培養(yǎng)基適用性檢查驗(yàn)證方案

1、 編號(hào): AB/06-31-B 培養(yǎng)基適用性驗(yàn)證方案 計(jì)數(shù)培養(yǎng)基 *藥廠(chǎng)有限公司 培養(yǎng)基適用性驗(yàn)證方案標(biāo)題培養(yǎng)基適用性驗(yàn)證方案編 號(hào)AB/06-31-B頁(yè) 碼共5頁(yè)、第1頁(yè)執(zhí) 行200 年 月 日頒發(fā)部門(mén)GMP綜合辦公室分發(fā)部門(mén)行政管理辦公室分發(fā)數(shù)起草人起草日期審核人審核日期批準(zhǔn)人批準(zhǔn)日期目 錄1. 概述.22. 驗(yàn)證目的23. 驗(yàn)證的范圍24. 驗(yàn)證人員及職責(zé)25. 驗(yàn)證程序和方法26. 驗(yàn)證可接受的標(biāo)準(zhǔn)37. 驗(yàn)證步驟38. 結(jié)果分析及評(píng)價(jià)：49. 驗(yàn)證報(bào)告510. 建議.511. 最準(zhǔn)批準(zhǔn).512. 所使用的記錄.61. 驗(yàn)證目的：細(xì)菌、霉菌及酵母菌計(jì)數(shù)用的培養(yǎng)基應(yīng)進(jìn)行培養(yǎng)基的適用性檢查

2、。本次驗(yàn)證的目的是確認(rèn)營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基和玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基適合細(xì)菌、霉菌及酵母菌數(shù)測(cè)定。2. 參照標(biāo)準(zhǔn)：2010版中國(guó)藥典二部附錄XI J微生物限度檢查法。3. 驗(yàn)證項(xiàng)目：營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基和玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基的適用性檢查。4.驗(yàn)證小組人員及職責(zé)：4.1驗(yàn)證小組人員:小組人員職務(wù)姓 名所在部門(mén)職 務(wù)組 長(zhǎng)質(zhì)量部經(jīng) 理組 員質(zhì)量部QC主任組 員質(zhì)量部檢驗(yàn)員4.2驗(yàn)證人員職責(zé)及要求4.2.1按驗(yàn)證方案及相關(guān)文件實(shí)施驗(yàn)證。4.2.2認(rèn)真觀(guān)察并做好驗(yàn)證原始記錄。4.2.3對(duì)實(shí)施驗(yàn)證的結(jié)果負(fù)責(zé)。4.3驗(yàn)證中各部門(mén)的職責(zé)4.3.1驗(yàn)證領(lǐng)導(dǎo)組職責(zé)4.3.1.1制訂驗(yàn)證總計(jì)劃，負(fù)責(zé)全公司驗(yàn)證工作的管理。4.3.1.

3、2確定驗(yàn)證項(xiàng)目及驗(yàn)證項(xiàng)目負(fù)責(zé)人。4.3.1.3負(fù)責(zé)驗(yàn)證方案的批準(zhǔn)工作。4.3.1.4負(fù)責(zé)驗(yàn)證資料及結(jié)果的審核工作。4.3.1.5負(fù)責(zé)驗(yàn)證報(bào)告的批準(zhǔn)工作。4.3.2驗(yàn)證工作小組職責(zé)4.3.2.1負(fù)責(zé)驗(yàn)證方案的起草工作。4.3.2.2參與驗(yàn)證方案的討論、確認(rèn)工作。4.3.2.3負(fù)責(zé)驗(yàn)證方案的實(shí)施。4.3.2.4負(fù)責(zé)驗(yàn)證結(jié)果的分析、統(tǒng)計(jì)、報(bào)告工作。4.3.2.5參與驗(yàn)證結(jié)果的評(píng)價(jià)工作。4.3.3質(zhì)量部職責(zé)4.3.3.1負(fù)責(zé)公司驗(yàn)證日常管理工作。4.3.3.2負(fù)責(zé)驗(yàn)證方案的審核工作。4.3.3.3負(fù)責(zé)驗(yàn)證過(guò)程中儀器、儀表、計(jì)量器具的校驗(yàn)工作。4.3.3.4負(fù)責(zé)檢驗(yàn)儀器及檢驗(yàn)方法的驗(yàn)證。4.3.3.5負(fù)

4、責(zé)驗(yàn)證中各項(xiàng)檢測(cè)工作，提供驗(yàn)證的檢驗(yàn)記錄、檢驗(yàn)報(bào)告，對(duì)驗(yàn)證過(guò)程中的各項(xiàng)檢驗(yàn)工作負(fù)責(zé)。4.3.3.6負(fù)責(zé)對(duì)驗(yàn)證人員的培訓(xùn)、考核工作。4.3.3.7負(fù)責(zé)驗(yàn)證資料和報(bào)告的審核工作。4.3.3.8負(fù)責(zé)驗(yàn)證文件回收、歸檔管理工作。5. 合格標(biāo)準(zhǔn)：被檢培養(yǎng)基上的菌落平均數(shù)不小于對(duì)照培養(yǎng)基上的菌落平均數(shù)的70%，且菌落形態(tài)大小與對(duì)照培養(yǎng)基上的菌落一致。6. 試驗(yàn)材料：6.1. 被驗(yàn)證產(chǎn)品：營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基6.2. 儀器設(shè)備：6.2.1. SYQ-DSX-280B型手提式壓力蒸汽滅菌器6.2.2. SW-CJ-2A雙人凈化工作臺(tái) 6.2.3. XSW-CJ-1A單人凈化操作臺(tái) 6.2.4.

