NF-kb信號(hào)通路

1、NF-KB與微循環(huán)障礙目前經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)。發(fā)現(xiàn)有四種，今天我代表我們小組給大家講解其中的一種，即nf kb在接下來(lái)的十分鐘 我們要解決四個(gè)問(wèn)題1什么是NFKB2他又有怎樣的結(jié)構(gòu)特征3在細(xì)胞中信號(hào)是如何進(jìn)行傳導(dǎo)的4對(duì)生命活動(dòng)又有怎樣的意義 于1986年，Sen 等首次從鼠B淋巴細(xì)胞核提取物在信號(hào)通路子KB（nuclear factor-kappa B,NF-KB)蛋白家族是一種多效性的轉(zhuǎn)錄因子，可以與多種基啟動(dòng)子部位的KB位點(diǎn)發(fā)生特異性的結(jié)合從而促進(jìn)其轉(zhuǎn)錄表達(dá)。其受氧化應(yīng)激、細(xì)菌脂多糖，細(xì)胞因子等多種刺激而活化后，能調(diào)控前炎癥性細(xì)胞因子、細(xì)胞表面受體、轉(zhuǎn)錄因子、粘附分子等的生成。而這些刺激因素及其調(diào)

2、控的因子與微循環(huán)障礙的發(fā)生、發(fā)展均有著密切的關(guān)系。本文就NF-KB的組成結(jié)構(gòu)，活化調(diào)節(jié)及與微循環(huán)障礙的關(guān)系等方面做一綜述，以期從一新的角度闡述微循環(huán)障礙發(fā)生的機(jī)制及改善的途徑。1.NF-KB的概述1.1 NF-KB/Rel蛋白家族及結(jié)構(gòu) 1986年，Sen 等首次從鼠B淋巴細(xì)胞核提取物中，發(fā)現(xiàn)一種能與免疫球蛋白K輕鏈基因增強(qiáng)子KB序列(GGGACTTTCC)特異結(jié)合，調(diào)節(jié)其基因表達(dá)的核蛋白因子，稱(chēng)之為NF-KB。 隨后大量的研究又陸續(xù)發(fā)現(xiàn)了NF-KB家族的其它成員，其構(gòu)成亞基分別是NF-KB1 (P50)、NF-KB2(P52)、P65（RelA）、c-Rel（Rel)、RelB等，因這些亞基

3、的N-末端均崐有約300個(gè)氨基酸殘基的Rel同源區(qū)（rel homology domain ,RHD)，故統(tǒng)稱(chēng)為NF-KB/Rel蛋白家族。其RHD內(nèi)含DNA結(jié)合區(qū)，二聚體化區(qū)和核定位序列，分別具有與DNA KB序列結(jié)合、與同源或異源亞基二聚體化以及與NF-KB抑制蛋白（IKB）家族成員相互作用并攜帶核定位信號(hào)（NLS），參與活化的NF-KB由細(xì)胞質(zhì)向細(xì)胞核的迅速移動(dòng)等功能。 又根據(jù)結(jié)構(gòu)、功能和合成方式的不同，Rel蛋白分為兩類(lèi)。一類(lèi)為P50(NF-KB1）和P52(NF-KB2），分別由含有C-末端錨蛋白重復(fù)序列（ahkrin repeat motif）的前體蛋白p105和p100通過(guò)ATP

4、依賴(lài)蛋白水解過(guò)程裂解而形成。該類(lèi)蛋白含有RHD，但缺乏轉(zhuǎn)錄活性區(qū)，無(wú)獨(dú)立激活基因轉(zhuǎn)錄的功能。另一類(lèi)為p65(RelA)，Rel（c-Rel),Rel B和果蠅的dorsal、Dif和Relish,它們沒(méi)有前體，除N端的RHD外，其C-端有一個(gè)或多個(gè)轉(zhuǎn)錄活性區(qū)，具有直接作用轉(zhuǎn)錄設(shè)備而激活基因轉(zhuǎn)錄的功能。 Rel蛋白成員間可形成多種形式的同源或異源二聚體，如p50/RelA、p50/p50、RelA/Rel等，但并不是都可構(gòu)成二聚體，如RelB只能與p50或p52二聚體化，而不能構(gòu)成同源二聚體。 Rel間的二聚化作用是其與DNA結(jié)合的特性所決定的，因?yàn)镵B位點(diǎn)為二元對(duì)稱(chēng)結(jié)構(gòu)，二聚體中的每一成員只與

5、半個(gè)識(shí)別序列發(fā)生作用。而且不同的NF-KB/Rel蛋白二聚體具有不同的結(jié)合序列（KB位點(diǎn)），因而具有各自的特性。如NF-KB的KB序列為十聚體的5'GGGRNNYYCC-3'，而p65/c-Rel二聚體的KB序列為十聚體的5'-HGGARNYYCC-3',(H代表A,C或T,R代表嘌呤，Y代表嘧啶）。這樣保證了NF-KB/Rel家族對(duì)基因調(diào)控的特異性，這種特異性還與細(xì)胞類(lèi)型、亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)定位、相互作用的IKB類(lèi)型及激活的方式等有關(guān)。通常所指的NF-KB的組成為p50/p65異源二聚體，其幾乎存在于體內(nèi)所有細(xì)胞，且含量常常最高。除RHD外，其組分p50有很少其它序列

6、，而P65則有250個(gè)氨基酸殘基的C未端，內(nèi)含2-3個(gè)獨(dú)立的轉(zhuǎn)錄活性區(qū)，有增強(qiáng)靶基因轉(zhuǎn)錄激活的作用，而且p65的另一個(gè)重要功能是與IKB成員直接偶然。 其他的同源或異源二聚體的核因子KB在體內(nèi)含量極少，但可能對(duì)某些特定的啟動(dòng)子有獨(dú)特和重要的作用。Lehming等報(bào)道存在于淋巴細(xì)胞中p50同源二聚體能以結(jié)構(gòu)型與DNA鏈KB序列結(jié)合，對(duì)轉(zhuǎn)錄起抑制作用。訖今為止的體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)NF-KB/Rel蛋白復(fù)合物大多以這樣有二種類(lèi)型存在于胞漿中：同源或異源二聚體與IKB蛋白家族構(gòu)成的三聚體；Rel蛋白（如p65）與未裂解的前體（如p105）組成的二聚體。信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)可誘導(dǎo)IKB和p105磷酸化而降解，從而使NF

