嗜酸性粒細胞浸潤對鼻息肉術(shù)后鼻腔黏膜轉(zhuǎn)歸及療效的影響(一)

1、嗜酸性粒細胞浸潤對鼻息肉術(shù)后鼻腔黏膜轉(zhuǎn)歸及療效的影響(一)【摘要】 探討嗜酸性粒細胞（eosinophils, EOS）浸潤對鼻息肉術(shù)后鼻腔黏膜轉(zhuǎn)歸及療效影響的因素。方法：對于50例鼻息肉患者術(shù)中及部分術(shù)后復(fù)發(fā)的鼻息肉組織和上頜竇口周邊水腫組織采用Chromotrope 2R特染，檢測以上標本中嗜酸性粒細胞在功能性鼻竇內(nèi)窺鏡術(shù)后術(shù)腔黏膜恢復(fù)過程中的表達水平，并進行相關(guān)分析。結(jié)果：鼻息肉組織中EOS水平明顯高于中鼻甲黏膜組織，且隨時間呈現(xiàn)不同的變化規(guī)律（P0.01）；EOS浸潤程度越深，鼻腔黏膜恢復(fù)越慢，鼻息肉復(fù)發(fā)越快。結(jié)論：EOS浸潤在鼻息肉的形成和發(fā)展中起重要作用，提示其可能參與延遲鼻竇、鼻

2、腔黏膜上皮化的進程，可作為療效判斷的指標之一。 【關(guān)鍵詞】 鼻息肉 內(nèi)窺鏡外科手術(shù) 嗜酸性粒細胞ABSTRACT Objective: To explore the eosinophil infiltration on the transitionary process of nasal mucosa following nasal endoscopic surgery. Methods: Eosinophil was quantitatively determined in polyps and recurrent polyps and edema tissues around the ma

3、xillary sinus by Chromotrope 2R staining. Results: Eosinophil was higher in polyps than in the middle turbinate (P0.01). The recurrence rate was highly correlated with the eosinophil infiltration in the tissues. Conclusion: Eosinophil infitration is directly related to the recurrence of polyps, whic

4、h can be regarded as a prognostic indicator for polyps.KEY WORDS Nasal polyps; Endoscopic surgical procedures, operative; Eosinophils 鼻息肉術(shù)后黏膜組織中炎性細胞浸潤、水腫、息肉樣組織增生等嚴重阻礙了術(shù)腔黏膜上皮化的進程，從而影響手術(shù)效果，這是長期以來困擾耳鼻喉科醫(yī)生的一個重要問題。臨床隨訪中發(fā)現(xiàn)，部分鼻息肉患者雖然施行了成功的手術(shù)和嚴格的隨訪綜合治療，仍表現(xiàn)為術(shù)腔遷延炎癥及息肉復(fù)發(fā)1。鼻息肉的病理學(xué)特征之一是組織中嗜酸性粒細胞浸潤增多2。為深入研究嗜酸性粒細胞

5、浸潤對鼻息肉術(shù)后黏膜上皮化轉(zhuǎn)歸和預(yù)后的影響，我們對其作以下探討。1 資料與方法11 臨床資料 收集我院鼻息肉患者標本50例，男38例，女12例；16 72歲，平均43歲。本組患者均在局麻下行功能性鼻竇內(nèi)鏡手術(shù)（functional endoscopic sinus surgery, FESS），術(shù)后局部應(yīng)用抗炎抗過敏治療。術(shù)前1周應(yīng)用糖皮質(zhì)激素及抗組胺藥。所有病例均于術(shù)中、術(shù)后1 2周取適量的息肉組織,術(shù)后4 6周及術(shù)后10 12周取適量的上頜竇口周邊水腫的鼻黏膜組織。收集20例鼻中隔偏曲或單純上頜竇囊腫患者的中鼻甲黏膜作為對照。上述標本離體后，立即用10甲醛固定，按常規(guī)制成石蠟塊保存。1.2

6、 檢測方法 取石蠟塊連續(xù)切片，厚4?m，行Chromotrope 2R染色（美國Sigma公司），試劑染色步驟按說明書進行。染色方法見參考文獻2。即使在細胞形態(tài)不典型的情況下，也能明確辨認EOS3。行Chromotrope 2R染色后，EOS胞漿著色，呈粉紅色，胞漿多為雙核，典型者呈“熊貓眼”征。在高倍鏡（400）下選取3個炎性細胞浸潤明顯的視野進行計數(shù)，分別計算100個炎性細胞中嗜酸性粒細胞的數(shù)量，然后取其平均數(shù)為嗜酸性粒細胞浸潤指數(shù)，其浸潤程度按浸潤指數(shù)在0 25為度，26 50為度，51 75為度，76 100為度計算。1.3 統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS10.0統(tǒng)計軟件行t檢驗，P0.05

