食品中重金屬砷的測定 畢業(yè)論文

1、濟(jì)源職業(yè)技術(shù)學(xué)院 畢 業(yè) 設(shè) 計（論 文）(冶金化工系)題 目 食品中重金屬砷的測定 專 業(yè) 工業(yè)分析與檢驗 班 級 分析1101 姓 名 郭雨桐 學(xué) 號 11210105 指導(dǎo)教師 周鴻燕 完成日期 2013-09-10 目錄第一章 概述 31.1 砷的簡介.31.2 砷在食品中存在的形式及毒性.31.3 砷的測定意義.3第二章 食品中總砷的前處理和分析方法的優(yōu)化及應(yīng)用 .4第三章 食品中總砷及無機(jī)砷的測定3.1總砷的測定73.1.1氧化物原子熒光光度法（原理）.73.1.2 試劑 .73.1.3 儀器 .73.1.4 分析步驟 .83.1.5 標(biāo)準(zhǔn)系列制備 .93.1.6 測定 .93.1

2、.7 結(jié)果計算 .93.1.8 精密度.103.2銀鹽法.10 3.2.1 原理.113.2.2 試劑.113.2.3 儀器.123.2.4 試樣處理.133.2.5 分析步驟.133.2.6 結(jié)果計算.153.2.7 精密度.153.3無機(jī)砷測定 .153.3.1氧化物原子熒光光度法（原理）.153.3.2 試劑.163.3.3 儀器.163.3.4 分析步驟.163.3.5 儀器參考操作步驟.163.3.6 標(biāo)準(zhǔn)系列173.3.7 結(jié)果計算173.4 銀鹽法.173.4.1 原理.183.4.2 試劑183.4.3 儀器183.4.4 分析步驟193.4.5 標(biāo)注系列制備193.4.6 測

3、定203.4.7 結(jié)果計算20 3.4.8 精密度20結(jié)束語.20致謝.21參考文獻(xiàn).22摘要研究重金屬砷在食品中危害，食品中的有機(jī)砷和無機(jī)砷污染物是造成食源性疾病的重要原因，隨著經(jīng)濟(jì)的發(fā)展，食品中重金屬危害人們的健康的實例也屢見不鮮，食品安全問題不僅關(guān)系我國食品行業(yè)發(fā)展問題，還嚴(yán)重威脅人民的身體健康，為此受到有關(guān)部門的高度重視，保護(hù)消費者健康勢在必得。食品中的砷可能以不同的化學(xué)形式存在，包括總砷和無機(jī)砷，“無機(jī)砷”本身是致癌物質(zhì)，可引起癌癥,皮膚患病，心血管系統(tǒng)疾病，神經(jīng)系統(tǒng)中毒和糖尿病。無機(jī)砷以氧化物形式被提取，實現(xiàn)總砷和無機(jī)砷的分離。關(guān)鍵詞：重金屬、食品、砷、測定第一章 概述1.1神的簡

4、介砷(arsenic)是一個知名的化學(xué)元素，元素符號As,原子序33。第一次有關(guān)砷的記錄是在1250年，由大阿爾伯特所完成。它是一種以有毒著名的類金屬，并有許多的同素異形體，黃色（分子結(jié)構(gòu)，非金屬）和幾種黑，灰色的（類金屬）是一部分常見的種類。三種有著不同晶格結(jié)構(gòu)的類金屬形式砷存在與自然界（嚴(yán)格的說是砷礦，和更為稀有的自然輝砷礦，但更容易發(fā)現(xiàn)的形式是砷化物與砷酸鹽化合物，總共有數(shù)百種的礦物是已被發(fā)現(xiàn)的。）在中國古代，三氧化二砷被稱為砒霜。砷的形態(tài)分析研究中，最常用的砷化物提取溶劑是強(qiáng)酸效果較好的是甲醛的水溶液，最常用的分離檢測方法是液相色譜結(jié)合氧化物發(fā)生-原子熒光法，分析結(jié)果最全面最可靠的液相

