利用光刺激發(fā)光法檢測輻照食品標準

1、 術語：CEN 歐洲標準化委員會(法文縮寫)CENELEC 歐洲電工標準化委員會（法文縮寫）BSI 英國標準協(xié)會 BRITISH STANDARDS INSTITUTIONBS 英國標準 BRITISH STANDARDSEN 歐洲標準(德文縮寫)HIS 美國信息處理服務公司Informations Handling ServicesICS國際標準文獻分類號Internationnal classification for standards英國標準標準號 BS EN 3751：2002食品利用光刺激發(fā)光法檢測輻照食品歐洲標準（EN）13751：2002具有與英國標準一樣的效力等級。ICS 6

2、7.050 BSI（英國標準協(xié)會） British Standards（英國標準）除法允許外，未經(jīng)英國標準協(xié)會允許嚴禁復制。總前言此英國標準是歐洲標準（EN 13751：2002）的官方英文版。英國委托技術委員會AW/-/3，行業(yè)分析參與了標準的籌備工作，其職責包括：幫助咨詢者理解本文本；將對標準相關解釋的詢問，或修改的建議提交給責任國際/歐洲委員會，并告知英國相關行業(yè)；監(jiān)測國際和歐洲的相關進展，并在英國公布。代表此委員會的組織列表可向委員會秘書索取獲得。相互參照此文獻提與的執(zhí)行相應國際或歐洲標準的英國標準可以在BSI目錄下標題為“相應國際標準索引”中找到，也可以使用BSI電子目錄或英國標準在

3、線的“搜索”工具得到。此出版物并未聲稱包括所有合同必須的條款。使用者有責任正確應用此標準。遵守此英國標準并不意味著免除自身的法律義務。此英國標準是在政策和策略委員會消費產(chǎn)品和服務部的指導下起草的，并由標準政策和策略委員會授權于2002.10.15出版。頁數(shù)總覽文獻包括封面，扉頁，歐洲標準（EN）標題頁，頁碼2-11和封底。文獻上顯示的英國標準協(xié)會（BSI）日期表明了此文獻最近一次發(fā)行的時間。出版后公布修正修正號日期評論BSI 2002.10.15ISBN 0 580 405877歐洲標準（英文、德文和法文版） EN13751 2002.9ICS67.050英文版食品利用光刺激發(fā)光法檢測輻照食品

4、（德文和法文）歐洲標準由歐洲標準化委員會（CEN）于2002.8.5批準。歐洲標準化委員會成員必須遵守CEN/CENELEC的部條例，條例約定了使此歐洲標準不做任何修改成為國家標準的條件。類似國家標準涉與的最新列表和參考目錄可以向管理中心或任何CEN成員國申請獲得。此歐洲標準有三個官方版本（英語，法語，和德語）。CEN成員有責任將其翻譯成本國語言，并告知管理中心，則此其它語種版本具有官方版本同樣的地位。CEN成員是由澳大利亞，比利時，捷克斯洛伐克國，丹麥，芬蘭，法國，德國，希臘，冰島，愛爾蘭，意大利，盧森堡，馬耳他，荷蘭，挪威，葡萄牙，西班牙，瑞典，瑞士和英國的國家標準部門組成。歐洲標準化委員

5、會管理中心：rue de Stassart，36 B-1050 布魯塞爾2002 CEN CEN成員國在全球圍保留通過任何手段 Ref。No。EN 13751：2002E 以任何形式利用的權利。目錄前言 31 圍 32 術語和定義 33 原則 44 試劑 55 設備 56 樣本技術 67 程序 68 評價 79 局限 910 效度 911 測驗報告 10參考文獻 11前言 此文件EN 13751：2002是由技術委員會CEN/TC275“食品分析橫向分析”起草，德國標準協(xié)會擔任秘書處。通過出版一樣的文本或正式批準，此歐洲標準最晚在2003.3給予其國家標準的地位。并且最晚在2003.3廢除與之

