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1、微生物和發(fā)酵工程一輪復(fù)習(xí)學(xué)法建議本專題是選修第五章內(nèi)容,包括微生物類群;微生物的營養(yǎng)、代謝和生長;發(fā)酵工程簡介;酶工程簡介、微生物培養(yǎng)技術(shù)實(shí)驗(yàn)五個(gè)部分內(nèi)容。在本專題復(fù)習(xí)中主要運(yùn)用歸納法、比較法、模型法、知識(shí)梳理法等,在解題過程中需要先發(fā)散思維再集中思維。一、總體內(nèi)容復(fù)習(xí)與其他專題相同的是首先運(yùn)用歸納法和知識(shí)梳理法將本專題內(nèi)容形成知識(shí)網(wǎng)絡(luò),同學(xué)們可嘗試自己先整理,然后參考下圖:從以上知識(shí)網(wǎng)絡(luò)圖中可以看出本專題有兩大塊知識(shí),一塊是理論上的有關(guān)微生物的知識(shí),另一塊是實(shí)際應(yīng)用的關(guān)于發(fā)酵工程和酶工程,其中以發(fā)酵工程為主。學(xué)習(xí)微生物知識(shí)是為發(fā)酵工程工程打基礎(chǔ)的。二、具體內(nèi)容復(fù)習(xí)微生物包括微生物類群、微生物
2、營養(yǎng)、代謝、生長四塊知識(shí)。復(fù)習(xí)這部分知識(shí)注意運(yùn)用比較法,將微生物與動(dòng)植物的細(xì)胞結(jié)構(gòu)、代謝等知識(shí)相比較,抓住微生物的特殊性。1微生物類群和微生物的營養(yǎng)將細(xì)菌與動(dòng)植物細(xì)胞(真核細(xì)胞)比較:真核生物細(xì)胞細(xì)菌細(xì)胞細(xì)菌的優(yōu)點(diǎn)細(xì)胞核有核膜、核仁,具有多對染色體擬核、有一個(gè)大型環(huán)狀DNA,不形成染色體誘變育種更容易細(xì)胞質(zhì)有多種細(xì)胞器只有核糖體容易培養(yǎng)基因結(jié)構(gòu)編碼區(qū)是間隔的、不連續(xù)的編碼區(qū)是連續(xù)的,不間隔的可人工合成基因細(xì)胞質(zhì)基因在線粒體和葉綠體中在質(zhì)粒中作運(yùn)載體,改造菌種,進(jìn)行發(fā)酵細(xì)胞培養(yǎng)分化形成生物體形成菌落進(jìn)行菌種鑒定微生物類群和微生物營養(yǎng)之間的關(guān)系是:不同微生物的營養(yǎng)需求不同,只有了解其營養(yǎng)需求,才能
3、配制好培養(yǎng)基。而病毒的特殊性不能用普通培養(yǎng)基培養(yǎng),只能用活細(xì)胞培養(yǎng),通常用活雞胚培養(yǎng),所以在發(fā)酵工程中不采用病毒。在微生物類群和微生物營養(yǎng)復(fù)習(xí)中可具體歸納如下圖:復(fù)習(xí)中注意與其他章節(jié)知識(shí)的聯(lián)系:在復(fù)習(xí)細(xì)菌的結(jié)構(gòu)時(shí),應(yīng)結(jié)合高中生物必修教材中原核生物細(xì)胞的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。擬核中大型環(huán)狀DAN及質(zhì)粒DNA相當(dāng)于真核細(xì)胞中的核DNA和質(zhì)DNA。作為擬核的大型環(huán)狀DNA,它控制著細(xì)菌的主要遺傳性狀;而質(zhì)粒DNA則控制細(xì)菌產(chǎn)物尤其是次級(jí)代謝產(chǎn)物的合成。結(jié)合選修第三章遺傳與基因工程中運(yùn)用質(zhì)粒作基因運(yùn)載體的知識(shí),加強(qiáng)知識(shí)的橫向聯(lián)系和綜合應(yīng)用。在復(fù)習(xí)病毒的結(jié)構(gòu)和功能特點(diǎn)時(shí),可回憶必修第六章中“噬菌體侵染細(xì)菌實(shí)驗(yàn)”,知
