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1、職業(yè)教育醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)專業(yè)教學(xué)資源庫(kù)第一節(jié) 血液標(biāo)本采集與處理1全血全血2血漿血漿 主要用于化學(xué)和凝血項(xiàng)目檢測(cè)等。主要用于化學(xué)和凝血項(xiàng)目檢測(cè)等。3血清血清 主要用于化學(xué)和免疫學(xué)等項(xiàng)目檢測(cè)。主要用于化學(xué)和免疫學(xué)等項(xiàng)目檢測(cè)。血清與血漿比較,主要是前者缺乏纖維蛋白原及某些凝血因子。4血細(xì)胞血細(xì)胞 主要用于某些特殊項(xiàng)目的檢測(cè)主要用于某些特殊項(xiàng)目的檢測(cè)靜脈全血?jiǎng)用}全血末梢全血靜脈全血?jiǎng)用}全血末梢全血一、血液標(biāo)本類型抗凝劑抗凝劑分離膠分離膠促凝劑促凝劑我是血漿,我是血漿,還是血清呢?還是血清呢?抗凝:采用物理或化學(xué)的方法去除或抑制某種凝血因子的活性,以阻止血液凝固的方法稱為抗凝??鼓齽耗軌蜃柚寡耗痰幕?/p>
2、學(xué)物質(zhì)稱為抗凝劑(anticoagulant)或抗凝物質(zhì)。 血細(xì)胞血細(xì)胞抗凝劑抗凝劑抗凝原理抗凝原理臨床用途臨床用途 真空采血管真空采血管顏色顏色枸櫞酸鈉枸櫞酸鈉(檸檬酸鈉檸檬酸鈉 )與血液中的Ca2+結(jié)合形成可溶性螯合物,使Ca2+失去凝血作用,阻止血液凝固血栓與止血檢驗(yàn)(1:9)血沉測(cè)定(1:4)血液保養(yǎng)液藍(lán)色藍(lán)色黑色黑色乙二胺四乙酸乙二胺四乙酸 EDTA-K2/K3/Na2與血液中的Ca2+結(jié)合形成螯合物,使Ca2+失去凝血作用,阻止血液凝固全血細(xì)胞分析 紫色紫色肝素肝素加強(qiáng)抗凝血酶(AT-)滅活絲氨酸蛋白酶作用 血細(xì)胞比容測(cè)定臨床生化項(xiàng)目 綠色綠色草酸鈉草酸鈉與血液中的Ca2+形成草酸
3、鈣沉淀,阻止血液凝固 血細(xì)胞比容、血細(xì)胞計(jì)數(shù)、網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)等 (不常用)灰色灰色常常 用用 抗抗 凝凝 劑劑促凝劑:促凝劑:激活纖維蛋白酶,使可溶性纖維蛋白變成不可溶性的纖維蛋白聚體,進(jìn)而形成穩(wěn)定的纖維蛋白凝塊臨床用途:臨床用途:急診化學(xué)檢查真空采血管顏色真空采血管顏色 紅色紅色分離膠:分離膠:離心后固化在血清與血塊之間形成隔離層,使血清和血細(xì)胞完全分離。臨床用途:臨床用途:生化、血庫(kù)、血清學(xué)等相關(guān)檢驗(yàn) 真空采血管顏色:真空采血管顏色:黃色黃色 血液標(biāo)本采集血液標(biāo)本采集靜脈采血法靜脈采血法皮膚采血法皮膚采血法動(dòng)脈采血法動(dòng)脈采血法皮膚采血法,又稱毛細(xì)血管采血法,主要用于需要微量血液檢驗(yàn)項(xiàng)目和嬰
4、幼兒血常規(guī)檢驗(yàn)。1、采血針皮膚采血法(1)主要器材: 一次性采血針、 微量吸管、 消毒用品等。一次性采血針一次性采血針(2)采血部位: 一般采用手指指端或耳垂, 嬰幼兒可選擇拇趾或足跟內(nèi)外側(cè)緣。世界衛(wèi)生組織(WHO)推薦采血部位為左手中指或無(wú)名指指端內(nèi)側(cè)。 選擇皮膚完好處采血。 (3)簡(jiǎn)要操作 (3)簡(jiǎn)要操作 (4)注意事項(xiàng):采血時(shí)必須注意嚴(yán)格消毒和生物安全防范。采血針應(yīng)為一次性使用的“專用采血針”,針刺深度以23mm為宜。取血時(shí)可稍加擠壓,但切忌用力過(guò)大,以免使過(guò)多組織液混入血液中。采血要迅速,防止流出的血液發(fā)生凝固。手工法血液標(biāo)本采集順序順序?yàn)椋貉“逵?jì)數(shù)、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白測(cè)定、白細(xì)胞