7、為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。2 結(jié) 果2.1 鼻息肉手術(shù)前后EOS與鼻黏膜浸潤程度的關(guān)系 EOS在鼻息肉手術(shù)前、后鼻腔黏膜中的表達隨時間呈如下變化規(guī)律：術(shù)后1 2周組較術(shù)前病變黏膜明顯減少，但術(shù)后4 6周達高峰，基本恢復(fù)至術(shù)前水平，術(shù)后10 12周又明顯回落，接近手術(shù)后1 2周時水平（表1）。2.2 EOS浸潤程度與息肉復(fù)發(fā)率的關(guān)系 術(shù)前鼻息肉中EOS浸潤程度越高，則術(shù)后鼻息肉復(fù)發(fā)率也越高（P0.01）（表2）。復(fù)發(fā)病例均經(jīng)仔細復(fù)查，積極治療，除全身應(yīng)用皮質(zhì)類固醇外，局部應(yīng)用同種類固醇噴霧治療，持續(xù)到嗜酸性粒細胞浸潤指數(shù)25停用，其中使用類固醇噴霧劑治療最短1個月，最長6個月。類固醇噴霧劑治療結(jié)束后觀

8、察1年，術(shù)腔無分泌物，全上皮化。復(fù)發(fā)病例均治愈。3 討 論近年來的研究證明，鼻息肉為局部微環(huán)境控制的炎癥性腫塊，而EOS浸潤在鼻息肉的形成和發(fā)展中起重要作用，主要表現(xiàn)在4，5：（1）損傷上皮；（2）釋放炎性介質(zhì)；（3）細胞因子的作用。鼻息肉術(shù)后易復(fù)發(fā)是其一個重要特點。近年來廣泛開展了功能性鼻內(nèi)鏡鼻竇手術(shù)，鼻息肉的復(fù)發(fā)率明顯降低，但仍存在諸多影響因素，特別是EOS的浸潤，與鼻息肉術(shù)后復(fù)發(fā)有直接關(guān)系。鼻息肉是由于局部微環(huán)境中以EOS為主的炎性細胞和細胞因子調(diào)控的自身延續(xù)的慢性炎癥性腫塊。EOS通過Th2細胞因子的釋放、遷徙、移行到炎癥反應(yīng)黏膜中，又能通過自身分泌IL3、IL5、粒細胞巨噬細胞集落刺

9、激因子(GMCSF)等細胞因子加重炎癥的程度、延長炎癥的時間，使疾病呈惡性循環(huán)，遷延不愈。EOS是鼻息肉的重要致病物質(zhì)。從本文的結(jié)果可以看出，術(shù)前與術(shù)后1 2周、10 12周EOS的浸潤程度分布差異有統(tǒng)計學(xué)意義，術(shù)前與術(shù)后4 6周EOS的浸潤程度分布差異無統(tǒng)計學(xué)意義，因此，EOS浸潤程度與鼻息肉術(shù)后復(fù)發(fā)有直接關(guān)系，EOS浸潤程度越高，鼻息肉復(fù)發(fā)越快。因此，EOS浸潤程度可直接影響鼻息肉的術(shù)后復(fù)發(fā)和預(yù)后，故可作為判斷是否治愈鼻息肉的一個輔助指標。在慢性鼻竇炎鼻息肉中，25.3的患者合并變應(yīng)性鼻炎，且變應(yīng)性因素存在的比例在慢性鼻竇炎鼻息肉的臨床分型中有隨著分期由輕到重、由低到高出現(xiàn)的趨勢6。隨著F

