生理實(shí)驗(yàn)家兔呼吸衰竭和肝性腦病實(shí)驗(yàn)報(bào)告

1、醫(yī)學(xué)形態(tài)與機(jī)能實(shí)驗(yàn)技術(shù)實(shí)驗(yàn)報(bào)告中山醫(yī)學(xué)院 09393184林永東一：實(shí)驗(yàn)綜述 本次實(shí)驗(yàn)包括2個實(shí)驗(yàn)：家兔急性呼吸衰竭實(shí)驗(yàn)和肝性腦病實(shí)驗(yàn)，通過制作兔的閉合性氣胸及開放性氣胸，復(fù)制呼吸衰竭模型。做氣管內(nèi)插管并連接呼吸傳感設(shè)置，記錄家兔呼吸運(yùn)動的變化，以及記錄注射不同劑量的氯化銨對家兔的影響，結(jié)合組織制片和顯微照相等技術(shù)，從器官層次到細(xì)胞層次了解肺，肝急性衰竭前后結(jié)構(gòu)組織變化的情況。二：目的和原理1：呼吸衰竭是指由于外呼吸功能的嚴(yán)重障礙，以致動脈血氧分壓低于正常范圍，伴有或不伴有二氧化碳分壓增高的病理過程。肺通氣障礙或（和）肺換氣功能障礙都可引起呼吸衰竭。本實(shí)驗(yàn)通過復(fù)制呼吸衰竭病理模型，觀察呼吸和血

2、氣的變化并分析其機(jī)制，學(xué)習(xí)動脈采血的方法，了解血?dú)鉁y定方法。2：正常情況下，血氨的來源與清除保持動態(tài)平衡，而氨在肝臟中合成尿素是維持此平衡的關(guān)鍵。通過結(jié)扎大部分肝臟造成急性肝功能不全，然后經(jīng)消化道輸入堿性氯化銨溶液，導(dǎo)致腸道中氨生成增多并吸收入血，引起實(shí)驗(yàn)動物血氨迅速升高，出現(xiàn)震顫、抽搐、昏迷等類似肝性腦病癥狀，證明氨在肝性腦病發(fā)病機(jī)制中起主要作用。本次實(shí)驗(yàn)的目的是學(xué)習(xí)復(fù)制急性肝功能不全造成急性肝功能不全模型的方法，了解氨在肝性腦病發(fā)病機(jī)制中的作用，通過制作組織切片了解肝組織損傷的形態(tài)學(xué)改變。 三：實(shí)驗(yàn)對象家兔四：手術(shù)器材和藥品兔手術(shù)臺、實(shí)驗(yàn)手術(shù)器械一套、氣管插管（兩側(cè)管套有橡皮管）、連接靜脈

3、插管的輸液裝置、連接三通的動脈插管、注射器（1ml、2ml、10ml、50ml）、軟木塞、濾紙、血?dú)馑釅A分析儀。離心機(jī)、分光光度計(jì)、水浴鍋、電爐、注射器（5ml）、輸液瓶、膠管、螺旋夾、滴管、吸管、離心管、試管、試管夾、試管架、酒精燈、手術(shù)器械一套、輸尿管塑料插管、顯微鏡、玻片。20烏拉坦、1肝素生理鹽水溶液、生理鹽水、0.1腎上腺素， 2.5%氯化銨，1%普魯卡。五：實(shí)驗(yàn)步驟肺衰竭：1取家兔一只，稱重，從耳緣靜脈注射20烏拉坦溶液5ml/kg。將家兔仰臥固定于兔臺上。2沿頸部正中切開皮膚，分離氣管，插入氣管插管。分離左側(cè)頸總動脈，插入充滿肝素生理鹽水的動脈插管。分離右側(cè)頸外靜脈，插入靜脈插管

4、，連接輸液裝置，并緩慢輸入生理鹽水（45滴/min）。3用注射器抽出動脈插管內(nèi)的死腔液，然后用充有肝素生理鹽水溶液的注射器與動脈插管相連，讓血液自動流入注射器內(nèi)（切勿進(jìn)入氣泡），取血2ml，迅速套上帶軟木塞的針頭，作血?dú)夥治?，同時觀察家兔的呼吸頻率及深度。4打開胸腔，觀察家兔的呼吸頻率和深度。5：用止血鉗夾住氣管，處死動物，打開胸腔，在氣管分叉處結(jié)扎氣管以防止水腫液流出，取出一部分肺組織。注意事項(xiàng)：1、穿刺胸腔時，針頭應(yīng)與胸壁垂直，順肋骨上緣插入以免損傷肋間動脈，注意不要插得太深或太淺（0.5cm左右）進(jìn)針時不可用力夠猛以免穿破胸膜臟層。肝衰竭：1：取兔一只，稱重后仰臥固定于兔臺上，剪去腹部正

