L苯丙氨酸質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和檢驗(yàn)規(guī)程

1、目 的：規(guī)范檢驗(yàn)操作，確保檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確可靠。適用范圍：適用于L-苯丙氨酸的檢驗(yàn)。責(zé) 任 者：化驗(yàn)員。名 稱：L-苯丙氨酸（L-Phenylalanine）化學(xué)名：L-氨基-苯丙酸（L-Amino-phenylpropionic Acid）結(jié)構(gòu)式：分子式：C9H11NO2 分子量：165.19 CAS: 63-91-2一、中國藥典2005年版（CP2005）本品為L-氨基-苯丙酸。按干燥品計(jì)算，含C9H11NO2不得少于98.5%。在熱水中易溶，在水中略溶，在乙醇中不溶；在稀酸或氫氧化鈉試液中易溶。檢驗(yàn)操作規(guī)程：1.性狀：本品為白色結(jié)晶或結(jié)晶性粉末；無臭，味微苦。1.1取本品適量于白色干凈紙上

2、觀察，可輕聞其味道。 2.比旋度：本品比旋度范圍為33.0°至35.0°2.1樣品溶液：取本品1g，精密稱定至0.0001g，加水溶解并稀釋成50ml的溶液（每1ml中約含20mg的溶液）。樣品溶解一定要完全，可用超聲機(jī)助溶，溶解完溶液需澄清。2.2空白溶劑：取溶解樣品用超純水適量。2.3測定：用讀數(shù)至0.001°并經(jīng)過檢定的旋光計(jì)檢測。將測定管用空白溶劑沖洗數(shù)次，緩緩注入空白溶劑適量（注意勿使發(fā)生氣泡，測定管兩端的玻璃鏡片要擦拭干凈），置于旋光計(jì)內(nèi)校正讀數(shù)，即空白溶劑的旋光度要為0。校正完畢以后用相同的方法檢測樣品溶液并記錄下來，用同法讀取旋光度3次，取3次的平

3、均數(shù)。2.4計(jì)算： 比旋度V×L× m× （1W）式中：V稀釋倍數(shù)；所測旋光度的均值；L測定用管的長度（dm） m稱樣量；W樣品的干燥失重量2.5以上溶液及測定的過程一定要調(diào)節(jié)溫度至20±0.53.鑒別：本品的紅外光吸收?qǐng)D譜應(yīng)與對(duì)照的圖譜(光譜集983圖)一致。4.酸度：本品的pH值應(yīng)為5.46.0。4.1pH計(jì)校正用標(biāo)準(zhǔn)緩沖液的配置。鄰苯二甲酸氫鉀標(biāo)準(zhǔn)緩沖液（pH4.0）：精密稱取在115±5干燥23小時(shí)的鄰苯二甲酸氫鉀KHC8H4O410.21g，加水使溶解并稀釋至1000ml。 磷酸鹽標(biāo)準(zhǔn)緩沖液（pH6.8）：精密稱取在115±

4、5干燥23小時(shí)的無水磷酸氫二鈉3.55g與磷酸二氫鉀3.40g，加水使溶解并稀釋至1000ml。4.1.3硼砂標(biāo)準(zhǔn)緩沖液（pH9.2）：精密稱取硼砂Na2B4O7·10H2O3.81g（注意：避免風(fēng)化），加水使溶解并稀釋至1000ml，置聚乙烯塑料瓶中，密塞，避免與空氣中二氧化碳接觸。4.2pH計(jì)的校正：取鄰苯二甲酸氫鉀標(biāo)準(zhǔn)緩沖液對(duì)儀器進(jìn)行校正，使儀器示值與表列數(shù)值一致。溫度鄰苯二甲酸氫鉀標(biāo)準(zhǔn)緩沖液磷酸鹽標(biāo)準(zhǔn)緩沖液（pH6.8）硼砂標(biāo)準(zhǔn)緩沖液04.016.989.6454.006.959.40104.006.929.33154.006.909.28204.006.889.23254.

5、016.869.18304.026.859.14354.026.849.10404.046.849.07454.056.839.04504.066.839.01554.086.838.99604.096.848.96儀器校正后，再用磷酸鹽標(biāo)準(zhǔn)緩沖液核對(duì)儀器示值，誤差應(yīng)不大于±0.02pH單位。若大于此偏差，則應(yīng)小心調(diào)節(jié)斜率，使示值與磷酸鹽標(biāo)準(zhǔn)緩沖液的表列數(shù)值相符。重復(fù)上述定位與斜率調(diào)節(jié)操作，至儀器示值與標(biāo)準(zhǔn)緩沖液的規(guī)定數(shù)值相差不大于0.02pH單位，否則，須檢查儀器或更換電極后再行校正至符合要求。4.3樣品的測定：樣品液的配制：取本品0.20g，加水20ml完全溶解后，待測。測定法：

6、將已校正好的pH計(jì)電極帽輕輕取下，用純化水充分洗滌電極，然后用濾紙將水吸盡，將電極放入所測樣品溶液中，輕輕攪動(dòng)10s后讓它靜止并觀察讀數(shù)的變化，待穩(wěn)定后即可記錄數(shù)據(jù)。5.透光率：在430nm的波長處測定透光率，不得低于98.0%。5.1配套吸收池的校正：將儀器調(diào)至波長430nm，開機(jī)預(yù)熱約30分鐘。用純化水潤洗吸收池35次后，裝入純化水約4/5后用擦鏡紙將吸收池兩邊的光滑面擦拭干凈，在“A”狀態(tài)下調(diào)“0”，在“T”狀態(tài)下調(diào)“100%”將另一吸收池也用純化水潤洗吸收池35次后，裝入溶劑約4/5后同樣用擦鏡紙將吸收池兩邊的光滑面擦拭干凈，在相同波長測定透光率，透光率應(yīng)在99.8%100.2%之間，