5、色譜串聯(lián)原子質(zhì)譜和有機(jī)質(zhì)普法。每一種方法都有獨特的優(yōu)勢，當(dāng)然也存在實際樣品分析測定時需要具體問題具體對待。對食品砷形態(tài)分析中的前處理技術(shù)檢測技術(shù)等安全進(jìn)行研究和分析。1.2砷在食品中存在的形式及毒性砷有三種形式存在：不帶價（As），三價砷（arsenite），五價砷（arsenate）,其化合物對哺乳動物的毒性由價數(shù)的不同，有機(jī)或是無機(jī)，是氣體，液體，還是固體，溶解度高低，粒徑大小，吸收率，代謝率，純度等來決定。一般而言無機(jī)砷比有機(jī)砷要毒，三價砷比五價砷毒，但是我們對不帶價的砷的毒性了解還不多。砷化氫的毒性和其它的砷都不同，而它可說是目前已知的砷化合物中最毒的一個。砷的毒性以及對身體的危害在食

6、品安全方面，砷元素被認(rèn)為是一種有毒有害的元素，一直是人民關(guān)注的重點。低劑量的無機(jī)砷如果被長期攝入，雖然不會產(chǎn)生急性中毒反應(yīng)，但是對身體健還是產(chǎn)生很大的威脅，容易發(fā)生皮膚癌，膀胱癌，腎癌等疾病。砷和癌癥之間的關(guān)系，現(xiàn)在成為地方病調(diào)查和臨床診斷等領(lǐng)域研究的熱點問題?？茖W(xué)研究發(fā)現(xiàn)，砷元素以許多不同化合物的形式存在。不同的砷形態(tài)具有不同的物理及化學(xué)性質(zhì)，特別是其毒性依賴與其化學(xué)形態(tài)砷的無機(jī)化合物一般具有毒性，隨化合價和基因團(tuán)不同，其毒性依照砷化氫，三氧化二氫（俗稱砒霜），亞砷酸，砷酸的順序依次減小，食物中的無機(jī)砷（如亞砷酸根）進(jìn)入人體之后，使很多生物酶的活性降低或消失嚴(yán)重干擾細(xì)胞的生物功能，結(jié)構(gòu)和正常

7、代謝，而砷的有機(jī)化合物毒性一般比無機(jī)砷要小的很多，甚至有些烷基化程度較高的有機(jī)砷化合物，砷是高度毒性的元素，其毒性取決與砷的化學(xué)形式。過去一般公認(rèn)無機(jī)砷（As）比甲基化砷化合物的毒性大，據(jù)2000年世界衛(wèi)生組織報道研究，三價的甲基化砷化物毒性遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于無機(jī)砷，因此砷的形態(tài)分析成為非常重要的課題。在環(huán)保，食品檢驗檢疫行業(yè)開展了深入的研究，美國EPA將冷阱-還原蒸汽-原子吸收法推薦為四種毒性較高的砷形態(tài)分析的標(biāo)準(zhǔn)方法有毒性的砷形態(tài)：Aa(III)-As(V)-MMA-DMA。1.3 砷的測定意義砷是廣泛存在與食品中的有毒重金屬元素之一，容易在體內(nèi)積累，砷在體內(nèi)存在的有多種形態(tài)，不同形態(tài)砷之間的毒性差

8、異很大，若僅進(jìn)行砷總量的測定，不能正確反映其在食品中的安全性，目前食品中砷的形態(tài)越來越受到國際衛(wèi)生機(jī)構(gòu)的關(guān)注砷的形態(tài)分析也逐漸成為研究的熱點。砷是一種古老的毒物，攝入過多量有毒作用，近年來用于殺蟲劑，存在蔬菜水果殘留，產(chǎn)生慢性中毒危害人類健康。隨著社會的不斷發(fā)展，人們對食品的重視也越來越高，食品中重金屬砷超標(biāo)事件，引起人們高度重視和廣泛關(guān)注，所以關(guān)于砷的測定與研究我們勢在必行。砷是一種自然界常見的有毒有害元素，具有較強(qiáng)的毒性，同時存在致癌物質(zhì)，一次過量攝入砷容易引起砷急性中毒而死亡，長期低劑量攝入會人體蓄積從而引起慢性砷中毒和誘發(fā)各類皮膚病以及肝腎損傷，應(yīng)引起人們足夠的重視，因此，測定食品中的