5、中兔毛，在上腹部正中用1%普魯卡因作浸潤性局麻。2：從胸骨劍突起作上腹部正中切口（長約5-6cm），打開腹腔后，即可見到肝臟。用手輕輕向下壓肝臟，切斷肝與橫膈之間的鐮狀韌帶。3：將肝臟各葉向上翻，除與胃連接緊密的肝尾葉外，用粗棉線自根部將其余各部結(jié)扎。4：順著胃幽門部找出十二指腸，在其表面作一荷包縫合。用眼科剪剪一小口，插入一導(dǎo)尿管，結(jié)扎固定，然后關(guān)閉腹腔，然后關(guān)閉腹腔，松綁，放于實(shí)驗(yàn)桌上進(jìn)行觀察和實(shí)驗(yàn)。5：觀察家兔的一般情況，角膜反射及對刺激的反應(yīng)。6：每隔5min向十二指腸內(nèi)注入2.5%氯化銨混合液5ml。仔細(xì)觀察動物的一般情況、角膜反射及對刺激反應(yīng)的變化。注意有無反應(yīng)性增高，直至出現(xiàn)痙攣

6、發(fā)作為止。記錄從給藥開始到痙攣抽搐發(fā)作時間以及用藥總量。7：切下一小塊肝尾葉組織和一小塊之前結(jié)扎的正常肝臟組織，制成組織切片并進(jìn)行觀察。注意事項(xiàng)：1、 勿將藥液漏入腹腔。2、 用生理鹽水紗布覆蓋傷口，避免體熱及水分丟失。3、 手術(shù)操作要輕，因肝臟軟易破。切斷鐮狀韌帶時要小心勿損傷其后方的下腔靜脈。4、 動物行局麻時，有時會掙扎，要與氨引起的強(qiáng)直性痙攣相區(qū)別。六：實(shí)驗(yàn)結(jié)果肺呼吸衰竭（1） 呼吸曲線描記1.正常呼吸2.閉合性氣胸 呼吸幅度降低3.閉合性氣胸?fù)尵群?4.開放性氣胸 呼吸曲線很快便接近一條直線（2） 病理切片氣胸模型肺組織的組織切片10*10倍肺整體 支氣管腔內(nèi)空氣充滿40*10倍支氣

7、管腔 支氣管腔增大40*10倍 可見肺臟萎縮肝急性衰竭（一）、每隔5min注入5ml的氯化銨混合液，并觀察兔子的一般情況，角膜反射，刺激反應(yīng)等，記錄結(jié)果如下：次數(shù)時間一般情況角膜反射刺激反應(yīng)10min正常存在（+）靈敏（+）25min正常存在（+）靈敏（+）310min正常存在（+）靈敏（+）415min正常存在（+）靈敏（+）520min從21min開始抽搐，22min出現(xiàn)角弓反張（2） 、病理切片1、 肝尾葉10倍 肝小葉中央靜脈 可見部分肝細(xì)胞呈空泡樣門管區(qū)有炎癥細(xì)胞浸潤40倍 肝尾葉肝細(xì)胞 部分肝細(xì)胞受損，肝細(xì)胞腫脹呈球形 有些可見炎癥細(xì)胞肝竇內(nèi)淤血門管區(qū)2、正常的肝組織切片七：實(shí)驗(yàn)討論肺呼吸衰竭 本實(shí)驗(yàn)以兔子為實(shí)驗(yàn)對象，分別制作兔子閉合性氣胸、開放性氣胸導(dǎo)致急性呼吸衰竭以觀察兔子的呼吸曲線變化。從呼吸曲線可以看出，對兔子進(jìn)行閉合性氣胸后，呼吸幅度降低，頻率減慢，直至接近直線，抽氣搶救成功后，呼吸曲線逐漸恢復(fù)到接近原來狀態(tài)；對兔子進(jìn)行開放性氣胸，可觀察到呼吸曲線很快便接近一條直線，呼吸衰竭模型制作成功。 肝急性衰竭八：課程及實(shí)驗(yàn)感想這次選修了醫(yī)學(xué)形態(tài)與機(jī)能實(shí)驗(yàn)技術(shù)課程，學(xué)到了相當(dāng)多實(shí)用的實(shí)驗(yàn)室技術(shù)，包括組織切片中包埋，染色，切片，冰凍切片