4、道病毒中有只含DNA的病毒(如噬菌體、乙肝病毒等)和只含RNA的病毒(如煙草花葉病毒、車前草病毒、HIV、SARS、禽流感病毒等),結(jié)合選修第一章人體生命活動(dòng)的調(diào)節(jié)和免疫中細(xì)胞免疫,對于侵入人體細(xì)胞中的病毒,可以通過效應(yīng)T細(xì)胞激活宿主細(xì)胞中的溶酶體中酶,使宿主細(xì)胞裂解,病毒無藏身之所,被相應(yīng)的抗體結(jié)合而被消滅。理解病毒的抗原決定簇知識(shí)。結(jié)合選修第三章遺傳與基因工程中運(yùn)用噬菌體或動(dòng)植物病毒作基因運(yùn)載體的知識(shí),知道運(yùn)載體都是核酸,且進(jìn)入宿主細(xì)胞的是核酸,而不是蛋白質(zhì)外殼。結(jié)合選修第四章細(xì)胞與細(xì)胞工程中動(dòng)物細(xì)胞融合和制備單克隆抗體時(shí)運(yùn)用滅活的病毒作誘導(dǎo)劑的知識(shí),利用了病毒能夠在宿主細(xì)胞膜上鉆孔的能力
5、。復(fù)習(xí)微生物營養(yǎng)應(yīng)結(jié)合必修教材第一章化學(xué)元素和化合物的知識(shí),結(jié)合新陳代謝的類型,分析微生物的實(shí)際類型,尤其是代謝特點(diǎn),明確微生物對碳源、氮源需求的特導(dǎo)性,從而確定不同微生物所需的營養(yǎng)物質(zhì)的來源與功能。通過分析明確自養(yǎng)型與異養(yǎng)型微生物的區(qū)別主要是碳源,前者是無機(jī)碳源;后者必需要提供有機(jī)碳源。固氮微生物與非固氮微生物的氮源區(qū)別是只有固氮微生物能直接利用氮?dú)?,在?shí)際培養(yǎng)時(shí),只能以此培養(yǎng)自生固氮微生物,因?yàn)楣采痰⑸镏挥性谂c其共生的生物體內(nèi)才能固氮。理解培養(yǎng)基配制的三個(gè)原則時(shí),要與微生物具體代謝所需原料及條件相聯(lián)系,其種類和比例是按代謝過程的需要配制,pH是根據(jù)代謝中的酶的活性的要求確定的,可結(jié)合
6、發(fā)酵工程中的實(shí)例來加強(qiáng)理解。2微生物的代謝與生長微生物的代謝:微生物的代謝與動(dòng)植物代謝既有相同之處,也有不同之處。相同的是都能通過同化作用合成體內(nèi)所需物質(zhì),通過異化作用分解部分體內(nèi)物質(zhì),釋放能量供給生命活動(dòng)需要。不同之處是微生物的代謝迅速,物質(zhì)更新快,原因是其體表面積與體積之比特別大。由于學(xué)習(xí)這部分知識(shí)是為了應(yīng)用于發(fā)酵工程,所以需要了解微生物的兩類代謝產(chǎn)物初級(jí)代謝產(chǎn)物和次級(jí)代謝產(chǎn)物。可采取列表區(qū)別。記憶時(shí)可將“××素”去除維生素,其他均為次級(jí)代謝產(chǎn)物。重點(diǎn)放在對代謝調(diào)節(jié)的理解上,可采取建立模型的方法進(jìn)行復(fù)習(xí): 在此模型中對酶合成的調(diào)節(jié)關(guān)鍵在底物,如果是正常情況下,合成的組成
7、酶,催化底物反應(yīng)形成產(chǎn)物,產(chǎn)物過多,出現(xiàn)反饋調(diào)節(jié);如果環(huán)境變化,只有某種底物時(shí),則合成誘導(dǎo)酶,無論合成組成酶,還是合成誘導(dǎo)酶都需要遺傳物質(zhì)控制,但合成誘導(dǎo)酶還受環(huán)境的控制。模型1和模型2中兩種類型的反饋調(diào)節(jié)啟示我們要采用不同的人工控制,解除其反饋調(diào)節(jié),滿足人類對其產(chǎn)物的需求。 微生物的生長:主要有測定方法和生長規(guī)律兩部分知識(shí)。測定細(xì)菌數(shù)量和重量,都涉及到取樣,要聯(lián)系細(xì)菌呼吸,樣品中pH變化通常是隨取樣時(shí)間逐漸降低。測定數(shù)量要用紅細(xì)胞與之均勻混合;測定重量包括測定濕重和干重,需要離心分離后,反復(fù)洗滌,去掉培養(yǎng)基后再稱重或烘干后稱重。而微生物群體生長規(guī)律是重點(diǎn)知識(shí),只有掌握其生長規(guī)律,才能在發(fā)酵工
