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1、中藥藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)總結(jié)學(xué)院:農(nóng)學(xué)院專業(yè):中草藥栽培與鑒定班級:121姓名學(xué)號1實(shí)驗(yàn)組實(shí)驗(yàn)時間指導(dǎo)教師成績實(shí) 驗(yàn) 內(nèi) 容實(shí)驗(yàn)一 小白鼠的捉拿、固定、給藥、標(biāo)記及處死方法實(shí)驗(yàn)內(nèi)容包括小白鼠的捉拿、小白鼠的固定、小白鼠的給藥、小白鼠的標(biāo)記、小白鼠的處死方法實(shí)驗(yàn)二中藥鎮(zhèn)痛作用比較(扭體法)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容包括小白鼠的選擇、小白鼠的分組、小白鼠的給藥、扭體次數(shù)的測量、鎮(zhèn)痛率的計(jì)算、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的處理。實(shí)驗(yàn)三 中藥番瀉葉對小白鼠腸蠕動的影響實(shí)驗(yàn)內(nèi)容包括小白鼠的選擇、小白鼠的分組、小白鼠的灌胃給藥、小白鼠的處死和解剖、炭末推進(jìn)長度和小腸長度的測量、炭末推進(jìn)率的計(jì)算、實(shí)驗(yàn)數(shù) 據(jù)處理。實(shí)驗(yàn)四補(bǔ)益藥抗應(yīng)激作用實(shí)驗(yàn)內(nèi)容包括小白鼠的
2、選擇、小白鼠的分組、小白鼠的給藥、密封計(jì)時、測量小鼠耐缺氧時間、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的處理。實(shí) 驗(yàn) 目 的實(shí)驗(yàn)一 通過本實(shí)驗(yàn)的學(xué)習(xí),讓學(xué)生了解實(shí)驗(yàn)動物的捉拿、固定、給藥、標(biāo)記及處死方法。實(shí)驗(yàn)二通過本實(shí)驗(yàn)的學(xué)習(xí),讓學(xué)生了解用扭體法篩選鎮(zhèn)痛藥的實(shí)驗(yàn)方法;觀察中約的鎮(zhèn)痛作用。實(shí)驗(yàn)三通過本實(shí)驗(yàn)的學(xué)習(xí),讓學(xué)生了解生番瀉葉對腸蠕動的影響實(shí)驗(yàn)四通過本實(shí)驗(yàn)的學(xué)習(xí),讓學(xué)生學(xué)習(xí)小白鼠耐常壓缺氧的實(shí)驗(yàn)方法,研究補(bǔ)中益氣丸的抗應(yīng)激作用。實(shí)驗(yàn)材料與藥品實(shí)驗(yàn)方法與步驟實(shí)驗(yàn)一 儀器設(shè)備條件:鼠籠(1個)、灌胃針(1支)、燒杯(2個)、1 ml注射器 (4支)等,小白鼠,每組 3只雌鼠,3只雄鼠。實(shí)驗(yàn)二 儀器設(shè)備條件:鼠籠(1個)、灌胃
3、針(1支)、燒杯(2個)、1 ml注射器(4支)。實(shí)驗(yàn)動物一一小鼠(每組 3只雌鼠,3只雄鼠)、實(shí)驗(yàn)三 儀器設(shè)備條彳鼠籠1個)、灌胃針(1支)、燒杯(2個)、1 ml注射器(3 支)、電爐、鐵鍋、鐵鏟、搪瓷盤、蛙板、眼科剪、眼科鐐、直尺。物質(zhì)條件:實(shí)驗(yàn)動物一一小鼠(每組 4只),番瀉葉實(shí)驗(yàn)四 儀器設(shè)備條件:鼠籠(1個)、灌胃針(1支)、燒杯(2個)、1 ml注射器(3支)、線、玻璃缸(水桶)、200ml磨口瓶等物質(zhì)條件:實(shí)驗(yàn)動物一一小鼠(小鼠每組4只)、補(bǔ)中益氣中藥水煎液實(shí)驗(yàn)一 小白鼠是藥理實(shí)驗(yàn)常用的一種動物,常用于藥物的篩選、LD5oED5o的測定、中樞神經(jīng)系統(tǒng)藥試驗(yàn)、抗炎免疫藥試驗(yàn)、避孕藥