7、如不在此范圍，須把吸收池用洗液浸泡5分鐘后，用水洗凈，重復(fù)以上操作符合規(guī)定后，方可進(jìn)行下一步檢測。5.2樣品液的配置：取本品0.50g，加純化水25ml完全溶解后，待測。5.3樣品的測定：將儀器調(diào)至所需狀態(tài)下即“T”（測透光率）。用溶解好的樣品液潤洗第二個(gè)吸收池35次后，裝入溶劑約4/5后用擦鏡紙將吸收池兩邊的光滑面擦拭干凈然后放入槽中進(jìn)行檢測，每檢測一批樣須驗(yàn)證儀器是否處于正常狀態(tài)，最后讀取數(shù)據(jù)。6.干燥失重：減失重量不得過0.2%6.1扁型稱量瓶的恒重：取扁型稱量瓶，在105干燥1小時(shí)，取出置干燥器冷卻至室溫（約30分鐘），精密稱重后，再置105干燥1小時(shí)，取出置干燥器冷卻至室溫（約30分

8、鐘），精密稱重，直至連續(xù)兩次干燥后稱重的差異在0.3mg以下，方可進(jìn)行以下步驟。6.2檢測法：取供試品，混合均勻。分取約1g，置于105下干燥至恒重的扁形稱瓶中（供試品干燥時(shí)，應(yīng)平鋪在扁形稱瓶中，厚度不可超過5mm）精密稱定。放入烘箱進(jìn)行干燥時(shí)，應(yīng)將瓶蓋半開進(jìn)行干燥，3個(gè)小時(shí)后取出。取出時(shí)，須將稱瓶蓋好。置烘箱內(nèi)干燥的供試品，應(yīng)在干燥后取出置干燥器放冷至室溫（約30分鐘），然后稱定重量。稱定扁形稱量瓶和供試品以及干燥后的恒重，均應(yīng)準(zhǔn)確至0.1mg位。6.3計(jì)算： 干燥失重%W1W2×100%W1W0式中：W0空瓶重(g); W1供試品+瓶重(g); W2干燥后供試品+瓶重(g)7.

9、熾灼殘?jiān)哼z留殘?jiān)坏眠^0.1%7.1坩堝的恒重：將坩堝在600熾灼3小時(shí)，取出置干燥器冷卻至室溫（約60分鐘），精密稱重后，再置600熾灼2小時(shí)，取出置干燥器冷卻至室溫（約60分鐘），精密稱重，直至連續(xù)兩次干燥后稱重的差異在0.3mg以下，方可進(jìn)行以下步驟。7.2樣品的測定：取供試品2.0g，置已熾灼至恒重的坩堝中，精密稱定，在電爐上緩緩熾灼至完全炭化，放冷至室溫；加硫酸0.51ml使?jié)駶?，低溫加熱至硫酸蒸氣除盡后，再放入600的高溫爐中熾灼使完全灰化，3個(gè)小時(shí)后關(guān)閉高溫爐待爐溫降至300左右再移置干燥器內(nèi)，放冷至室溫，精密稱定后，再在600熾灼至恒重，即得。7.3計(jì)算： 熾灼殘?jiān)?W2W0

10、×100%W1W0式中：W0空坩堝重(g); W1供試品+坩堝重(g); W2熾灼后供試品+坩堝重(g)8.重金屬：含重金屬不得過百萬分之十。8.1試劑的配制：標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液的制備：稱取在105干燥至恒重硝酸鉛0.160g，置1000ml量瓶中，加硝酸 5ml與水50ml溶解后，用水稀釋至刻度，搖勻，作為貯備液。臨用前，精密量取貯備液10ml，置100ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，即得（每1ml相當(dāng)于10g的Pb）。配制與貯存用的玻璃容器均不得含鉛。氨試液：取濃氨溶液400ml，加水使成1000ml，即得醋酸鹽緩沖液：取醋酸銨25g，加水25ml溶解后，加7mol/L鹽酸溶液38ml

11、，用2mol/L鹽酸溶液或5mol/L氨溶液準(zhǔn)確調(diào)節(jié)pH值至3.5，用水稀釋到100ml，即得。硫代乙酰胺試液：取硫代乙酰胺4g，加水使溶解成100ml，置冰箱中保存。臨用前取混合液（由1mol/L氫氧化鈉溶液15ml、水5.0ml及甘油20ml組成5.0ml，加上述硫代乙酰胺溶液1.0ml，置水浴上加熱20秒，冷卻，立即使用。8.2檢測法：取熾灼殘?jiān)?xiàng)下遺留的殘?jiān)酉跛?.5ml，蒸干，至氧化氮蒸氣除盡后，放冷，加鹽酸2ml，置水浴上蒸干后加水15ml，滴加氨試液至對(duì)酚酞指示液顯中性，再加醋酸鹽緩沖液（PH3.5）2ml，微熱溶解后，移置納氏比色管中，加水稀釋成25ml；另取配制供試品溶液

12、的試劑，置瓷皿中用同法蒸干后，加醋酸鹽緩沖液（PH3.5）2ml與水15ml，微熱溶解后，移置納氏比色管中，加標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液2.0ml，再用水稀釋成25ml；再在兩管中分別加硫代乙酰胺試液各2ml，搖勻，放置2分鐘，同置白紙上，自上向下透視，供試品管中顯出的顏色與對(duì)照品管比較，不得更深。9.砷鹽：含砷鹽不得過百萬分之一。9.1試劑的配制：標(biāo)準(zhǔn)砷溶液：精密稱取在105干燥至恒重的三氧化二砷 0.132g，置 1000ml量瓶中，加 20%氫氧化鈉溶液5ml溶解后，用適量的稀硫酸中和，再加稀硫酸 10ml，用水稀釋至刻度，搖勻，作為貯備液。臨用前，精密量取貯備液 10ml，置 1000ml量瓶中，加稀

