植物營養(yǎng)研究法--根際研究法

1、1根和根際的研究方法根和根際的研究方法 2第一節(jié)第一節(jié) 根系研究法根系研究法 一根系在植物生長中的作用一根系在植物生長中的作用1固定植物固定植物：攝取、運(yùn)輸、貯藏營養(yǎng)物質(zhì)，合成有機(jī)：攝取、運(yùn)輸、貯藏營養(yǎng)物質(zhì)，合成有機(jī)物質(zhì)如氨基酸等物質(zhì)如氨基酸等2植物地上部分根系生長是相互依賴、彼此協(xié)調(diào)植物地上部分根系生長是相互依賴、彼此協(xié)調(diào)（1）如：如果剪去菜豆的一半葉片或一半根系，只要）如：如果剪去菜豆的一半葉片或一半根系，只要保留兩部分分生組織完整，則過一段時(shí)間后保留兩部分分生組織完整，則過一段時(shí)間后根根/冠比冠比又又會(huì)恢復(fù)至原來數(shù)值。會(huì)恢復(fù)至原來數(shù)值。（2）原因：根系向地上部輸送礦質(zhì)養(yǎng)分和水分）原因：根

2、系向地上部輸送礦質(zhì)養(yǎng)分和水分, 地上部向根系提供碳水化合物，根系合成部分有機(jī)物地上部向根系提供碳水化合物，根系合成部分有機(jī)物，然后輸送到地上部，然后輸送到地上部3二影響根系生長的因素二影響根系生長的因素 研究影響作物根系生長的因素，進(jìn)而調(diào)節(jié)這些研究影響作物根系生長的因素，進(jìn)而調(diào)節(jié)這些因素，使之達(dá)適宜水平，促進(jìn)根系生長，從而促進(jìn)因素，使之達(dá)適宜水平，促進(jìn)根系生長，從而促進(jìn)整個(gè)植株生長，最終獲得理想的產(chǎn)量。整個(gè)植株生長，最終獲得理想的產(chǎn)量。 植物根系的生長和形態(tài)特征，植物根系的生長和形態(tài)特征，主要取決于主要取決于植物植物的的遺傳特征遺傳特征，不同植物，甚至同一植物不同品種，不同植物，甚至同一植物不

3、同品種，其根系形態(tài)特征都會(huì)有很大差異，外界環(huán)境，特別其根系形態(tài)特征都會(huì)有很大差異，外界環(huán)境，特別是土壤環(huán)境對(duì)根系生長也會(huì)產(chǎn)生很大影響。是土壤環(huán)境對(duì)根系生長也會(huì)產(chǎn)生很大影響。 4（一）化學(xué)因素：（一）化學(xué)因素：1養(yǎng)分供應(yīng)：根系具有趨肥性養(yǎng)分供應(yīng)：根系具有趨肥性2低低pH與毒害元素：與毒害元素： Al、Mn、Fe、B（二）物理因素：二）物理因素：1機(jī)械阻力機(jī)械阻力2水分水分3通氣通氣4溫度溫度（三）生物因素（三）生物因素：一般情況下，根際微生物的存在：一般情況下，根際微生物的存在減少植物的主根和側(cè)根長度，減少側(cè)根數(shù)量，并使減少植物的主根和側(cè)根長度，減少側(cè)根數(shù)量，并使根毛長度的密度減少。根毛長度的密

4、度減少。5三根系研究方法三根系研究方法 根系研究：根系研究：形態(tài)學(xué)形態(tài)學(xué)：根數(shù)、分布、根重、根莖、根：根數(shù)、分布、根重、根莖、根表面積、體積表面積、體積 生理學(xué)生理學(xué) 解剖學(xué)解剖學(xué) 研究根系的難處：不象地上部，如何把根系不受研究根系的難處：不象地上部，如何把根系不受損傷地從土壤中取出是研究方法的關(guān)鍵所在；或者損傷地從土壤中取出是研究方法的關(guān)鍵所在；或者不把根系從土壤取出，而在其中直接觀察；或者不不把根系從土壤取出，而在其中直接觀察；或者不讓根系與土壤接觸，易于取出。讓根系與土壤接觸，易于取出。 6（一）釘板法 1方法簡介：取田間含根系的原狀土，用釘板方法簡介：取田間含根系的原狀土，用釘板固定使

5、根系保持在自然位置，洗去土壤，觀察根系。固定使根系保持在自然位置，洗去土壤，觀察根系。洗土：砂土或壤土洗土：砂土或壤土浸泡浸泡12h粘土：干燥分散：粘土：干燥分散：100度干燥、浸泡，焦磷酸鈉度干燥、浸泡，焦磷酸鈉使膠粒分散使膠粒分散 冷凍使分散：冷凍使分散：-25度度2應(yīng)用：可以用于根的分布形態(tài)，還可研究其應(yīng)用：可以用于根的分布形態(tài)，還可研究其它形態(tài)指標(biāo)。它形態(tài)指標(biāo)。 7（二）容器法（根籍或根箱法） 1方法介紹：特制的種植盆，一面或幾面是透明的玻璃，可方法介紹：特制的種植盆，一面或幾面是透明的玻璃，可以裝卸，外覆使不透明，盆內(nèi)裝土，種植植物，常規(guī)管理。以裝卸，外覆使不透明，盆內(nèi)裝土，種植植物