7、-KB活化再由胞漿轉(zhuǎn)核而發(fā)揮效應(yīng)。 1.2 IBK家族 IKB蛋白家族成員有IKB(MAD-3,pp40)、IKB、IKB/p105、IKB/p100、IKB、Bcl-3以及果蠅屬的Cactus等。其家族結(jié)構(gòu)特點(diǎn)是均有多個(gè)約33個(gè)氨基酸的重復(fù)序列，稱(chēng)為崐SWI6/錨蛋白重復(fù)序列，主要參與與Rel蛋白的RHD相互作用。IKB蛋白主要有以下三個(gè)部分構(gòu)成：1.與蛋白降解有關(guān)的N-末端區(qū)；2.能與NF-KB相互作用的內(nèi)部區(qū)（區(qū)內(nèi)含有錨蛋白重復(fù)序列）；3.稱(chēng)為PEST的C端區(qū)，主要參與“囚禁”NF-KB在細(xì)胞漿中。1.2.1 IKB，IKB 主要與含有p65和c-Rel的二聚體具有高親和力，與其它Rel

8、蛋白親和力低，是體內(nèi)NF-KB（p50-p65)的主要調(diào)控抑制蛋白。IKB的基因啟動(dòng)子上有KB位點(diǎn)，故其合成也受到NF-KB的調(diào)控，因此形成對(duì)NF-KB的負(fù)反饋調(diào)節(jié)。IKB則無(wú)這種機(jī)制。這種調(diào)節(jié)差異可致NF-KB調(diào)控的靶基因的表達(dá)表現(xiàn)在時(shí)間上和水平上的差異。1.2.2 IKB, IKB 作為p50和p52蛋白前體的p105和p100，由于在結(jié)構(gòu)上有能與RHD相互作用錨蛋白的重復(fù)序列，在功能上有類(lèi)于NF-KB抑制劑的作用，因此將之歸于IKB家族，稱(chēng)為p105/IKB,p100/IKB。例如：p105既含有在N-未端區(qū)的p50，又含有3-4個(gè)錨蛋白重復(fù)序列的C-未端區(qū)，因而它既能掩蔽p65、c-R

9、el,又可以通過(guò)蛋白水解釋放出p50。1.2.3 IKB,Bcl-3 IKB主要與p65發(fā)生抑制作用，專(zhuān)一性地與p65和c-Rel結(jié)合，與IKB具有多方面的共同特性。Bcl-3位于胞核，雖然表現(xiàn)出能抑制含有p50的二聚體，但與p52在DNA上結(jié)合后卻發(fā)揮了轉(zhuǎn)錄共激活的功能。1.3 NF-KB的活化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑 非活化狀態(tài)的NF-KB以與IKB聚合的三聚體形式或與前體蛋白聚合的二聚體的形式存在于細(xì)胞漿中，在多種因素的刺激作用下，通過(guò)多種信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑使IKB磷酸化，再在蛋白水解酶作用下發(fā)生降解，從而使NF-KB得以活化而轉(zhuǎn)核發(fā)揮其調(diào)控作用。這個(gè)過(guò)程大致分三部分：1.3.1刺激因素的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)：多種因

10、素如細(xì)胞因子（TNF-、 IL-1、IL-2）、病毒（流感病毒、鼻病毒）、雙鏈ANA、氧化劑、細(xì)菌脂多糖、多種抗原及紫外線(xiàn)照射等均是NF-KB活化的刺激信號(hào)，能通過(guò)多種不同的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，由胞外向胞內(nèi)傳遞，使NIK（NF-KB-inducing kinase）或活化途徑中的其它激酶激活，而致NF-KB的活化。 Cao等提出IL-1的活化途徑是：IL-1與胞膜上的IL-1受體（IL-1R）識(shí)別結(jié)合后，IL-1R胞漿內(nèi)組份立即與IL-1R輔助蛋白（IL-1R accessory protein,IL-RAcP）聯(lián)結(jié)，IL-1RAcP再聚集活化一種接合體蛋白髓細(xì)胞樣分化蛋白（Myeloid diff

11、erentiation protein MyD88）,MyD88再聚集兩種絲氨酸/蘇氨酸激酶：IL-1受體活化激酶（IL-1 receptor-activated kinase IRAK）和IRAK2而共同形成受體復(fù)合體。IRAK、IRAK2又隨后又跟一種接合體分子TNF受體結(jié)合因子6（TNF receptor-associated factor 6,TRAF6）相互作用。TRAF-6使IRKA、IRAK2與NF-KB誘導(dǎo)激酶（NF-KB-inducing kinase NIK）相聯(lián)結(jié)，NIK被激活。zhang等則通過(guò)實(shí)驗(yàn)證明，LPS與其受體結(jié)合后要通過(guò)IL-1的漿內(nèi)信號(hào)介導(dǎo)途徑激活NIK.從

12、而活化NF-KB的。而Takeuchi等揭示TNF激活NIK是通過(guò)TNF受體、TNF受體結(jié)合死亡區(qū)（TNF reeeptor associated death domain,TRADD）、TRAF2及絲氨酸/蘇氨酸激酶RIP的過(guò)程。 雙鏈DNA（double-stranded DNA,dsDNA）和佛波酯(PMA)則分別通過(guò)dsDNA依賴(lài)的蛋白激酶（dsDNA-dependentprotein kinase, PKR）和PKC、絲裂原激活蛋白激酶（MAPK-PP90rsk）來(lái)使IKB磷酸化。1.3.2 IKB的磷酸化及降解 NIK屬于絲裂原激活蛋白激酶MAPKKK家族的。NIK活化IKB激酶復(fù)

13、合體IKK、IKK, IKK、IKK催化IKB上Ser32/36磷酸化,然后IKB上Lys21/22遍在蛋白化（ubiquitination）,再遍在蛋白連接酶（ubiquitin conjugation enzymes）作用下與蛋白酶小體（proteasome）連接，在蛋白酶小體作用下IKB降解，NF-KB活化。1.3.3 NF-KB核轉(zhuǎn)位及調(diào)控基因表達(dá)。 IKB降解后，暴露NF-KB上的核定位信號(hào)，NF-KB迅速發(fā)生轉(zhuǎn)核，與調(diào)控基因啟動(dòng)子上的KB位點(diǎn)結(jié)合，啟動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄。2.NF-KB在微循環(huán)障礙發(fā)生發(fā)展中的作用。 NF-KB活化后能調(diào)控一系列基因的表達(dá)：如粘附分子家族的細(xì)胞間粘附分子1（i