13、硫酸 10ml，用水稀釋至刻度，搖勻，即得（每 lml相當(dāng)于1ug 的As）。碘化鉀試液：取碘化鉀16.5g，加水使溶解成100ml，即得。（本液應(yīng)臨用新制）酸性氯化亞錫試液：取氯化亞錫20g，加鹽酸使溶解成50ml，濾過，即得。（本液配成后3個(gè)月即不適用）乙醇制溴化汞試液：取溴化汞2.5g，加乙醇50ml，微熱溶解，即得。（本液應(yīng)置玻璃塞瓶內(nèi)，在暗處保存）溴化汞試紙：取質(zhì)地較疏松的中速定量濾紙條浸入乙醇制溴化汞試液中，1小時(shí)后取出，在暗處干燥，即得。（本試紙應(yīng)置棕色磨口塞玻璃瓶中保存）醋酸鉛試液：取醋酸鉛10g，加新沸過的冷水溶解后，滴加醋酸使溶液澄清，再加新沸過的冷水使成100ml，即得。

14、醋酸鉛棉花：取脫脂棉花，浸入醋酸鉛試液與水等容混合液中，濕透后，瀝去過多的溶液，并使之疏松，在100以下干燥后，置棕色磨口塞玻璃瓶中保存。9.2檢測法。標(biāo)準(zhǔn)砷斑制備。取醋酸鉛棉花（60100mg）撕成疏松狀，每次少量，用細(xì)玻璃棒均勻地裝入導(dǎo)氣管中，裝管高度為6080mm。于旋塞的頂端平面上放一片溴化汞試紙（試紙大小以能覆蓋孔徑而不露出平面外為宜），蓋上旋塞蓋并旋緊。精密量取標(biāo)準(zhǔn)砷溶液2ml，置測砷儀三角瓶中，加鹽酸5ml與水 21ml，再加碘化鉀試液 5ml與酸性氯化亞錫試液 5滴，在室溫放置 10分鐘后，加鋅粒2g，立即將照上法裝妥的導(dǎo)氣管密塞于 三角瓶上，并置2540水浴中，反應(yīng)45分鐘，

15、取出溴化汞試紙，即得。9.2.2樣品檢測取樣品2g，置測砷儀三角瓶中，照標(biāo)準(zhǔn)砷斑的制備，自“加鹽酸5ml與水 21ml”起，依法操作。將生成的砷斑與標(biāo)準(zhǔn)砷斑比較，不得更深。10.鐵鹽：含鐵量不得過百萬分之十。10.1試劑的配制：稀鹽酸（9.5%10.5%）：取鹽酸234ml，緩緩加入適量水中，邊加邊攪拌，冷卻后，加水稀釋至1000ml，搖勻，即得。硫氰酸銨試液（30%）：取硫氰酸銨30g，加水使溶解成100ml，搖勻，即得。標(biāo)準(zhǔn)鐵貯備液（100g的Fe/ml）：取硫酸鐵銨0.863g，置1000ml量瓶中，加水適量使溶解后，加硫酸2.5ml，用水稀釋至刻度，搖勻，即得。10.2樣品的檢測：稱取

16、1g樣品于小燒杯中，加水5ml，加稀鹽酸4ml使樣品溶解，加過硫酸銨0.05g，轉(zhuǎn)移至納氏比色管中，加水至35ml。最后加硫氰酸銨試液3ml，用水稀釋至50ml，搖勻，即得樣品管。精密量取0.1ml的標(biāo)準(zhǔn)鐵貯備液于納氏比色管中，加25ml水，加稀鹽酸4ml，過硫酸銨0.05g，再加硫氰酸銨試液3ml，用水稀釋至50ml，搖勻，即得標(biāo)準(zhǔn)管。在白紙上比較兩管顏色，樣品管顏色應(yīng)該淺于標(biāo)準(zhǔn)管顏色。其中兩管的操作應(yīng)同時(shí)進(jìn)行。11.硫酸鹽：含硫酸根量不得過萬分之二。11.1試劑的配制：稀鹽酸（9.5%10.5%）：取鹽酸234ml，緩緩加入適量水中，邊加邊攪拌，冷卻后，加水稀釋至1000ml，搖勻，即得。

17、氯化鋇試液（25%）：取氯化鋇的細(xì)粉25g，加水使溶解成100ml，搖勻，即得。標(biāo)準(zhǔn)硫酸鉀溶液（100g的SO4/ml）：取硫酸鉀0.181g，置1000ml量瓶中，加水適量使溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得。11.2樣品的檢測：稱取0.7g樣品于小燒杯中，加水5ml，加稀鹽酸2ml使樣品溶解，轉(zhuǎn)移至納氏比色管中，加氯化鋇試液5ml，用水稀釋至50ml，搖勻，放置10min即得樣品管。精密量取1.4ml的標(biāo)準(zhǔn)硫酸鉀溶液于納氏比色管中，加25ml水，加稀鹽酸2ml，加氯化鋇試液5ml，用水稀釋至50ml，搖勻后放置10min即得標(biāo)準(zhǔn)管。在黑色背景下比較兩管顏色，樣品管顏色應(yīng)該淺于標(biāo)準(zhǔn)管顏色。其中兩管

18、的操作應(yīng)同時(shí)進(jìn)行。12.氯化物：含氯離子量不得過萬分之二。12.1試劑的配制：稀硝酸（9.5%10.5%）：取硝酸105ml，緩緩加入適量水中，邊加邊攪拌，冷卻后，加水稀釋至1000ml，搖勻，即得。硝酸銀試液（0.1mol/L）：取硝酸銀17.5g，加水使溶解成1000ml，搖勻，即得。標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉貯備液（100g的Cl/ml）：取氯化鈉0.165g，置1000ml量瓶中，加水適量使溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得。12.2樣品的檢測：稱取0.3g樣品于小燒杯中，加稀硝酸10ml試樣品溶解。加水25ml后轉(zhuǎn)移至納氏比色管中，加入硝酸銀試液1ml，用水稀釋至50ml，充分搖勻，在暗處放置5min即得