6、，常規(guī)管理。由于溫度對(duì)根系生長影響較大，若為了保持種植盆內(nèi)溫度與田由于溫度對(duì)根系生長影響較大，若為了保持種植盆內(nèi)溫度與田間一致，可將盆子埋入土中。間一致，可將盆子埋入土中。觀察項(xiàng)目：（觀察項(xiàng)目：（1）生長動(dòng)態(tài)：可以對(duì)根系生長發(fā)育進(jìn)行連續(xù)的）生長動(dòng)態(tài)：可以對(duì)根系生長發(fā)育進(jìn)行連續(xù)的原位觀察。透過玻璃直接觀察。原位觀察。透過玻璃直接觀察。（2）其它觀察：取下玻璃，結(jié)合釘板法或直接沖洗，研究根）其它觀察：取下玻璃，結(jié)合釘板法或直接沖洗，研究根系形態(tài)、生理系形態(tài)、生理2局限性：（局限性：（1）容器空間有限，對(duì)大根系作物難以應(yīng)用，只）容器空間有限，對(duì)大根系作物難以應(yīng)用，只能研究其苗期或根系較小的作物。能研

7、究其苗期或根系較小的作物。（2）非自然條件下進(jìn)行，但易操作和控制條件。）非自然條件下進(jìn)行，但易操作和控制條件。8（三）玻璃壁或玻璃管 1方法：玻璃壁：土壤剖面上安置玻璃方法：玻璃壁：土壤剖面上安置玻璃根系觀察室根系觀察室 玻璃管：土壤中打孔，埋入玻璃管玻璃管：土壤中打孔，埋入玻璃管玻璃與土壤間空隙要用土填實(shí)玻璃與土壤間空隙要用土填實(shí)2觀察方法：玻璃壁：直接觀察觀察方法：玻璃壁：直接觀察玻璃管：借助潛望鏡原理，外加放大鏡玻璃管：借助潛望鏡原理，外加放大鏡3問題與優(yōu)點(diǎn)：可以連續(xù)觀測(cè)根系生長狀況問題與優(yōu)點(diǎn)：可以連續(xù)觀測(cè)根系生長狀況更接近自然狀況更接近自然狀況但玻璃壁處根系生長密度一般大于正常土壤中的

8、生長密度。但玻璃壁處根系生長密度一般大于正常土壤中的生長密度。 9（四）同位素法 1土壤注入法：在土壤不同位置，不同深度注入放土壤注入法：在土壤不同位置，不同深度注入放射性物質(zhì)射性物質(zhì)32P或或86Rb。經(jīng)過一段時(shí)間后測(cè)定地上部分經(jīng)過一段時(shí)間后測(cè)定地上部分的放射性強(qiáng)度，其結(jié)果可以直接反映出根系吸收能的放射性強(qiáng)度，其結(jié)果可以直接反映出根系吸收能力大小。力大小。 通過在土壤不同位置、不同深度注入放射性元素通過在土壤不同位置、不同深度注入放射性元素，可以判斷該位置深度根系分布及活力狀況，多點(diǎn)，可以判斷該位置深度根系分布及活力狀況，多點(diǎn)布樣，可以構(gòu)造出立體的根系活力分布圖。布樣，可以構(gòu)造出立體的根系活

9、力分布圖。102植物注入法：從植物地上部莖基注入植物注入法：從植物地上部莖基注入32P或其它示蹤物，或其它示蹤物，經(jīng)一定時(shí)間從根系分布區(qū)一定部位取原狀土樣品，其放射性強(qiáng)經(jīng)一定時(shí)間從根系分布區(qū)一定部位取原狀土樣品，其放射性強(qiáng)度反映該土壤活性根數(shù)量，多點(diǎn)取樣可了解活性物質(zhì)根的分布度反映該土壤活性根數(shù)量，多點(diǎn)取樣可了解活性物質(zhì)根的分布狀況。狀況。3宏觀放射自顯影法：用帶有機(jī)玻璃板的根籍培養(yǎng)植物，宏觀放射自顯影法：用帶有機(jī)玻璃板的根籍培養(yǎng)植物，一定時(shí)期從地上部莖中注入一定時(shí)期從地上部莖中注入32P，3-5天后用天后用X光膠片在有機(jī)玻璃光膠片在有機(jī)玻璃面曝光，顯影、定影，可得根系分布圖。面曝光，顯影、定