14、ntercellular adhesion nolecule-1,ICAM-1）、血管細(xì)胞粘附分子1(vascullar cell adhesion molecule-1,VCAM-1)、E-選擇素（E-selectin）、p-選擇素（P-selectin）前炎癥性細(xì)胞因子TNF-、IL-1、IL2、IL-6，化學(xué)趨化因子單核細(xì)胞趨化蛋白1（Monocyte chemoattoactant protein-1,MCP-1）、IL-8以及一些受體分子IL-2受體、T細(xì)胞受體、 鏈，等等。而這些物質(zhì)都能直接或間接地作用于微血管內(nèi)皮細(xì)胞或血細(xì)胞或者介導(dǎo)它們之間的相互作用，從而導(dǎo)致微循環(huán)障礙。2.1

15、NF-KB介導(dǎo)的微管內(nèi)皮細(xì)胞的損傷。2.1.1炎癥性浸潤(rùn)引發(fā)的損傷 已知ICAM-1基因啟動(dòng)子上有個(gè)基本的NF-KB位點(diǎn)，VCAM-1基因有2個(gè)NF-KB位點(diǎn)，E-sel基因有3個(gè)NF-KB位點(diǎn)。在TNF、IL-1、LPS及活性氧作用下，能在30min內(nèi)使NF-KB活化升高，并且持續(xù)很長(zhǎng)時(shí)間，然后單獨(dú)或與其它因子協(xié)同作用下，使ICAM-1、VCAM-1、E-sel在2-4小時(shí)內(nèi)表達(dá)增加，6-12小時(shí)內(nèi)達(dá)到峰值，而且其表達(dá)升高與刺激物質(zhì)呈時(shí)間、劑量依賴(lài)的方式。不同途徑抑制NF-KB的活化或清除刺激來(lái)源后，均能相應(yīng)地抑制這種活化和表達(dá)。ICAM-1、VCAM-1、E-sel能與白細(xì)胞表面的配體相應(yīng)

16、地結(jié)合，介導(dǎo)白細(xì)胞的貼壁粘附，致白細(xì)胞聚集、浸潤(rùn)，從而導(dǎo)致局部炎癥的發(fā)生，微血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷，表現(xiàn)為微血管通透性增加、組織水腫等，微循環(huán)障礙發(fā)生。 P-sel又名血小板活化依賴(lài)顆料表面膜蛋白（Platelet activation dependent granule-external membrane,PADGEM或GMP-140），參與介導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞與中性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞的粘附。研究表明在鼠P-sel基因啟動(dòng)子上-218GGGGGTGACCC(-207)處有KB位點(diǎn)，TNF-、LPS刺激下，NF-KB與結(jié)合cAMP反應(yīng)元件的核因子協(xié)同促進(jìn)P-sel基因的表達(dá)，在2h時(shí)能檢測(cè)到這種增高。 NF-

17、KB通過(guò)調(diào)控IL-8及MCP等化學(xué)趨化因子的表達(dá)，從而募集大量的單核巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞，引發(fā)炎癥浸潤(rùn)和損傷。Ping等認(rèn)為在LPS、TNF-促進(jìn)MCP的表達(dá)中，p65是必需的Rel家族蛋白，而Stylianon則指出Mcp上的兩個(gè)KB位點(diǎn)1和2中c-Rel只與A2結(jié)合，而且在IL-1刺激MCP表達(dá)過(guò)程中，出現(xiàn)c-Relp65和(p65)2選擇性反式作用于A1、A2位點(diǎn)的現(xiàn)象。 NF-KB還能促進(jìn)IL-2受體，T細(xì)胞受體、鏈的表達(dá)，從而介導(dǎo)了IL-2的毒性損傷以及T細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞粘附，導(dǎo)致內(nèi)皮細(xì)胞受損。 2.1.2 NF-KB活化后促內(nèi)皮細(xì)胞的凋亡，致微血管損傷。 NF-KB的活化能誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)

18、胞的凋亡，主要有以下幾種方面的證據(jù)：在許多促調(diào)亡基因：C-myc、TNF及IL-1轉(zhuǎn)化酶（IL-1 converting enzyme,ICE）啟動(dòng)子上都發(fā)現(xiàn)了KB位點(diǎn)。TNF-誘導(dǎo)凋亡中出現(xiàn)了NF-KB的伴隨活化。胸腺細(xì)胞能活化NF-KB而誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。通過(guò)清除NF-KB的誘導(dǎo)物活性氧（reactive oxygen species,ROS）能抑制凋亡的發(fā)生。 也有研究表明在惡性腫瘤，變態(tài)反應(yīng)和自身免疫疾病中，NF-KB通過(guò)上調(diào)凋亡抑制蛋白（inhibitor of apoptosis,IAP）而抑制瘤細(xì)胞等的凋亡，從而加重了疾病的發(fā)生，這可能與Rel家族不同成分及不同的刺激、信號(hào)途徑有關(guān)。

19、2.2 NF-KB活化影響凝溶的平動(dòng)態(tài)衡，促微血栓形成。2.2.1 NF-KB活化促進(jìn)vWF(von Willebrand Factor)的表達(dá)。vWF是因子的相關(guān)因子，它與因子結(jié)合，能有效防止在血漿中迅速降解。VWF與結(jié)合，組成F/VWF，一端與血小板糖蛋白Ib結(jié)合，另一端與內(nèi)皮細(xì)胞下的膠原纖維連接，介導(dǎo)血小板粘附血管內(nèi)皮，促進(jìn)微血栓形成。Keightley報(bào)道p50能與VWF啟動(dòng)子結(jié)合，從而影響血液中vWF水平。鐮刀型貧血病時(shí)高水平的vWF介導(dǎo)鐮刀型RBC的聚集及與內(nèi)皮細(xì)胞的粘附，并且促進(jìn)血小板內(nèi)皮細(xì)胞粘分子（platelet-endothelial cell adhesion molec

20、ule-1,PECAM-1）的磷酸化，抑制NF-KB則明顯改善這些指標(biāo)。2.2.2 NF-KB調(diào)控內(nèi)皮細(xì)胞合成組織因子（Tissue factor），這是一種親脂性蛋白能作為受體與因子和a結(jié)合而形成復(fù)合物，使IX和X裂解，從而既激活外凝系統(tǒng)又激活內(nèi)凝系統(tǒng)。IL-1、LPS、TNF均能通過(guò)刺激NF-KB促進(jìn)其的合成，在2h達(dá)到峰值，且存在時(shí)間，劑量依賴(lài)性，已在內(nèi)毒素血癥DIC的發(fā)生發(fā)展中得到證實(shí)。2.2.3 NF-KB對(duì)纖溶的影響 纖溶與抗纖溶在正常情況下維持動(dòng)態(tài)平衡。但纖溶酶原激活抑制物2（Plasminogen activator inhibitor type-2,PAI-2）啟動(dòng)子上有兩個(gè)

