舒心膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究

1、舒心膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究         09-08-22 14:38:00     編輯：studa20                    作者：王琳，張羽，王曉明，邱智東【摘要】  目的：建立舒心膠囊的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。方法:采用TLC對苦參、黃芪進(jìn)行色譜鑒別，采用HPLC測定紅參中人參皂苷

2、Rb1的含量。結(jié)果：苦參、黃芪的TLC結(jié)果好，陰性無干擾；人參皂苷Rb1在0.9989.88g范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系,r=0.9998,平均加樣回收率97.95%，RSD=1.66%。結(jié)論:所建立的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)可有效的控制舒心膠囊的質(zhì)量。 【關(guān)鍵詞】  舒心膠囊；質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)；HPLC;人參皂苷Rb1舒心膠囊由紅參、黃芪、苦參等藥味組成，臨床常用于治療冠心病、心絞痛等病癥。為保證本品的質(zhì)量可控，我們對處方中的苦參、黃芪進(jìn)行了薄層鑒別，并采用高效液相色譜法對紅參所含人參皂苷Rb1進(jìn)行含量測定，報告如下。1  儀器與試藥    日本島津LC-10ATVP

3、高效液相色譜儀,SPD-10AVP紫外檢測器，7725i手動進(jìn)樣器，浙江大學(xué)N2000色譜數(shù)據(jù)工作站，人參皂苷Rb1化學(xué)對照品(由中國藥品生物制品檢定所提供，批號：110704-200420，規(guī)格：供含量測定用)。所用試劑均為色譜純和分析純。2  定性鑒別2.1  苦參的鑒別  取本品10 g，加氯仿80 mL、氨水0.8 mL，回流40 min，濾過，濾液蒸干，加氯仿5 mL使溶解，上中性氧化鋁柱(5 g，內(nèi)徑1 cm)，依次用氯仿-甲醇(7:3)各20 mL洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加氯仿1 mL使溶解，制成供試品溶液。吸取苦參堿對照品溶液、上述供試品溶液各

4、10 l，分別點于同一用1%NaOH制備的硅膠G薄層板上,以甲苯-丙酮-甲醇(8：3：0.5)為展開劑，展開8 cm，晾干，再以甲苯-乙酸乙酯-甲醇-水(2:4：2:1)10以下放置的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴碘化鉍鉀溶液，供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)位置上，顯相同顏色的斑點。2.2  黃芪的鑒別  (略)3  含量測定3.1  色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性試驗  用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-0.05%磷酸(29.5:70.5)為流動相；檢測波長為203 nm。理論板數(shù)按人參皂苷Rb1峰計算應(yīng)不低于2000。3.2 

5、; 對照品及供試品溶液的制備3.2.1  對照品溶液的制備  精密稱取人參皂苷Rb1對照品適量，加甲醇制成每10 mL含0.5 mg的溶液，即得。3.2.2  供試品溶液的制備  取裝量差異項下的本品約2.5 g,研碎，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50  mL，密塞，稱定重量，加熱回流90 min，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，精密稱取續(xù)濾液25 mL，蒸干，殘渣加水10 mL使溶解，用乙醚萃取2次，每次15 mL，棄去乙醚液，水液用水飽和正丁醇萃取4次，每次15 mL,合并正丁醇液，正丁醇液用1%NaOH溶液萃

6、取3次，每次20 mL，棄去NaOH溶液，正丁醇液再用正丁醇飽和水萃取2次，每次20 mL，棄去水液，正丁醇液蒸干，殘渣加少量甲醇溶液，定容至5 mL，微孔濾膜濾過，即得。     09-08-22 14:38:00     編輯：studa203.2.3  陰性對照品溶液的制備及測定  取不含紅參的處方,按制備工藝制成缺紅參的陰性對照品，再按供試品溶液的制備方法制成陰性對照品溶液。按含量測定方法測定，結(jié)果表明本法具有良好的專屬性。3.4  線性關(guān)系考察  精密吸取人參皂苷R

7、b1對照品溶液2、5、10、15、20  l注入液相色譜儀，以進(jìn)樣量(l)為橫坐標(biāo)，峰面積積分值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線人參皂苷Rb1的回歸方程y=163240x+9604.1，r=0.9998,由此確定丹皮酚線性范圍為0.9989.88g。3.5  精密度試驗  精密吸取同一對照品溶液各10 l,分別注入液相色譜儀，連續(xù)進(jìn)樣5次，依法測定，記錄峰面積積分值，計算，考察精密度。結(jié)果RSD為1.55%,表明機(jī)器精密度較好。3.6  重現(xiàn)性試驗  精密稱取同一批樣品共5份,按供試品溶液項下制備方法，依法獨立測定，測定樣品含量，以考察本法的重現(xiàn)性。結(jié)果R

