加味當(dāng)歸補(bǔ)血湯對腫瘤轉(zhuǎn)移過程中血液流變學(xué)的影響

1、加味當(dāng)歸補(bǔ)血湯對腫瘤轉(zhuǎn)移過程中血液流變學(xué)的影響 龔繼勇1 張奉梅2 王興武1 齊寶鳳1 （1 山東省腫瘤醫(yī)院 山東濟(jì)南 250117 2 濱州醫(yī)學(xué)院 山東煙臺 264003）摘要：目的：探討加味當(dāng)歸補(bǔ)血湯是否具有改變腫瘤轉(zhuǎn)移過程中血液流變學(xué)狀態(tài)從而抑制腫瘤轉(zhuǎn)移的作用。方法：小鼠U14宮頸癌肺轉(zhuǎn)移造模，于10d、19d、25d測全血粘度、血小板聚集率、紅細(xì)胞壓積、血小板計(jì)數(shù)及計(jì)算紅細(xì)胞聚集指數(shù)率。結(jié)果：10d、19d，中藥組與模型組相比全血粘度三個切變率均有所降低，尤其低切變率較模型組顯著下降，P<0.05。血小板最大聚集率較模型組顯著下降，P<0.05。25d，中藥組低切變率較模型

2、組顯著升高，P<0.05；其余指標(biāo)各組比較差異不明顯，P>0.05，血小板最大聚集率較模型組顯著下降，P<0.01。結(jié)論：加味當(dāng)歸補(bǔ)血湯通過降低腫瘤小鼠升高的血液黏度、降低血小板聚集率升高來影響血液流變學(xué)從而具有一定的抑制腫瘤轉(zhuǎn)移的作用。關(guān)鍵字：加味當(dāng)歸補(bǔ)血湯，腫瘤轉(zhuǎn)移，血液流變學(xué)Modified Dangguibuxue Tang on tumor metastasis in the course of the impact of hemorheologyGong Jiyong1 Zhang Fengmei 2 Wang XingWu1 Qi Baofeng 1 (1 Ca

3、ncer Hospital in Shandong Province, Jinan, Shandong 250117 2 Binzhou Medical College Yantai, Shandong 264003)Abstract: Objective: To investigate whether the Modified Dangguibuxue soup with changes in the process of tumor metastasis hemorheology state to inhibit tumor metastasis role. Method: U14 cer

4、vical cancer in mice lung metastases model, in the 10 d, 19d, 25d measuring blood viscosity, platelet aggregation, hematocrit, platelet count and red blood cell aggregation index was calculated. Results: 10 d, 19d, the Board compared with the model of whole blood viscosity three shear rate has decre

5、ased, especially low-shear rate than the model group dropped significantly, P <0.05. Platelet aggregation model group than the rate dropped significantly, P <0.05. 25 d, the Board of low shear rate than the model group were significantly higher, P <0.05; other indicators of the difference b

6、etween the groups was not obvious, P> 0.05, platelet aggregation A significant decline in the model group, P <0.01. Conclusion: Modified Dangguibuxue soup tumors in mice by reducing elevated blood viscosity, reducing platelet aggregation rate increased to influence hemorheology thus has a role

7、 in inhibiting tumor metastasis.Keyword: Modified Dangguibuxue soup, tumor metastasis, hemorheology現(xiàn)代研究已經(jīng)證實(shí)惡性腫瘤患者血液呈高凝狀態(tài)，血流變慢，使脫落的腫瘤細(xì)胞不易被沖刷而附壁；同時產(chǎn)生的血栓也易產(chǎn)生渦流，為分散的癌細(xì)胞提供了整合、粘附機(jī)會，脫落的癌細(xì)胞易從軸流處移向管壁邊流，可能陷入內(nèi)皮細(xì)胞不規(guī)則處或附于血栓表面被包裹，從而逃避了免疫系統(tǒng)及化療藥物的攻擊，發(fā)生腫瘤轉(zhuǎn)移1。加味當(dāng)歸補(bǔ)血湯在我院用來輔助放化療，具有升白，提高免疫功能的作用23。為探討它是否可以改變腫瘤轉(zhuǎn)移過程中血液流變學(xué)狀