21、KB位點(diǎn)。TNF-能刺激NF-KB促PAI-2的表達(dá)。Dechend也報(bào)道動(dòng)脈粥樣硬化時(shí)內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生的PAI、組織因子等促凝血蛋白質(zhì)的升高伴隨著NF-KB的活化。而p65的持續(xù)活化則能促進(jìn)uPA（urokinase-type PA）的表達(dá)，因?yàn)閡PA啟動(dòng)子上也發(fā)現(xiàn)了一個(gè)KB位點(diǎn)。NFKB的活化能紊亂微血管的纖溶系統(tǒng)。2.3 NF-KB在微循環(huán)障礙中的自我調(diào)控2.3.1 NF-KB經(jīng)細(xì)胞外的正反饋調(diào)節(jié)：NF-KB活化后，可增強(qiáng)TNF、IL-1、IL-2的基因轉(zhuǎn)錄，TNF-、IL-1、IL2產(chǎn)生和釋放增多，進(jìn)而再次激活NF-KB；同時(shí)還可使IL-6、IL-8等這些前炎癥因子產(chǎn)生、釋放增多，從而導(dǎo)致

22、最初的炎癥信號(hào)進(jìn)一步放大，加重機(jī)體損傷及微循環(huán)障礙，直至DIC或死亡。這種情況多見(jiàn)于膿毒綜合征（sepsis syndrome)和急性呼吸窘迫綜合征（ARDS)等。但通常這種情況在機(jī)體內(nèi)不是這樣無(wú)止境無(wú)限制的，因?yàn)镹F-KB有負(fù)反饋調(diào)節(jié)。2.3.2 NF-KB經(jīng)細(xì)胞內(nèi)、外的負(fù)反饋調(diào)節(jié)：在胞內(nèi)NF-KB活化后除啟動(dòng)炎癥介質(zhì)基因轉(zhuǎn)錄外,同時(shí)還上調(diào)IKB、Bcl-3以及具有雙重功能的p100、p105前體蛋白，這些新增加抑制蛋白,能迅速在核內(nèi)或核外重新滅活活化的NF-KB。從而終止炎癥介質(zhì)的轉(zhuǎn)錄，限制急性炎癥反應(yīng)。其中IKB的效果最明顯,NF-KB在活化后30min就有了IKB的合成,因而單純刺激I

23、KB的磷酸化只能引起短時(shí)相的NF-KB的活化。IKB的合成不受NF-KB的調(diào)控，因此IKB磷酸化能引起NF-KB長(zhǎng)時(shí)相的活化。 故若缺乏IKB，則易引起廣泛的全身性炎癥。此外NF-KB的活化也使p50同源二聚體生成增多，此種二聚體不能被IKB有效結(jié)合，并缺乏轉(zhuǎn)錄激活區(qū)。易位至細(xì)胞核后，可與NF-KB競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合KB序列，抑制NF-KB的活性。 在細(xì)胞外，LPS、TNF-和IL-1能刺激反向調(diào)節(jié)細(xì)胞因子IL-10的產(chǎn)生，IL10能阻止單核細(xì)胞中內(nèi)毒素誘導(dǎo)的NF-KB的活化，從而限制急性炎癥反應(yīng)，緩解微循環(huán)障礙。 NF-KB能促進(jìn)Mn SOD（manganese superoxide dismuta

24、se ,MnSOD）及iNOS(inducing nitric oxide synthase,iNOS)的表達(dá)。MnSOD啟動(dòng)子上有KB位點(diǎn)，LPS、ROS刺激下，NF-KB和C/EBP、NF-1等共同作用，促進(jìn)MnSOD的表達(dá)，從而清除自由基，抑制NF-KB活化，減少自由基的損傷作用。蛋白酶抑制劑MG341、TLCK能抑制IL-1誘導(dǎo)的iNOS的升高，通過(guò)抑制IKB的降解過(guò)程。展望： 微循環(huán)障礙廣泛發(fā)生于臨床各種疾病、創(chuàng)傷及某些生理應(yīng)激情況下,其發(fā)生不僅是局部或全身組織器官的損傷的標(biāo)志,而且持續(xù)的微循環(huán)障礙更加重了疾病的發(fā)生、發(fā)展及預(yù)后。因此通過(guò)抑制NF-KB的激活,從而阻斷NF-KB調(diào)控的

25、炎癥反應(yīng)，緩解微循環(huán)障礙,減輕機(jī)體組織的損傷，正日益成為研究的熱點(diǎn)。當(dāng)前實(shí)驗(yàn)研究從基因治療、蛋白激酶抑制、免疫抑制及抗氧化幾個(gè)途徑著手來(lái)抑制IKB的降解或直接抑制NF-KB的活性,已經(jīng)取得了一定的突破，并且對(duì)糖皮質(zhì)激素、阿司林、Vc、Ve等的抗炎癥、抗氧化損傷機(jī)制提出了新的藥理認(rèn)識(shí)，指導(dǎo)了臨床應(yīng)用。相信將來(lái)能更盡一步弄清NF-KB的活化及調(diào)控機(jī)制，從而能夠?qū)嵤┽槍?duì)性、特異性治療。 NF-kb探針5-AGT TGA GGG GAC TTT CCC AGG C-33-TCA ACT CCC CTG AAA GGG TCC G-5 NF-B一般以同源或異源二聚體形式存在，激活后與靶基因上特定的DNA

26、序列（B位點(diǎn)，其核心序列為GGGRNNYYCC，R：嘌呤Y：嘧啶N：任意堿基）結(jié)合并調(diào)節(jié)基因轉(zhuǎn)錄。只要有這段核心序列就行，無(wú)種屬差異。NF-B類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的治療靶標(biāo)前言：類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（RA）是世界性疾病，在我國(guó)也是一種常見(jiàn)病，患病率約為0.3。這種系統(tǒng)性慢性炎癥性疾病是一種復(fù)雜的自身免疫病，目前公認(rèn)的RA是由不明抗原介導(dǎo)免疫的反應(yīng)，導(dǎo)致自身抗體產(chǎn)生，RA以炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)滑膜及大量炎癥介質(zhì)產(chǎn)生,非化膿性增生性滑膜炎為特點(diǎn)，逐漸導(dǎo)致關(guān)節(jié)軟骨的破壞，最后造成關(guān)節(jié)功能的障礙，并可伴有關(guān)節(jié)周?chē)浗M織及其它器官的損害。核轉(zhuǎn)錄因子NF-kB是一種多極性基因調(diào)控蛋白，能調(diào)節(jié)多種參與免疫反應(yīng)的細(xì)胞因子、炎癥介質(zhì)、