19、樣品管。精密量取標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉貯備液0.6ml于納氏比色管中，加水25ml溶解，加稀硝酸10ml，加入硝酸銀試液1ml，用水稀釋至50ml，充分搖勻，在暗處放置5min即得標(biāo)準(zhǔn)管。在黑色背景下比較兩管顏色，樣品管顏色應(yīng)該淺于標(biāo)準(zhǔn)管顏色。其中兩管的操作應(yīng)同時(shí)進(jìn)行。 13.含量測定：按干燥品計(jì)算，含量不得少于98.5%。13.1試劑的配制：高氯酸滴定液(0.1mol/L)：取無水冰乙酸7500ml，加入高氯酸（70%72%）85ml，搖勻，在室溫下緩緩滴加醋酐230ml，邊加邊搖，加完后再振搖均勻，放冷，加無水冰乙酸適量使成10000ml,搖勻，放置24小時(shí)，即得。然后再用已經(jīng)干燥至恒重的鄰苯二甲酸氫

20、鉀標(biāo)定具體濃度。結(jié)晶紫指示液：取結(jié)晶紫0.5 g，加冰乙酸100ml使溶解，搖勻，即得。13.2樣品的滴定：稱取本品約0.13g，精密稱定，放入250ml三角瓶中，加無水甲酸3ml使樣品完全溶解后，再加冰醋酸50ml，加入結(jié)晶紫指示液2滴，立即用已標(biāo)定的高氯酸滴定液滴定（每1ml高氯酸滴定液(0.1mol/L)相當(dāng)于16.52mg的C9H11NO2），溶液顏色由紫色變至藍(lán)綠色為終點(diǎn)。同時(shí)另取一個(gè)空瓶進(jìn)行空白試驗(yàn)，即加入無水甲酸3ml，冰醋酸50ml，加入結(jié)晶紫指示液2滴后滴定至終點(diǎn)。記錄滴定的體積和滴定時(shí)的溫度。13.3計(jì)算： 含量%C ´（VV0）´ 0.1652

21、5;100%1 + 0.0011 ´（tt0）´ m ´（1W）式中：C高氯酸滴定液的準(zhǔn)確濃度（mol/L）；V樣品滴定時(shí)消耗的滴定液的體積； V0空白試驗(yàn)中消耗的滴定液體積；t滴定時(shí)的室溫；m樣品的稱樣量；t0標(biāo)定滴定液時(shí)的室溫； W樣品的干燥失重量14.銨鹽 取本品0.10g，依法檢查(附錄 K)，與標(biāo)準(zhǔn)氯化銨溶液2.0ml制成的對(duì)照液比較，不得更深(0.02%)。15.其他氨基酸 取本品，精密稱定，加水制成每1ml中含6mg的溶液，照薄層色譜法(附錄 B)試驗(yàn)，吸取上述溶液5l，點(diǎn)于硅膠G薄層板上，以正丁醇-水-冰醋酸(5:2:1)為展開劑，展開，晾干，噴以

22、茚三酮的丙酮溶液(150)，在90加熱至顯色，立即檢視，應(yīng)只顯一個(gè)紫色斑點(diǎn)。16.細(xì)菌內(nèi)毒素 取本品，加入細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水，并加熱至80使其溶解，依法檢查(附錄 E)，每1g苯丙氨酸中含內(nèi)毒素的量應(yīng)小于25EU（供注射用）?！绢悇e】氨基酸類藥?！举A藏】密封保存。二、美國食品化學(xué)法典第五版<Food-Chemicals-Codex V>（FCCV）【描 述】L-苯丙氨酸為無色或白色片狀結(jié)晶，或白色結(jié)晶性粉末，1g本品可溶解于35mL的水中，微溶于乙醇、稀酸以及堿性氫氧化物溶液中。在283°左右時(shí)熔解，1:100的水溶液其pH為5.46.0。功能 營養(yǎng)物【要 求】鑒別 在相

23、同波長下，按照相同的測試條件，樣品的紅外吸收譜圖應(yīng)與標(biāo)準(zhǔn)色譜圖一致。含量 折干計(jì)算，應(yīng)不小于98.5%且不大于101.5%鉛 不大于5 mg/kg干燥失重 不大于0.2%比旋度 D20°：33.2°35.2°（折干計(jì)算）；或者D25°：32.7° 34.7（折干計(jì)算）灼燒殘?jiān)?不大于0.1%【檢 驗(yàn)】含量 1.試劑的配制：1.1高氯酸滴定液(0.1mol/L)：取無水冰乙酸7500ml，加入高氯酸（70%72%）85ml，搖勻，在室溫下緩緩滴加醋酐230ml，邊加邊搖，加完后再振搖均勻，放冷，加無水冰乙酸適量使成10000ml,搖勻，放置24小

24、時(shí)，即得。然后再用已經(jīng)干燥至恒重的鄰苯二甲酸氫鉀標(biāo)定具體濃度。1.2結(jié)晶紫指示液：取結(jié)晶紫0.5 g，加冰乙酸100ml使溶解，搖勻，即得。2.樣品的滴定：稱取本品約0.3g，精密稱定，放入250ml三角瓶中，加無水甲酸3ml使樣品完全溶解后，再加冰醋酸50ml，加入結(jié)晶紫指示液2滴，立即用已標(biāo)定的高氯酸滴定液滴定（每1ml高氯酸滴定液(0.1mol/L)相當(dāng)于16.52mg的C9H11NO2），溶液顏色由紫色變至藍(lán)綠色為終點(diǎn)。同時(shí)另取一個(gè)空瓶進(jìn)行空白試驗(yàn)，即加入無水甲酸3ml，冰醋酸50ml，加入結(jié)晶紫指示液2滴后滴定至終點(diǎn)。記錄滴定的體積和滴定時(shí)的溫度。3.計(jì)算： 含量%C ´（

