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文檔簡介
1、遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)報告冊適用于護(hù)理、醫(yī)學(xué)生物技術(shù)專業(yè)目錄實(shí)驗(yàn)一、顯微鏡的結(jié)構(gòu)和使用實(shí)驗(yàn)二、臨時裝片的制作實(shí)驗(yàn)三、細(xì)胞分裂實(shí)驗(yàn)四、人類染色體實(shí)驗(yàn)五、X染色質(zhì)的制備與觀察實(shí)驗(yàn)六、小鼠骨髓細(xì)胞染色體標(biāo)本與觀察實(shí)驗(yàn)七、人類皮膚紋理實(shí)驗(yàn)一 顯微鏡的結(jié)構(gòu)和使用一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?1、知道一般光學(xué)顯微鏡的結(jié)構(gòu)和功能。 2、初步學(xué)會顯微鏡的保護(hù)和使用方法。二、實(shí)驗(yàn)用品:顯微鏡、擦鏡紙、各種裝片。三、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容: (一)顯微鏡的結(jié)構(gòu):1.機(jī)械部分:鏡座、鏡柱、鏡臂、載物臺、鏡筒、物鏡轉(zhuǎn)換器、調(diào)節(jié)器。 2.光學(xué)部分:接目鏡、接物鏡、集光器、反光鏡: (二)顯微鏡的使用方法: 1.低倍鏡的使用:準(zhǔn)備、對光、置片、調(diào)焦距。 2、高
2、倍鏡的使用:1) 低倍鏡找到清晰物象后,直接轉(zhuǎn)化高倍鏡。2)左眼觀察,調(diào)節(jié)細(xì)調(diào)節(jié)器,直至清晰。需要更換標(biāo)本片時,從低倍鏡開始調(diào)節(jié)。四、實(shí)驗(yàn)報告:標(biāo)本名稱: 放大倍數(shù): 標(biāo)本名稱: 放大倍數(shù): 標(biāo)本名稱: 放大倍數(shù): 標(biāo)本名稱: 放大倍數(shù): 實(shí)驗(yàn)二 臨時裝片的制作一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?、 說出動、植物細(xì)胞的結(jié)構(gòu)。2、 初步學(xué)會邊看顯微鏡邊繪圖。3、 熟練使用顯微鏡。二、實(shí)驗(yàn)材料和用具: 顯微鏡、洋蔥、碘液、平滑肌裝片、載玻片、蓋玻片、牙簽。三、操作步驟及內(nèi)容: (一)洋蔥表皮細(xì)胞裝片的制作和觀察: 1、將蓋玻片、載玻片擦拭干凈。 2、在載玻片中間滴一滴碘液。3、用鑷子撕取一小塊洋蔥外表皮,置于碘液中,
3、展平。 4、加蓋玻片,吸去多余的碘液。 5、先低倍鏡再高倍鏡進(jìn)行觀察,并繪圖。 (二)人口腔上皮細(xì)胞裝片的制作和觀察: 1、將蓋玻片、載玻片擦拭干凈。 2、漱口后,用牙簽在口腔頰部刮幾下。 3、將刮取的上皮細(xì)胞單向均勻地涂在載玻片上,忌來回涂。 4、滴碘液染色。 5、加蓋玻片,吸去多余碘液。6、先低倍鏡再高倍鏡進(jìn)行觀察,并繪圖。四、作業(yè)與思考1、繪出所觀察到的動、植物細(xì)胞的結(jié)構(gòu)。 標(biāo)本名稱: 放大倍數(shù): 2、比較動、植物細(xì)胞結(jié)構(gòu)的異、同點(diǎn)。實(shí)驗(yàn)三 細(xì)胞分裂一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?、了解動、植物細(xì)胞有絲分裂的過程及各期的特征。2、熟練掌握生物繪圖技術(shù)。二、實(shí)驗(yàn)材料和用具: 馬蛔蟲卵細(xì)胞有絲分裂裝片;洋蔥
4、根尖細(xì)胞有絲分裂裝片;顯微鏡三、操作步驟及內(nèi)容: (一)觀察馬蛔蟲卵細(xì)胞的有絲分裂:根據(jù)各期的主要特征,在顯微鏡下,找到典型的細(xì)胞,并將其畫下來。 (二)觀察洋蔥根尖細(xì)胞的有絲分裂:根據(jù)各期的主要特征,在顯微鏡下,找到典型的細(xì)胞。注意與馬蛔蟲卵細(xì)胞加以比較,找到動、植物細(xì)胞有絲分裂的異、同點(diǎn)。四、作業(yè)與思考1、繪出所觀察到的動物細(xì)胞有絲分裂各期的典型細(xì)胞。前期 中期 后期 末期放大倍數(shù): 2、比較動、植物細(xì)胞有絲分裂的異、同點(diǎn)。實(shí)驗(yàn)四 人類染色體一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?、 掌握人類染色體的形態(tài)結(jié)構(gòu)及分組特征。 5、 能夠進(jìn)行人類染色體的核型分析。二、實(shí)驗(yàn)用品:顯微鏡、剪刀、人染色體標(biāo)本片、核型紙、二甲
