微生物實(shí)驗(yàn)室管理制度

1、目的：規(guī)范微生物室管理規(guī)范，以保證微生物實(shí)驗(yàn)的順利進(jìn)行。范圍：適用于微生物實(shí)驗(yàn)室依據(jù):GB/T 19489-2008實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求;執(zhí)行部門(mén)：化驗(yàn)室微生物檢驗(yàn)室職責(zé)：1。 微生物檢驗(yàn)員負(fù)責(zé)微生物實(shí)驗(yàn)室的管理. 2. 實(shí)驗(yàn)室主管負(fù)責(zé)對(duì)微生物實(shí)驗(yàn)室管理情況進(jìn)行檢查。內(nèi)容:本中心微生物實(shí)驗(yàn)室管理制度包括微生物實(shí)驗(yàn)室人員管理制度、微生物室出入管理制度、微生物室環(huán)境管理制度、微生物室的使用管理制度。微生物實(shí)驗(yàn)室藥品管理制度。1。 微生物實(shí)驗(yàn)室的人員管理1。1 微生物實(shí)驗(yàn)室由微生物檢驗(yàn)員管理及使用，其他人員須經(jīng)主管人員批準(zhǔn)后方可進(jìn)入和使用。1.2 微生物實(shí)驗(yàn)室的人員需經(jīng)過(guò)相關(guān)的培訓(xùn)。2。 微生物實(shí)

2、驗(yàn)室出入管理2。1 人員出入管理:2.1。1 人員進(jìn)入微生物實(shí)驗(yàn)室潔凈區(qū)前，需要洗手消毒；在一級(jí)緩沖室換實(shí)驗(yàn)服、戴帽子、換鞋后，進(jìn)入風(fēng)淋室，風(fēng)淋后，進(jìn)入二級(jí)緩沖室準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn).2。1。2 實(shí)驗(yàn)操作前須帶上無(wú)菌手套和口罩.2.2 物料出入管理:2。2。1 物料進(jìn)入微生物實(shí)驗(yàn)室以前，脫去外包裝或者用酒精棉球擦拭后，放置于傳遞窗中.2.2.2 物料放置于傳遞窗后，開(kāi)啟紫外0.5小時(shí)，同時(shí)將微生物實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的凈化系統(tǒng)、紫外燈打開(kāi)。2。2。3 紫外開(kāi)啟0.5小時(shí)以后，關(guān)閉紫外，并將物品轉(zhuǎn)移于實(shí)驗(yàn)操作臺(tái)上.2。2.4 實(shí)驗(yàn)完畢后，微生物實(shí)驗(yàn)室物品經(jīng)傳遞窗傳出后，經(jīng)高溫滅菌后廢液、廢物倒入廢液桶處理.3。 微生物

3、實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境管理3。1 微生物實(shí)驗(yàn)室的清潔管理微生物實(shí)驗(yàn)室的清潔分為一般清潔及徹底清潔，其具體的清潔部位、方式方法、頻率見(jiàn)下表所示：3。2 微生物實(shí)驗(yàn)室常用消毒劑及其配制4. 微生物實(shí)驗(yàn)室的使用管理4。1 微生物實(shí)驗(yàn)室使用之前,應(yīng)先開(kāi)啟微生物實(shí)驗(yàn)室自?xún)粝到y(tǒng)30分鐘。每次使用前應(yīng)用消毒液擦拭超凈工作臺(tái)及其他一切可能引起污染的死角，然后開(kāi)紫外燈滅菌30分鐘，同時(shí)開(kāi)啟超凈工作臺(tái)。操作完畢后，用消毒液擦拭臺(tái)面，做好衛(wèi)生，開(kāi)紫外燈30分鐘，并記錄紫外燈照射時(shí)間.注：當(dāng)紫外燈使用1000小時(shí)應(yīng)更換.4.2 微生物實(shí)驗(yàn)室使用時(shí)，應(yīng)同時(shí)進(jìn)行沉降菌監(jiān)測(cè)，將含有營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)皿在各監(jiān)測(cè)點(diǎn)正向放置，打開(kāi)蓋子，暴