25、VV0）´ 0.1652×100%1 + 0.0011 ´（tt0）´ m ´（1W）式中：C高氯酸滴定液的準(zhǔn)確濃度（mol/L）； V樣品滴定時(shí)消耗的滴定液的體積; V0空白試驗(yàn)中消耗的滴定液體積；t滴定時(shí)的室溫；m樣品的稱樣量；t0標(biāo)定滴定液時(shí)的室溫；W樣品的干燥失重量鉛 依據(jù)鉛限度檢測方法，附錄IIIB，樣品溶液的制備參考有機(jī)化合物的方法，標(biāo)準(zhǔn)鉛（Pb）離子溶液控制在5ug之下。干燥失重 依據(jù)干燥失重的檢測方法，附錄IIC，將樣品放置105°烘干3小時(shí)。1.扁型稱量瓶的恒重：取扁型稱量瓶，在105干燥1小時(shí)，取出置干燥器冷卻至室

26、溫（約30分鐘），精密稱重后，再置105干燥1小時(shí)，取出置干燥器冷卻至室溫（約30分鐘），精密稱重，直至連續(xù)兩次干燥后稱重的差異在0.3mg以下，方可進(jìn)行以下步驟。2.檢測法：取供試品，混合均勻。分取約1g，置于105下干燥至恒重的扁形稱瓶中（供試品干燥時(shí)，應(yīng)平鋪在扁形稱瓶中，厚度不可超過5mm）精密稱定。放入烘箱進(jìn)行干燥時(shí)，應(yīng)將瓶蓋半開進(jìn)行干燥，3個(gè)小時(shí)后取出。取出時(shí)，須將稱瓶蓋好。置烘箱內(nèi)干燥的供試品，應(yīng)在干燥后取出置干燥器放冷至室溫（約30分鐘），然后稱定重量。稱定扁形稱量瓶和供試品以及干燥后的恒重，均應(yīng)準(zhǔn)確至0.1mg位。3.計(jì)算： 干燥失重%W1W2×100%W1W0式中：

27、W0空瓶重(g); W1供試品+瓶重(g); W2干燥后供試品+瓶重(g)比旋度 依據(jù)比旋度的檢測方法，附錄IIB，將2 g的干燥樣品充分溶解，制成100mL的溶液，依法檢測。1.樣品溶液：取本品1g，精密稱定至0.0001g，加水溶解并稀釋成50ml的溶液（每1ml中約含20mg的溶液）。樣品溶解一定要完全，可用超聲機(jī)助溶，溶解完溶液需澄清。2.空白溶劑：取溶解樣品用超純水適量。3.測定：用讀數(shù)至0.001°并經(jīng)過檢定的旋光計(jì)檢測。將測定管用空白溶劑沖洗數(shù)次，緩緩注入空白溶劑適量（注意勿使發(fā)生氣泡，測定管兩端的玻璃鏡片要擦拭干凈），置于旋光計(jì)內(nèi)校正讀數(shù)，即空白溶劑的旋光度要為0。校

28、正完畢以后用相同的方法檢測樣品溶液并記錄下來，用同法讀取旋光度3次，取3次的平均數(shù)。4.計(jì)算： 比旋度V×L× m× （1W）式中：V稀釋倍數(shù)；所測旋光度的均值；L測定用管的長度（dm） m稱樣量；W樣品的干燥失重量5.以上溶液及測定的過程一定要調(diào)節(jié)溫度至20±0.5灼燒殘?jiān)?依據(jù)灼燒殘?jiān)臋z測方法，附錄IIC，灼燒1g的樣品。1.坩堝的恒重：將坩堝在600熾灼3小時(shí)，取出置干燥器冷卻至室溫（約60分鐘），精密稱重后，再置600熾灼2小時(shí)，取出置干燥器冷卻至室溫（約60分鐘），精密稱重，直至連續(xù)兩次干燥后稱重的差異在0.3mg以下，方可進(jìn)行以下步驟。2.

29、樣品的測定：取供試品2.0g，置已熾灼至恒重的坩堝中，精密稱定，在電爐上緩緩熾灼至完全炭化，放冷至室溫；加硫酸0.51ml使?jié)駶?，低溫加熱至硫酸蒸氣除盡后，再放入600的高溫爐中熾灼使完全灰化，3個(gè)小時(shí)后關(guān)閉高溫爐待爐溫降至300左右再移置干燥器內(nèi)，放冷至室溫，精密稱定后，再在600熾灼至恒重，即得。3.計(jì)算： 熾灼殘?jiān)?W2W0×100%W1W0式中：W0空坩堝重(g)； W1供試品+坩堝重(g)； W2熾灼后供試品+坩堝重(g)包裝和存儲(chǔ) 密閉容器中避光保存。*備注：附錄部分可以參考CP2005相對(duì)應(yīng)的詳細(xì)附錄三、美國食品化學(xué)法典第四版<Food-Chemicals-Cod

30、ex IV>（FCCIV）【描 述】L-苯丙氨酸為無色或白色片狀結(jié)晶，或白色結(jié)晶性粉末，1g本品可溶解于35mL的水中，微溶于乙醇、稀酸以及堿性氫氧化物溶液中。在283°左右時(shí)溶解，1:100的水溶液其pH為5.46.0。食品中的功能 營養(yǎng)物，食品添加物【要 求】鑒別 A、取0.1%試樣液5mL, 加水合茚三酮試液1mL，加熱，呈現(xiàn)紅紫色。 B、取1%試樣液5mL, 加幾滴重鉻酸鉀指示液，有特殊氣味產(chǎn)生。 C、取10mg樣品，加上500mg的硝酸鉀，以及2mL的硫酸，水浴中加熱混合物10分鐘，然后加入10ml的1N氫氧化鈉溶液，呈現(xiàn)紅紫色。含量 折干計(jì)算，應(yīng)不小于98.5%且不

31、大于101.5%重金屬（以Pb計(jì)） 不大于0.002%鉛 不大于10 mg/kg干燥失重 不大于0.2%灼燒殘?jiān)?不大于0.1%比旋度 D20°：33.2°35.2°（折干計(jì)算）；或者D25°：32.7° 34.7°（折干計(jì)算）【檢 驗(yàn)】含量 準(zhǔn)確稱取大約300mg的樣品，溶解于3mL的甲酸和50mL的乙酸中，加入2滴的結(jié)晶紫指示劑，用0.1N的高氯酸滴定至青綠色終點(diǎn)。(注意 應(yīng)在通風(fēng)櫥中操作使用高氯酸，)需滴定空白液（詳見總則），并做校正修訂。每1ml的0.1N的高氯酸相當(dāng)于16.52 mg 的C9H11NO2。1.試劑的配制：1.