5、計(jì)數(shù)及白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)、血型鑒定等。2. 激光皮膚采血法 激光皮膚采血法屬于非接觸式采血法,在一次性耗材(鏡頭片)的配合下,激光采血器能在極短時(shí)間內(nèi)發(fā)出一束特定波長(zhǎng)的激光束,接觸皮膚后瞬間在采血部位產(chǎn)生高溫,使皮膚氣化形成一個(gè) 0.40.8mm 的微孔,血液自微孔流出,從而實(shí)現(xiàn)采集末梢全血的目的。該方法具有感染機(jī)會(huì)少、被檢者痛感輕和工作人員工作強(qiáng)度低等優(yōu)點(diǎn)。靜脈采血法臨床應(yīng)用廣泛,所采集的靜脈血能準(zhǔn)確反映全身血液的真實(shí)情況,因其不易受氣溫和末梢循環(huán)變化的影響,更具有代表性。普通采血法負(fù)壓采血法1、普通采血法 即傳統(tǒng)的靜脈采血方法 。(1)主要器材: 注射器、 試管、消毒用品等。 普通采血法負(fù)壓采
6、血法(2)采血部位: 通常采用肘部靜脈。 當(dāng)肘部靜脈不明顯時(shí),可采用手背部、 手腕部和外踝部靜脈。 幼兒可采用頸外靜脈采血, 其它:股靜脈、大隱靜脈及鎖骨下靜脈等。 肘部靜脈肘部靜脈(3)簡(jiǎn)要操作 (4)注意事項(xiàng):根據(jù)檢驗(yàn)項(xiàng)目判斷所需采血量,選擇注射器。嚴(yán)格執(zhí)行無(wú)菌操作。采血時(shí)切忌將針?biāo)ㄍ赝疲悦庾⑸淦髦械目諝膺M(jìn)入血循環(huán)形成氣栓。為避免溶血,注射器和容器必須干燥,抽血時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生大量氣泡,抽血完畢后應(yīng)先拔下針頭,然后將血液沿管壁徐徐注入容器,需要抗凝時(shí)應(yīng)與抗凝劑輕輕混勻,切忌用力振蕩試管。進(jìn)行血小板功能試驗(yàn),為了防止血小板激活,須使用塑料注射器或經(jīng)硅化處理后的玻璃試管或塑料試管。采血一般取坐
7、位或臥位,不能立位采血,因?yàn)轶w位影響水分在血管內(nèi)外的分布,影響被測(cè)血液成分的濃度。壓脈帶捆扎時(shí)間不應(yīng)超過(guò)1分鐘,否則會(huì)使血液成分濃度發(fā)生改變。 2、負(fù)壓采血法 又稱為真空采血法 。(1)主要器材: 負(fù)壓采血系統(tǒng) 雙向采血針 真空采血管 套筒套筒雙向采血針雙向采血針頭皮靜脈頭皮靜脈雙向采血針雙向采血針 (2)采血部位: 同普通采血法。(3)簡(jiǎn)要操作 (4)注意事項(xiàng):使用前切勿松動(dòng)或拔除采血管的膠塞頭蓋。刺塞針端的乳膠套能防止拔除采血試管后繼續(xù)流血污染周圍環(huán)境,達(dá)到封閉采血防止污染環(huán)境的作用,因此不可取下乳膠套。采血完畢后,先拔下刺塞針端的采血試管,后拔穿刺針端。一次采血,使用玻璃采血管多管采集血
8、液標(biāo)本的分配順序?yàn)椋貉囵B(yǎng)管、無(wú)抗凝劑血清管、枸櫞酸鈉抗凝管、其他抗凝劑管;使用塑料采血管分配順序:血培養(yǎng)管(黃色)、枸櫞酸鈉抗凝管(藍(lán)色)、加或未加促凝劑或分離膠的血清管、加或未加分離膠的肝素管(綠色)、EDTA抗凝管(紫色)、加葡萄糖分解抑制劑管(灰色) 。1主要器材 :2ml或5ml注射器(準(zhǔn)備l000U/ml無(wú)菌肝素生理鹽水溶液,以濕潤(rùn)注射器內(nèi)腔、橡皮塞),或一次性動(dòng)脈采血針、消毒用品等。2采血部位 多選用橈動(dòng)脈(最方便) 股動(dòng)脈、肱動(dòng)脈。3簡(jiǎn)要操作 橈動(dòng)脈采血橈動(dòng)脈采血4. 注意事項(xiàng):隔絕空氣:用于血?dú)夥治龅臉?biāo)本,采集后先立即封閉針頭斜面,再混勻標(biāo)本。立即送檢:標(biāo)本采集后應(yīng)立即送檢,