27、粘附分子、及蛋白酶類(lèi)的基因轉(zhuǎn)錄過(guò)程，從而控制它們的生物合成。NF-kB能夠參與免疫細(xì)胞的分化，增殖，和活化。NF-kB在參與某些細(xì)胞的生長(zhǎng)調(diào)控以及抗細(xì)胞凋亡方面亦起著重要的作用，因此NF-kB在發(fā)病的多個(gè)環(huán)節(jié)中起重要作用，所以，抑制NF-kB活性為臨床治療各種RA提供了一條新的治療性干預(yù)途徑，同時(shí)也為篩選新型治療的藥物指明了前進(jìn)方向。一）NF-kB系統(tǒng)的組成）. NF-kB系統(tǒng)的組成NF-kB系統(tǒng)幾乎存在于所有細(xì)胞中，由NF-kB家族及其抑制物I-kB家族共同組成1。NF-kB家族由Rel蛋白家族中的成員以同源或異源二聚體的形式存在。在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中有五種NF-kB /Rel家族成員：RelA

28、(P65), RelB，C-Rel，NF-kB 1(p50)，NF-kB 2(p52)。每個(gè)家族成員含有一個(gè)由N-端300個(gè)氨基酸組成的保守的Rel同源結(jié)構(gòu)域（RHD）負(fù)責(zé)DNA結(jié)合、二聚化、核定位及與I-kB抑制性亞單位相互作用，其中P65含有轉(zhuǎn)錄活化區(qū)域。盡管存在多種Rel家族成員，但習(xí)慣上通常把由多肽p65和p50兩個(gè)蛋白亞基組成的同源或異源性二聚體稱(chēng)為NF-kB，其中異源性二聚體活性較強(qiáng)，在NF-kB異源性二聚體中，雖然二種亞單位均能與DNA結(jié)合，但只有P65在蛋白的C末端含有轉(zhuǎn)錄激活區(qū)域，能直接作用于轉(zhuǎn)錄元件而激活轉(zhuǎn)錄過(guò)程2-3。靜息時(shí)NF-kB二聚體與I-kB蛋白家族構(gòu)成三聚體而存

29、留于胞漿，當(dāng)細(xì)胞受到外界因素，如細(xì)菌或病毒感染、炎癥細(xì)胞因子、TNF、LPS、紫外線(xiàn)照射、電離輻射等刺激后，I-kB將發(fā)生磷酸化并迅速降解，NF-kB被釋放，、激活并進(jìn)入細(xì)胞核，結(jié)合于特異性DNA位點(diǎn)，從而啟動(dòng)一系列基因的轉(zhuǎn)錄，發(fā)揮其重要的生物學(xué)作用4。IB蛋白家族是NF-B的抑制物，目前已知包括I-kB、I-kB、I-kB/p105、I-kB、I-kB、Bcl-3、P100等成員。該家族成員分子中均含有5-7個(gè)約含30個(gè)氨基酸的錨蛋白重復(fù)序列，這是I-kB與NF-kB相互作用的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)。I-kB通過(guò)非共價(jià)鍵掩蓋NF-kB的核定位信號(hào)（NLS）而阻止NF-kB的核轉(zhuǎn)位。）NF-B的激活過(guò)程主要

30、分三步：1. NF-kB的誘導(dǎo)劑通過(guò)細(xì)胞膜激活胞漿中的IB激酶，使IB在32、36位絲氨酸的磷酸化，磷酸化的IB接著被lys21、lys22上被泛素化，泛素化的IB迅速被26S的蛋白酶體降解，NF-B游離于胞漿中；2. 胞漿內(nèi)游離的NF-B移位至胞核內(nèi)，與DNA分子靶基因中啟動(dòng)子區(qū)域的NF-B結(jié)合位點(diǎn)相結(jié)合；3. 啟動(dòng)靶基因轉(zhuǎn)錄，生成相應(yīng)的mRNA。這一過(guò)程相當(dāng)迅速，無(wú)需蛋白質(zhì)合成。哺乳動(dòng)物細(xì)胞轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)證明IK和IK是NF-B激活途徑的關(guān)鍵酶。）NF-B的激活劑與抑制劑目前發(fā)現(xiàn)多種因素可誘導(dǎo)NF-B活化。前炎性細(xì)胞因子，如TNF、IL-1；與細(xì)胞分裂、增殖有關(guān)的因素，如抗原、植物血凝素（PHA

31、）、刀豆素A（ConA）和佛波酯（PMA）；細(xì)菌毒性產(chǎn)物L(fēng)PS、病毒、雙鏈RNA等；物理化學(xué)因子，如紫外線(xiàn)、吐根堿、放線(xiàn)菌酮等；致凋亡因子，如離子射線(xiàn)、化療藥物。在眾多因素中活性氧產(chǎn)物在介導(dǎo)NF-B活化中可能起重要作用。NF-B的激活也能被多種因素抑制。5-6 免疫抑制劑，如糖皮質(zhì)激素、環(huán)胞素、水楊酸、阿斯匹林；抗炎癥因子，如IL-1、IL-10；抗氧化劑，如乙?；装彼?、花生四烯酸、吡硌烷雙硫脲、倍半萜內(nèi)酯；其他，如木霉素、cAMP、IK、NO、A20。植物藥物是開(kāi)發(fā)NF-B抑制劑的寶庫(kù)，有人研究了通過(guò)NF-B信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路發(fā)揮抗炎作用的藥用植物，發(fā)現(xiàn)余甘子、蒙自樺、當(dāng)歸藤、扁擔(dān)藤、獨(dú)子藤、香

32、須樹(shù)生藥的提取物可以抑制NF-B向核內(nèi)易位。7有人也發(fā)現(xiàn)銀杏8、姜黃素等多種天然植物藥物可以抑制NF-B活性9。二）NF-B的生物學(xué)功能）NF-B參與調(diào)節(jié)的基因受NF-B調(diào)節(jié)的基因包括細(xì)胞因子與生長(zhǎng)因子，如IL-2、3、6、8、12、IL-1、TNF、G-CSF、M-CSF、GM-CSF、EPO等；免疫受體，如免疫球蛋白輕鏈、T細(xì)胞受體、鏈MHC-I、II、2微球蛋白等；粘附分子，如細(xì)胞間粘附分子1、血管細(xì)胞粘附分子1、內(nèi)皮細(xì)胞白細(xì)胞間粘附分子等；急性期蛋白，如血管緊張肽酶、補(bǔ)體因子C4、補(bǔ)體因子B等；轉(zhuǎn)錄因子及調(diào)節(jié)子，如C-Rel、P105、IB、A20等；炎癥酶，如誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶、誘