6、沖突的國家標準。根據(jù)CEN/CENELEC部條例，下述國家標準組織必須執(zhí)行此歐洲標準：澳大利亞，比利時，捷克斯洛伐克國，丹麥，芬蘭，法國，德國，希臘，冰島，愛爾蘭，意大利，盧森堡，馬耳他，荷蘭，挪威，葡萄牙，西班牙，瑞典，瑞士和英國1 圍3這個歐洲標準專指光刺激發(fā)光法（PSL）測定輻照食品。在此描述的技術包括可能用于篩查的光刺激發(fā)光密度的初始測定，和確定光刺激發(fā)光法敏感性的校正方法用來輔助分類。有必要使用已校正的PSL或者其它的標準化（比如EN1784-1788）或已證實的方法來確認陽性的篩查結果。多個實驗室已經(jīng)成功地用貝類和草藥，香料和調(diào)味劑做試驗檢驗了此方法1。而從其它的研究可能得出下面的

7、結論，此方法可應用于更多種類的食物2，3，4。2 術語和定義 3為了表述此項歐洲標準，應用了以下術語和定義。2.1 光刺激發(fā)光法（PSL）由于束縛電荷載體的能量儲存產(chǎn)生的特定的輻射現(xiàn)象，光刺激后這種儲存能量的釋放可以產(chǎn)生可檢測的發(fā)光信號。2.2 光刺激發(fā)光（PSL）強度光刺激后檢測到的發(fā)光量，以光子計數(shù)率表示2.3 篩查PSL或初始PSL接受的樣本或儀器準備時的PSL強度2.4 校正PSL初始PSL測量后，被檢測樣品以已知劑量輻照后記錄到的PSL強度2.5 閾值用于分類的PSL強度值。在篩查模式，兩個閾值，一個低閾值（T1）和一個高閾值（T2）被用于樣品分類。2.6 陰性PSL結果PSL強度低

8、于低閾值（<T1）2.7 中間PSL結果PSL強度在低閾值和高閾值之間(T1中間PSL結果T2)2.8 陽性PSL結果PSL強度高于高閾值（>T2）2.9 黑暗計數(shù)空樣品容器無刺激時光倍增管測得的光子計數(shù)率2.10 光計數(shù)樣品容器用參考光源（比如裝有14C的閃爍體，或者同等品）得到的光子計數(shù)率2.11 空容器運行從空樣品容器測得的PSL強度，從而保證無樣品容器污染3 原理 43.1 總論大部分的食物中都能發(fā)現(xiàn)礦物殘渣，特別是硅酸鹽或生物無機物質(zhì)比如來自于貝克或者外骨骼的方解石，或者來自于骨或牙齒的羥磷灰石。當暴露在電離輻射中時，這些物質(zhì)能通過束縛在結構，空隙或雜質(zhì)中的載體儲存能量。

9、激發(fā)光譜學顯示光刺激礦物質(zhì)可以釋放這些載體5，6，7。隨后發(fā)現(xiàn)整個的草藥和香料樣品和其它食品在光刺激后可以獲得同樣的光譜2，8，9。PSL測定并不破壞樣品，因此整個樣品，或者其它有機和無機混合物質(zhì)，可以重復測量。但是如果重復測量一個樣品，其PSL信號會衰減。方法學包括篩查（初始）PSL測量以確定樣品的初始狀態(tài)（見2.3節(jié)）和校正輻射劑量輻照后任意第二次測量以確定樣品的PSL敏感性（見2.4節(jié)）。3.2 篩查PSL對于篩查（見2.3）信號等級與兩個閾值相比（見2.5）。大部分的輻照樣品產(chǎn)生很強的高于高閾值水平的信號。信號若低于低閾值表明樣品未經(jīng)過輻照。信號介于兩個閾值之間的中間信號表明它們需要進

