唾液尿素酶檢測法-HPS診斷兒童幽門螺桿菌感染的評價

1、唾液尿素酶檢測法-HPS診斷兒童幽門螺桿菌感染的評價葉國欽，葉小欽，葉小培Ameritek USA 螺旋菌研究所, 美國 西雅圖【摘要】目的：評價唾液尿素酶檢測法HPS在診斷兒童幽門螺桿菌感染中的價值。方法：采用“幽門螺桿菌唾液測試版”(HPS)1，在2008年月至9月，對浙江大學醫(yī)學院附屬兒童保健院35例有消化不良癥狀的初診患兒進行唾液檢測，其中27例同時接受13C-UBT試檢；同時對100例體撿的小學生進行HPS檢測。結(jié)果：35例有消化不良癥狀的患兒HPS陽性率為88.57%，其中27例接受13CUBT試驗陽性率為25.92%；100名體撿兒童HPS陽性率為40%，兩組比較差異顯著(X2=

2、24.57，P<0.01)。結(jié)論：唾液中存在高幽門螺桿菌檢出現(xiàn)象，說明在兒童中幽門螺桿菌感染非常常見，有消化不良癥狀的兒童幽門螺桿菌感染尤為嚴重。患病兒童個體發(fā)育不良和同年齡的兒童相比，體重身高都要差一些。亞洲兒童個體發(fā)育和歐洲兒童相比，身高，體重都比較小一些。經(jīng)過長時期臨床的觀察發(fā)現(xiàn)這些癥狀是和螺旋桿菌感染有關, 兒童幽門螺桿菌感染值得重視。【關鏈詞】  幽門螺桿菌 抗原 唾液 HPS兒童患有幽門螺桿菌(H.Pylori，簡稱Hp)感染是非常常見的。兒童感染幽門螺桿菌后主要癥狀是消化不良、發(fā)育與營養(yǎng)狀況較差和貧血現(xiàn)象等。我們于2008年6月至9月，在浙江大學醫(yī)學院附屬兒童保健

3、院，對35例有消化不良癥狀的初診患兒采用“幽門螺桿菌唾液測試板”(HPS)檢測唾液中兒童中幽門螺桿菌感染抗原，其中27例用時進行13C尿素呼氣試驗(UBT)；同期在杭州市某鐵路小學對100名體撿的兒童進行HPS檢測?，F(xiàn)將結(jié)果報道如下：1 資料和方法1.1 研究對象 35例有消化不良癥狀的患兒中，男16例，女19例，年齡7.4(313)歲。100例體撿狀兒童中，男52例，女48例，年齡9.2(813)歲。1.2 研究方法 唾液標本采取 受檢者留取唾液1ml于試杯內(nèi)送檢。 唾液Hp抗原HPS檢測法 將唾液吐入塑料杯中；用吸管吸取4滴唾液，滴入取樣杯中；滴加2滴緩沖液于取樣杯中；更換吸管，

4、充分混勻后，吸取3-4滴混合液，滴入唾液板的吸樣窗口6,5-15分鐘觀察結(jié)果，如指示窗口5顯示T線、C線，說明螺旋桿菌陽性；如指示窗口5只顯示C線而沒有T線，說明螺旋桿菌陰性。注意事項：測定前，患者一小時內(nèi)不能進行飲食和飲水。1.3 13C-UBT試驗 按常規(guī)方法進行。1.4 統(tǒng)計學處理 采用X2檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。2 結(jié)果35例有消化不良癥狀的患兒HPS陽性31例(88.57%)；100名無癥狀體撿兒童HPS陽性率為40%。兩組比較HPS陽性率有顯著性差異(X2=24.57，P<0.01)。35例有消化不良癥狀的患兒中，27例同時進行13CUBT試驗，

5、其中陽性7例(25.92%)，此7例HPS均呈陽性(100%)。3 討論來自美國的報道2,3,4,，對一組平均為53月的嬰幼兒進行調(diào)查，發(fā)現(xiàn)69.4%血清中幽門螺桿菌抗體陽性。瑞士一學者對858名小學生進行健康調(diào)查，發(fā)現(xiàn)81%的兒童患有幽門螺桿菌感染。一組來自東京的報道5，他們對283名日本兒童(平均年齡11.5歲)調(diào)查發(fā)現(xiàn)83%有幽門螺桿菌感染。我們的資料顯示，35例有消化不良癥狀的兒童，HPS檢測陽性率高達88.57%；100例無癥狀體撿兒童，HPS陽性率為40%。說明在兒童中幽門螺桿菌感染非常常見，有消化不良癥狀的兒童幽門螺桿菌感染尤為嚴重。兒童幽門螺桿菌感染通常受家庭人員健康

