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1、一、實驗?zāi)康模?. 學(xué)習(xí)蛙坐骨神經(jīng)干標(biāo)本的制備2. 觀察坐骨神經(jīng)干的雙相動作電位波形,并測定最大刺激強度3. 測定坐骨神經(jīng)干雙相動作電位的傳導(dǎo)速度4. 學(xué)習(xí)絕對不應(yīng)期和相對不應(yīng)期的測定方法5. 觀察機械損傷或局麻藥對神經(jīng)興奮和傳導(dǎo)的影響二、實驗材料1. 實驗對象:牛蛙2. 實驗藥品和器材:任氏液,2%普魯卡因,各種帶USB接口或插頭的連接導(dǎo)線,神經(jīng)屏蔽盒,蛙板,玻璃分針,粗剪刀,眼科剪,眼科鑷,培養(yǎng)皿,燒杯,滴管,蛙毀髓探針,BL-420N系統(tǒng)三、主要方法和步驟:1. 搗毀腦脊髓2. 分離坐骨神經(jīng)3. 安放引導(dǎo)電極4. 安放刺激電極5. 啟動試驗系統(tǒng)6. 觀察記錄7. 保存8. 編輯輸出四、實
2、驗結(jié)果和討論1. 觀察神經(jīng)干雙相動作電位引導(dǎo)(單通道,單刺激)如圖,觀察到一個雙相動作電位波形。2. 神經(jīng)干雙相動作電位傳導(dǎo)速度測定(雙通道,單刺激)(1) 選擇“神經(jīng)骨骼肌實驗”“傳導(dǎo)速度測定”(2) 改變單刺激強度(3) 傳導(dǎo)速度 = 傳導(dǎo)距離(R1-R2-)/傳導(dǎo)時間(t2-t1)如圖所示,兩個波峰之間的傳導(dǎo)時間 t = (t2-t1) = 0.66ms實驗中,我們設(shè)定在引導(dǎo)電極1和3之間的距離 R = (R1-R2-) = 1cm故傳導(dǎo)速度v = R/t = 1cm / 0.66ms = 15.2 m/s3. 神經(jīng)干雙相動作電位不應(yīng)期觀察由上圖可知,當(dāng)刺激間隔時間為4.61ms時,兩雙
3、相動作電位開始融合,此時為總不應(yīng)期;當(dāng)刺激間隔時間為1.05ms時,雙相動作電位完全融合,此時為絕對不應(yīng)期。故相對不應(yīng)期 = 總不應(yīng)期 絕對不應(yīng)期 = 4.61ms 1.05ms = 3.56ms4. 普魯卡因?qū)ι窠?jīng)沖動傳導(dǎo)的阻滯作用如圖所示,在兩通道之間滴加普魯卡因后,兩雙相電位間的波峰間隔時間為1.03ms,由引導(dǎo)電極之間的間隔距離1cm,得此時傳導(dǎo)速度:V1 = 1cm/1.03ms = 9.71 m/s5. 機械損傷對坐骨神經(jīng)干雙向動作電位的影響由圖可知,當(dāng)剪斷兩引導(dǎo)電極之間的神經(jīng)干時,第二通道的雙相動作電位消失。故機械損傷對神經(jīng)動作電位傳導(dǎo)的阻滯作用比局麻藥強。6. 實驗注意事項a) 牛蛙腓腸肌后的神經(jīng)干分支較難找,可以適當(dāng)剪開周圍軟組織輔助找到。b) 每隔一段時間,記得給神經(jīng)干(及未分離時的周圍軟組織)滴加任氏液以盡量保持組織的活性。c) 分離出的神經(jīng)要盡量長,以保證實驗數(shù)據(jù)的完整性。d) 滴加普魯卡因時,液滴可能會垂在神經(jīng)干上的兩個引導(dǎo)電極之間,此時可以用滴管將其引流到神經(jīng)干末端
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