10、一步的檢測。閾值的使用產(chǎn)生了一種有效的篩查方法，且校正法，EN1788中描述的TL或其它已證實的方法等可以輔助此方法3，4，8。3.3 校正PSL對于校正法，初始PSL測量后，樣品暴露于特定劑量的輻射下，然后再次測量。輻照樣品在此次輻照后只顯示輕度PSL減低，而未經(jīng)輻照的樣品在輻照后常顯示PSL信號的顯著減低。4 試劑 54.1 硅潤滑油氣膠比如 Electrolube SC0200H1）4.2 去離子水 5 設備 55.1 PSL系統(tǒng)，比如SURRC PPSL輻照食品篩查系統(tǒng)1）10，11，12，13由樣品容器，刺激源，脈沖刺激和同步光子計數(shù)系統(tǒng)組成。儀器結構見7.4節(jié)。注意多個實驗室檢測都

11、使用SURRC PPSL系統(tǒng)。5.2可置換Petri-盤注意多個實驗室檢測都使用5cmPetri-盤 5.3 放射源，在校正PSL測量前能以特定輻射劑量輻照樣品。在多個實驗室檢測中，對貝類和草藥，香料和它們的混合物測定，應用了60Co射線放射源，固定放射劑量1kGy.如果使用后發(fā)現(xiàn)很滿意的話也可使用替代的放射源注意其它的固定劑量同樣合適5.4 14C-源（可選擇）5.5 薄層流室（可選擇）5.6 空氣除塵器（可選擇）6 樣品技術 6只要可能，樣品是從食品轉(zhuǎn)運時避光的位置取得的，因為PSL強度見光后減低。在分析前，樣品應該避光。在黑暗中保存。7 程序 67.1 總論樣品的加樣和處理應盡可能的在柔

12、和的燈光下進行。樣品放入一次性Petri-盤，置于系統(tǒng)中。1）Electrolube SCO200H和格蘭大學研究和反應堆中心脈沖光刺激發(fā)光儀（SURRC PPSL）是此類商業(yè)產(chǎn)品代表。上述信息是為了方便使用此標準的人，但并不表示CEN批準這些產(chǎn)品。如果同類產(chǎn)品能提供同樣的結果也可以使用。樣品加樣時應該小心處理，避免交叉污染。建議樣品在層流室單獨加樣，每個樣品的新鮮組織放在臺上。Petri-盤應加蓋以減少污染機會。7.2 草藥，香料和調(diào)味品的樣品準備樣品加入清潔的Petri-盤，雙份。如果這些檢測產(chǎn)生不一致的分類，進一步以四等分量檢測，分類結果根據(jù)最大的兩個結果。一些樣本可能需要基本的處理，比

13、如香草豆莢可能需要切割使之合適盤子的大小，包裝應該去掉。樣品加樣入Petri，可以是厚層或薄層，放入已噴灑硅潤滑油（4.1）的盤中固定樣品。厚層樣品受漂白的影響幾率??；表面以下的礦物質(zhì)可以通過攪拌而暴露。注意薄層樣品也可以加入金屬圓片或其它適于90Sr或其它放射源輻照的淺容器。如果使用伽瑪放射源校正，上述的加樣方法都適合。7.3 甲殼類動物的準備7.3.1 總論PSL分析可以使用整體樣本，包括貝，有殼的整體樣本和割開的腸子或者水沖洗萃取的礦物質(zhì)（4.2）如果有充足的樣品物質(zhì)，建議樣品分成至少6份，即6個Petri-盤。7.3.2 整體樣品包括貝克等整體樣本可以整個放在Petri-盤中。在一些情

14、況下，需要將其切割以適合Petri-盤。如果腸管可見，最好首先把它放在上面。7.3.3有殼整體樣本包括貝克等整體樣本可以整個放在Petri-盤中。同樣放入的還可以是朝上的腸管，Petri-盤中應放入盡可能多的甲殼類動物。7.3.4甲殼類動物腸子甲殼類動物的腸子是一條細黑管，可以在對蝦或小蝦的凸面或者軟體動物部找到。使用解剖刀，將肉切開后用鑷子去除腸管。在甲殼類動物樣品上重復上述操作（建議：每個Petri-盤6個腸管）7.4 儀器設置這個部分以SURRC PPSL系統(tǒng)為例介紹儀器的設置。此系統(tǒng)通過與其連接的電腦設定個體測量參數(shù)（循環(huán)時間，閾值和數(shù)據(jù)記錄條件）來記錄光子定量計數(shù)。 注意1 此系統(tǒng)能