9、砷對人們有著重大的意義。 第二章 食品中砷的前處理和分析方法的優(yōu)化及應(yīng)用砷的毒性與其存在形態(tài)有著密切的關(guān)系，不同形態(tài)的砷毒性差異巨大，根據(jù)砷的毒性和砷的主要存在形式，砷的形態(tài)大致可分為有機(jī)砷和無機(jī)砷。無機(jī)砷主要形態(tài)表現(xiàn)為亞砷酸鹽（As）和砷酸鹽（AsV）兩種，均具有較強(qiáng)的毒性，而有機(jī)砷的形態(tài)表現(xiàn)多種多樣，目前已知的主要存在形態(tài)有甲基砷（包括一甲基砷MMA和二甲基砷DMA），砷甜菜堿 AsB，砷膽堿AsC，砷糖AsS砷脂AsL等。有機(jī)砷的眾多形態(tài)中，甲基砷被認(rèn)為有微弱的毒性，而其余形態(tài)更為復(fù)雜的有機(jī)砷由于可以被人體迅速排出體外而基本認(rèn)為是無毒或毒性低級，基本對人體無害。各形態(tài)砷的毒性大小順序為：

10、AsH3>亞砷酸鹽(AsIII)>砒霜（As2O3）>砷酸鹽（AsV）>一甲基砷酸（MMA）>二甲基砷酸（DMA）>砷甜菜堿（AsB），砷膽堿（AsC）等。FAO/WHO1998年提出的無機(jī)砷暫定每人每周耐受攝入量為0.015mg/kg.bw，以人體重60公斤計算每人每日耐受攝入量為0.129mg。我國在國家標(biāo)準(zhǔn)GB2762-2005食品中污染物限量中規(guī)定了食品總砷的限量標(biāo)準(zhǔn)，而由于砷的存在形態(tài)的多樣性以及毒性的差異，單單以總砷含量來評價砷對機(jī)體健康的影響并不科學(xué)。在國標(biāo)方法GB/T5009.11-2003中無機(jī)砷及無機(jī)砷的測定方法?？偵闇y定采用的前處理方法

11、有兩種，一種是500ºC干灰化，另一種是應(yīng)用氧化性酸進(jìn)行濕法消解，但是在應(yīng)用過程中發(fā)現(xiàn)兩種前處理方法某些樣品進(jìn)行總砷測定時均存在回收率偏低的問題，且應(yīng)用兩種前處理方法進(jìn)行總砷的測定同一樣品所得結(jié)果偏低的問題，且應(yīng)用兩種前處理方法進(jìn)行總砷的測定同一樣品所得結(jié)果也存在大差異，說明這兩種前處理方法并不合適所有類型的樣品。國標(biāo)方法GB5009.11-2003中測定無機(jī)砷的方法的第一法（酸浸提-原子熒光法）分析特異性差，由于各種形態(tài)的砷被提取出來，往往得出假陽性的結(jié)果，而第二法（酸浸提-銀鹽法）則同樣存在特異性差的問題，而且靈敏度低，不能滿足含量較低的食品樣品的無機(jī)砷測定。鑒于以上原因中國疾病

12、防控中心已經(jīng)對該方法提出了改進(jìn)，建立了液相色譜-在線消解-氧化物原子熒光譜法測定無機(jī)砷的方法，目前正在驗證狀態(tài)。新提出的無機(jī)砷的測定方法所使用的形態(tài)分析儀比較昂貴，以當(dāng)前中國的國情暫時無法在縣區(qū)級基層檢測機(jī)構(gòu)推廣。有鑒于此，有必要對總砷及無機(jī)砷的分析測定方法進(jìn)行研究改進(jìn)，已建立合適向基層檢測機(jī)構(gòu)推廣應(yīng)用的總砷及無機(jī)砷測定方法。國際上總砷測定基本采用靈敏度，精確度和檢測限均很出色的一些檢測手段，如ICP-MS，HG-AFS，HG-AAS等。無機(jī)砷的測定基本采用各種聯(lián)用技術(shù)，通過分離能力出色的色譜技術(shù)與特異性檢測器聯(lián)用，例如色譜與原子吸收技術(shù)聯(lián)用，色譜與原子熒光檢測技術(shù)聯(lián)用，色譜與電感偶合等離子質(zhì)