5、苯、香柏油 擦鏡紙 、人染色體放大照片。三、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容: (一)觀察人染色體標(biāo)本片: 1、取一張人外周血淋巴細(xì)胞染色體標(biāo)本片。 2、先低倍鏡下尋找好的分裂相,再轉(zhuǎn)換高倍鏡,選不重疊的分裂相。3、在標(biāo)本片上加一滴香柏油,轉(zhuǎn)換油鏡,進(jìn)行觀察、計數(shù),并描繪鏡下觀察到圖象。 (二)人類染色體核型分析:將人類染色體放大照片上的染色體剪下,對照染色體的分組特點(diǎn),將染色體一一配對,貼在核型紙上,并寫明核型及其他。四、實(shí)驗(yàn)報告:1、描繪鏡下觀察到圖象。放大倍數(shù): 2、做出核型分析報告。實(shí)驗(yàn)五 X染色質(zhì)的制備與觀察一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?、掌握人類X染色質(zhì)的形態(tài)結(jié)構(gòu)。 2、通過進(jìn)行人類X染色質(zhì)的檢查,可判定性別。二、實(shí)驗(yàn)
6、用品:略三、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容:1、 取口腔上皮細(xì)胞,用牙簽取。2、 放入盛有8ml生理鹽水的離心管中。3、 用吸管吹散細(xì)胞團(tuán)。4、 離心1000轉(zhuǎn)/10min.5、 取上清液。6、 在沉淀物上加甲醇:冰醋酸=3:1的固定液8ml。7、 靜止20min .8、 離心1000轉(zhuǎn)/10min。9、 取上清液。10. 在沉淀物上加甲醇:冰醋酸=1:1的固定液幾滴。11. 滴片,自然干燥。13. 將干燥好的片子放入5N鹽酸中,10min。14. 自然干燥。15. 將片子放入甲苯胺蘭中染色20min .16. 自然干燥。17. 鏡檢:低倍鏡 高倍鏡 油鏡四、實(shí)驗(yàn)報告:1、描繪鏡下觀察到圖象。放大倍數(shù): 實(shí)驗(yàn)六、
7、小鼠骨髓細(xì)胞染色體標(biāo)本與觀察一、實(shí)驗(yàn)原理:在有絲分裂指數(shù)相當(dāng)高的骨髓細(xì)胞中,可以得到中期細(xì)胞而不像血淋巴細(xì)胞或其它組織那樣要經(jīng)過體外培養(yǎng)。用適量的秋水仙素溶液注入動物體內(nèi),可抑制分裂細(xì)胞紡錘絲的形成,從而積累大量的分裂中期骨髓細(xì)胞,通過常規(guī)制片方法,直接制備染色體標(biāo)本。二、實(shí)驗(yàn)材料: 1、標(biāo)本:活體小鼠 2、器材:解剖器具、注射器、刻度離心管、乳頭吸管、離心機(jī)、恒溫水箱、試管架、顯微鏡、針頭、玻璃片、蓋玻片、小塊紗布。 3、試劑:秋水仙素溶液(200ug/ml)、生理鹽水、0.075mol/kcl、甲醇、冰醋酸、Giemsa溶液、pH6.8磷酸緩沖液、70%酒精。三、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容 (一)染色體標(biāo)本
8、的制備:選擇體重在1820g的健康小鼠,在實(shí)驗(yàn)前23小時于腹腔注射秋水仙素(注射量按12ug/g)體重計算。1、取材:用斷椎法處死小鼠,從髖關(guān)節(jié)處斷其后肢,剝?nèi)テと?,?0%酒精侵濕的紗布擦去骨上殘肉,再用干紗布擦干,從膝關(guān)節(jié)處斷下完整股骨。2、收集細(xì)胞:剪去股骨兩頭,用裝有6號針頭的注射器吸入3ml生理鹽水,插入骨髓腔中,反復(fù)沖洗骨髓細(xì)胞于刻度離心管中,直至股骨變白,棄掉股骨,換4號針頭用注射器反復(fù)吹打骨髓細(xì)胞,使其分散,將細(xì)胞液以1500rpm離心6分鐘。3、低滲處理:棄上清液,加入9ml預(yù)熱37和0.075mol/cKCL液,于37恒溫水箱中低滲處理30分鐘,加入1ml新配制的固定液(3
