高中生物選修一-dna粗提取與鑒定培訓(xùn)講學(xué)

1、高中生物選修一-DNA粗提取與鑒定一、基礎(chǔ)知識(shí)：提取DNA的方法（1 1）蛋白酶：）蛋白酶：水解蛋白質(zhì)水解蛋白質(zhì)，不能水解不能水解DNADNA。（2 2）高溫：）高溫：大多數(shù)蛋白質(zhì)不能忍受大多數(shù)蛋白質(zhì)不能忍受60608080的高溫，而的高溫，而DNADNA在在8080以上才會(huì)變性以上才會(huì)變性。（3 3）洗滌劑：）洗滌劑：瓦解細(xì)胞膜（瓦解細(xì)胞膜（主要破壞膜主要破壞膜中的蛋白質(zhì)分子中的蛋白質(zhì)分子），）， 但對(duì)但對(duì)DNADNA沒(méi)影響。沒(méi)影響。2 2、DNADNA對(duì)酶、高溫和洗滌劑的對(duì)酶、高溫和洗滌劑的耐受性耐受性（1 1）二苯胺：）二苯胺：沸水浴條件下，沸水浴條件下，DNADNA遇二苯胺沸水浴遇二苯

2、胺沸水浴5min5min會(huì)染成藍(lán)色會(huì)染成藍(lán)色（2 2）甲基綠：將）甲基綠：將DNADNA染成染成綠色綠色3 3、DNADNA鑒定原理鑒定原理二、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)原則上只要含原則上只要含DNADNA的生物材料都可以，但是的生物材料都可以，但是選選取取DNADNA含量相對(duì)較高的生物組織含量相對(duì)較高的生物組織，成功率更大。，成功率更大。（一）實(shí)驗(yàn)材料的選?。ㄒ唬?shí)驗(yàn)材料的選取 本實(shí)驗(yàn)材料：新鮮本實(shí)驗(yàn)材料：新鮮雞血細(xì)胞液雞血細(xì)胞液和雞全血相比，和雞全血相比，雞血細(xì)胞液中雞血細(xì)胞液中DNADNA相對(duì)含相對(duì)含量高量高，保證實(shí)驗(yàn)?zāi)芴崛〉阶銐蛄康?，保證實(shí)驗(yàn)?zāi)芴崛〉阶銐蛄康腄NADNA。二、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)（二）破碎細(xì)胞，獲取

3、含（二）破碎細(xì)胞，獲取含DNADNA的濾液的濾液 1. 1.動(dòng)物細(xì)胞：動(dòng)物細(xì)胞：加蒸餾水加蒸餾水使細(xì)胞吸水脹破使細(xì)胞吸水脹破，玻璃棒，玻璃棒攪攪拌可加速細(xì)胞膜和核膜破裂拌可加速細(xì)胞膜和核膜破裂，過(guò)濾后過(guò)濾后收集濾液收集濾液 2. 2.植物細(xì)胞：植物細(xì)胞：切碎切碎后加后加洗滌劑洗滌劑和和食鹽食鹽，然后，然后充分充分?jǐn)嚢?、研磨攪拌、研磨，過(guò)濾后收集，過(guò)濾后收集濾液濾液；（；（P55P55問(wèn)題）問(wèn)題）二、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)（三）去除濾液中的雜質(zhì)（三）去除濾液中的雜質(zhì) 方案方案3 3：控制溫度在：控制溫度在60756075 方案方案2 2：濾液中加嫩肉粉（木瓜蛋白酶）：濾液中加嫩肉粉（木瓜蛋白酶） 方案方案1 1：控制：控制NaClNaCl溶液的濃度，反復(fù)地溶液的濃度，反復(fù)地 溶解與析出溶解與析出DNADNA，去除雜質(zhì)，去除雜質(zhì)（四）（四）DNADNA的析出與鑒定的析出與鑒定此課件下載可自行編輯修改，僅供參考！此課