10、影，可得根系分布圖。優(yōu)點(diǎn)：優(yōu)點(diǎn)：1.簡便直接，不需進(jìn)行根土分離而直接測(cè)定。簡便直接，不需進(jìn)行根土分離而直接測(cè)定。2測(cè)定的是有吸收活力的根，可消除死根，休眠根或其它測(cè)定的是有吸收活力的根，可消除死根，休眠根或其它植物根系的影響。植物根系的影響。11（五）多孔膜法1方法介紹：方法介紹：（1）制作一孔徑經(jīng)約）制作一孔徑經(jīng)約0.3um的多孔膜套，該膜可以允許養(yǎng)分、的多孔膜套，該膜可以允許養(yǎng)分、水、水、O2透過，而植物根系難以透過。透過，而植物根系難以透過。（2）把膜套水平埋入）把膜套水平埋入20cm深的土層中（該層植物根系分布最深的土層中（該層植物根系分布最多），套口露于地面。多），套口露于地面。（3

11、）生長一定時(shí)間后取出膜套，可獲得全株植物及其全部不）生長一定時(shí)間后取出膜套，可獲得全株植物及其全部不含土粒的根系，根系可用于各項(xiàng)研究。含土粒的根系，根系可用于各項(xiàng)研究。2優(yōu)點(diǎn)：優(yōu)點(diǎn)：（1）不需要從土壤中分離根系，避免了根系損失，特別是具）不需要從土壤中分離根系，避免了根系損失，特別是具有根系活力的幼根的損失。有根系活力的幼根的損失。（2）可獲得完整根系）可獲得完整根系（3）環(huán)境條件和栽培措施更符合田間實(shí)際）環(huán)境條件和栽培措施更符合田間實(shí)際 1213四根參數(shù)四根參數(shù) （一）根數(shù)（一）根數(shù)意義：根據(jù)主根和側(cè)根可以估計(jì)根長、根密度等意義：根據(jù)主根和側(cè)根可以估計(jì)根長、根密度等測(cè)定：直接記數(shù)、掃描分析軟

12、件測(cè)定：直接記數(shù)、掃描分析軟件（二）根重（二）根重意義：反映根的總量、植物地下部分生產(chǎn)力，不能反映根系意義：反映根的總量、植物地下部分生產(chǎn)力，不能反映根系吸收能力，特別是對(duì)于具有粗狀主根的植物吸收能力，特別是對(duì)于具有粗狀主根的植物測(cè)定：鮮重：洗凈，用吸水紙吸干，稱重測(cè)定：鮮重：洗凈，用吸水紙吸干，稱重干重：更準(zhǔn)確、實(shí)用干重：更準(zhǔn)確、實(shí)用 （三）根莖（粗細(xì)）（三）根莖（粗細(xì)）意義：了解土壤孔隙大小、根系穿透能力、用于計(jì)算根表面意義：了解土壤孔隙大小、根系穿透能力、用于計(jì)算根表面積、體積積、體積 實(shí)際中較少應(yīng)用實(shí)際中較少應(yīng)用測(cè)定：細(xì)根：顯微鏡的測(cè)微計(jì)；較粗：千分尺放大鏡測(cè)定：細(xì)根：顯微鏡的測(cè)微計(jì)；

13、較粗：千分尺放大鏡 1415（四）根長與根密度（四）根長與根密度意義：單位體積土壤中根長，即意義：單位體積土壤中根長，即根密度根密度是計(jì)算根系吸水量的最好參數(shù)。是計(jì)算根系吸水量的最好參數(shù)。根密度對(duì)養(yǎng)分有效性、吸收能力很有意義根密度對(duì)養(yǎng)分有效性、吸收能力很有意義比其它根參數(shù)更能反映養(yǎng)分吸收能力比其它根參數(shù)更能反映養(yǎng)分吸收能力測(cè)定測(cè)定（）（）直接法直接法：根系置于透明玻璃盤中，盤內(nèi)加少量水，便于將根系分散，：根系置于透明玻璃盤中，盤內(nèi)加少量水，便于將根系分散，用鑷子將根拉直，不相重疊，上壓一玻璃板，防根移動(dòng)用鑷子將根拉直，不相重疊，上壓一玻璃板，防根移動(dòng) 玻璃盤下墊一帶玻璃盤下墊一帶mm刻度的方格

14、紙刻度的方格紙統(tǒng)計(jì)各根長度統(tǒng)計(jì)各根長度（）（）直線截獲法直線截獲法：前四步同上：前四步同上不是直接計(jì)根長，而是計(jì)根與方格線交叉點(diǎn)數(shù)：根長轉(zhuǎn)換系數(shù)不是直接計(jì)根長，而是計(jì)根與方格線交叉點(diǎn)數(shù)：根長轉(zhuǎn)換系數(shù)交叉點(diǎn)數(shù)交叉點(diǎn)數(shù)方格間距方格間距（）（）根長測(cè)試儀根長測(cè)試儀（）（）計(jì)算機(jī)掃描，軟件分析計(jì)算機(jī)掃描，軟件分析 ：可同時(shí)獲得根系的各種系數(shù)：可同時(shí)獲得根系的各種系數(shù)16（五）（五）根表面積根表面積意義：表征根系吸收能力的最好參數(shù)之一意義：表征根系吸收能力的最好參數(shù)之一測(cè)定方法測(cè)定方法（）（）直接法直接法 ：直接法：測(cè)出根的平均直徑和長度，計(jì)算表面積：直接法：測(cè)出根的平均直徑和長度，計(jì)算表面積：測(cè)出體積