4、露30分鐘,然后蓋上,將營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基放入3035培養(yǎng)箱培養(yǎng)48小時(shí)，觀察結(jié)果，每皿菌落數(shù)應(yīng)1個(gè),否則應(yīng)加強(qiáng)清潔消毒工作，必要時(shí)驗(yàn)證生物安全柜的性能。5. 微生物實(shí)驗(yàn)室藥品及培養(yǎng)基管理制度藥品及培養(yǎng)基是微生物試驗(yàn)的基礎(chǔ)，直接影響微生物試驗(yàn)結(jié)果.適宜的培養(yǎng)基制備方法、貯藏條件和質(zhì)量控制試驗(yàn)是提供優(yōu)質(zhì)培養(yǎng)基的保證.5.1 藥品及培養(yǎng)基的采購(gòu)及接收微生物實(shí)驗(yàn)室所用的藥品及培養(yǎng)基必須是符合國(guó)家相關(guān)資質(zhì)的公司所出產(chǎn)的。實(shí)驗(yàn)室根據(jù)檢驗(yàn)需要申購(gòu)所需的培養(yǎng)基并做好相應(yīng)的接收記錄。5。1培養(yǎng)基的接收微生物檢驗(yàn)室應(yīng)指定專(zhuān)人負(fù)責(zé)培養(yǎng)基的管理，在接收培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)核對(duì)培養(yǎng)基的品名、來(lái)源、批號(hào)、生產(chǎn)日期、有效期、數(shù)量，脫

5、水培養(yǎng)基應(yīng)附有處方和使用說(shuō)明，并做好接收記錄.5。2培養(yǎng)基的制備培養(yǎng)基可按處方配制，也可使用按處方生產(chǎn)的符合規(guī)定的脫水培養(yǎng)基。在制備培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)選擇質(zhì)量符合要求的脫水培養(yǎng)基或單獨(dú)配方組分進(jìn)行配制。脫水培養(yǎng)基應(yīng)附有處方和使用說(shuō)明，配制時(shí)應(yīng)按使用說(shuō)明上的要求操作以確保培養(yǎng)基的質(zhì)量符合要求,不得使用結(jié)塊或顏色發(fā)生改變的脫水培養(yǎng)基。脫水培養(yǎng)基或單獨(dú)配方組分應(yīng)在適當(dāng)?shù)臈l件下貯藏,如低溫、干燥和避光，所有的容器應(yīng)密封，尤其是盛放脫水培養(yǎng)基的容器.商品化的成品培養(yǎng)基除了應(yīng)附有處方和使用說(shuō)明外，還應(yīng)注明有效期、貯藏條件、適用性檢查試驗(yàn)的質(zhì)控菌和用途.為保證培養(yǎng)基質(zhì)量的穩(wěn)定可靠，各脫水培養(yǎng)基或各配方組分應(yīng)準(zhǔn)確稱(chēng)

6、量，并要求有一定的精確度。配制培養(yǎng)基最常用的溶劑是純化水，特殊情況下，可能需要用去離子水和蒸餾水。應(yīng)記錄各稱(chēng)量物的重量和水的使用量。配制培養(yǎng)基所用容器和配套器具應(yīng)潔凈，可用純化水沖洗玻璃器皿以消除清潔劑和外來(lái)物質(zhì)的殘留，對(duì)熱敏感的培養(yǎng)基如糖發(fā)酵培養(yǎng)基其分裝容器一般應(yīng)預(yù)先進(jìn)行滅菌，以保證培養(yǎng)基的無(wú)菌性。脫水培養(yǎng)基應(yīng)完全溶解于水中，再行分裝與滅菌。配制時(shí)若需要加熱助溶，應(yīng)注意不要過(guò)度加熱，以避免培養(yǎng)基顏色變深.如需要添加其他組分時(shí)，加入后應(yīng)充分混勻。應(yīng)按照生產(chǎn)商提供或使用者驗(yàn)證的參數(shù)進(jìn)行培養(yǎng)基的滅菌.商品化的成品培養(yǎng)基必須附有所用滅菌方法的資料.培養(yǎng)基滅菌一般采用濕熱滅菌技術(shù)，特殊培養(yǎng)基可采用薄膜

7、過(guò)濾除菌。培養(yǎng)基若采用不適當(dāng)?shù)募訜岷蜏缇鷹l件,有可能引起顏色變化、透明度降低、瓊脂凝固力或pH 的改變.因此，培養(yǎng)基應(yīng)采用驗(yàn)證的滅菌程序滅菌,培養(yǎng)基滅菌方法和條件，應(yīng)通過(guò)無(wú)菌性試驗(yàn)和促生長(zhǎng)試驗(yàn)進(jìn)行驗(yàn)證.此外，對(duì)高壓滅菌器的蒸汽循環(huán)系統(tǒng)也要加以驗(yàn)證，以保證在一定裝載方式下的正常熱分布。溫度緩慢上升的高壓滅菌器可能導(dǎo)致培養(yǎng)基的過(guò)熱，過(guò)度滅菌可能會(huì)破壞絕大多數(shù)的細(xì)菌和真菌培養(yǎng)基促生長(zhǎng)的質(zhì)量.滅菌器中培養(yǎng)基的容積和裝載方式也將影響加熱的速度。因此，應(yīng)根據(jù)滅菌培養(yǎng)基的特性,進(jìn)行全面的滅菌程序驗(yàn)證.應(yīng)確定每批培養(yǎng)基滅菌后的pH值（冷卻至室溫25 測(cè)定).若培養(yǎng)基處方中未列出pH 值的范圍，除非經(jīng)驗(yàn)證表明培