13、譜聯(lián)用等。這些技術(shù)都非常適合用于形態(tài)分析，但是由于所使用儀器設(shè)備價格昂貴，使用成本較高，并不能在國內(nèi)推廣使用。根據(jù)我國基層檢測機(jī)構(gòu)儀器設(shè)備的配置，絕大部分實驗室都配有液相色譜和我國擁有自主知識產(chǎn)權(quán)的原子熒光光譜儀，配有砷空心陰極燈的原子熒光光譜儀可以特異性檢測砷，在總砷的分析檢測方面只需要對前處理方法進(jìn)行優(yōu)化改進(jìn)，解決回收率低等問題即可使用原子熒光光譜儀來直接測定，而液相色譜則可以幫助我們實現(xiàn)無機(jī)砷的分離，然后直接進(jìn)行原子熒光光譜法測定無機(jī)砷，找到一個合適的提取分離條件，使無機(jī)砷能充分和有機(jī)砷分離，確定無機(jī)砷的保留時間，完全收集無機(jī)砷洗脫液，然后直接應(yīng)用原子熒光光譜儀進(jìn)行測定。這樣我們基層檢測

14、機(jī)構(gòu)就可以達(dá)到利用已有的儀器開展總砷及無機(jī)砷的測定工作的目的，而不需要購買昂貴的儀器支付昂貴的運營費。同時可以解決基層檢測機(jī)構(gòu)應(yīng)缺乏昂貴的儀器而無法按照我國食品中砷衛(wèi)生限量標(biāo)準(zhǔn)來完成檢測任務(wù)的問題，還能有效開展食品衛(wèi)生監(jiān)督，保證人們的食品安全，保護(hù)人民的身體健康。本文通過對國家標(biāo)準(zhǔn)檢測方法GB/T5009.11-2003中總砷分析兩種消解方法（濕法消解，干灰化法）進(jìn)行比對優(yōu)化，通過兩種消化方法的優(yōu)缺點比較，分析查找分析結(jié)果不理想的原因，建立了適合與不同類型食品樣品的消解效果更好的通過消解方法。通過對不同類型食品樣品中砷提取條件的研究和色譜柱分離條件的考察，建立并優(yōu)化了針對不同類型食品樣品的提取

15、方法和陰離子交換色譜柱分離無機(jī)砷的方法。對原子熒光光譜儀測定砷的儀器條件進(jìn)行了優(yōu)化選擇，通過對反應(yīng)酸濃度，還原劑濃度，燈電流，載氣流量等影響砷測定的關(guān)鍵因素進(jìn)行了考察，選擇最佳原子熒光光譜儀的儀器測條件。同時進(jìn)行了方法的回收率，線性，精密度，準(zhǔn)確度，以及檢測限的考察，研究砷在原子熒光光譜儀上的最佳測定條件。在原子熒光光譜法測定總砷的方法優(yōu)化中，對儀器測定條件及樣品前處理進(jìn)行了改進(jìn)優(yōu)化，對國家標(biāo)準(zhǔn)方法GB/T5009-2003中總砷測定回收率偏低的原因進(jìn)行了分析總結(jié)，分別針對不同類別食品樣品的消解進(jìn)行了研究，建立了濕消解-千灰化聯(lián)合消解原子熒光光譜法測定總砷的方法。在對砷存在形態(tài)較復(fù)雜的樣品進(jìn)行

16、總砷的分析測定中，微波消解和濕法消解由于消解溫度的限制，并不能把各種形態(tài)的砷完全消解成為可以直接測定的無機(jī)砷的狀態(tài)，從而造成總砷的測定結(jié)果偏低，而干灰化法則由于灰化不完全或樣品炭化過程中大量氣體產(chǎn)生氧化鎂覆蓋層遭到破壞等原因造成砷的損失，使總砷的測定結(jié)果偏低。在本方法中采用硝酸沸水浴，對待測樣品進(jìn)行預(yù)消解之后，再加入助溶劑硝酸鎂并覆蓋砷吸收劑輕質(zhì)氧化鎂進(jìn)行干灰化的前處理方法，很好的解決濕法消解不完全和干法消解容易損失的難題。在線性范圍內(nèi)，濕法-干灰化法聯(lián)合消解，原子熒光光譜測定總砷，線性相關(guān)系數(shù)大于0.999，回收率在94.4-102.6%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差小于8%。本方法在解決了前處理問題后，測

