板，以核糖核苷酸為底物，在DNA合成中，催化形成RNA引物的酶稱為引物酶及引物體。大腸桿菌的引物酶單獨(dú)沒有活性，只有與其它蛋白質(zhì)結(jié)合在一起，形成一個(gè)復(fù)合體，即引發(fā)體才有生物活性。 9復(fù)制叉(replication fork)：復(fù)制中的DNA分子，末復(fù)制的部分是親代雙螺旋，而復(fù)制好的部分是分開的，由兩個(gè)子代

44、雙螺旋組成，復(fù)制正在進(jìn)行的部分呈丫狀叫做復(fù)制叉。 10復(fù)制眼結(jié)構(gòu)：在一段DNA上，正在復(fù)制的部分形成眼狀結(jié)構(gòu)。復(fù)制眼在環(huán)狀DNA上形成的結(jié)構(gòu)與希臘字母相象，所以叫結(jié)構(gòu)。 11前導(dǎo)鏈(1eading strand)：在DNA復(fù)制過程中，以親代鏈(3 5為模板時(shí)，子代鏈的合成 (5 3)是連續(xù)的這條能連續(xù)合成的鏈稱前導(dǎo)鏈。 12岡崎片段(Okazaki fragment)、后隨鏈(1agging strand)：在DNA復(fù)制過程中，以親代鏈(5 3)為模板時(shí)，子代鏈的合成不能以3 5方向進(jìn)行，而是按5 3方向合成出許多小片段，因?yàn)槭菍榈热搜芯堪l(fā)現(xiàn)，因此稱岡崎片段。由許多岡崎片段連接而成的子代鏈稱

45、為后隨鏈。13半不連續(xù)復(fù)制(Semidiscontinuous replication)：在DNA復(fù)制過程中，一條鏈的合成是連續(xù)的，另一條鏈的合成是不連續(xù)的，所以叫做半不連續(xù)復(fù)制。14逆轉(zhuǎn)錄(reverse transcription)：以RNA為模板合成DNA的過程。15逆轉(zhuǎn)錄酶(reverse transeriptase)：催化以RNA為模板合成DNA的逆轉(zhuǎn)錄過程的酶。 Temin(1960)首次從勞氏肉瘤病毒中發(fā)現(xiàn)。逆轉(zhuǎn)錄酶具有多種酶活性：依賴RNA的DNA聚合酶活性；依賴DNA的DNA聚合酶活性，RNA水解酶活性，DNA合成方向5 3。合成時(shí)需要引物與模板。16突變(mutation)

46、：基因組DNA順序上的任何一種改變都叫做突變。分點(diǎn)突變和結(jié)構(gòu)畸變。17點(diǎn)突變(Point mutation)：是指一個(gè)或幾個(gè)堿基對(duì)被置換(replacement)，這種置換又分兩種形式：轉(zhuǎn)換(transition)一-指用一個(gè)嘌呤堿置換另一個(gè)嘌呤堿，一個(gè)嘧啶堿置換另一個(gè)嘧啶堿；顛換(transversion)一-指用嘌呤堿置換嘧啶堿或用嘧啶堿置換嘌呤堿。18結(jié)構(gòu)畸變：基因中的缺口、或插入(insertion)或缺失(deletion)某些堿基造成移碼突變使 DNA的模板鏈?zhǔn)スδ堋?9誘變劑(mutagen)：使基因組發(fā)生突變的物理、化學(xué)、生物因素叫誘變劑。20修復(fù)(repair)：除去DNA