15、，計(jì)算表面積，測(cè)出的是根系總面積：測(cè)出體積，計(jì)算表面積，測(cè)出的是根系總面積（）（）吸附法吸附法：植物對(duì)溶質(zhì)的最初吸收具有吸附的特性，假定這：植物對(duì)溶質(zhì)的最初吸收具有吸附的特性，假定這時(shí)根系表面均勻地覆蓋了一層吸附物質(zhì)的單分子層，因此可以根時(shí)根系表面均勻地覆蓋了一層吸附物質(zhì)的單分子層，因此可以根據(jù)根系對(duì)某種物質(zhì)的吸附量來測(cè)定根系吸收面積。據(jù)根系對(duì)某種物質(zhì)的吸附量來測(cè)定根系吸收面積。 常用甲烯藍(lán)作為被吸附物質(zhì)，已知常用甲烯藍(lán)作為被吸附物質(zhì)，已知mgmg甲烯藍(lán)成單分子層時(shí)甲烯藍(lán)成單分子層時(shí)占用占用1.11.1m m2 2，由此可求出根系的總吸收面積。由此可求出根系的總吸收面積。 根系吸收飽和大概需根

16、系吸收飽和大概需1.51.5minmin，再吸附再吸附1.51.5minmin的量可表示正活的量可表示正活躍吸收面積。躍吸收面積。17（六）根體積（六）根體積意義：在表征根系活力時(shí)不常用，因?yàn)榫哂形饬x：在表征根系活力時(shí)不常用，因?yàn)榫哂形漳芰Φ母课恢饕切「?，根尖或根毛、少量粗收能力的根部位主要是小根，根尖或根毛、少量粗大根的體積與大量小根相當(dāng)。大根的體積與大量小根相當(dāng)。測(cè)定：測(cè)定：排水法排水法18第二節(jié)根際的研究方法第二節(jié)根際的研究方法 一根際一根際是指受植物根系生理活動(dòng)的影響，在物理、是指受植物根系生理活動(dòng)的影響，在物理、化學(xué)、生物特性上不同于原土體的特殊土區(qū)?；瘜W(xué)、生物特性上不同于原

17、土體的特殊土區(qū)。根際范圍很小，一般指距根表數(shù)毫米，根際范圍很小，一般指距根表數(shù)毫米，mm根際土與原土的不同：根際是土壤根際土與原土的不同：根際是土壤植物根植物根微生微生物三者相互作用的場(chǎng)所，根際養(yǎng)分、物三者相互作用的場(chǎng)所，根際養(yǎng)分、pH、Eh、分泌物分泌物、微生物等原土均有不同。、微生物等原土均有不同。研究意義：根際的變化對(duì)于根際內(nèi)營養(yǎng)物質(zhì)的轉(zhuǎn)化研究意義：根際的變化對(duì)于根際內(nèi)營養(yǎng)物質(zhì)的轉(zhuǎn)化 土壤養(yǎng)分的有效性。土壤養(yǎng)分的有效性。 作物生長發(fā)育和抗逆性作物生長發(fā)育和抗逆性19二根際研究的難點(diǎn)二根際研究的難點(diǎn) 不象其它研究，根際研究是微區(qū)研究，不象其它研究，根際研究是微區(qū)研究，難度較大，進(jìn)展緩慢，要

18、求技術(shù)條件較高，難度較大，進(jìn)展緩慢，要求技術(shù)條件較高，對(duì)微區(qū)研究的高分辨率，如何將根際土分離對(duì)微區(qū)研究的高分辨率，如何將根際土分離出來研究。出來研究。 20三研究方法三研究方法 （一）根系表面特性的研究（一）根系表面特性的研究研究概況研究概況指標(biāo)：（指標(biāo)：（1）根系陽離子交換量（）根系陽離子交換量（CEC）：）：著重于陽著重于陽離子交換能力的物理化學(xué)性質(zhì)，表面吸附量忽略了離子交換能力的物理化學(xué)性質(zhì)，表面吸附量忽略了根系生理活性與養(yǎng)分吸收的聯(lián)系。根系生理活性與養(yǎng)分吸收的聯(lián)系。因此，因此，CEC與養(yǎng)分吸收相關(guān)性不一定很好，且與陽與養(yǎng)分吸收相關(guān)性不一定很好，且與陽離子種類、作物種類影響較大離子種類、