33、導(dǎo)型環(huán)加氧酶、胞質(zhì)磷脂酶等；病毒，如HIV 1、HIV-2、CMV、ADV、SV-40等；其他，如穿孔素、波形纖維蛋白、核心蛋白聚糖。反過(guò)來(lái)，由NF-B調(diào)節(jié)的產(chǎn)物，如TNF和IL-1又能激活NF-B。這意味著存在一個(gè)能放大且延續(xù)炎癥反應(yīng)的復(fù)雜的調(diào)節(jié)環(huán)路。NF-B并不是調(diào)節(jié)這些炎癥和免疫基因的唯一轉(zhuǎn)錄因子，但它與其他轉(zhuǎn)錄因子如活化蛋白-1（AP-1）共同起著中心調(diào)節(jié)作用10-12。 2）NF-B與淋巴細(xì)胞NF-B能夠參與免疫細(xì)胞的分化，增殖和活化NF-B能夠參與免疫細(xì)胞的分化，增殖和活化13-16，B細(xì)胞的生長(zhǎng)發(fā)育受免疫球蛋白基因的有序調(diào)控，而NF-B在B細(xì)胞中的一個(gè)重要作用就是調(diào)節(jié)免疫球蛋白鏈

34、基因表達(dá)，前B細(xì)胞一般不表達(dá)活化的NF-B，只有其發(fā)生分化時(shí)才能表達(dá)活化的NF-B 17 。成熟的B細(xì)胞系大部分以P50-C-Rel異源二聚體形式存在，而此二聚體與P50-RelA二聚體一樣能有效地激活I(lǐng)g基因的表達(dá)。利用“敲除”技術(shù)研究發(fā)現(xiàn)，在缺乏p50/p105亞基的小鼠，出現(xiàn)B細(xì)胞系的免疫反應(yīng)缺陷，其B細(xì)胞在LPS刺激下產(chǎn)生抗體的能力明顯下降 18 。而在人類(lèi)至今沿未見(jiàn)NF-B缺陷所導(dǎo)致的免疫功能低下相關(guān)疾病的報(bào)道。NF-B在T細(xì)胞的增殖活化過(guò)程中亦發(fā)揮重要作用：對(duì)T細(xì)胞增殖最為關(guān)鍵的細(xì)胞因子IL-2及其受體a鏈的基因增強(qiáng)子上均有NF-B的結(jié)合位點(diǎn)，其表達(dá)直接受NF-B調(diào)控；在CD2/C

35、D28協(xié)同刺激的T細(xì)胞中，NF-B特異性阻斷PDTC，在阻斷了NF-B活化的同時(shí)亦抑制了T細(xì)胞的增殖和有關(guān)因子的生成19-23 。. ）NF-B與細(xì)胞因子NF-B參與調(diào)控一系列重要免疫因子的表達(dá)（見(jiàn)前文），這此免疫因子對(duì)免疫細(xì)胞的活化、增殖、浸潤(rùn)、趨化和分泌功能起著直接的調(diào)控作用。因此，NF-B在免疫系統(tǒng)在可能有著舉足輕重的地位，是許多免疫炎癥相關(guān)基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控的樞紐，通過(guò)影響免疫細(xì)胞內(nèi)NF-B的活性有可能直接調(diào)控機(jī)體的免疫狀態(tài)。）NF-B與凋亡NF-B在參與某些細(xì)胞的生長(zhǎng)調(diào)控有及抗細(xì)胞凋亡方面亦起著重要作用。自1996年Ntwerp24發(fā)現(xiàn)NF-B能夠抑制由TNF誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡有來(lái)，這方面的研

36、究在不斷深入，目前認(rèn)為，NF-B主要通過(guò)以下三條途徑來(lái)抑制細(xì)胞凋亡25-29,（1）通過(guò)調(diào)控細(xì)胞因子而參與自身及其它細(xì)胞的凋亡；（2）通過(guò)誘導(dǎo)或上調(diào)抗凋亡基因抑制凋亡；（3）通過(guò)誘導(dǎo)TNF受體相關(guān)因子和凋亡抑制蛋白抑制凋亡。三）NF-B與炎癥，增殖及組織破壞1) .RA患者的主要免疫學(xué)異常1體液免疫: RA患者體液免疫處于激活狀態(tài)，表現(xiàn)在關(guān)節(jié)腔中出現(xiàn)大量漿細(xì)胞，外周血中CD5+B細(xì)胞（B1）比例明顯增高。激活的B細(xì)胞可產(chǎn)生包括RF在內(nèi)的多種自身抗體。自身抗體參與RA發(fā)生的可能機(jī)制是：自身抗體與自身抗原結(jié)合為復(fù)合物，激活補(bǔ)體和激肽系統(tǒng)，并刺激炎性細(xì)胞因子產(chǎn)生，從而導(dǎo)致組織損傷。2細(xì)胞免疫:一般認(rèn)

37、為RA的發(fā)生和演變由尚未明確的抗原性肽類(lèi)激活的T細(xì)胞所介導(dǎo)。RA關(guān)節(jié)滑膜中浸潤(rùn)大量T細(xì)胞，約占滑膜細(xì)胞的20%-50%，其中以CD4+T細(xì)胞為主。激活的T細(xì)胞可產(chǎn)生IL-2、IL-4、IFN-、LT等細(xì)胞因子，參與RA病變的持續(xù)進(jìn)展。3細(xì)胞因子：RA患者關(guān)節(jié)液和滑膜組織中存在多種細(xì)胞因子，包括T細(xì)胞產(chǎn)生IL-2、IL-4、IFN、LT等和單核/巨噬細(xì)胞產(chǎn)生的IL-1、IL-6、IL-8、TNF、GM-CSF、TGF-、LIF、血管生成因子等。目前認(rèn)為，IL-1和TNF-在導(dǎo)致RA滑膜炎癥中起重要作用。4凋亡異常: RA的特點(diǎn)是關(guān)節(jié)軟骨破壞，重塑，增生和慢性滑膜炎30-31。獨(dú)有的成纖維細(xì)胞應(yīng)答