17、定了總砷的結(jié)果準(zhǔn)確度得到了保證，對含有復(fù)雜形態(tài)砷的樣品測定結(jié)果優(yōu)于國標(biāo)GB/T5009.11-2003中采用了6mmol/L鹽酸熱侵提的方法進(jìn)行提取，侵提液直接進(jìn)行原子熒光光譜法測定或者比色法測定，原因是鹽酸熱侵能使樣品中某些形態(tài)的有機(jī)砷水解產(chǎn)生MMA和DMA，以及本底中所含MMA和DMA均會干擾無機(jī)砷的測定。本方法通過對不同提取試劑的提取效果的考察，建立并優(yōu)化三氟乙酸（TFA）提取的方法，以2.0mol/L的TFA為提取劑在80ºC侵提6小時，提取液經(jīng)過高速離心機(jī)離心，取上清液通過減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮。在常溫下向濃縮液加入氧化劑過氧化氫，使AsIII轉(zhuǎn)化為AsV，經(jīng)過陰離子交換色譜柱分

18、離實現(xiàn)AsV與MMA、DMA的分離，收集AsV洗脫液進(jìn)行原子熒光光譜法測定。以20mmol/L磷酸二氫銨（PH=6.0）為洗脫液，Hamilton PRPX-100陰離子交換色譜柱進(jìn)行等梯度洗脫，流速為1mL/min，收集保留時間12分鐘至16分鐘之間的色譜柱洗脫液，不經(jīng)消解直接進(jìn)行原子熒光光譜儀測定。結(jié)果顯示，本方法在0-80ug/L的范圍內(nèi)呈現(xiàn)良好線性，相關(guān)系數(shù)r=0.9995。定值參考物和實際樣品測定結(jié)果回收率在91.7-105.0%，本方法提取效率高，避免了MMA和DMA所帶來的假陽性。能準(zhǔn)確定各種類型食品樣品中的無機(jī)砷，靈敏度和準(zhǔn)確度均能滿足國家標(biāo)準(zhǔn)GB2762-2OO5對不同食品樣

19、品的無機(jī)砷限量標(biāo)準(zhǔn)的要求。在有良好分析方法的保證下，對食品中的總砷和無機(jī)砷的測定分析。 第三章 食品中總砷及無機(jī)砷測定3.1總砷的測定本方法檢出限：氫化物原子熒光光度法：0.01 mg/kg，線性范圍為0 ng/mL200 ng/mL。銀鹽法：0.2 mg/kg；砷斑法：0.25 mg/kg；硼氫化物還原比色法：0.05 mg/kg。3.1 .1 氫化物原子熒光光度法（原理）:食品試樣經(jīng)濕消解或干灰化后，加入硫脲使五價砷預(yù)還原為三價砷，再加入硼氫化鈉或硼氫化鉀使還原生成砷化氫，由氬氣載入石英原子化器中分解為原子態(tài)砷，在特制砷空心陰極燈的發(fā)射光激發(fā)下產(chǎn)生原子熒光，其熒光強(qiáng)度在固定條件下

20、與被測液中的砷濃度成正比，與標(biāo)準(zhǔn)系列比較定量。3.1.2試劑（1）氫氧化鈉溶液(2 g/L)。（2） 硼氫化鈉(NaBH)溶液(10 g/L)：稱取硼氫化鈉10.0g，溶于2 g/L氫氧化鈉溶液1 000 mL中混勻。此液于冰箱可保存10天，取出后應(yīng)當(dāng)日使用(也可稱取14 g硼氫化鉀代替10 g硼氫化鈉)。（3）硫脲溶液(50 g/L)。（4）硫酸溶液：量取硫酸100 mL，小心倒入水900 ml。中，混勻。（5） 氫氧化鈉溶液(100 g/L)(供配制砷標(biāo)準(zhǔn)溶液用，少量即夠)。（6） 砷標(biāo)準(zhǔn)溶液a. 砷標(biāo)準(zhǔn)儲備液：含砷01 mg/mL。精確稱取于100：干燥以上的三氧化二砷(As203)01