19、作物種類影響較大 21（2）根系表觀自由空間）根系表觀自由空間“Apparent free space”養(yǎng)分離子進(jìn)入根系的兩條通道：通過細(xì)胞膜的主動(dòng)養(yǎng)分離子進(jìn)入根系的兩條通道：通過細(xì)胞膜的主動(dòng)運(yùn)輸、質(zhì)外體。運(yùn)輸、質(zhì)外體。AFS：根系內(nèi)部的細(xì)胞間隙和細(xì)胞壁微纖維中的空根系內(nèi)部的細(xì)胞間隙和細(xì)胞壁微纖維中的空隙，在植物體內(nèi)相互連通形成運(yùn)輸通道，允許水分隙，在植物體內(nèi)相互連通形成運(yùn)輸通道，允許水分和溶液自由移動(dòng)，是根系表面的延續(xù)部分，或視為和溶液自由移動(dòng)，是根系表面的延續(xù)部分，或視為“內(nèi)表面內(nèi)表面”。有研究結(jié)果表明：有研究結(jié)果表明：AFS中養(yǎng)分濃度與植物吸收養(yǎng)分中養(yǎng)分濃度與植物吸收養(yǎng)分量呈正相關(guān)。量呈

20、正相關(guān)。 222根系根系A(chǔ)FS的測(cè)定：的測(cè)定：原理：低溫原理：低溫4度下，根系生理活性基本停滯，此時(shí)放度下，根系生理活性基本停滯，此時(shí)放入蒸餾水中根系入蒸餾水中根系A(chǔ)FS中的養(yǎng)分只能向外擴(kuò)散。中的養(yǎng)分只能向外擴(kuò)散。測(cè)定一定時(shí)間平衡后擴(kuò)散出的養(yǎng)分多少即代表該養(yǎng)分測(cè)定一定時(shí)間平衡后擴(kuò)散出的養(yǎng)分多少即代表該養(yǎng)分的的AFS。方法：營養(yǎng)液培養(yǎng)的根系或從土壤中清洗出的根系，方法：營養(yǎng)液培養(yǎng)的根系或從土壤中清洗出的根系，洗凈后吸水紙吸去多余水分，稱一定量根，加入洗凈后吸水紙吸去多余水分，稱一定量根，加入20倍倍量的水，于量的水，于4度冰箱中浸提度冰箱中浸提2小時(shí)后，測(cè)定溶液中養(yǎng)分小時(shí)后，測(cè)定溶液中養(yǎng)分量。量

21、。 23（二）根際土壤特性的研究方法（二）根際土壤特性的研究方法 根際土壤受根系活動(dòng)（呼吸、分泌物、根際土壤受根系活動(dòng)（呼吸、分泌物、吸收養(yǎng)分）影響，其吸收養(yǎng)分）影響，其pH、Eh、O2、水分、土水分、土壤養(yǎng)分?jǐn)?shù)量及形態(tài)部分有所不同。壤養(yǎng)分?jǐn)?shù)量及形態(tài)部分有所不同。研究它們的變化，有助于理解根系生理研究它們的變化，有助于理解根系生理活動(dòng)，特別是逆境條件（如缺素、過量）作活動(dòng)，特別是逆境條件（如缺素、過量）作物反應(yīng)機(jī)制。物反應(yīng)機(jī)制。 241根際土的直接采集法 （1）原理：根據(jù)土壤與根系粘著程度不同，將其分）原理：根據(jù)土壤與根系粘著程度不同，將其分為根面土、根際土和非根際土。為根面土、根際土和非根際

22、土。根面土：距根面約根面土：距根面約0-2mm。緊密附著于根面。緊密附著于根面。根際土：距根面約根際土：距根面約1-4mm，松散粘附于根面。松散粘附于根面。非根際土：距根面非根際土：距根面4mm以上，手工很容易抖落下來以上，手工很容易抖落下來。（2）應(yīng)用：可研究根際微域內(nèi)存在的有效養(yǎng)分虧缺）應(yīng)用：可研究根際微域內(nèi)存在的有效養(yǎng)分虧缺狀況。狀況。（3）優(yōu)缺點(diǎn)：方法簡單、方便，不需特殊設(shè)備，可）優(yōu)缺點(diǎn)：方法簡單、方便，不需特殊設(shè)備，可直接用于田間，但較粗放，不精確。直接用于田間，但較粗放，不精確。252根際土壤的冰凍切片法根際土壤的冰凍切片法 方法要點(diǎn)：方法要點(diǎn)：（1）集束平面根的培育：有機(jī)玻璃盆內(nèi)

23、裝營養(yǎng)液，上端置一漏斗形框架，內(nèi)）集束平面根的培育：有機(jī)玻璃盆內(nèi)裝營養(yǎng)液，上端置一漏斗形框架，內(nèi)放尼龍網(wǎng)，密集播入放尼龍網(wǎng)，密集播入30粒種子，一個(gè)月后，玻璃盆中形成平面根。粒種子，一個(gè)月后，玻璃盆中形成平面根。（2）土塊制備：供試土樣過）土塊制備：供試土樣過100目篩，稱取一定量裝入長方形有機(jī)玻璃盒，目篩，稱取一定量裝入長方形有機(jī)玻璃盒，將開口處土壤蒙上一隔將開口處土壤蒙上一隔膜膜，其可讓水分養(yǎng)分自由通過，根系無法通過。，其可讓水分養(yǎng)分自由通過，根系無法通過。（3）根際土的形成：將制好的土盆隔膜面與集束根平面緊密接觸，放入盆缽）根際土的形成：將制好的土盆隔膜面與集束根平面緊密接觸，放入盆缽中