5、HZMJ型霉菌培養(yǎng)箱 (2328)6.2.5. JC303-4電熱恒溫培養(yǎng)箱 (3035)6.2.6.不銹鋼遠(yuǎn)紅外烘箱6.2.7 101-2A電熱鼓風(fēng)干燥箱6.2.8微波爐6.3. 驗(yàn)證用培養(yǎng)基 名稱(chēng)生產(chǎn)廠(chǎng)家批號(hào)營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基改良馬丁培養(yǎng)基改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)瓊脂對(duì)照培養(yǎng)基玫瑰紅鈉瓊脂對(duì)照培養(yǎng)基酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基6.4. 驗(yàn)證用菌株：(第 代)驗(yàn)證菌株培養(yǎng)基培養(yǎng)溫度培養(yǎng)時(shí)間（小時(shí)）大腸埃希菌營(yíng)養(yǎng)肉湯30351824金黃色葡萄球菌營(yíng)養(yǎng)肉湯30351824枯草芽孢桿菌營(yíng)養(yǎng)肉湯30351824白色念珠菌改良馬丁培養(yǎng)基23282448黑曲霉菌改良馬丁瓊脂培養(yǎng)

6、基232857（天）7. 菌液制備 7.1. 接種大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、與枯草芽孢桿菌的新鮮培養(yǎng)物至營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基中，于3035培養(yǎng)1824小時(shí)。取經(jīng)3035培養(yǎng)1824小時(shí)的大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、與枯草芽孢桿菌營(yíng)養(yǎng)肉湯新鮮培養(yǎng)物1ml加入到9ml0.9%無(wú)菌氯化鈉溶液中，10倍稀釋至10-610-7約為50100cfuml的菌懸液備用。7.2.接種白色念珠菌的新鮮培養(yǎng)物至改良馬丁培養(yǎng)基中，于2328培養(yǎng)2448小時(shí)。取經(jīng)2328培養(yǎng)2448小時(shí)的白色念珠菌改良馬丁液體培養(yǎng)物1ml加入到9ml0.9%無(wú)菌氯化鈉溶液中，10倍稀釋至10-5約為50100cfuml的菌懸液備用。7.3

7、.接種黑曲霉菌的新鮮培養(yǎng)物至改良馬丁瓊脂斜面培養(yǎng)基上，于2328培養(yǎng)57天，加入35ml含0.05%（ml/ml）聚山梨脂80的0.9%無(wú)菌氯化鈉溶液，將孢子洗脫。然后，用適宜方法吸出孢子懸液至無(wú)菌試管內(nèi)，用含0.05%（ml/ml）聚山梨脂80的0.9%無(wú)菌氯化鈉溶液制成每1ml含孢子數(shù)50100cfuml的菌懸液備用。8.菌液計(jì)數(shù)：（每種菌液接種2個(gè)平皿）大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌與枯草芽孢桿菌分別取1ml接種至營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基中，置3035培養(yǎng)48小時(shí)；白色念珠菌、黑曲霉分別取1ml接種至玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基，置2328培養(yǎng)72小時(shí)。菌落計(jì)數(shù)結(jié)果（2個(gè)平皿計(jì)數(shù)取平均值）見(jiàn)下表菌落計(jì)數(shù)結(jié)果（c

8、fuml）試驗(yàn)次數(shù)10-5稀釋10-6稀釋10-7稀釋123123123大腸埃希菌金黃色葡萄球菌枯草芽孢桿菌白色念珠菌黑曲霉9.適用性檢查： 9.1.取大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌的菌液（50100cfu/ml）各1ml，分別注入無(wú)菌平皿中，立即傾注營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，每株試驗(yàn)菌平行制備2個(gè)平皿，混勻，凝固，置3035培養(yǎng)48小時(shí)，計(jì)數(shù)；取白色念珠菌、黑曲霉菌的菌液（50100cfu/ml）各1ml，分別注入無(wú)菌平皿中，立即傾注玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基，每株試驗(yàn)菌平行制備2個(gè)平皿，混勻，凝固，置2328培養(yǎng)72小時(shí)，計(jì)數(shù)。9.2取大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌的菌液（50100cfu/ml）各1ml，分別注入無(wú)菌平皿中，立即傾注營(yíng)養(yǎng)瓊脂對(duì)照培養(yǎng)基，每株試驗(yàn)菌平行制備2個(gè)平皿，混勻，凝固，置3035培養(yǎng)48小時(shí)，計(jì)數(shù)；取白色念珠菌、黑曲霉菌的菌液（50100cfu/ml）各1ml，分別注入無(wú)菌平皿中，立即傾注玫瑰紅鈉瓊脂對(duì)照培養(yǎng)基，每株試驗(yàn)菌平行制備2個(gè)平皿，混勻，凝固，置2328培養(yǎng)72小時(shí)，計(jì)數(shù)。 9.3. 結(jié)果見(jiàn)附表10. 結(jié)論：附表1：計(jì)數(shù)培養(yǎng)基適用性檢查驗(yàn)證記錄試驗(yàn)時(shí)間 年 月 日 完成時(shí)間 年 月 日驗(yàn)證菌株平皿號(hào)供試品組cfuml對(duì)照培養(yǎng)基組cfum