15、在獨立模式下運行，只用一個簡單的按鈕控制，用于初始測量。但是此標準介紹的是儀器操作有效的程序，用連接的電腦進行定量檢測。此儀器的設置包括檢查黑暗計數(shù)（2.9）和光計數(shù)（2.10），確定測量參數(shù)和檢查輻照和未輻照標準材料。多實驗室試驗中1，草藥和香料的閾值設定，T1=700計數(shù)/60秒和T2=5000計數(shù)/60秒顯示滿意的結果。這些閾值使用5cmPetri-盤。而甲殼類動物，在多實驗試驗中1，閾值設定在T1=1000計數(shù)/60秒和T2=4000計數(shù)/60秒顯示滿意的效果。注意2 閾值水平是根據(jù)多實驗檢測結果和進一步經(jīng)驗得出的。它們或許需要根據(jù)PSL強度，儀器的靈敏度和樣品表面情況（Petri-盤

16、大?。┱{(diào)整。曾顯示辣椒，肉豆蔻和丁香對PSL相對不敏感。必須進行空容器檢測（2.11）保證容器未受污染。此步驟應重復進行，比如，至少每10個樣品和發(fā)現(xiàn)陽性結果的樣品之后進行?？諝馕鼔m器（5.6）可用來清潔樣品容器。7.5 篩查測量進行樣品檢測并記錄特定測量時間得到的結果。結果根據(jù)預先設定的閾值（2.6-2.8）分類。7.6 校正測量篩查檢測后，樣品應該覆蓋以防止物質(zhì)損失或污染，Petri-盤加蓋，而金屬圓盤或淺容器則用其它合適的物品。樣品處理時，多加小心不晃動樣品。之后樣品暴露在特定的輻射劑量下（比如1kGy或者與預期處理劑量相似的劑量）。在輻照后，進一步的處理應盡可能的在弱光下進行。以室溫保

17、存過夜后（甲殼類動物和其它易腐爛物質(zhì)建議冷藏），根據(jù)7.4和7.5 進行校正測量。8 評價 8.1 陰性結果8.1.1篩查PSL陰性結果（計數(shù)<T1）表示樣品不可能被輻照。而輻照樣品如果沒有足夠的PSL強度，也可能出現(xiàn)陰性結果。8.1.2 校正PSL陰性校正結果（校正結果讀數(shù)<T1）表示PSL強度不足。這在草藥和香料中少見，常伴隨陰性的篩查結果。對于甲殼類動物，陰性校正結果可能更常見。任何樣品校正后出現(xiàn)陰性信號不能被分類。在這種情況下，建議應用EN1788中描述的TL分析或EN1784，EN1785，EN1786，EN1787中描述的其它標準化方法，或者其它認可的方法。陰性校正結果

18、伴隨非陰性篩查結果表明分析錯誤，應在樣品新鮮成分中進行再次測量。8.2 中間結果8.2.1 篩查PSL中間分析結果（T1，T2）不能直接得出樣品輻照情況：它們可能表示經(jīng)過輻照處理，殘余地質(zhì)信號，或者輻照物質(zhì)稀釋混合物。對于所有篩查PSL顯示中間結果的樣品，建議應用EN1788中描述的TL分析或EN1784，EN1785，EN1786，EN1787中描述的其它標準化方法，或者其它認可的方法。8.2.2 校正PSL如果樣品的篩查結果是中間的，則同樣的中間校正結果或許表示經(jīng)過輻照處理。陰性的篩查結果和中間的校正結果表示低敏感性的未輻照樣品。同樣，建議應用EN1788中描述的TL分析或EN1784，E