24、，再充以石英砂或土壤，溫室中培養(yǎng)不多于中，再充以石英砂或土壤，溫室中培養(yǎng)不多于20天天（4）土壤冰凍切片法制備：取出有機(jī)玻璃盆中土壤，液氮速凍，切片機(jī)上切）土壤冰凍切片法制備：取出有機(jī)玻璃盆中土壤，液氮速凍，切片機(jī)上切成成1mm厚薄以供分析。厚薄以供分析。優(yōu)缺點(diǎn)：嚴(yán)格地解決了不同層次微區(qū)土壤的區(qū)分、可定量研究各種養(yǎng)分、水優(yōu)缺點(diǎn)：嚴(yán)格地解決了不同層次微區(qū)土壤的區(qū)分、可定量研究各種養(yǎng)分、水分在根土界面移動(dòng)規(guī)律。分在根土界面移動(dòng)規(guī)律。只能進(jìn)行短期試驗(yàn)、獲得土壤樣品量有限。只能進(jìn)行短期試驗(yàn)、獲得土壤樣品量有限。 263放射性自顯影法 （1）方法：）方法：獲得同位素標(biāo)記過土壤的根際薄片土層；獲得同位素標(biāo)

25、記過土壤的根際薄片土層；薄層與薄層與x光膠片接觸、曝光，記錄下薄層不同部位的光膠片接觸、曝光，記錄下薄層不同部位的放射性；放射性；沖洗沖洗x光膠片、顯影：曝光點(diǎn)即為待測(cè)養(yǎng)分分布區(qū)，光膠片、顯影：曝光點(diǎn)即為待測(cè)養(yǎng)分分布區(qū)，曝光深淺反映養(yǎng)分離子含量多少。曝光深淺反映養(yǎng)分離子含量多少。（2）特點(diǎn)）特點(diǎn)可以定位放射示蹤劑在樣品中的分布可以定位放射示蹤劑在樣品中的分布定量上誤差較大，只能作相對(duì)定量定量上誤差較大，只能作相對(duì)定量只能獲得養(yǎng)分總量根念，不能測(cè)其有效性只能獲得養(yǎng)分總量根念，不能測(cè)其有效性274微電極法 微電極：原理與普通電極一樣，其體積小，特別是其敏感尖端微電極：原理與普通電極一樣，其體積小，

26、特別是其敏感尖端直徑以直徑以u(píng)m計(jì)，若直徑小于計(jì)，若直徑小于0.5um為超微電極，最小可達(dá)為超微電極，最小可達(dá)0.04um。微電極可以測(cè)量微區(qū)的微電極可以測(cè)量微區(qū)的pH、Eh、電導(dǎo)、養(yǎng)分（離子選擇電極電導(dǎo)、養(yǎng)分（離子選擇電極）等。）等。應(yīng)用：可以測(cè)定土壤各部位，包括根際中的電化學(xué)性質(zhì)，有時(shí)應(yīng)用：可以測(cè)定土壤各部位，包括根際中的電化學(xué)性質(zhì)，有時(shí)也可以用于植物組織甚至細(xì)胞中性質(zhì)測(cè)定。也可以用于植物組織甚至細(xì)胞中性質(zhì)測(cè)定。優(yōu)點(diǎn)：可以在原位連續(xù)測(cè)定根際微區(qū)的養(yǎng)分環(huán)境狀況，減少則優(yōu)點(diǎn)：可以在原位連續(xù)測(cè)定根際微區(qū)的養(yǎng)分環(huán)境狀況，減少則取樣、提取分析等帶來的誤差；取樣、提取分析等帶來的誤差； 操作方便，易實(shí)

27、現(xiàn)自動(dòng)化。操作方便，易實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化。285電子探針法 （1）方法簡介：利用高速電子束轟擊試樣表面的微小區(qū)域時(shí)，）方法簡介：利用高速電子束轟擊試樣表面的微小區(qū)域時(shí)，入射電子透入試樣內(nèi)部與其作用，使其內(nèi)部原子受激發(fā)，然后入射電子透入試樣內(nèi)部與其作用，使其內(nèi)部原子受激發(fā)，然后釋放出特征釋放出特征x射線，不同元素發(fā)射的射線，不同元素發(fā)射的x射線不同，通過測(cè)定射線不同，通過測(cè)定x射線射線波長及強(qiáng)度，可以判定元素的波長及強(qiáng)度，可以判定元素的種類和數(shù)量種類和數(shù)量。（2）應(yīng)用：是一種電子顯微分析技術(shù)）應(yīng)用：是一種電子顯微分析技術(shù) 可以在不破壞樣品情況下進(jìn)行準(zhǔn)確定位分析；可以分析某可以在不破壞樣品情況下進(jìn)行準(zhǔn)確定