8、程中進(jìn)行人工控制??蓪⒈静糠种R(shí)歸納成下表,幫助理解和記憶。時(shí)期細(xì)菌生長特點(diǎn)形成原因菌體特征應(yīng)用與控制調(diào)整期不立即繁殖,數(shù)目幾乎不變對新環(huán)境的適應(yīng)代謝活躍,體積增長較快通過控制菌種、接種量、培養(yǎng)條件等,縮短調(diào)整期對數(shù)期繁殖速率快,以等比數(shù)列的形式增加生存條件適宜代謝旺盛,個(gè)體形態(tài)和生理特征穩(wěn)定獲取生產(chǎn)用菌種,作科研材料穩(wěn)定期繁殖速率與死亡速率相等,活菌數(shù)量最大生存條件惡化,種內(nèi)斗爭激烈代謝產(chǎn)物積累最多,開始出現(xiàn)芽孢通過添加新培養(yǎng)基、放出老培養(yǎng)基和控制其他生產(chǎn)條件,來延長穩(wěn)定期衰亡期死亡速率大大增加,活菌數(shù)目急劇下降生存條件極惡化出現(xiàn)多種形態(tài)畸變菌體裂解,釋放代謝產(chǎn)物,便于分離提純產(chǎn)品 3發(fā)酵工
9、程簡介:有了關(guān)于微生物的類群、微生物營養(yǎng)、代謝和生長的知識(shí),這部分內(nèi)容相對比較簡單,只要將有關(guān)微生物類群、營養(yǎng)、代謝和生長的知識(shí)應(yīng)用到發(fā)酵工程就可以了。首先是確定所培養(yǎng)的微生物是哪種代謝類型,然后運(yùn)用微生物營養(yǎng)知識(shí)和配制培養(yǎng)基的有關(guān)知識(shí),配制培養(yǎng)基。從自然界選取的菌種,要根據(jù)人類的需要,以及該微生物代謝和生長特性,聯(lián)系基因工程、細(xì)胞工程和誘變育種知識(shí),改造微生物,自然界的菌種產(chǎn)量不高,需要經(jīng)過三種方法改造后再成為生產(chǎn)用菌種,擴(kuò)大培養(yǎng)直到對數(shù)期再接種,可縮短調(diào)整期,同時(shí)將配制好的培養(yǎng)基調(diào)節(jié)到適宜的pH后,連同發(fā)酵罐一起滅菌,冷卻后接種。注意根據(jù)不同微生物類型控制發(fā)酵條件,配合添加新鮮培養(yǎng)基,可延
10、長穩(wěn)定期;根據(jù)不同的產(chǎn)品采取不同的分離提純方法。注意結(jié)合教科書的插圖或下圖理解發(fā)酵過程,能夠?qū)ζ渲幸恍┓矫娼Y(jié)合習(xí)題,思考其變化,采用發(fā)散思維展開復(fù)習(xí)和記憶。4酶工程簡介:這部分知識(shí)不是重點(diǎn)知識(shí),在2005年考試大綱中也未列出,但其中固定化酶、氨芐青霉素、血糖快速測定儀等知識(shí),在有些題目中涉及,所以需要了解。酶工程與其他生物工程之間的關(guān)系也要知道,所以復(fù)習(xí)中采取簡單歸納,重點(diǎn)了解有關(guān)知識(shí)即可??蓪⒚腹こ虤w納成下圖:5學(xué)習(xí)培養(yǎng)微生物的基本技術(shù)實(shí)驗(yàn)本實(shí)驗(yàn)包括兩部分,一是細(xì)菌的培養(yǎng),二是真菌的培養(yǎng)。復(fù)習(xí)中主要抓住三方面,理解實(shí)驗(yàn)原理;熟記實(shí)驗(yàn)過程;注意實(shí)驗(yàn)細(xì)節(jié)。細(xì)菌和真菌培養(yǎng)主要不同點(diǎn)見下表:培養(yǎng)基主要原料pH滅菌細(xì)菌的培養(yǎng)牛肉膏、蛋白胨等98kPa、20min真菌的培養(yǎng)木屑或棉籽殼等147 kPa、12h培養(yǎng)細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)過程可歸納如下:稱量融化調(diào)節(jié)pH分裝包扎滅菌擱置斜面接種培養(yǎng)觀察培養(yǎng)真菌的實(shí)驗(yàn)過程可歸納如下:稱量拌料調(diào)節(jié)pH分裝包扎滅菌接種培養(yǎng)收獲細(xì)節(jié)方面注意:瓊脂是凝固劑,在配制固體培養(yǎng)基時(shí)必須要加,且在牛肉膏和蛋白胨融化后再加。調(diào)節(jié)pH要在融化后分裝前進(jìn)行。注意幾個(gè)比例1/5、2/3、1/2,灌裝培養(yǎng)基高度不能超過試管的1/5,棉塞要塞入2/3,擱置斜面不能超過試管的1/2。接種前手用酒精棉球消毒后,要等酒精揮發(fā)后才能點(diǎn)燃酒精燈接種一定要在酒精燈火焰上方進(jìn)行,菌種試管在下,被接
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