38、TNF后產(chǎn)生基質(zhì)溶解素和明膠酶，滑膜炎與這種獨(dú)有的成纖維細(xì)胞增生有關(guān)32，人們認(rèn)為這些成纖維細(xì)胞對(duì)關(guān)節(jié)軟骨起直接作用，是導(dǎo)致軟骨和骨破壞的重要細(xì)胞。目前認(rèn)為侵蝕性成纖維細(xì)胞無(wú)法控制地增生機(jī)制生長(zhǎng)與凋亡之間失去了平衡。2）.RA中NF-B處于激活狀態(tài)在人類(lèi)早期、晚期炎癥關(guān)節(jié)的滑膜組織中均可以檢測(cè)到NF-B的活化33，滑膜植塊的核提取物分析表明病人存在NF-B 結(jié)合活性升高，而骨關(guān)節(jié)炎病人則沒(méi)有34。免疫組化研究顯示 RelA（p65）和NF-B1（p50）大部份位于RA內(nèi)皮細(xì)胞和滑膜層，尤其是CD14陽(yáng)性細(xì)胞，而正?；t未染色35。用抗活性NF-B抗體（與B分離）進(jìn)行免疫染色也得到類(lèi)似的結(jié)果，

39、活性NF-B存在于滑膜層的巨噬細(xì)胞樣滑膜細(xì)胞核內(nèi)以及血管內(nèi)皮細(xì)胞中。Miyazawa 等人利用NF-B報(bào)導(dǎo)基因體外分析原代成纖維樣滑膜細(xì)胞的單克隆的NF-B依賴(lài)的轉(zhuǎn)錄，在一些克隆中檢測(cè)到NF-B的活性成分，值得注意的是，這些克隆自發(fā)產(chǎn)生大量的IL-636。這些證據(jù)表明NF-kB活化是人類(lèi)RA滑膜的共同特點(diǎn)。在多種RA的動(dòng)物模型中也檢測(cè)到NF-B活化，如大鼠佐劑性關(guān)節(jié)炎37,異十八烷和鏈球菌細(xì)胞壁誘導(dǎo)的大鼠關(guān)節(jié)炎38-39，膠原誘導(dǎo)的小鼠關(guān)節(jié)炎40。 3). NF-kB與滑膜炎癥自身免疫應(yīng)答形成持續(xù)的、自我永存的炎癥反應(yīng)，RA慢性炎癥開(kāi)始與自身免疫應(yīng)答的形成有關(guān)。實(shí)驗(yàn)證據(jù)表明NF-kB的活化在R

40、A的發(fā)病初始及慢性炎癥的持續(xù)期起重要的作用。4). NF-B在慢性炎癥的初始抗原遞呈細(xì)胞（APC）與細(xì)胞相互作用導(dǎo)致二者NF-B激活，T細(xì)胞受體和CD28與APC遞呈的配體，MHC，共刺激分子CD80和CD86結(jié)合觸發(fā)NF-kB活化。T細(xì)胞受體和CD28協(xié)同誘導(dǎo)細(xì)胞激活和增殖所需的NF-B依賴(lài)性基因，如IL-2，IL-2R,IFN 41-42。隨后活化的T細(xì)胞引發(fā)APC的激活?；罨募?xì)胞表達(dá)TNF超家族，CD40L，TRANCE或ODF（造骨細(xì)胞分化因子），它們與APC受體CD40和RANK誘導(dǎo)NF-B活化，提高APC存活和增殖能力，通過(guò)上調(diào)F-B依賴(lài)性分子MHC，共刺激分子CD80和CD86

41、，刺激細(xì)胞增殖與活化43-46。 通過(guò)小鼠的觀測(cè)到了NF-kB在免疫應(yīng)答中的重要作用，RelB 和 NF-kB2 在 relb / 和 nfkb2 / 小鼠中失活導(dǎo)致APC功能受損，NF-kB1 和 c-Rel在 nfkb1 / 和 rel / 小鼠中缺失導(dǎo)致T、B細(xì)胞活化的多種缺陷，以及對(duì)致病原應(yīng)答減弱47。5）NF-kB 促進(jìn)Th形成T細(xì)胞活化后CD4+Th細(xì)胞能夠分化成Th1或Th2亞型。它們分別產(chǎn)生不同的細(xì)胞因子,調(diào)節(jié)不同的免疫應(yīng)答: Th1(IFN和 IL-12優(yōu)勢(shì))細(xì)胞介導(dǎo)細(xì)胞免疫，激活巨噬細(xì)胞，通常認(rèn)為具有促炎性作用：Th2 (IL-4 和IL-5 優(yōu)勢(shì)) 細(xì)胞具有抗寄生蟲(chóng)和體液

42、免疫，抑制巨噬細(xì)胞活化作用。通常認(rèn)為具有抗炎作用。由于.NF-kB控制h1型細(xì)胞因子IL-2，IFN，IL-12的表達(dá)，因此NF-kB激活促進(jìn)h型細(xì)胞形成。實(shí)際上，在表達(dá)NF-kB抑制劑（-kB不降解突變體，也稱(chēng)為超阻遏物-kB）轉(zhuǎn)基因鼠觀察到h應(yīng)答降低，而h升高48-49。細(xì)胞表達(dá)ac2（NF-kB上游激活劑）的轉(zhuǎn)基因鼠相應(yīng)的形成h型應(yīng)答50。6） NF-kB與慢性炎癥的持續(xù)活化的細(xì)胞分泌產(chǎn)物通過(guò)細(xì)胞與細(xì)胞間的作用誘導(dǎo)激活巨噬細(xì)胞，巨噬細(xì)胞是滑膜炎型細(xì)胞因子的主要生產(chǎn)者。IL-1、TNF是RA炎癥的重要介質(zhì)，NF-kB控制它們的表達(dá)。IL-1、TNF是有效地誘導(dǎo)激活劑，這說(shuō)明NF-kB持續(xù)活

43、化與NF-kB與一定水平的IL-1、TNF相互依賴(lài)，實(shí)際上sr-kB 不能誘導(dǎo)人巨噬細(xì)胞和原代FLS產(chǎn)生IL-1、TNF50-52。 Aupperle等人近來(lái)研究發(fā)現(xiàn)IKK/IKK2是NF-kB應(yīng)答IL-1、TNF的而活化的主要激酶，IKK-2的DN突變體抑制細(xì)胞因子誘導(dǎo)的NF-kB激活，使IL-6、IL-8、ICAM-1和膠原酶-1無(wú)法合成。相反DN IKK/IKK1則沒(méi)有此作用53。IKK基因敲除鼠表明IKK/IKK2是細(xì)胞因子誘導(dǎo)的NF-kB激活的主要途徑54。通過(guò)抑制NF-kB可以抑制多種前炎性細(xì)胞因子的表達(dá)，IL-1、TNF、L-6、IL-8、ICAM-1、VCAM-1，但對(duì)抗炎性細(xì)