28、位分析；可以分析某元素的分布；可以同時(shí)測(cè)定從硼到鈾的所有元素，處于研究元元素的分布；可以同時(shí)測(cè)定從硼到鈾的所有元素，處于研究元素間相互關(guān)系，不象自顯影素間相互關(guān)系，不象自顯影需放射性元素；靈敏度高：可需放射性元素；靈敏度高：可達(dá)達(dá)10-15-10-18.6.根際微生物：種類數(shù)量根際微生物：種類數(shù)量7 根系分泌物：根系分泌物：29第三節(jié)第三節(jié) VA菌根的研究方法菌根的研究方法 一菌根的種類與分布一菌根的種類與分布菌根菌根真菌與植物根聯(lián)合組成的共質(zhì)體真菌與植物根聯(lián)合組成的共質(zhì)體目前已知能在根部形成菌根的植物有目前已知能在根部形成菌根的植物有2000多種（草木本），能多種（草木本），能在植物根部形成

29、菌根的真菌種類也很多。一般分為內(nèi)生菌根及在植物根部形成菌根的真菌種類也很多。一般分為內(nèi)生菌根及外生菌根。外生菌根。1外生菌根：大量菌絲纏繞根表面，形成緊密的菌絲鞘套，同外生菌根：大量菌絲纏繞根表面，形成緊密的菌絲鞘套，同時(shí)，部分菌絲伸入根組織外皮層細(xì)胞間隙，構(gòu)成菌絲網(wǎng)絡(luò)，成時(shí)，部分菌絲伸入根組織外皮層細(xì)胞間隙，構(gòu)成菌絲網(wǎng)絡(luò)，成為真菌與寄主物質(zhì)交換的場(chǎng)所。寄主主要是一些林木，如松科為真菌與寄主物質(zhì)交換的場(chǎng)所。寄主主要是一些林木，如松科、柏科、樺木科等、柏科、樺木科等2內(nèi)生菌根：包括內(nèi)生菌根：包括VA菌根、蘭科菌根、杜鵑花科菌根，其中菌根、蘭科菌根、杜鵑花科菌根，其中VA菌根最主要。菌根最主要。3

30、0VA菌根真菌菌絲著生于根組織皮層細(xì)胞間隙或寄入細(xì)胞菌根真菌菌絲著生于根組織皮層細(xì)胞間隙或寄入細(xì)胞之中，但不進(jìn)入內(nèi)皮層和中柱，一些菌絲伸出根外與土壤接之中，但不進(jìn)入內(nèi)皮層和中柱，一些菌絲伸出根外與土壤接觸，皮層組織內(nèi)的菌線未端可以反復(fù)二叉分枝，形成叢枝，觸，皮層組織內(nèi)的菌線未端可以反復(fù)二叉分枝，形成叢枝，在細(xì)胞內(nèi)或細(xì)胞間的菌絲可以膨大成為直徑約在細(xì)胞內(nèi)或細(xì)胞間的菌絲可以膨大成為直徑約50um的泡囊，的泡囊，稱為稱為“泡囊泡囊叢枝菌根叢枝菌根”，Vesicular_ Arbuscular_ Mycorrhiza，簡稱簡稱VA菌根。菌根。其寄主很廣泛，尤其是禾本科，豆科，除十字花科（如其寄主很廣泛

31、，尤其是禾本科，豆科，除十字花科（如油菜）和藜科（如甜菜）外，大多農(nóng)作物都能形成菌根，油菜）和藜科（如甜菜）外，大多農(nóng)作物都能形成菌根，VA菌根的菌根的Fungus與寄主植物無嚴(yán)格專一性。與寄主植物無嚴(yán)格專一性。311.根瘤菌；2.根瘤菌入侵根毛；3.根瘤菌穿過皮層細(xì)胞；4.切面 32二二VA菌根在植物營養(yǎng)中的作用菌根在植物營養(yǎng)中的作用 1菌根擴(kuò)大了根系吸收面積，明顯增加植物對(duì)養(yǎng)分吸收，菌根擴(kuò)大了根系吸收面積，明顯增加植物對(duì)養(yǎng)分吸收，特別是土壤中移動(dòng)性較差的磷素，特別是土壤中移動(dòng)性較差的磷素，機(jī)理：菌絲吸機(jī)理：菌絲吸P的的Km小，可以在很低小，可以在很低P濃度溶液中吸濃度溶液中吸P，菌絲菌絲表