21、32 o g。加。00 g/L氫氧化鈉10mL，溶解，用適量水轉(zhuǎn)入1 000mL容量瓶中，加(1+9)硫酸25mL，用水定容至刻度。 b. 砷使用標(biāo)準(zhǔn)液：含砷1 /mL。吸取100 mL砷標(biāo)準(zhǔn)儲備液于100 mL容量瓶中，用水稀釋至刻度。此液應(yīng)當(dāng)日配制使用。(7)濕消解試劑：硝酸、硫酸、高氯酸。(8)千灰化試劑：六水硝酸鎂(150 g/L)、氯化鎂、鹽酸(1+1)。3.1.3 儀器原子熒光光度計。3.1.4 分析步驟(1)試樣消解a.濕消解：固體試樣稱樣1 g25 g液體試樣稱樣5 g10 g(或mL)(精確至小數(shù)點后第二位)，置人50 mL100 mL錐形瓶中，同時做兩份試劑空白。加硝酸20

22、 mL40 mL，硫酸125 mL，搖勻后放置過夜，置于電熱板上加熱消解。若消解液處理至10 mL左右時仍有未分解物質(zhì)或色澤變深，取下放冷，補(bǔ)加硝酸5 mL10 mL，再消解至10 mL左右觀察，如此反復(fù)兩三次，注意避免炭化。如仍不能消解完全，則加入高氯酸1 mL2 mL，繼續(xù)加熱至消解完全后，再持續(xù)蒸發(fā)至高氯酸的白煙散盡，硫酸的白煙開始冒出。冷卻，加水25 mL，再蒸發(fā)至冒硫酸白煙。冷卻，用水將內(nèi)容物轉(zhuǎn)入25 mL容量瓶或比色管中，加入50 g/L硫脲25 mL，補(bǔ)水至刻度并混勻，備測。b.干灰化：一般應(yīng)用于固體試樣。稱取1 g25 g(精確至小數(shù)點后第二位)于50 mL100 mL坩堝中，

23、同時做兩份試劑空白。加150 g/L硝酸鎂10 mL混勻，低熱蒸于，將氧化鎂1 g仔細(xì)覆蓋在干渣上，于電爐上炭化至無黑煙，移入550C：高溫爐灰化4 h。取出放冷，小心加入(1+1)鹽酸10mL，以中和氧化鎂并溶解灰分，轉(zhuǎn)入25 mL容量瓶或比色管中，向容量瓶或比色管中加入50 g/L硫脲25 mL，另用(1+9)硫酸分次涮洗坩堝后轉(zhuǎn)出合并，直至25 mL刻度，混勻備測。3.1.5標(biāo)準(zhǔn)系列制備取25 mL，容量瓶或比色管6支，依次準(zhǔn)確加入1 pg/mL砷使用標(biāo)準(zhǔn)液0、005、02、05、20、50mL(備相當(dāng)于砷濃度0、20、200、800、2000 ng/mL)各加(1+9)硫酸125mL，

24、50 g/L硫脲2.5 mL，補(bǔ)加水至刻度，混勻備測。3.1.6測定a.儀器參考條件：光電倍增管電壓：400 V；砷空心陰極燈電流：35 mA；原子化器：溫度820850；高度7 mm；氬氣流速：載氣600 Ml/min；測量方式：熒光強(qiáng)度或濃度直讀，讀數(shù)方式：峰面積讀數(shù)延遲時間：1 s讀數(shù)時間：15 s；硼氫化鈉溶液加入時間：5 s；標(biāo)液或樣液加入體積：2 mL。b.濃度方式測量：如直接測熒光強(qiáng)度，則在開機(jī)并設(shè)定好儀器條件后，預(yù)熱穩(wěn)定約20 min。按“B”鍵進(jìn)入空白值測量狀態(tài)，連續(xù)用標(biāo)準(zhǔn)系列的“0”管進(jìn)樣，待讀數(shù)穩(wěn)定后，按空檔鍵記錄下空白值(即讓儀器自動扣底)即可開始測量。先依次測標(biāo)準(zhǔn)系列