32、1高氯酸滴定液(0.1mol/L)：取無水冰乙酸7500ml，加入高氯酸（70%72%）85ml，搖勻，在室溫下緩緩滴加醋酐230ml，邊加邊搖，加完后再振搖均勻，放冷，加無水冰乙酸適量使成10000ml,搖勻，放置24小時(shí)，即得。然后再用已經(jīng)干燥至恒重的鄰苯二甲酸氫鉀標(biāo)定具體濃度。1.2結(jié)晶紫指示液：取結(jié)晶紫0.5 g，加冰乙酸100ml使溶解，搖勻，即得。2.樣品的滴定：稱取本品約0.3g，精密稱定，放入250ml三角瓶中，加無水甲酸3ml使樣品完全溶解后，再加冰醋酸50ml，加入結(jié)晶紫指示液2滴，立即用已標(biāo)定的高氯酸滴定液滴定（每1ml高氯酸滴定液(0.1mol/L)相當(dāng)于16.52mg

33、的C9H11NO2），溶液顏色由紫色變至藍(lán)綠色為終點(diǎn)。同時(shí)另取一個(gè)空瓶進(jìn)行空白試驗(yàn)，即加入無水甲酸3ml，冰醋酸50ml，加入結(jié)晶紫指示液2滴后滴定至終點(diǎn)。記錄滴定的體積和滴定時(shí)的溫度。3.計(jì)算： 含量%C ´（VV0）´ 0.1652×100%1 + 0.0011 ´（tt0）´ m ´（1W）式中：C高氯酸滴定液的準(zhǔn)確濃度（mol/L）； V樣品滴定時(shí)消耗的滴定液的體積; V0空白試驗(yàn)中消耗的滴定液體積；t滴定時(shí)的室溫；m樣品的稱樣量；t0標(biāo)定滴定液時(shí)的室溫；W樣品的干燥失重量重金屬 準(zhǔn)確稱取1g樣品，按照重金屬檢測方法二，附錄I

34、IIB，標(biāo)準(zhǔn)鉛（Pb）離子溶液控制在20ug。1.試劑的配制：1.1標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液的制備：稱取在105干燥至恒重硝酸鉛0.160g，置1000ml量瓶中，加硝酸 5ml與水50ml溶解后，用水稀釋至刻度，搖勻，作為貯備液。臨用前，精密量取貯備液10ml，置100ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，即得（每1ml相當(dāng)于10g的Pb）。配制與貯存用的玻璃容器均不得含鉛。1.2氨試液：取濃氨溶液400ml，加水使成1000ml，即得1.3醋酸鹽緩沖液：取醋酸銨25g，加水25ml溶解后，加7mol/L鹽酸溶液38ml，用2mol/L鹽酸溶液或5mol/L氨溶液準(zhǔn)確調(diào)節(jié)pH值至3.5，用水稀釋到100ml，

35、即得。1.4硫代乙酰胺試液：取硫代乙酰胺4g，加水使溶解成100ml，置冰箱中保存。臨用前取混合液（由1mol/L氫氧化鈉溶液15ml、水5.0ml及甘油20ml組成5.0ml，加上述硫代乙酰胺溶液1.0ml，置水浴上加熱20秒，冷卻，立即使用。2.檢測法：取熾灼殘?jiān)?xiàng)下遺留的殘?jiān)?，加硝?.5ml，蒸干，至氧化氮蒸氣除盡后，放冷，加鹽酸2ml，置水浴上蒸干后加水15ml，滴加氨試液至對(duì)酚酞指示液顯中性，再加醋酸鹽緩沖液（PH3.5）2ml，微熱溶解后，移置納氏比色管中，加水稀釋成25ml；另取配制供試品溶液的試劑，置瓷皿中用同法蒸干后，加醋酸鹽緩沖液（PH3.5）2ml與水15ml，微熱溶解

36、后，移置納氏比色管中，加標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液2.0ml，再用水稀釋成25ml；再在兩管中分別加硫代乙酰胺試液各2ml，搖勻，放置2分鐘，同置白紙上，自上向下透視，供試品管中顯出的顏色與對(duì)照品管比較，不得更深。鉛 依據(jù)鉛限度檢測方法，附錄IIIB，樣品溶液的制備參考有機(jī)化合物的方法，標(biāo)準(zhǔn)鉛（Pb）離子溶液控制在10ug。干燥失重 依據(jù)干燥失重的檢測方法，附錄IIC，將樣品放置105°烘干3小時(shí)。1.扁型稱量瓶的恒重：取扁型稱量瓶，在105干燥1小時(shí)，取出置干燥器冷卻至室溫（約30分鐘），精密稱重后，再置105干燥1小時(shí)，取出置干燥器冷卻至室溫（約30分鐘），精密稱重，直至連續(xù)兩次干燥后稱重的差異

37、在0.3mg以下，方可進(jìn)行以下步驟。2.檢測法：取供試品，混合均勻。分取約1g，置于105下干燥至恒重的扁形稱瓶中（供試品干燥時(shí)，應(yīng)平鋪在扁形稱瓶中，厚度不可超過5mm）精密稱定。放入烘箱進(jìn)行干燥時(shí)，應(yīng)將瓶蓋半開進(jìn)行干燥，3個(gè)小時(shí)后取出。取出時(shí)，須將稱瓶蓋好。置烘箱內(nèi)干燥的供試品，應(yīng)在干燥后取出置干燥器放冷至室溫（約30分鐘），然后稱定重量。稱定扁形稱量瓶和供試品以及干燥后的恒重，均應(yīng)準(zhǔn)確至0.1mg位。3.計(jì)算： 干燥失重%W1W2×100%W1W0式中：W0空瓶重(g)；W1供試品+瓶重(g)； W2干燥后供試品+瓶重(g)比旋度 依據(jù)比旋度的檢測方法，附錄IIB，將2 g的干燥