8、SD為1.51%，表明該方法重現(xiàn)性良好。3.7  穩(wěn)定性試驗  取對照品溶液、供試品溶液進(jìn)樣10 l,每隔一段時間進(jìn)樣1次，共進(jìn)樣5次,對照品RSD為1.75%，供試品RSD為1.08%，表明對照品溶液、供試品溶液在36 h內(nèi)穩(wěn)定。3.8  加樣回收率試驗  精密稱取同法測定的已知含量樣品共5份，分別精密加入對照品10 mL，依法測定，計算回收率。結(jié)果人參皂苷Rb1平均回收率97.95%，RSD=1.66%，表明本法準(zhǔn)確性較好。3.9  樣品測定  取樣品3批，按供試品溶液制備方法處理，照上述含量測定方法測定,結(jié)果060601、060

9、602、060603 3批次的含量(mg/g)分別為2.0143、2.1662、2.1592。4  討論4.1  含量測定在供試品溶液制備中，根據(jù)被提取成分人參皂苷Rb1的溶解性，人參皂苷Rb1屬皂苷類化合物，極性較大，其良好提取溶劑為甲醇，故供試品溶液制備方法選擇甲醇為溶劑，分別選擇超聲提取法和加熱回流提取法提取，結(jié)果用回流提取法比超聲提取法的提取效率高。4.2  根據(jù)文獻(xiàn)資料，分別選擇乙腈-水(30：70)、乙腈-水(29：71)、乙腈-0.05%磷酸酸溶液(29.5：70.5)作為流動相，結(jié)果乙腈-0.05%磷酸酸溶液(29.5：70.5)分離效果較好，人參

10、皂苷Rb1峰與其它峰達(dá)到了良好的分離度(R>1.5),故采用此法進(jìn)行含量測定方法。 【參考文獻(xiàn)】  1中華人民共和國藥典委員會.中國藥典S.北京：化學(xué)工業(yè)出版社,2005:195.2呂武清.中成藥中的藥材薄層色譜鑒別M.北京:人民衛(wèi)生出版社,1997:120.3鄭虎占.中藥現(xiàn)代研究與應(yīng)用M.北京:學(xué)苑出版社，1997:89.     09-08-22 14:38:00     編輯：studa203.2.3  陰性對照品溶液的制備及測定  取不含紅參的處方,按制備工藝制

11、成缺紅參的陰性對照品，再按供試品溶液的制備方法制成陰性對照品溶液。按含量測定方法測定，結(jié)果表明本法具有良好的專屬性。3.4  線性關(guān)系考察  精密吸取人參皂苷Rb1對照品溶液2、5、10、15、20  l注入液相色譜儀，以進(jìn)樣量(l)為橫坐標(biāo)，峰面積積分值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線人參皂苷Rb1的回歸方程y=163240x+9604.1，r=0.9998,由此確定丹皮酚線性范圍為0.9989.88g。3.5  精密度試驗  精密吸取同一對照品溶液各10 l,分別注入液相色譜儀，連續(xù)進(jìn)樣5次，依法測定，記錄峰面積積分值，計算，考察精密度。結(jié)果RSD為1

12、.55%,表明機(jī)器精密度較好。3.6  重現(xiàn)性試驗  精密稱取同一批樣品共5份,按供試品溶液項下制備方法，依法獨立測定，測定樣品含量，以考察本法的重現(xiàn)性。結(jié)果RSD為1.51%，表明該方法重現(xiàn)性良好。3.7  穩(wěn)定性試驗  取對照品溶液、供試品溶液進(jìn)樣10 l,每隔一段時間進(jìn)樣1次，共進(jìn)樣5次,對照品RSD為1.75%，供試品RSD為1.08%，表明對照品溶液、供試品溶液在36 h內(nèi)穩(wěn)定。3.8  加樣回收率試驗  精密稱取同法測定的已知含量樣品共5份，分別精密加入對照品10 mL，依法測定，計算回收率。結(jié)果人參皂苷Rb1平均回收率9

13、7.95%，RSD=1.66%，表明本法準(zhǔn)確性較好。3.9  樣品測定  取樣品3批，按供試品溶液制備方法處理，照上述含量測定方法測定,結(jié)果060601、060602、060603 3批次的含量(mg/g)分別為2.0143、2.1662、2.1592。4  討論4.1  含量測定在供試品溶液制備中，根據(jù)被提取成分人參皂苷Rb1的溶解性，人參皂苷Rb1屬皂苷類化合物，極性較大，其良好提取溶劑為甲醇，故供試品溶液制備方法選擇甲醇為溶劑，分別選擇超聲提取法和加熱回流提取法提取，結(jié)果用回流提取法比超聲提取法的提取效率高。4.2  根據(jù)文獻(xiàn)資料，分別選擇乙腈-水(30：70)、乙腈-水(29：71)、乙腈-0.05%磷酸酸溶液(29.5：70.5)作為流動相，結(jié)果乙