25、(可不再測“0”管)。標(biāo)準(zhǔn)系列測完后應(yīng)仔細(xì)清洗進(jìn)樣器(或更換一支)，并再用“O”管測試使讀數(shù)基本回零后，才能測試劑空白和試樣，每測不同的試樣前都應(yīng)清洗進(jìn)樣器。記錄(或打印)下測量數(shù)據(jù)。c.儀器自動方式：利用儀器提供的軟件功能可進(jìn)行濃度直讀測定，為此在開機(jī)、設(shè)定條件和預(yù)熱后，還需輸入必要的參數(shù)，即：試樣量(g或mL)；稀釋體積(mL)；進(jìn)樣體積(mL)；結(jié)果的濃度單位；標(biāo)準(zhǔn)系列各點的重復(fù)澳0量次數(shù)；標(biāo)準(zhǔn)系列的點數(shù)(不計零點)，及各點的濃度值。首先進(jìn)入空白值測量狀態(tài)，連續(xù)用標(biāo)準(zhǔn)系列的“0”管進(jìn)樣以獲得穩(wěn)定的空白值并執(zhí)行自動扣底后，再依次測標(biāo)準(zhǔn)系列(此時“0”管需再測一次)在測樣液前，需再進(jìn)入空白值

26、測量狀態(tài)，先用標(biāo)準(zhǔn)系列“0”管測試使讀數(shù)復(fù)原并穩(wěn)定后，再用兩個試劑空白各進(jìn)一次樣，讓儀器取其均值作為扣底的空白值，隨后即可依次測試樣。測定完畢后退回主菜單，選擇“打印報告”即可將測定結(jié)果打出。3.1.7結(jié)果計算 如果采用熒光強(qiáng)度測量方式，則需先對標(biāo)準(zhǔn)系列的結(jié)果進(jìn)行回歸運算(由于測量時“O”管強(qiáng)制為0，故零點值應(yīng)該輸入以占據(jù)一個點位)，然后根據(jù)回歸方程求出試劑空白液和試樣被測液的砷濃度，再按式(1)計算試樣的砷含量：X（C1C0）/m×（25/1000）式中：X試樣的砷含量，單位為毫克每千克或毫克每升(mg/kg或mg/L)c試樣被測液的濃度，單位為納克每毫升(ng/rnL)

27、；G試劑空白液的濃度，單位為納克每毫升(ng/mL)；m試樣的質(zhì)量或體積，單位為克或毫升(g/mL)。計算結(jié)果保留兩位有效數(shù)字。3.1.8 精密度濕消解法在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨立測定結(jié)果的絕對差值不得超過算術(shù)平均值的10。干灰化法在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨立測定結(jié)果的絕對差值不得超過算術(shù)平均值的15。3.1.9準(zhǔn)確度濕消解法測定的回收率為90100；干灰化法測定的回收率為85100。 3.2 銀鹽法3.2.1原理試樣經(jīng)消化后，以碘化鉀、氯化亞錫將高價砷還原為三價砷，然后與鋅粒和酸產(chǎn)生的新生態(tài)氫生成砷化氫，經(jīng)銀鹽溶液吸收后，形成紅色膠態(tài)物，與標(biāo)準(zhǔn)系列比較定量。3.2.2試劑(1)硝

28、酸。硫酸。鹽酸。氧化鎂。無砷鋅粒。(2)硝酸一高氯酸混合溶液(4+1)：量取80 mL硝酸，加20 mL，高氯酸，混勻。(3)硝酸鎂溶液(150 g/L)：稱取15 g硝酸鎂Mg(NO3)2·6H2O溶于水中，并稀釋至100 mL。(4)碘化鉀溶液(150 g/L)：貯存于棕色瓶中。(5)酸性氯化亞錫溶液：稱取40 g氯化亞錫(SnCIz·2H：O)，加鹽酸溶解并稀釋至100 mL，加人數(shù)顆金屬錫粒。(6)鹽酸(1+1)：量取50 mL鹽酸加水稀釋至100 mL。(7)乙酸鉛溶液(100 g/L)。(8)乙酸鉛棉花：用乙酸鉛溶液(：0.01 g/mL)浸透脫脂棉后，壓除多余