6、狀況的影響6，父母雙方都感染幽門螺桿菌，兒童感染的機會是44%；父母一方感染幽門螺桿菌，兒童感染的機會是30%；父母都未感染幽門螺桿菌，兒童感染的機會是21%。幽門螺桿菌在兒童中的傳播可能是被污染的食物感染口腔，再從口腔到胃這一途徑。因此，胃幽門螺桿菌炎癥的源頭在口腔中，幽門螺桿菌隨著唾液不斷吞入胃內(nèi)，在胃內(nèi)定植引起胃幽門螺桿菌炎癥。倫敦大學醫(yī)學院查了100名兒童，用胃鏡、RUT、切片組織培養(yǎng)的方法診斷胃幽門螺桿菌感染。從陽性兒童的口腔牙菌斑中用PCR檢測幽門螺桿菌，發(fā)現(xiàn)68%胃幽門螺桿菌陽性者，其牙菌斑有幽門螺桿菌存在，同時在胃幽門螺桿菌陰性兒童也有24%在牙菌斑中找到幽門螺桿菌。彭惠等7采

7、用PCR,SSCP法檢測138例胃潰瘍和159例十二指腸潰瘍患者的唾液和胃黏膜，幽門螺桿菌的檢出率分別為71.7%和100%，98%口腔與胃內(nèi)的幽門螺桿菌呈現(xiàn)相同的單鏈構(gòu)象。作者對另一組126例成人慢性胃炎初診患者進行HPS檢測，同時接受14CUBT、RUT或WS銀染檢查，結(jié)果顯示HPS的陽性率為73.02%，14CUBT、RUT、WS銀染總陽性率為53.17。本組有消化不良癥狀的患兒HPS陽性率為88.57%，13CUBT陽性率為25.92%，13CUBT陽性率明顯偏低的原因有待進一步探討。但7例13CUBT陽性的患兒HPS檢測均呈陽性，支持胃幽門螺桿菌感染者唾液中存在高幽門螺桿菌檢出現(xiàn)象。

8、來自東京的另一報導講，他們對283個日本兒童（平均年齡是11.5歲）調(diào)。查發(fā)現(xiàn)83%的幽門螺旋桿菌者都有口腔螺旋桿菌的感染，這些患病兒童伴也有貧血現(xiàn)象5。有一批巴西的報導，兒童隨著年齡的增長螺旋桿菌感染率隨著增長8。朝鮮一篇報導稱，兒童有胃螺旋菌感染者，除了一般營養(yǎng)不良之外，還通常有明顯血清鐵含量下降（正常為39mg/ml,感染者為24mg/ml（9,10）。他們推測患有螺旋菌感染兒童身高、體重都低于同年齡兒童的真正原因正是血清鐵含量的下降。臺灣報導，成年人胃癌患者，他們多數(shù)是在兒童時期曾患有螺旋菌感染11。香港的報導說有些兒童的螺旋菌感染是由於接受螺旋菌感染患者的輸血而引起的12。這里有一個

9、重要的建議：輸血者必需事前通過螺桿菌檢查為陰性。目前，唾液幽門螺桿菌抗原檢測方法有PCR法、ELISA法和作者采用HPS法。PCR法需要10萬級凈化糸統(tǒng)和貴重儀器設備,有很高的假陽性檢,檢測麻煩, 費用昂貴。C13呼氣法的精確性和兒童的呼氣動作小有關,兒童做吞服C13膠囊之后，在收集氣體時，兒童沒有做好充分地呼氣動作，這樣也影響到收集標本的數(shù)量，這也影響到陽性率。HPS法是測定唾液中具有毒力標志細胞毒相關基因A(Cag A) 幽門螺桿菌釋放的尿素酶，這種尿素酶的結(jié)構(gòu)和口腔中其它細菌產(chǎn)生的尿素酶沒有交叉反應13。HPS法具有敏感性、特異性高，操作方便、快速等優(yōu)點，可用于口腔幽門螺桿菌感染的實驗室

10、診斷，胃幽門螺桿菌炎癥患者也有很高的陽性檢出率。HPS法為臨床提供了一種新的非侵入性無創(chuàng)幽門螺桿菌檢測方法14，也可用于臨床流行病學調(diào)查。作者感謝對浙江大學醫(yī)學院附屬兒童保健院和杭州鐵路小學的幫助。參考文獻1 葉國欽;中國專利証書, 第1282313 號,51 Int. Cl. 2009.G01N 33/569 (2006. 01), G01N 33/558 (2006.01), 專利號 ZL 200820183327.7.2 Barbara Braden, Hans-Georg Posselt, Peter Ahrens, Richard Kitz, C. F. Dietrich, and

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13、 gastritis or peptic ulcer disease.6 Patrizia Dominici et al. Familial clustering of Helicobacter pylori infection: population based study. BMJ. 319: 537-541, 1999.7 彭惠，潘國宗;在唾液中檢測幽門螺桿菌的意義J.中華內(nèi)科雜志，38:17,1-173, 1999.8 Andrea, B. C. et al; Helicobacter pylori Clolonization among Children up to 6 years:

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