實驗六細胞染色體的制備ppt課件

1、2021級生工1班羅甜甜小組華俊豪小組2021級生工1班實驗六實驗六細胞染色體制備與察看細胞染色體制備與察看 一、目的與要求一、目的與要求 1、初步掌握小白鼠染色體標本制造方法，了解其原理 2、了解小白鼠染色體的特點 3、掌握常規(guī)壓片法制備植物染色體標本。 4、了解染色體的生物學意義。二、資料、試劑與器材二、資料、試劑與器材 1、 資料 ：小白鼠18-20克、玉米根尖 2、藥品： 09生理鹽水; 2%檸檬酸鈉溶液；秋水仙素溶液； Giemsa液；磷酸緩沖液PH6.8);吉姆薩染液或0.1%亞甲基藍液 固定液甲醛：冰醋酸 3：1 0.4%KCl液、Carnoy固定液、苯酚品紅染液、10%HCl

2、45%醋酸等3、器材： 顯微鏡，載玻片，蓋玻片，鑷子，滴管，擦鏡紙，刀片，恒溫水浴鍋 ，離心機,離心管, 小培育皿4套，剪刀和電腦等問問 題題1、什么叫染色體？、什么叫染色體？ 由脫氧核糖核酸、蛋白質(zhì)和少量核糖核酸組成的線狀或棒狀物，是生物主要遺傳物質(zhì)的載體。是細胞中可被堿性染料著色的物質(zhì)。染色體方式圖 2、根據(jù)著絲粒在染色體上所處的位置劃分哪四類？ 1中間著絲粒染色體M 2近中間著絲粒染色體SM 3近端著絲粒染色體ST 4端著絲粒染色體T 只需一條臂。 中期染色體分類的形狀圖三、實驗操作 1、小白鼠骨髓細胞染色體的制造與察看1、實驗原理 凡細胞處于活潑增殖形狀，或經(jīng)過處置后細胞可進入分裂的任

3、何動物組織，均可用于染色體分析。給小白鼠體內(nèi)注射一定劑量的秋水仙素使分裂中的細胞多滯留于中期階段，染色體具有典型形狀。骨髓中具有高度分裂活性的細胞，經(jīng)過秋水仙素處置，可使分裂的細胞阻斷在有絲分裂中期，再經(jīng)低滲處置，固定，滴片，染色等步驟，可獲的染色體標本。 2、實驗步驟 1、在實驗前4-8小時，取20g左右的小白鼠，以4g/ g體重的劑量從腹腔注射秋水仙素； 2)、 取材： 利用斷頸法處死小白鼠，置于解剖盤內(nèi)，剪開后肢皮膚和肌肉，取出動物后肢的脛骨與股骨,剔除肌肉、肌腱，將其置于小培育皿中，用生理鹽水洗凈，剪去長骨兩端； 3)、取1.5ml 2%檸檬酸鈉用注射器注入骨髓腔中將骨髓細胞沖洗出來，

4、然后吹打散。轉(zhuǎn)入10ml離心管中。 4)、在離心管中加8ml 0.4%KCl液，吹打散.將離心管置于37水浴鍋內(nèi)處置20min 5)、離心：1500轉(zhuǎn)/min，離心10min 6)、棄去上清液，沿著管壁緩慢參與固定液5ml。 7)、用吸管悄然吹打細胞，靜止固定20min，離心，棄去上清液。反復上述再固定1次。 8)、離心終了，棄去固定液，根據(jù)管中細胞的量參與少量的固定液將細胞塊吹打均勻，制備成細胞懸液。 9)、在干凈、濕、冷的載玻片上滴一滴細胞懸液，在酒精燈上文火烘干或晾干。 10)、染色：在載玻片的細胞懸液上滴一滴 1：10 Giemsa磷酸鹽緩沖液，染色5min。 11)、沖洗與察看2、植

5、物細胞染色體標本制備 1實驗原理 染色體是細胞分裂時期遺傳物質(zhì)存在的特定方式，是染色質(zhì)嚴密包裝的結(jié)果，對染色體的察看在研討生物進化、發(fā)育、遺傳和異變中有非常重要的作用。 植物染色體標本的制備。常規(guī)壓片法仍是當今察看植物染色體常見的方法，其程序包括取材、預處置、固定、解離、染色和壓片等步驟，簡單易操作，但是染色體易變形、難分散開。2實驗步驟 (1) 取材：把玉米種子預先浸泡24h，然后轉(zhuǎn)入墊有潮濕紙的培育皿中，置25溫箱中暗培育發(fā)根，或者培育洋蔥根，于上午8:3010:00剪下根尖。 (2) 預處置：將剪下的根尖置于0.1秋水仙素溶液中，浸泡處置2-4 h。 (3) 固定：用水洗凈處置過的根尖，經(jīng)Carnoy固定液中固定2-4h，轉(zhuǎn)入70乙醇中，4保管備用。 (4) 解離：取出根尖，用蒸餾水洗凈，放入10% HCl中60解離 15min，再用蒸餾水洗凈。 (5) 染色：苯酚品紅或亞甲基藍 染色5min。 (6) 壓片：把根尖放在載玻片上，加一滴45 %醋酸，蓋上蓋玻片，垂直輕壓，使細胞和染色體分散。 7鏡檢 3、實驗報告 要求：1、察看小白鼠骨髓細胞染色體的形狀， 并繪制染色體圖 2、對小白鼠細胞染色體和洋蔥根尖細胞 或玉米根尖細胞染色體計數(shù)思索題思索題 1、經(jīng)過對小白鼠骨髓細胞染色體的察