9、否則應(yīng)將標(biāo)本置于26保存,但保存時(shí)間不應(yīng)超過(guò)2小時(shí)。防止血腫:采血完畢,拔出針頭后,用消毒干棉簽用力按壓采血處止血,以防形成血腫。 預(yù)處理與保存預(yù)處理與保存檢驗(yàn)后保存與處理檢驗(yàn)后保存與處理運(yùn)送運(yùn)送接受與拒收接受與拒收(一)(一)血液標(biāo)本運(yùn)送血液標(biāo)本運(yùn)送生物安全原則生物安全原則唯一標(biāo)識(shí)原則唯一標(biāo)識(shí)原則及時(shí)運(yùn)送原則及時(shí)運(yùn)送原則抗凝劑正確,血細(xì)胞計(jì)數(shù)使用抗凝劑正確,血細(xì)胞計(jì)數(shù)使用 EDTA-K2標(biāo)本采集的日期和時(shí)間明確標(biāo)本采集的日期和時(shí)間明確最好使用真空采血系統(tǒng),無(wú)外漏以保證生物安全最好使用真空采血系統(tǒng),無(wú)外漏以保證生物安全標(biāo)識(shí)清楚,具有唯一性標(biāo)識(shí)清楚,具有唯一性(二)血液標(biāo)本接受與拒收(二)血液標(biāo)
10、本接受與拒收采血量準(zhǔn)確采血量準(zhǔn)確抗凝標(biāo)本凝固抗凝標(biāo)本凝固采集容器不當(dāng)采集容器不當(dāng) 標(biāo)本污染、容器破損標(biāo)本污染、容器破損 申請(qǐng)單和標(biāo)本標(biāo)識(shí)不一致申請(qǐng)單和標(biāo)本標(biāo)識(shí)不一致 采血量不足或錯(cuò)誤采血量不足或錯(cuò)誤 溶血溶血轉(zhuǎn)運(yùn)條件不當(dāng)轉(zhuǎn)運(yùn)條件不當(dāng) 抗凝劑使用錯(cuò)誤抗凝劑使用錯(cuò)誤 (二)血液標(biāo)本接受與拒收(二)血液標(biāo)本接受與拒收血液標(biāo)本接收后,需按照測(cè)定項(xiàng)目的要求進(jìn)行標(biāo)本的預(yù)處理, 如血常規(guī)檢測(cè)室溫存放待檢; 需要血漿的檢驗(yàn)項(xiàng)目,可通過(guò)離心抗凝血獲得血漿; 需要血清的檢驗(yàn)項(xiàng)目,對(duì)未含促凝劑或分離膠采血管的血液 標(biāo)本置于37孵育,待血液完全凝固后離心分離血清; 含促凝劑或分離膠采血管的血液標(biāo)本可直接離心分離血清;
11、 對(duì)于需要特定細(xì)胞的實(shí)驗(yàn),應(yīng)根據(jù)要求采用不同的細(xì)胞分離液 或分離技術(shù)分離細(xì)胞,同時(shí)盡量避免混入其他細(xì)胞。(三)血液標(biāo)本預(yù)處理(三)血液標(biāo)本預(yù)處理當(dāng)血液標(biāo)本不能立即測(cè)定時(shí),應(yīng)選擇合適的保存方式、保存條件予以保存。1分離后標(biāo)本 不能及時(shí)檢驗(yàn)或需保留標(biāo)本,一般應(yīng)將標(biāo)本置于4冰箱內(nèi)保存。標(biāo)本需保存至少1個(gè)月時(shí),放置于-20冰箱內(nèi)保存。標(biāo)本需保存至少3個(gè)月時(shí),分離后置于-70冰箱保存。標(biāo)本存放時(shí)需要密封,以免水分揮發(fā)而使標(biāo)本濃縮。標(biāo)本應(yīng)避免反復(fù)凍融。2立即送檢標(biāo)本 如血氨(密封送檢)、紅細(xì)胞沉降率、血?dú)夥治觯芊馑蜋z)、酸性磷酸酶、乳酸等標(biāo)本。(四)血液標(biāo)本保存(四)血液標(biāo)本保存(四)血液標(biāo)本保存(四)血液標(biāo)本保存3檢測(cè)后的標(biāo)本 血液一般分析標(biāo)本用后應(yīng)于室溫存放 24 小時(shí)后處理,一般生化檢驗(yàn)項(xiàng)目的標(biāo)本檢驗(yàn)后應(yīng)放 4環(huán)境存放 7 天后處理,特殊檢驗(yàn)項(xiàng)目檢驗(yàn)后的標(biāo)本應(yīng)吸出血清或血漿并置20冰箱內(nèi)保存 1 個(gè)月以上。保存檢驗(yàn)標(biāo)本時(shí)應(yīng)包括標(biāo)本信息的保存,且與分離的血漿或血清標(biāo)本相對(duì)應(yīng)。急診標(biāo)本和非急診標(biāo)本均必須妥善保存,在需要重新測(cè)定時(shí),確保標(biāo)本檢索快速有效、檢驗(yàn)及時(shí)。保存原則是在有效的保存期內(nèi)確保被檢測(cè)物質(zhì)不會(huì)發(fā)生明顯改變,以備復(fù)查需要。(五)檢測(cè)后血液標(biāo)本處理(五)檢測(cè)后血液
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