38、樣品充分溶解，制成100mL的溶液，依法檢測。1.樣品溶液：取本品1g，精密稱定至0.0001g，加水溶解并稀釋成50ml的溶液（每1ml中約含20mg的溶液）。樣品溶解一定要完全，可用超聲機(jī)助溶，溶解完溶液需澄清。2.空白溶劑：取溶解樣品用超純水適量。3.測定：用讀數(shù)至0.001°并經(jīng)過檢定的旋光計(jì)檢測。將測定管用空白溶劑沖洗數(shù)次，緩緩注入空白溶劑適量（注意勿使發(fā)生氣泡，測定管兩端的玻璃鏡片要擦拭干凈），置于旋光計(jì)內(nèi)校正讀數(shù)，即空白溶劑的旋光度要為0。校正完畢以后用相同的方法檢測樣品溶液并記錄下來，用同法讀取旋光度3次，取3次的平均數(shù)。4.計(jì)算： 比旋度V×L×

39、 m× （1W）式中：V稀釋倍數(shù)；所測旋光度的均值；L測定用管的長度（dm） m稱樣量； W樣品的干燥失重量5.以上溶液及測定的過程一定要調(diào)節(jié)溫度至20±0.5灼燒殘?jiān)?依據(jù)灼燒殘?jiān)臋z測方法，附錄IIC，灼燒1g的樣品。1.坩堝的恒重：將坩堝在600熾灼3小時(shí)，取出置干燥器冷卻至室溫（約60分鐘），精密稱重后，再置600熾灼2小時(shí)，取出置干燥器冷卻至室溫（約60分鐘），精密稱重，直至連續(xù)兩次干燥后稱重的差異在0.3mg以下，方可進(jìn)行以下步驟。2.樣品的測定：取供試品2.0g，置已熾灼至恒重的坩堝中，精密稱定，在電爐上緩緩熾灼至完全炭化，放冷至室溫；加硫酸0.51ml使?jié)駶?/p>

40、，低溫加熱至硫酸蒸氣除盡后，再放入600的高溫爐中熾灼使完全灰化，3個(gè)小時(shí)后關(guān)閉高溫爐待爐溫降至300左右再移置干燥器內(nèi)，放冷至室溫，精密稱定后，再在600熾灼至恒重，即得。3.計(jì)算： 熾灼殘?jiān)?W2W0×100%W1W0式中：W0空坩堝重(g); W1供試品+坩堝重(g); W2熾灼后供試品+坩堝重(g)包裝和存儲(chǔ) 密閉容器中避光保存。*備注：附錄部分可以參考CP2005相對(duì)應(yīng)的詳細(xì)附錄四、美國藥典第29版（USP29）含量：98.5%101.5%（C9H11NO2即L-苯丙氨酸，成品按干品計(jì)）包裝與儲(chǔ)存：放置在密封容器內(nèi)USP對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)品（11）：USPL-苯丙氨酸對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)品L-酪

41、氨酸對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)品。鑒別：紅外吸收（197K）比旋度（781S）：-32.7°-34.7°樣品溶液：20mg/ml(溶于水)PH（791）：5.46.0，按1：100溶解干燥失重（731）：于105干燥3小時(shí)，0.3%熾灼殘?jiān)?81）：0.4%氯化物（221）：0.73g樣品所含的氯化物不能超過相當(dāng)于0.50ml的0.02mol/L的鹽酸量，0.05%硫酸鹽：0.33g樣品所含的硫酸鹽不能超過0.10ml的0.02mol/L硫酸量，0.03%鐵鹽（241）：0.003%重金屬，方法（231）：0.0015%色譜純度吸附劑0.25mm厚的層析硅膠G混合物。稀釋液配制冰乙酸水溶液

42、（50：50）樣品溶液精確稱量L-苯丙氨酸用稀釋液溶解成10mg/ml，吸取5ul.標(biāo)準(zhǔn)品溶液精確稱量USP L-苯丙氨酸對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)品用稀釋液溶解成0.05mg/ml,吸取5ul（備注：該標(biāo)準(zhǔn)品溶液的濃度相當(dāng)于0.5%的樣品溶液。）相應(yīng)系統(tǒng)溶液用稀釋液配制0.4mg/ml的USP L-苯丙氨酸對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)品溶液和0.4mg/ml的USP L-酪氨酸對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)品溶液，各吸取5ul 。噴霧顯色劑0.2g茚三酮溶于100ml正丁醇乙酸溶液中（按95：5配制）。顯影溶劑正丁醇，冰乙酸和水按60：20：20混合。操作過程：直接按照色譜法下的薄層色譜法操作。硅膠板在空氣中自然晾干，噴以噴霧顯色劑，在100105下

43、加熱15min，后在白光下觀察結(jié)果。系統(tǒng)適應(yīng)性溶液得到的圖譜是兩個(gè)清晰獨(dú)立的點(diǎn)。由樣品溶液得到的圖譜中的任何第二個(gè)點(diǎn)都不得大于或更深于有標(biāo)準(zhǔn)溶液得到的圖譜中的第一個(gè)點(diǎn)：任何單個(gè)雜質(zhì)0.5%，雜質(zhì)的總和2.0%有機(jī)的揮發(fā)性雜質(zhì)：符合方法（467）要求。殘留溶劑：符合方法（467）要求。含量：精確稱量160mg苯丙氨酸到125ml三角瓶，加入3ml的蟻酸和50ml的冰乙酸混合液溶解，用0.1N的高氯酸滴定，通過電位滴定法判斷終點(diǎn)，需做空白實(shí)驗(yàn)和必要的校正。每1ml的0.1N高氯酸相當(dāng)于16.52mg的C9H11NO2。*備注：附錄部分可以參考CP2005相對(duì)應(yīng)的詳細(xì)附錄五、企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)（食品）本標(biāo)準(zhǔn)所