8、態(tài)從而抑制腫瘤轉(zhuǎn)移的作用，我做了如下實(shí)驗(yàn)，。1材料 1.1瘤細(xì)胞株 小鼠腹水型U14子宮頸癌瘤株，由山東省腫瘤醫(yī)院基礎(chǔ)研究中心提供。 1.2動物 昆明種健康小白鼠90只，體重1822g，雌性，SPF級，由魯抗實(shí)驗(yàn)動物中心提供(合格證書號：SDXK魯20070145)。 1.3藥品 加味當(dāng)歸補(bǔ)血湯(黃芪、當(dāng)歸、靈芝、雞血藤、補(bǔ)骨脂等），山東省腫瘤醫(yī)院制劑中心生產(chǎn)，批號：070318。肝素鈉注射液：上海第一生化藥業(yè)公司，批號：061016。 1.4主要儀器,LBY-NJ6型旋轉(zhuǎn)式血液粘度計(jì)及LBY-NJ2型血小板聚集儀，普利生集團(tuán)生產(chǎn)。 2方法 2.1子宮頸癌細(xì)胞株的制備：采用種鼠為腹腔生長U14

9、腹水型子宮頸癌的昆明小鼠，傳代7天后消毒小鼠腹部皮膚，局部穿刺抽取腹水0.2ml，腹水原液以無菌生理鹽水3倍稀釋。實(shí)驗(yàn)用昆明小鼠下腹部皮膚消毒，經(jīng)腹腔注射稀釋腹水0.2ml，傳代的成功率為100，每7天傳代一次，經(jīng)5次傳代后的小鼠腹水用于移植接種。 2.2腫瘤細(xì)胞懸液的制備：選取接種7天的U14腹水瘤小鼠6只，腹部皮膚消毒，使用1ml的注射器每只小鼠抽吸腹水(為乳白色的濃稠液體)lml，放入無菌EP管中混勻。 2.3 U14子宮頸癌肺轉(zhuǎn)移模型的復(fù)制每只實(shí)驗(yàn)小鼠經(jīng)背側(cè)皮下注射0.2ml子宮頸癌u14瘤細(xì)胞懸液，并繼續(xù)給藥25天。 2.4分組與給藥：接種24小時后，小鼠隨機(jī)分為2組,每組各30只。

10、分別為：模型組、中藥組。模型組小鼠每天灌胃生理鹽水O.1ml/lOg；中藥組每只小鼠灌胃加味當(dāng)歸補(bǔ)血湯O.1ml/lOg；另取30只健康小鼠生理鹽水O.1ml/lOg作陰性對照。 2.5觀察指標(biāo) 分別于實(shí)驗(yàn)開始后的第10天、19天、25天每組各取10只小鼠，戊巴比妥鈉40mg/kg腹腔注射麻醉，肝素抗凝，下腔靜脈取血，測定各組小鼠全血粘度；由ADP誘導(dǎo)，測血小板最大聚集率，測紅細(xì)胞壓積及血小板計(jì)數(shù)。紅細(xì)胞聚集指數(shù)：低切變率/高切變率4。2.6統(tǒng)計(jì)學(xué)處理計(jì)量資料采用SPSS統(tǒng)計(jì)軟件包作單因素卡方檢驗(yàn)比較各組之間的差異，當(dāng)P<0.05時為有意義。3結(jié)果3.1加味當(dāng)歸補(bǔ)血湯對接種10天的子宮頸