4、、抗腫瘤以及抗衰老藥試驗(yàn)等。常用體重18 22g。1 .捉拿方法 右手提起鼠尾,放在粗糙物(如鼠籠)上面,輕向后拉其尾,用左手 拇指和食指捏住其頭部皮膚及雙耳,將小白鼠固定在掌中,使其腹部朝上,然后以第四 指和小指夾住鼠尾。2 .給藥途徑:(1)經(jīng)口給藥法:口服(PO :將受試藥物放入飼料或溶于飲用水中,由動物自由提取的一種方法。 缺點(diǎn)是攝入劑量不夠準(zhǔn)確。灌胃(IG):將小鼠固定后,右手持裝有灌胃針頭的注射器,自口角插入口腔,沿上 腭插入食道。如遇阻力,可將針頭抽出再另插,以免穿破食道或誤入氣管。灌注量為0.1 0.3ml/10g 體重。(2)皮下注射(SC):常在背部皮下注射。一手固定動物,
5、另一手注射,注射量為0.1 0.3ml/10g 體重。(3)肌內(nèi)注射(IM):多注射于后肢股部肌肉,每側(cè)不超過 0.1ml.(4)腹腔注射(IP):左手固定小鼠,右手持注射器,從下腹部外側(cè)進(jìn)針約 35mm呈450角刺入腹腔,注射量 0.10.2ml/10g體重。(5)靜脈注射(IV):將小鼠至于固定筒內(nèi),使尾巴露在外面,用7075%酉精棉球擦尾部,或?qū)⑹笪步?550OC溫水中。待尾部左右側(cè)靜脈擴(kuò)張后,左手拉尾,右手進(jìn)針。注射量不超過 0.5ml/只。實(shí)驗(yàn)二 1.藥品的配制元胡止痛分散片每片重0.4g,成人的劑量每天 3次,每次3片,即成人劑量是3.6g/60Kg ,換算成小白鼠的劑量是0.0
6、144g/20g(即0.72g/Kg)。又因?yàn)樾“资蠼o藥量是 0.4mL/20g ,故元胡止痛片溶液的濃度應(yīng)該為 0.0144g/0.4mL,所 以將18g的元胡止痛分散片溶于 500mL的去離子水中,制成0.0036g/mL (即14.4g/400mL ) 的元胡止痛片溶液。阿咖酚散同樣的方法換算成小白鼠的劑量也是0.0144g/20g(即0.72g/Kg)。小白鼠的給藥量是是 0.4mL/20g,故阿咖酚散溶液的濃度應(yīng)該為0.0144g/0.4mL,所以將18g的阿咖酚散溶于 500mL的去離子水中,制成 0.0036g/mL (即14.4g/400mL )的阿咖酚散 溶液。生理鹽水配制成
7、 0.9%的濃度。冰醋酸配制成0.6%的濃度。2.將小鼠隨機(jī)分為3組,每組3只,稱重并編號。第一組灌胃未知中藥醇提液 0.2ml/10g (體重),第二組腹腔注射顱痛定 0.2ml/10g (體重)(40mg/kg),第三組灌胃等容量生理鹽水作為對照。給藥30min后,每組小鼠均腹腔注射0.6%冰醋酸0.2ml/只,觀察并記錄20min內(nèi)小鼠扭體次數(shù)。對照組扭體次數(shù)一給藥組扭體次數(shù)鎮(zhèn)痛率= x 100%對照組扭體次數(shù)實(shí)驗(yàn)三1.藥品不同炮制品的處理要求學(xué)生根據(jù)所學(xué)知識擬寫操作步驟和實(shí)際操作。2 . 藥品制備:炭末生理鹽水混懸液0.1g/ml (炭末為活性炭),番瀉葉水煎液1g/ml(含炭末 0.