10、ESS的逐漸成熟，術(shù)腔黏膜上皮化的優(yōu)劣已成為從整體上影響手術(shù)療效的重要原因。FESS術(shù)后黏膜組織中炎性細胞浸潤、水腫、息肉樣組織增生等嚴重阻礙了術(shù)腔黏膜上皮化的進程7，從而影響手術(shù)效果。我們在實驗中檢測到在鼻息肉術(shù)后鼻腔黏膜轉(zhuǎn)歸不同階段均有EOS。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，術(shù)后4 6周組織中EOS表達明顯高于術(shù)后1 2周組、術(shù)后10 12周組，接近術(shù)前病變黏膜組。術(shù)后1 2周EOS的表達較術(shù)前病變黏膜明顯降低，可能是因為術(shù)腔內(nèi)微循環(huán)發(fā)生改變,病變黏膜及其包含的炎癥細胞、細胞因子明顯減少；此外，F(xiàn)ESS手術(shù)是一個創(chuàng)傷，術(shù)后患者應(yīng)激性腎上腺皮質(zhì)激素升高，抑制術(shù)腔EOS炎癥的發(fā)展和細胞因子的表達。術(shù)后4 6周組織E

11、OS的表達明顯高于術(shù)后1 2周及術(shù)后10 12周組。表明FESS術(shù)后4 6周術(shù)腔黏膜中有較多的EOS浸潤，且活性較高。EOS被激活后分泌細胞因子增加，由于當時術(shù)腔黏膜尚未上皮化，纖毛功能恢復(fù)不全，不能形成“粘液毯”，包括EOS在內(nèi)的細胞因子不能及時帶走，進而募集并激活以EOS為主的炎癥細胞，這些炎性細胞又分泌各類細胞因子，形成“自我放大”8，9。此外，修復(fù)過程中的神經(jīng)末梢處于暴露狀態(tài)，對各類神經(jīng)肽的刺激較敏感，導(dǎo)致血管擴張，腺體分泌增加。本實驗中術(shù)后4 6周EOS浸潤顯著增多。EOS浸潤可導(dǎo)致鼻黏膜上皮損傷、脫落等局部炎癥發(fā)生10。考慮這一階段為術(shù)后黏膜上皮化的關(guān)鍵時期，提示我們應(yīng)加強這段時間

12、的治療，如換藥、術(shù)腔沖洗、局部用藥等，以利盡早完成術(shù)腔黏膜上皮化，減少慢性鼻竇炎、鼻息肉的復(fù)發(fā)。目前除手術(shù)治療鼻息肉之外，糖皮質(zhì)激素是治療鼻息肉最有效的藥物之一。類固醇藥物可抑制EOS組織浸潤，促使肥大細胞和炎癥細胞減少，從而減輕黏膜滲出、水腫等炎性反應(yīng)10，術(shù)前應(yīng)用可使鼻息肉體積縮小，鼻塞改善，術(shù)后應(yīng)用可防止或延緩鼻息肉復(fù)發(fā)?！緟⒖嘉墨I】1 吳敏曼，孫虹，李和清，等. 過敏性鼻炎對鼻息肉術(shù)后療效的影響及其機制探討J. 中國耳鼻咽喉顱底外科雜志, 2005，11（4）：225226.2 張羅，韓德民，周兵，等.鼻息肉中嗜酸性粒細胞浸潤和活化與白細胞介素5表達J.中國耳鼻咽喉頭頸外科雜志, 20

13、05，12（3）：171.3 張羅，韓德民，張勇，等.鼻息肉中嗜酸性粒細胞浸潤和活化狀態(tài)的研究J.臨床耳鼻咽喉科雜志,2001,15(11):486488.4 Hamilos DL, Leung DY, Wood R, et al. Chronic hypeplastic sinusitisa; association of tissue eosinophilia with mRNA expression of granulocytemacrophage colonystimulating factor and interleukin3J. J Allergy Clin Immunol, 19

14、93, 92(6):3948. 5 Djukanovic R. Nasal polypsa model of chronic respiratory mucosal inflammationJ. Clin Exp Allergy, 1995, 25（7）：582585.6 王鴻，張羅，周兵，等.慢性鼻竇炎鼻息肉與變應(yīng)性因素相關(guān)性的探討J.中華耳鼻咽喉頭頸外科雜志,2005,40(3):170.7 李華斌，李源，許庚，等.功能性內(nèi)窺鏡手術(shù)后術(shù)腔黏膜轉(zhuǎn)歸階段的劃分及處理原則J.中華耳鼻咽喉科雜志，1999，34（5）：301305.8 Wong CK, Zhang JP, Ip WK, et al. Activation of p38mitogenavtivated protein kinase and nuclear factorkappaB in tumour necrosis factorinduced eotaxin release of human eosinophilsJ. Clin Exp Lmmunol, 2002, 128:483489.9 Min YG, Kin YJ, Yun YS. Distribution of eosinophil granule protein