44、采用的試劑和水，在沒有其他特殊要求時(shí)，均使用符合GB/T603-2002和GB/T6682-1992規(guī)定的分析純?cè)噭┖驼麴s水或相當(dāng)純度的水。5.1感官指標(biāo)取本品少許，放于無色燒杯中，在良好的自然光線下，用肉眼觀察其色澤、形態(tài)，并用鼻嗅、口嘗方法，品其滋、氣味。5.2理化指標(biāo)鑒別.1試劑.1.1 水合茚三酮試液: 取水合茚三酮 (C9H4O3 H2O)200mg溶于水, 定容至100mL；.1.2 硝酸鉀；.1.3 硫酸；.1.4 溴酚藍(lán)試液: 取溴酚藍(lán)100mg, 溶于100mL50%的乙醇中, 必要時(shí)過濾；.1.5 氫氧化鉀乙醇液: 35g氫氧化鉀溶于20mL水, 加無醛乙醇試液至1000m

45、L, 然后進(jìn)行標(biāo)定；(0.5mol/L).1.6 鹽酸羥氨試液: 取鹽酸羥氨3.5g, 溶于95mL60%的乙醇, 加0.1%溴酚藍(lán)試液0.5mL及0.5mol/L氫氧化鉀乙醇液, 至出現(xiàn)淡綠色為止. 再用60%乙醇定容至100mL；.1.7 氫氧化鈉試液: 取氫氧化鈉4.3g, 溶于水, 定容至100mL.(本試液約為1mol/L)。.2儀器和設(shè)備.2.1 1mL刻度的具玻塞量筒：100mL；.2.2 恒溫水??；.2.3 分析天平；.2.4 標(biāo)定后的刻度滴定管（精確度0.01mL）。.3分析步驟.3.1氨基試驗(yàn)取1%試樣液5mL, 加水合茚三酮試液1mL, 共熱,陽性結(jié)果是紅紫色。.3.2羧

46、基試驗(yàn)取試樣10mg, 加硝酸鉀500mg和硫酸2mL, 在水浴上加熱20min, 冷卻后，加鹽酸羥氨試液2mL, 浸入冰水中10min后加氫氧化鈉試液10mL, 陽性結(jié)果是紅紫色。5.2.2 L-苯丙氨酸含量.1試劑和溶液.1.1 無水甲酸；.1.2 冰醋酸；.1.3 高氯酸標(biāo)準(zhǔn)滴定液： C (HClO4)=0.1000mol/L；.1.4 結(jié)晶紫指示液：5g/L。.2 儀器和設(shè)備.2.1 燒杯：150mL；.2.2 微量滴定管：10mL。.3 分析步驟準(zhǔn)確稱取0.3000g本產(chǎn)品，放到一個(gè)150mL燒杯中，加入3mL無水甲酸，溶解后，再加50mL冰醋酸。加結(jié)晶紫指示液，立即用0.1 mol

47、/L高氯酸標(biāo)準(zhǔn)滴定液滴定到藍(lán)綠色終點(diǎn)，同時(shí)進(jìn)行一個(gè)空白對(duì)照，做一個(gè)必要的校準(zhǔn)。每毫升0.1 mol/L高氯酸相當(dāng)于L-苯丙氨酸（C9H11NO2）16.52mg。.4分析結(jié)果的表述L-苯丙氨酸含量（以C9H11NO2計(jì)）的質(zhì)量百分?jǐn)?shù)X1按式（1）式計(jì)算：X1 =C(V1V2) ×0.1652×100(1)m式中：C高氯酸標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的濃度，單位為摩爾每升（mol/L）；V1樣品滴定中高氯酸標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的消耗體積，單位為毫升（mL）；V2空白試驗(yàn)中高氯酸標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的消耗體積，單位為毫升（mL）；0.1652與1.00mL高氯酸標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液C (HClO4)=0.1000mo

48、l/L 相當(dāng)?shù)囊詆表示的本產(chǎn)品的質(zhì)量；m本產(chǎn)品試樣的質(zhì)量，單位為克（g）。.5校正若滴定試樣與標(biāo)定高氯酸標(biāo)準(zhǔn)液時(shí)，室溫差別超過10時(shí)，則應(yīng)重新標(biāo)定；若未超過10時(shí)，則可根據(jù)式（2）將高氯酸標(biāo)準(zhǔn)液的濃度C1加以校正。C2=C1(2)1+0.0011 (t2 - t1)式中：1+0.0011冰乙酸的膨脹系數(shù)；t2標(biāo)定高氯酸時(shí)的室溫，單位為攝氏度（）；t1滴定試樣時(shí)的室溫，單位為攝氏度（）；C1t2時(shí)高氯酸標(biāo)準(zhǔn)液的濃度，單位為摩爾每升（mol/L）。5.2.3水分按GB/T5009.3-2003中規(guī)定第二法測定。5.2.4比旋光度D20將1.000g樣品溶在水中，定容體積為100mL，用旋光儀在30

49、min內(nèi)檢測樣品溶液。計(jì)算方法：xt 100a/lpd100a/lC （3）式中：a直接觀察的旋光度，單位為度；t溫度；x使用的光的波長；l旋光計(jì)管的長度，單位為分米；d液體或固體溶液在此溫度下的比重；p100g溶液中溶質(zhì)的含量；C100mL溶液中溶質(zhì)的濃度。注： P和C在干燥或無水基礎(chǔ)上被計(jì)算。5.2.5灰分的測定按GB/T5009.4-2003中規(guī)定的方法測定。5.2.6重金屬按GB/T5009.74-2003中規(guī)定的方法進(jìn)行測定.5.2.7砷按GB/T5009.76-2003中規(guī)定的方法進(jìn)行測定.5.2.8鉛按GB/5009.75-2003中規(guī)定的方法進(jìn)行測定.六、企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)（化工原料）本品為L-氨基-苯丙酸。按干燥品計(jì)算，含C9H11NO2不得少于98.5%且不大于101.5%?！拘誀睢?/p>