8、1g/m1),3 .取禁食20-24h成年、體重相近的4只小白鼠,隨機(jī)分為 2組,每組2只,用苦 味酸標(biāo)記。分別用上述 2種炭末液0.3ml/10g體重灌胃。給藥 30min后脫頸椎處死,打 開腹腔分離腸系膜,剪取上端至幽門,下端至回盲部的腸管,置于托盤上。輕輕將小腸 拉成直線,測量腸管長度作為“小腸總長度”。從幽門至炭末前沿的距離作為“炭末在 腸內(nèi)推進(jìn)距離”。取各組 2只小自鼠平均值,用公式汁算炭末推進(jìn)百分率,并注意觀察 各組小腸容積是否增大。炭末在腸內(nèi)推進(jìn)距離(cm)炭末推進(jìn)率= X 100%小腸全長(cm)實(shí)驗(yàn)四 取4只小鼠,雌雄不限,稱重,用苦味酸標(biāo)記,隨機(jī)分為兩組。給藥組每只灌胃未知
9、中藥水煎液 0.25ml/10g ,對照組每只灌胃等容量的生理鹽水,給藥后 30min將小鼠放入盛有15g鈉石灰的廣口瓶內(nèi)(每瓶只放1只小鼠),用凡士林涂抹瓶口蓋嚴(yán),是之不漏氣,立即計(jì)時。以呼吸停止為判斷死亡指標(biāo),記錄小鼠因缺氧而死亡的時間。與對照組 比較并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。綜合全實(shí)驗(yàn)室的結(jié)果,分別算出兩組的平均存活時間按表記錄未知中藥對小鼠耐常壓缺氧的影響組別動物數(shù)劑量存活時間(n)(ml/10g )(min)生理鹽水 未知中藥水煎液實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析實(shí)驗(yàn)一 小白鼠的捉拿、給藥、注射操作不熟練,致使小白鼠受傷實(shí)驗(yàn)二表 未知中藥對小白鼠鎮(zhèn)痛作用的影響(X± SDD (實(shí)驗(yàn)小組數(shù)據(jù))組別動物
10、數(shù) 劑量(g/kg )開始扭體時間20min內(nèi)扭體 炭末推進(jìn)率生理鹽水20.4ml雄10次;雌4次阿咖酚20.4ml雄16次;雌0次元胡鎮(zhèn)痛片20.4ml雄9次;雌0次表 未知中藥對小白鼠鎮(zhèn)痛作用的影響(X± SD (全班數(shù)據(jù))(全班數(shù)據(jù))動物數(shù)開始扭體時間20min內(nèi)扭體炭末推進(jìn)率組別齊【J量(g/kg )(只)(min)次數(shù)(cm)(%生理鹽水210.7249.56元胡止痛片220.7234.48阿咖酚散190.7232.02分析:根據(jù)全班實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn),一生理鹽水組為對照發(fā)現(xiàn)元胡止痛片和阿咖酚散均有止 痛作用,且阿咖酚散的止痛效果比元胡止痛片的止痛效果略明顯;根據(jù)小組實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),
11、發(fā)現(xiàn)雄性小鼠的比雌性小鼠的痛感更敏感,而且兩種止痛藥對雌性小鼠的作用效果跟好實(shí)驗(yàn)三表 中藥對小白鼠腸蠕動的影響( X± sp組別動物數(shù)劑量小腸總炭末推進(jìn)炭末推進(jìn)腸容積變化(只)(g/Kg)長度距離cm 率()生理鹽140.6050.2840.4990.45小變水番瀉葉180.6049.9340.6295.51 增大分析:根據(jù)統(tǒng)計(jì)結(jié)果分析,番瀉葉炭末推進(jìn)率比生理鹽水的炭末推進(jìn)率高出番瀉葉液可促進(jìn)炭末在小腸推進(jìn),番瀉葉有助于小腸蠕動5.06%。說明實(shí)驗(yàn)四表中藥對小鼠耐常壓缺氧的影響( X± SDD組別動物數(shù)(只)劑量(g/kg)存活時間(min)生理鹽水151.859.50補(bǔ)中