32、成的磷酸酶促進(jìn)有機(jī)磷水解，菌根改變陰表成的磷酸酶促進(jìn)有機(jī)磷水解，菌根改變陰/陽離子吸收平衡陽離子吸收平衡，引起，引起pH改變。改變。對(duì)遷移較慢的對(duì)遷移較慢的S、Cu、Zn、Ca、Fe等也有增加吸收的功能。等也有增加吸收的功能。2有利于豆科作物結(jié)瘤固氮：在嚴(yán)重缺磷土壤，若無菌有利于豆科作物結(jié)瘤固氮：在嚴(yán)重缺磷土壤，若無菌根，三葉草不能結(jié)瘤。根，三葉草不能結(jié)瘤。3菌根對(duì)某些重金屬（菌根對(duì)某些重金屬（Zn、Mg）的吸收有抑制作用的吸收有抑制作用334抗逆性：病、旱、高溫、鹽。抗逆性：病、旱、高溫、鹽。5環(huán)境條件對(duì)真菌侵染的影響：環(huán)境條件對(duì)真菌侵染的影響：pH、養(yǎng)分含量養(yǎng)分含量6其它微生物與菌根真菌的

33、協(xié)同或拮抗作用其它微生物與菌根真菌的協(xié)同或拮抗作用7菌根真菌的生物學(xué)特性：菌根真菌的生物學(xué)特性：VA菌根在脫離宿主植物菌根在脫離宿主植物條件下還不能單獨(dú)進(jìn)行純培養(yǎng)基繁育，如何通過人工條件下還不能單獨(dú)進(jìn)行純培養(yǎng)基繁育，如何通過人工培養(yǎng)基擴(kuò)大繁殖是該領(lǐng)域的一個(gè)前沿課題。培養(yǎng)基擴(kuò)大繁殖是該領(lǐng)域的一個(gè)前沿課題。34三三VA菌根的研究內(nèi)容菌根的研究內(nèi)容 1選擇侵染力強(qiáng)的高效菌種：不同選擇侵染力強(qiáng)的高效菌種：不同VA菌根真菌對(duì)作物侵染程菌根真菌對(duì)作物侵染程度不一，對(duì)缺度不一，對(duì)缺P或固或固P嚴(yán)重土壤可能產(chǎn)生明顯增產(chǎn)效果。嚴(yán)重土壤可能產(chǎn)生明顯增產(chǎn)效果。2宿主對(duì)菌根的依賴性：宿主對(duì)菌根的依賴性：指標(biāo)：（帶菌根

34、的植物干重指標(biāo)：（帶菌根的植物干重?zé)o菌根植物干重）無菌根植物干重）/帶菌根植物帶菌根植物干重干重*100最高：具粗根胡蘿卜很高：豆科、韭、洋蔥最高：具粗根胡蘿卜很高：豆科、韭、洋蔥較低：馬鈴薯、蕃茄很低：燕麥、小麥較低：馬鈴薯、蕃茄很低：燕麥、小麥為零：包心菜、甜菜為零：包心菜、甜菜植物接種菌根提高作物產(chǎn)量的先決條件：植物接種菌根提高作物產(chǎn)量的先決條件：缺磷土壤，對(duì)菌根依賴性大的作物，土壤中原來缺少菌根或原缺磷土壤，對(duì)菌根依賴性大的作物，土壤中原來缺少菌根或原有菌根效率低。有菌根效率低。35四研究方法四研究方法 （一）孢子的提取（一）孢子的提取VA菌根的繁殖體包括：孢子、孢子果、泡囊、菌絲等菌

35、根的繁殖體包括：孢子、孢子果、泡囊、菌絲等它們?nèi)魏我粋€(gè)或多個(gè)均可對(duì)植物根部進(jìn)行侵染；多種繁殖體構(gòu)成它們?nèi)魏我粋€(gè)或多個(gè)均可對(duì)植物根部進(jìn)行侵染；多種繁殖體構(gòu)成“混合繁殖體混合繁殖體”，其侵染速度快；但不易獲得，其侵染速度快；但不易獲得“純純”種，為了獲種，為了獲得純種，常提取得純種，常提取VA的孢子進(jìn)行接種，而菌絲等易與其它真菌混的孢子進(jìn)行接種，而菌絲等易與其它真菌混淆。淆。由于目前由于目前VA菌根真菌脫離宿主植物均無法進(jìn)行單獨(dú)培養(yǎng)，故要菌根真菌脫離宿主植物均無法進(jìn)行單獨(dú)培養(yǎng)，故要獲得該真菌必須從種殖了宿主植物的田間或溫室盆栽土壤中提供獲得該真菌必須從種殖了宿主植物的田間或溫室盆栽土壤中提供。 361濕篩和傾注法濕篩和傾注法土壤土壤1升水升水?dāng)嚢韬蟪两禂?shù)秒攪拌后沉降數(shù)秒上部懸濁液上部懸濁液粗土篩（孔粗土篩（孔徑徑500-800um，除去不沉降的大有機(jī)質(zhì)顆粒）除去不沉降的大有機(jī)質(zhì)顆粒）攪拌后細(xì)篩（攪拌后細(xì)篩（38