44、胞因子IL-10、IL-2受體拮抗劑幾乎沒(méi)有作用55-57。說(shuō)明NF-kB 活化可促進(jìn)炎癥關(guān)節(jié)內(nèi)的促炎性因子與抗炎性因子失衡。7） NF-kB與增生正?；H有1-2層滑膜細(xì)胞，而RA滑膜則可增厚達(dá)3-7層，形成侵蝕性，腫瘤樣的血管翳，它侵襲、破壞關(guān)節(jié)實(shí)驗(yàn)證據(jù)表明NF-kB 活化可以通過(guò)促進(jìn)RA FLS增生，抑制FLS凋亡，從而出現(xiàn)滑膜增生。61 增生 NF-kB誘導(dǎo)c-Myc 和 cyclin D1, 細(xì)胞周期循環(huán)所需蛋白的表達(dá)，在破肌細(xì)胞和纖維細(xì)胞的生長(zhǎng)中起陽(yáng)性調(diào)節(jié)作用58-60。 Makarov等人研究大鼠原代FLS發(fā)現(xiàn)用血小板源的生長(zhǎng)因子（PDGF）和堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子刺激后可誘導(dǎo)

45、NF-kB活化, NF-kB活化是c-Myc 和DNA合成所必需的58。相反具有絲裂原活性的胰島樣生長(zhǎng)因子-1不能激活NF-kB，也不為NF-kB抑制劑所影響（未發(fā)表）。NF-kB在FLS絲裂原保護(hù)細(xì)胞免受c-Myc的細(xì)胞毒性。盡管增殖需要c-Myc，但是除非存在一定的存活因子，否則c-Myc會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞死亡。PDGF就是這樣的因子，它能夠?qū)筩-Myc的促凋亡傾向。Makarov發(fā)現(xiàn)阻斷NF-kB會(huì)導(dǎo)致PDGF的保護(hù)作用喪失，這說(shuō)明在PDGF途徑，NF-kB傳遞兩種信號(hào)，一是誘導(dǎo)c-Myc所需的，另一個(gè)是抗凋亡信號(hào)，中和c-Myc的細(xì)胞毒性，可以認(rèn)為是誘導(dǎo)產(chǎn)生了一個(gè)或多個(gè)保護(hù)性基因58。c-M

46、yc 在RA滑膜中過(guò)度表達(dá)，NF-kB活化后抑制 c-Myc誘導(dǎo)的凋亡，促進(jìn)滑膜增生增殖。有重要意義的是PDGE誘導(dǎo)的NF-kB活化涉及到磷脂酰肌醇-3激酶PI(3)K/Akt，和蛋白激酶B/Akt，目前已經(jīng)清楚PI(3)K/Akt途徑涉及多種人類(lèi)惡性疾病的發(fā)病過(guò)程,這說(shuō)明RA和腫瘤在增生形成方面有相似的機(jī)制。62 凋亡很多促凋亡刺激物，如TNF，射線(xiàn)、化療能夠激活NF-kB，在大多數(shù)細(xì)胞中NF-kB傳遞抗凋亡信號(hào)。NF-kB抑制凋亡表明它激活了抗凋亡基因，包括TRAF1 、 TRAF2、c-IAP1 、c-IAP2、 Bcl-2 同源 A1/Bfl-1 和Bcl-xL、IEX-1、 XIAP

47、 61。阻斷大鼠原代SCW FLS NF-kB活化能夠大大地增強(qiáng)TNF和FasL的細(xì)胞毒性，與此一致，體內(nèi)使用不同的NF-kB抑制劑，如蛋白酶體 抑制劑、sr-kB的腺病毒轉(zhuǎn)基因結(jié)構(gòu)，能夠加速異十八烷及SCW誘導(dǎo)的大鼠關(guān)節(jié)炎關(guān)節(jié)內(nèi)的凋亡50。zhang等人與此觀點(diǎn)一致，他們?cè)谌薘A/SCID鼠模型中觀察到NF-kB活化能夠?qū)筎NF對(duì)RA FLS的細(xì)胞毒性,大概是通過(guò)誘導(dǎo)抗凋亡蛋白XIAP來(lái)實(shí)現(xiàn)的60。這些結(jié)果表明NF-kB可能是通過(guò)抑制TNF和FasL的細(xì)胞毒性在防止RA FLS發(fā)生凋亡中起了重要作用。因?yàn)樵赗A FLS中TNF是一種有力的絲裂原，所以NF-kB是以一種重要開(kāi)關(guān)的形式?jīng)Q定TN

48、F是執(zhí)行絲裂原還是促凋亡的作用。前面提到PI(3)K/Akt途徑在腫瘤細(xì)胞的存活和增殖方面具有顯著作用，NF-kB是其中重要的環(huán)節(jié)。實(shí)驗(yàn)表明PI(3)K/Akt途徑可以對(duì)多種刺激物產(chǎn)生應(yīng)答，如PDGF 58、TNF63、IL-1 64、 bradykinin 65、 致癌性 H-Ras 66 、Her-2/neu 67。調(diào)節(jié)NF-kB活化。Akt依賴(lài)性NF-kB活化能夠調(diào)節(jié)PDGF58和Her-2/neu 67的抗凋亡功能，通過(guò)下調(diào)c-Myc 58、H-Ras 66、NF67。制細(xì)胞死亡。Akt如何精確激活NF-kB依賴(lài)性轉(zhuǎn)錄依然有不少爭(zhēng)論。一些小組認(rèn)為與IKK有關(guān)，因此涉及到NF-kB依賴(lài)性機(jī)制 63,65,67,68,69，另有些學(xué)者認(rèn)為是NF-kB非依賴(lài)性機(jī)制，是Akt使NF-kB具有了轉(zhuǎn)錄功能64,66。Akt與NF-kB的連接機(jī)制及NF-kB途徑在Akt抗凋亡功能中的作用很有可能與細(xì)胞和刺激物類(lèi)型有關(guān)。Akt在RA發(fā)病機(jī)制及在RA滑膜中對(duì)NF-kB活化的作用尚不清楚，但照理看二者之間肯定按存在聯(lián)系，值得進(jìn)一步探討。NF-kB與組織改型目前認(rèn)為RA關(guān)節(jié)破壞主要是FLS的作用，RA關(guān)節(jié)炎性環(huán)境造成了FLS的侵蝕性表型，有證據(jù)說(shuō)明NF-kB活化為FLS提供了破壞能力。首先，NF-kB調(diào)節(jié)一些基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP）的活化，MMP-1 的啟動(dòng)子具有NF-