12、益氣丸211.867.15分析:上表的統(tǒng)計(jì)結(jié)果表明,補(bǔ)中益氣丸有抗耐常壓缺氧的作用。1、所有實(shí)驗(yàn)中小白鼠體重越接近越好,平均體重最好用20g左右的小鼠,腸管比較粗大,易于操作。2、實(shí)驗(yàn)三番瀉葉的瀉下作用實(shí)驗(yàn)中腸容積變化可以上下端接扎,稱取重量,以定量化。3、實(shí)驗(yàn)三和實(shí)驗(yàn)四即番瀉葉瀉下作用實(shí)驗(yàn)和補(bǔ)中益氣丸的常壓耐缺氧試驗(yàn)中,開始給藥至處死動物的時間必須準(zhǔn)確,以免時間不同造成實(shí)驗(yàn)誤差。4、實(shí)驗(yàn)四中的實(shí)驗(yàn)之前先檢查鈉石灰,若鈉石灰吸水和二氧化碳變色以后應(yīng)立即更換,再放入瓶子中開始試驗(yàn)。5、實(shí)驗(yàn)操作過程中避免錯誤操作,使用器械時不要傷到操作者及周圍的同學(xué),帶乳膠手套,以防被小鼠咬傷。6、請珍愛生命,尊
13、重生命。小鼠為實(shí)驗(yàn)奉獻(xiàn)生命,實(shí)驗(yàn)者應(yīng)認(rèn)真對待實(shí)驗(yàn)中藥藥理學(xué)是以中醫(yī)藥基本理論為指導(dǎo),運(yùn)用現(xiàn)代科學(xué)方法,研究中藥和機(jī)體(包 括正常機(jī)體、病理機(jī)體和病原體)相互作用及規(guī)律的一門學(xué)科。本學(xué)期通過羅老師的講 授,我學(xué)習(xí)了中藥藥理學(xué)這一課程,對中醫(yī)藥的基本理論和現(xiàn)在科學(xué)方法的結(jié)合有所了 解,并在羅老師的指導(dǎo)下完成了課程設(shè)計(jì)中的實(shí)驗(yàn)部分。在實(shí)驗(yàn)操作之前,通過一些實(shí)驗(yàn)視頻也對實(shí)驗(yàn)中的操作細(xì)節(jié)有所了解,大概幾乎 沒有接觸過這種情景,也許是女生的心天生就膽小慈悲,看到一些血淋淋的場面,身上 的汗毛不禁豎立起來。等到親自實(shí)驗(yàn),看到活生生的小白鼠時,其實(shí)心理準(zhǔn)備也做的差 不多了,但是小白鼠的味道真的很不容易讓人接受。實(shí)驗(yàn)小結(jié)在一旁觀察老師的操作示范后,自己去模仿練習(xí),第一次接觸,小白鼠的捉拿真的 不容置操作好,每次用手抓住小白鼠的耳朵及背后的皮,小白鼠就會蜷縮起來,更不用 說再去把灌胃針伸進(jìn)它的胃里了。在捉拿過程中,發(fā)現(xiàn)有的小白鼠排泄,難道是知道自 己命不久矣而害怕到如此。輕撫它的背,跟它說話,漸漸的對小白鼠的恐懼和嫌棄就消 失了,在我眼里這就是我的實(shí)驗(yàn)材料。接下來的實(shí)驗(yàn)灌藥,打針,觀察,解剖等過程,其實(shí)還是勉強(qiáng)不了自己親自操刀上 陣,還好組里有其他的小伙伴躍躍欲試,所以分工就明確和合理了。一人操作,一人督 導(dǎo)、觀察并記錄結(jié)果,實(shí)驗(yàn)就這
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