6種常用抗菌中藥對3株常見病原性細菌的抑菌作用檢測(一)

1、6 種常用抗菌中藥對3 株常見病原性細菌的抑菌作用檢測(一)作者：薛建江喬海霞劉進軍季建軍張玉妥邱景富【摘要】目的 :建立抗菌中藥對臨床常見病原性細菌抑菌作用的檢測方法。方法 :選擇 6 種常用抗菌中藥（黃連、苦參、連翹、大黃、生地、知母 )，分別采用水提法制備至質(zhì)量濃度 1mg/L。應(yīng)用液體稀釋法測定上述中藥對金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌和銅綠假單胞菌的最低抑菌濃度 (MIC)。結(jié)果 :建立了中藥抑菌作用的檢測方法。黃連、大黃與連翹抑制細菌的作用較強， MIC 值均 0.05mg/L，其中黃連對金黃色葡萄球菌的抑菌作用最強（ MIC 值為 0.00625mg/L）。結(jié)論 :應(yīng)用本方法可以進行中

2、藥抑菌作用的檢測。 抗菌中藥對所試驗菌種表現(xiàn)不同的抑菌作用?！娟P(guān)鍵詞】中草藥；微生物敏感性試驗；抗菌藥；細菌【ABSTRACT】Objective:Toestablishamethodtodetecttheantibacterialactivityoftraditionalchinesemedicineagainstpathegenicbacteria.Methods:Sixvarietiesoftraditionalchinesemedicine(Coptisetc)wereselectedandextractedwithpurewatertomakeconcentratedwith1mg/

3、L.Threedifferentcommonpathogenicbacteriawereusedtodeterminetheminimalinhibitoryconcentration(MIC)invitrowithliquiddilutionmethodtotheselectedmedicine.Results:Themethodswereestablishedtodetecttheantibacterialactivityoftraditionalchinesemedicine.Threeherbshadinhibitioneffectsonthestrainsoftest,amongwh

4、ichCoptisChinesishadthestrongesteffectandMICwas0.00625g/mLtoStaphylococcusaureus.Conclusion:Themethodscanserveasareferencefortheantibacterialactivityoftraditionalchinesemedicine.Thedegreeofinhibitioneffectfordifferenttraditionalchinesemedicineondifferentbacteriaweredifferent.【KEYWORDS】ChineseHerb,Mi

5、crobialSensitivityTests中藥幾千年來為中國人民的健康做出了重大貢獻，在現(xiàn)代預(yù)防和控制細菌性感染疾病中也發(fā)揮了積極作用。應(yīng)用中藥進行抗感染治療具有副作用小，藥物來源廣泛，價格低廉等優(yōu)勢 1，2。在清熱解毒抗菌類中藥中開發(fā)抗菌藥物具有良好的應(yīng)用前景。長期以來，對于抗菌中藥作用機理的較少認識限制了其在臨床中的應(yīng)用。目前，尚無統(tǒng)一規(guī)范的中藥抗菌作用評價方法。為此，本研究擬應(yīng)用抗生素最小抑菌濃度檢測方法，檢測 6 種常用抗菌中藥（大黃、苦參、連翹、黃連、生地、知母）對三種常見病原性細菌（金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、銅綠假單胞菌）的抑菌作用，建立一種可以規(guī)范的中藥抗菌作用檢測方法。1

6、 材料與方法1.1 菌株的選擇選擇三種不同病原性細菌的標準株：包括金黃色葡萄球菌ATCC29213，銅綠假單胞菌ATCC27853，大腸埃希菌ATCC29523作為受試菌株，以上菌株全部購自中國藥品生物制品檢定所。1.2 中藥的選擇選擇常用的清熱解毒類中藥（大黃、苦參、連翹、黃連、生地、知母)作為本次研究所用藥物。全部藥物購自河北北方學院中醫(yī)門診部。1.3 中藥的提取分別將上述中藥置于37溫箱烘干至易于研磨為止，準確稱取50g 中藥于250mL 蒸餾水中混勻，浸泡1h，用微火加熱煮沸30min，收集煎液，用無菌濾紙過濾，繼續(xù)加水250mL，同法煎制，30min后收集。將兩次煎液收集合并，應(yīng)用加

7、熱的方法將藥液濃縮至最終質(zhì)量濃度為1g/mL3。1.4 細菌的培養(yǎng)與稀釋將選定的實驗菌株，接種普通瓊脂培養(yǎng)基35孵育 24h，進行菌落形態(tài)觀察并進行生化反應(yīng)再次鑒定后備用。菌液濃度的配制方法為，挑取菌落用 23mL 無菌生理鹽水校正至0.5 麥氏比濁單位， 使其含菌量為 1.5 ×108CFU/L。1.5MIC 的測定按美國臨床實驗室標準化委員會（NCCLS）推薦的液體稀釋法測定實驗菌株的 MIC 值，通過瓊脂平板抑菌法觀察上述不同抗菌中藥的MIC 結(jié)果。具體應(yīng)用2 倍稀釋法對藥物進行稀釋，稀釋液為Mueller Hinton液體培養(yǎng)基， 每種中草藥的劑量分別為0.100、0.050、0.025、0.0125、0.00625mg/L，在每個試管中加入1.5 × 108CFU/L的細菌 10L，35培養(yǎng) 24h，分別轉(zhuǎn)種普通平板培養(yǎng)基， 24h 后無細菌生長的試管則為 MIC。所有試驗均在不同日期重復(fù) 3 遍。2 結(jié)果中藥大黃、黃連和連翹對三種受試菌株都具有較強的體外抗菌活性，MIC 值 0.050mg/L，其中黃連對金黃色葡萄球菌的抑菌作用最強， MIC 值為 0.025mg/L。而知母、生地和苦參的抑菌作用相對較弱， MIC 值0.100mg/L，不