47、上的損傷，恢復(fù)DNA的正常結(jié)構(gòu)和功能是生物機(jī)體的一種保護(hù)功能。21光裂合酶修復(fù)(又稱光復(fù)活)(photoreactivation)：可見光將光裂合酶激活，它分解DNA上由紫外線照射而形成的嘧啶二聚體，使它們恢復(fù)成兩個(gè)單獨(dú)的嘧啶堿。22切除修復(fù)(excision repair)：在一系列酶的作用下，將DNA分子中受損傷部分切除，以互補(bǔ)鏈為模板，合成出空缺的部分，使DNA恢復(fù)正常結(jié)構(gòu)的過程。23重組修復(fù)(recombination repair)：DNA在有損傷的情況下也可以復(fù)制，復(fù)制時(shí)子代鏈躍過損傷部位并留下缺口，通過分子間重組，從完整的另一條母鏈上將相應(yīng)的核苷酸序列片段移至子鏈缺口處，然后用再

48、合成的多核苷酸的序列補(bǔ)上母鏈的空缺，此過程稱重組修復(fù)。24誘導(dǎo)修復(fù)和應(yīng)急反應(yīng)(induction repair and SOS response)(SOS修復(fù))：由于DNA受到損傷或復(fù)制系統(tǒng)受到抑制所誘導(dǎo)引起的一系列復(fù)雜的應(yīng)急效應(yīng)，稱為應(yīng)急反應(yīng)。SOS反應(yīng)主要包括兩個(gè)方面：DNA損傷修復(fù)(SOS修復(fù)或稱誘導(dǎo)修復(fù))和誘變效應(yīng)。SOS修復(fù)是一種易出差錯(cuò)的修復(fù)過程，雖能修復(fù)DNA的損傷而避免死亡。但卻帶來高的變異率。25DNA重組(recombination)：DNA重組是指在真核生物減數(shù)分裂過程中，細(xì)菌細(xì)胞的轉(zhuǎn)化中、病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)中等發(fā)生的DNA片段的交換或插入。26基因工程(又稱基因重組技術(shù))(gen

49、e/genetic engineering)：是將外源基因經(jīng)過剪切加工，再插入到一個(gè)具有自我復(fù)制能力的載體DNA中，將新組合的DNA轉(zhuǎn)移到一個(gè)寄主細(xì)胞中，外源基因就可以隨著寄主細(xì)胞的分裂進(jìn)行繁殖，寄主細(xì)胞也借此獲得外源基因所攜帶的新特性。27轉(zhuǎn)錄(transcription)：由依賴于DNA的RNA聚合酶催化，以DNA的一條鏈的一定區(qū)段為模板，按照堿基配對(duì)原則，合成一條與DNA鏈互補(bǔ)的RNA鏈的過程。28模板鏈(template strand)又稱負(fù)(-)鏈，反意義鏈(antisense strand)：轉(zhuǎn)錄過程中用作模板的這條DNA鏈，稱模板鏈。29非模板鏈(nontemplate stra

50、nd)又稱正(+)鏈，編碼鏈(coding strand)，有意義鏈(sense strand)：與模板鏈互補(bǔ)的那條DNA鏈，稱非模板鏈。30不對(duì)稱轉(zhuǎn)錄(asymmetric transcription)：因?yàn)镽NA的轉(zhuǎn)錄只在DNA的任一條鏈上進(jìn)行，所以把RNA的合成叫做不對(duì)稱轉(zhuǎn)錄。31啟動(dòng)子(promoter)：DNA鏈上能指示RNA轉(zhuǎn)錄起始的DNA序列稱啟動(dòng)子。32轉(zhuǎn)錄單位(transcription unit)：RNA的轉(zhuǎn)錄只在DNA的一個(gè)片段上進(jìn)行，這段DNA序列叫轉(zhuǎn)錄單位。33內(nèi)含子(intron)：真核生物基因中，不為蛋白質(zhì)編碼的、在mRNA加工過程中消失的DNA序列，稱內(nèi)含子。