11、癌小鼠血液流變學(xué)變化的影響實(shí)驗(yàn)10天后血液流變學(xué)的改變?yōu)槟Ｐ徒M全血粘度三個切變率和中藥組低、中切變率較健康組均明顯升高，P<0.01；中藥組三個切變率較模型組均有所降低，尤其低切變率較模型組顯著下降，P<0.05。中藥組血小板最大聚集率較模型組顯著下降，P<0.05。(見表1)表1 10d 小鼠全血粘度和血小板聚集率比較(±SD)組別n血液粘度(nb)血小板最大聚集率低切變率中切變率高切變率健康組105.0246±0.6754.6341±0.7612.3592±0.41726.425±5.15模型組109.4801±

12、1.326*8.4728±1.783*4.2154±1.259*36.925±22.87中藥組107.3567±1.4387.1524±2.4163.4625±1.27724.971±4.98注： ”與健康組比較有顯著性差異，P<0.01；與模型組比較有顯著性差異，P<0.01。3.2加味當(dāng)歸補(bǔ)血湯對接種19天的子宮頸癌小鼠血液流變學(xué)變化的影響 實(shí)驗(yàn)19天后血液流變學(xué)的改變?yōu)槟Ｐ徒M全血粘度三個切變率和中藥組低、中切變率較健康組均明顯升高，P<0.01及P<0.05；中藥組三個切變率較模型組均有所降低，

13、尤其高切變率較模型組顯著下降，P<0.05。模型組血小板最大聚集率較健康組明顯增加，P<0.01；中藥組血小板最大聚集率較模型組顯著下降，P<0.05。(見表2)表2 19d 小鼠全血粘度和血小板聚集率比較(±SD)組別n血液粘度(nb)血小板最大聚集率低切變率中切變率高切變率健康組105.2421±0.7014.3147±0.8292.3449±0.45526.592±4.90模型組107.4856±1.154*6.6987±1.429*3.9394±1.317*57.74±26.75

14、*中藥組106.5740±1.1935.7985±1.6722.7978±1.10735.472±15.31 注：*與健康組比較有顯著性差異，P<O.05；*與健康組比較有顯著性差異，P<0.01。3.3加味當(dāng)歸補(bǔ)血湯對接種25天的子宮頸癌小鼠血液流變學(xué)變化的影響 實(shí)驗(yàn)25天后血液流變學(xué)的改變?yōu)槟Ｐ徒M全血粘度高切變率較健康組明顯升高，P<0.05；中藥組低切變率較模型組顯著升高，P<O.05；其余指標(biāo)各組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P>0.05。模型組血小板最大聚集率較健康組顯著增加，P<0.01；中藥組血小板最大聚集率較模

15、型組顯著下降，P<0.01。(見表3)表3 25d 小鼠全血粘度和血小板聚集率比較(±SD)組別n血液粘度(nb)血小板最大聚集率低切變率中切變率高切變率健康組102.4341±0.2974.5417±0.5655.3420±0.85627.585±7.03模型組103.2534±0.767*4.9563±1.7314.8714±1.45157.974±20.67*中藥組102.6831±1.1254.8334±1.5345.9846±0.80536.987±14.26 注：*與健康組比較有顯著性差異，P<0.01；與模型組比較有顯著性差異，P<0.01。 4結(jié)論由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可見，在腫瘤轉(zhuǎn)移過程中出現(xiàn)了全血黏度和血小板聚集率升高為主要特征的血液流變學(xué)改變。加味當(dāng)歸補(bǔ)血湯對腫瘤轉(zhuǎn)移過程中血液流變學(xué)影響是降低荷瘤小鼠升高的血液黏度，另外也起到了降低血小板聚集率升高這一腫瘤轉(zhuǎn)移的關(guān)鍵環(huán)節(jié)的作用。由于其抗血小板聚集的作用，抑制了細(xì)胞的黏附性和瘤栓的形成，從而抑制了腫瘤細(xì)胞的黏附、游走、穿透而抗轉(zhuǎn)移。由此，可以