19、N1785，EN1786，EN1787中描述的其它標準化方法，或者其它認可方法評價這些樣品。高度陽性篩查結果（>>T2）加上中間的校正結果表明分析錯誤。但是對于接近T2的陽性篩查結果樣品，出現(xiàn)中間校正結果表明樣品經(jīng)過高于校正暴露劑量的輻照。此時應再次測量，如有必要進一步用TL分析或其它標準化或認可的方法評價。8.3 陽性結果8.3.1 篩查PSL陽性篩查結果（>T2）高度提示輻照樣品。對于高PSL敏感性( 高地質(zhì)殘留信號)的未輻照樣品偶爾也會出現(xiàn)陽性結果。8.3.2 校正PSL與篩查結果同數(shù)量級的陽性校正結果（>T2）表示輻照樣品。如果樣品同時出現(xiàn)接近于T2閾值的陽性篩

20、查和校正PSL結果，應該使用EN1788中描述的TL分析或EN1784，EN1785，EN1786，EN1787中描述的其它標準化方法，或者其它認可方法進一步分析。陽性校正結果的單一樣品，若其值遠高于陰性或中間篩查結果很可能是未經(jīng)輻照的。校正PSL與篩查結果相比極小的情況（在1到2個數(shù)量級之間）可能表示分析錯誤，應再次分析。9 局限 PSL方法原則上可以應用于含有礦物殘渣的輻照食品的檢測。樣品的PSL敏感性取決于單個樣品含有的礦物質(zhì)的量和類型。低于低閾值（T1）的信號大致與非輻照物質(zhì)相關，但是也可能來自地敏感性輻照物質(zhì)。校正法能幫助鑒別這些情況。低敏感性樣品（校正后顯示陰性或中間信號）應進一步

21、用TL分析或其它標準化或認可的方法檢測?？傮w來講，建議用矯正PSL測量方法檢測低礦物質(zhì)含量的甲殼類動物和干凈香料（比如肉豆蔻，地生白和黑胡椒），以避免錯誤的陰性結果。非混合食品可以得出最佳的結果。咖喱粉等的混合食品以與混合物可能含有具有一定圍PSL敏感性的礦物殘渣，從而矯正PSL可能得出模糊的結果。樣品中鹽的存在可在一定程度上主導PSL強度，使任何剩余輻照成分的信號被掩蓋。樣品水化后再次測量能識別和校正這種情況。10 效度對于甲殼類動物，SURRC代表當時的英國農(nóng)業(yè)、漁業(yè)和食品部組織了一個小型相互比較實驗檢測了此方法，共有5個實驗是參加，每個實驗室分析來自溫水和冷水共5個品種的10份輻照和5份

22、未輻照帶盲樣品（即具體樣品是否輻照未知）。10份輻照樣品是由每個品種接受2個不同的劑量輻照后組成（0.5kGy和2.5kGy）。要求參加的實驗室測量6個等分量的整體樣品和6個等分量的腸管樣品的60秒值，每種情況均使用兩個最大的結果使定性篩查的結論與閾值T1=1000計數(shù)/60S和T2=4000計數(shù)/S相關。基于上述方法，所有的75份樣品都被正確的分類（見表1）。隨后進行校正PSL測量而不管等分量樣品的低敏感性。篩查和校正測量得出了同樣的定性結果。表1甲殼類動物多實驗室試驗PSL篩查結果輻照未輻照正確判別假陰性正確判別假陽性甲殼類動物a100（100%）0（0%）50（100%）0（0%） A這

23、是75份標本的結果，使用整體樣本和腸管進行獨立分析。在所有的樣品檢測中，每個樣本報告都報告兩個結果。在另一項更大的由代表MAFF的SURRC組織的多實驗室檢測中1，8個實驗室檢測了40種草藥，香料和調(diào)味品，和4種混合物，這些樣品是帶盲的輻照（最大劑量10kGy）或未輻照樣品。閾值采用T1=700計數(shù)/60s和T2=5000計數(shù)/60s，測量時間是60s。共計報告對樣品進行了662次篩查檢測（345次輻照和317次未輻照樣品），根據(jù)陰性或者陽性儀器讀數(shù)產(chǎn)生了577個定性分類結果。569份樣品的輻照情況被正確識別（98.6%的陽性或者陰性結果）。8份錯誤（1.4%假陽性或者假陰性），原因是操作錯誤。662份