8、養(yǎng)基的pH 值允許的變化范圍很寬，否則,pH值的范圍不能超過(guò)規(guī)定值士0。2 。制成平板或分裝于試管的培養(yǎng)基應(yīng)進(jìn)行下列檢查：容器和蓋子不得破裂,裝量應(yīng)相同，盡量避免形成氣泡,固體培養(yǎng)基表面不得產(chǎn)生裂縫或漣漪，在冷藏溫度下不得形成結(jié)晶，不得污染微生物等.應(yīng)檢查和記錄批數(shù)量、有效期及培養(yǎng)基的無(wú)菌檢查.5。3 培養(yǎng)基的貯藏自配的培養(yǎng)基應(yīng)標(biāo)記名稱(chēng)、批號(hào)、配制日期等信息，并在已驗(yàn)證的條件下貯藏。商品化的成品培養(yǎng)基標(biāo)簽上應(yīng)標(biāo)有名稱(chēng)、批號(hào)、生產(chǎn)日期、失效期及培養(yǎng)基的有關(guān)特性，生產(chǎn)商和使用者應(yīng)根據(jù)培養(yǎng)基使用說(shuō)明書(shū)上的要求進(jìn)行貯藏，所采用的貯藏和運(yùn)輸條件應(yīng)使成品培養(yǎng)基最低限度的失去水分并提供機(jī)械保護(hù).培養(yǎng)基滅菌后

9、若貯藏在高壓滅菌器中，質(zhì)量可能會(huì)受影響，一般不提倡這種存放法。瓊脂培養(yǎng)基不得在O 或O 以下存放，因?yàn)槔鋬隹赡芷茐哪z特性。培養(yǎng)基應(yīng)避光保存,若要長(zhǎng)期保存，應(yīng)置于密閉容器中以防止水分流失。瓊脂平板最好現(xiàn)配現(xiàn)用,如置冰箱保存，一般不超過(guò)1周，且應(yīng)密閉包裝，若延長(zhǎng)保存期限，保存期需經(jīng)驗(yàn)證確定。固體培養(yǎng)基滅菌后的再融化只允許1 次，以避免因過(guò)度受熱造成培養(yǎng)基質(zhì)量下降或微生物污染。培養(yǎng)基的再融化一般采用水浴或流通蒸汽加熱。若使用微波爐,應(yīng)避免培養(yǎng)基過(guò)度受熱及水分的蒸發(fā),更要注意安全。融化的培養(yǎng)基應(yīng)置于45 50 的水浴中,不得超過(guò)8 小時(shí).傾注培養(yǎng)基時(shí),應(yīng)擦干培養(yǎng)基容器外表面的水分,避免容器外壁的水滴

10、進(jìn)人培養(yǎng)基中造成污染。使用過(guò)的培養(yǎng)基(包括失效的培養(yǎng)基)應(yīng)按照國(guó)家污染廢物處理相關(guān)規(guī)定進(jìn)行.5。4 質(zhì)量控制試驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)對(duì)試驗(yàn)用培養(yǎng)基建立質(zhì)量控制程序，以確保所用培養(yǎng)基質(zhì)量符合相關(guān)檢測(cè)的需要。實(shí)驗(yàn)室配制或商品化的成品培養(yǎng)基的質(zhì)量依賴(lài)于其制備過(guò)程，采用不適宜方法制備的培養(yǎng)基將影響微生物的生長(zhǎng)或復(fù)蘇，從而影響試驗(yàn)結(jié)果的可靠性.所有配制好的培養(yǎng)基均應(yīng)進(jìn)行質(zhì)量控制試驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)室配制的培養(yǎng)基的常規(guī)監(jiān)控項(xiàng)目是pH 、適用性檢查試驗(yàn)，定期的穩(wěn)定性檢查以確定有效期。培養(yǎng)基在有效期內(nèi)應(yīng)依據(jù)適用性檢查試驗(yàn)確定培養(yǎng)基質(zhì)量是否符合要求.有效期的長(zhǎng)短將取決于在一定存放條件下（包括容器特性及密封性）的培養(yǎng)基其組成成分的穩(wěn)定性。除藥典附錄另有規(guī)定外，在實(shí)驗(yàn)室中，若采用已驗(yàn)證的配制和滅菌程序制備培養(yǎng)基且過(guò)程受控，那么同一批脫水培養(yǎng)基的適用性檢查試驗(yàn)可只進(jìn)行1 次。如果培養(yǎng)基的制備過(guò)程未經(jīng)驗(yàn)證，那么每一批培養(yǎng)基均要進(jìn)行適用性檢查試驗(yàn),試驗(yàn)的菌種可根據(jù)培養(yǎng)基的用途從相關(guān)附錄中進(jìn)行