51、34外顯子(exon)：真核生物基因中，在mRNA上出現(xiàn)并代表蛋白質(zhì)的DNA序列，叫外顯子。35轉(zhuǎn)錄加工(post-transcriptional processing)：細(xì)菌中很多RNA分子和幾乎全部真核生物的RNA在合成后都需要不同程度的加工，才能形成成熟的RNA分子，這個(gè)過程叫轉(zhuǎn)錄后加工。36核內(nèi)不均一RNA(hnRNA)：是真核生物細(xì)胞核內(nèi)的mRNA前體分子，分子量較大，并且不均一，含有許多內(nèi)含子。 37RNA的復(fù)制(RNA replication)：某些病毒RNA既可以做為模板合成病毒蛋白質(zhì)又可在 RNA復(fù)制酶(RNA replicase)的催化下，以自身RNA為模板，合成互補(bǔ)的RN

52、A新鏈，合成方向53，這一過程叫RNA復(fù)制。(二)問答題1試述Meselson和Stahl關(guān)于DNA半保留復(fù)制的證明實(shí)驗(yàn)。提示：將Ecoli放入以15NH4Cl為唯一氮源的培養(yǎng)基中連續(xù)培養(yǎng)十幾代，使所有DNA分子標(biāo)記上15N；將15N標(biāo)記的Ecoli再放入普通的14N培養(yǎng)基中培養(yǎng)，在細(xì)胞生長(zhǎng)一代、二代 、 、n代的時(shí)間間隔內(nèi)采樣；采用氯化銫密度梯度離心分離DNA，并用紫外照相技術(shù)檢測(cè)DNA所在位置；結(jié)果如下：其結(jié)果確切地證明DNA以半保留方式復(fù)制。2描述大腸桿菌DNA聚合酶I在DNA生物合成過程中的作用。Ecoli DNA聚合酶I是多功能酶，具有：DNA聚合酶活性，能按模板要求，以5 3方向合

53、成DNA，在DNA復(fù)制中，常用以填補(bǔ)引物切除后留下的空隙；53外切酶活性，DNA復(fù)制后期，用于切除RNA引物；35外切酶活性，用以校對(duì)復(fù)制的正確性，當(dāng)出現(xiàn)錯(cuò)配堿基時(shí)，切除錯(cuò)配堿基直到正確配對(duì)為止；DNA聚合酶I不是DNA復(fù)制和校正中的主要聚合酶，它的功能主要是修復(fù)。3試述DNA復(fù)制過程，總結(jié)DNA復(fù)制的基本規(guī)律。以Ecoli為例，DNA復(fù)制過程分三個(gè)階段；起始：從DNA上控制復(fù)制起始的序列即起始點(diǎn)開始復(fù)制，形成復(fù)制叉，復(fù)制方向多為雙向，也可以是單向，若以雙向進(jìn)行復(fù)制，兩個(gè)方向的復(fù)制速度不一定相同。由于DNA聚合酶不能從無到有合成新鏈，所以DNA復(fù)制需要有含3-OH的引物，引物由含有引物酶的引發(fā)

54、體合成一段含3一10個(gè)核苷酸的RNA片段；延長(zhǎng)：DNA復(fù)制時(shí)，分別以兩條親代DNA鏈為模板，當(dāng)復(fù)制叉沿DNA移動(dòng)時(shí)，以親代35鏈為模板時(shí)，子鏈的合成方向是53，可連續(xù)進(jìn)行，以親代53鏈為模板時(shí)，子鏈不能以35方向合成，而是先合成出許多53方向的岡崎片段，然后連接起來形成一條子鏈；終止：當(dāng)一個(gè)岡崎片段的3-OH與前一個(gè)岡崎片段的5-磷酸接近時(shí)，復(fù)制停止，由DNA聚合酶I切除引物，填補(bǔ)空隙，連接酶連接相鄰的DNA片段。 DNA復(fù)制時(shí)，由DNA解旋酶(又稱解鏈酶)通過水解ATP獲得能量來解開DNA雙鏈，并沿復(fù)制叉方向移動(dòng)，所產(chǎn)生的單鏈很快被單鏈結(jié)合蛋白所覆蓋，防止DNA的變性并保護(hù)其單鏈不被降解，復(fù)制叉前進(jìn)過程中，雙螺旋產(chǎn)生的應(yīng)力在拓?fù)洚悩?gòu)酶的作用下得到調(diào)整