9、:1甲醇:冰醋酸)進(jìn)行預(yù)固定,用吸管輕輕混均后以1500rpm離心6分鐘。 4、固定:棄上清液,加10ml新固定液,用吸管輕輕吹打細(xì)胞團(tuán),制成骨髓細(xì)胞懸液,室溫下固定30分鐘,以1500rpm離心6分鐘。5、制備細(xì)胞懸液:棄上清液,加入0.20.5ml新固定液,混均后制成細(xì)胞懸液。6、滴片:要吸管取細(xì)胞懸液少許,滴2滴在冰載玻片,然后順載玻片斜面用口對準(zhǔn)液滴用力吹一口氣,細(xì)胞散開,自然涼干。7、染色:用Giemsa原液與磷酸緩沖液(pH6.8)1:10配成Giemsa染液,均勻滴于標(biāo)本上,染色20分鐘(用染缸染),流水沖去染液,自然涼干。二、觀察: 在低倍鏡下觀察,尋找染色體分散的中期分裂相,
10、換高倍鏡,再換油鏡。三、實(shí)驗(yàn)報告:描繪鏡下觀察到的小鼠骨髓細(xì)胞染色體圖象。放大倍數(shù): 實(shí)驗(yàn)七 人類皮膚紋理一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?、 掌握指紋的主要類型、嵴線計數(shù)和掌紋的測方法。 7、 了解皮膚印取和資料分析的方法。二、實(shí)驗(yàn)用品:放大鏡、量角器、鉛筆、直尺、紅色印油、白紙三、實(shí)驗(yàn)原理人體的手、腳掌面具有特定的紋理表現(xiàn)簡稱皮紋。人類的皮膚由表皮和真皮構(gòu)成。真皮乳頭向表皮突起,形成許多排列整齊、平行的乳頭線,此線又稱嵴紋。嵴紋上有許多汗線的開口。突起的嵴紋相互又形成凹陷的溝,這些凹凸的紋理就構(gòu)成了人體的指(趾)紋和掌紋。人體的皮紋既有個體的特異性,又有高度的穩(wěn)定性。皮紋在胚胎發(fā)育第13周開始出現(xiàn),第19周
11、左右形成,出生后終生不變。三、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容: (一)皮膚資料的印取印油印取法:1、將紅色印油適量地到入磁盤的海綿墊上,涂抹均勻,再把白紙平鋪于桌上。2、洗凈手,把全掌按在海綿上,使掌面獲得均勻的印油。3、先將掌腕線放在白紙上,從后向前依掌、指順序逐步放下,手指自然分開,以適當(dāng)?shù)膲毫ΡM量將全掌的各部分均勻地印在白紙中央。提手。 (二)皮膚紋理的分析:1、指紋觀察手指末端腹面的皮紋稱為指紋。根據(jù)紋理的走向和三叉點(diǎn)的數(shù)目,可將指紋分為弓形紋、萁形紋和斗形紋三種類型。 弓形紋:弓形紋的特點(diǎn)是嵴線由一側(cè)至另一側(cè),呈弓形,無中心點(diǎn)和三叉萁形紋:紋線從一側(cè)起始,斜向上彎曲,再回轉(zhuǎn)到起始側(cè),形成似簸萁。斗形紋:特
12、點(diǎn)是具有兩個或兩個以上的三叉點(diǎn)2、嵴紋計數(shù)(1)指嵴紋計數(shù) 弓形紋由于沒有圓心和三叉點(diǎn),計數(shù)為零。 則可從中心(圓心)到三叉點(diǎn)中心繪一直線,計算直線通過的嵴紋數(shù)。斗形紋因有兩個三叉點(diǎn),可得到兩個數(shù)值,只計多的一側(cè)數(shù)值。(2)指嵴紋總數(shù)(TFRC)TFRC值為10個手指指嵴紋計數(shù)的總和。我國男性平均值為148條,女性為138條。3、掌紋觀察Atd角:正常人手掌基部的大、小魚際之間,具有一個三叉點(diǎn)稱軸三叉,用t表示。從指基部三叉點(diǎn)a和三叉點(diǎn)d分別畫直線與三叉點(diǎn)t相連,即構(gòu)成atd角。計算Atd角:可用量角器測量atd角度的大小,我國正常人atd角的平均值為41°。4、指褶紋和掌褶紋指手掌和手指屈面各關(guān)節(jié)彎曲活動處所顯示的褶紋, (1)指褶紋正常人除拇指只有一條指褶紋外,其余四指都有2條指褶紋與各指關(guān)節(jié)相連對應(yīng)。但先天愚型患者和18三體患者的第五指(小指)可只有一條指褶紋。(2)掌褶紋:實(shí)際上褶紋不是皮膚紋理,但由于染色體病患者的指褶紋和掌褶紋有改變,所以列入皮紋,進(jìn)行討論。通貫手 由遠(yuǎn)側(cè)橫褶紋與近側(cè)橫褶紋連成一條直線橫貫全掌而形成。橋貫手 表
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