29、溶液，并使疏松，在100以下干燥后，貯存于玻璃瓶中。(9)氫氧化鈉溶液(200 g/L)。(10)硫酸(6+94)：量取60 mL硫酸加于80 mL水中，冷后再加水稀釋。(11)二乙基二硫代氨基甲酸銀一三乙醇胺一三氯甲烷溶液：稱取025 g二乙基二硫代氨基甲酸銀(czHs)zNcszAg置于乳缽中，加少量三氯甲烷研磨，移入100mL量筒中，加入18mL三乙醇胺，再用三氯甲烷分次洗滌乳缽，洗液一并移人量簡中，再用三氯甲烷稀釋至100 mL，放置過夜。濾人棕色瓶中貯存。(12)砷標(biāo)準(zhǔn)儲備液：準(zhǔn)確稱取0132 0 g在硫酸干燥器中干燥過的或在100干燥2 h的三氧化二砷，加5 mL氫氧化鈉溶液(20

30、0 g/L)，溶解后加25 mL，硫酸(6+94)，移入1 000 mL容量瓶中，加新煮沸冷卻的水稀釋至刻度，貯存于棕色玻塞瓶中。此溶液每毫升相當(dāng)于010mg砷。(13)砷標(biāo)準(zhǔn)使用液：吸取10 mL砷標(biāo)準(zhǔn)儲備液，置于100 mL容量瓶中，加1 mL硫酸(6+94)，加水稀釋至刻度，此溶液每毫升相當(dāng)于Lo0ug砷。3.2.3儀器分光光度計。（1）測砷裝置：見圖1。1150 mL錐形瓶；2導(dǎo)氣管；3乙酸鉛棉花；410 mL刻度離心管。圖1標(biāo)準(zhǔn)（2）100 mL150 mL。錐形瓶：19號標(biāo)準(zhǔn)口。（3）導(dǎo)氣管：管口19號口或經(jīng)堿處理后洗凈的橡皮塞與錐形瓶密合時不應(yīng)漏氣。管的另一端管徑為10mm。（4

31、）吸收管：10 mL刻度離心管作吸收管用。3.2.4試樣處理（1）硝酸一高氯酸一硫酸法a.糧食、粉絲、粉條、豆干制品、糕點、茶葉等及其他含水分少的固體食品：稱取500 g或1000 g的粉碎試樣，置于250 mL500 mL定氮瓶中，先加水少許使?jié)駶?，加?shù)粒玻璃珠,10 mL15 mL硝酸一高氯酸混合液，放置片刻，小火緩緩加熱，待作用緩和，放冷。沿瓶壁加入5 mL或10mL硫酸，再加熱，至瓶中液體開始變成棕色時，不斷沿瓶壁滴加硝酸一高氯酸混合液至有機(jī)質(zhì)分解完全。加大火力，至產(chǎn)生白煙，待瓶口白煙冒凈后，瓶內(nèi)液體再產(chǎn)生白煙為消化完全，該溶液應(yīng)澄明無色或微帶黃色，放冷。(在操作過程中應(yīng)注意防止爆沸或

32、爆炸)加20 mL水煮沸，除去殘余的硝酸至產(chǎn)生自煙為止，如此處理兩次，放冷。將冷后的溶液移入50 mL或100 mk容量瓶中，用水洗滌定氮瓶，洗液并入容量瓶中，放冷，加水至刻度，混勻。定容后的溶液每10 mL相當(dāng)于1 g試樣，相當(dāng)加入硫酸量1 mL。取與消化試樣相同量的硝酸一高氯酸混合液和硫酸，按同一方法做試劑空白試驗。b.蔬菜、水果：稱取2500 g或5000 g洗凈打成勻漿的試樣，置于250 mL500 mL，定氮瓶中，加數(shù)粒玻璃珠、10 mL15 mL硝酸一高氯酸混合液，以下按1211自“放置片刻”起依法操作，但定容后的溶液每10 mL，相當(dāng)于5 g試樣，相當(dāng)加入硫酸1 mL。c.醬、醬

33、油、醋、冷飲、豆腐、腐乳、醬腌菜等：稱取1000 g或2000 g試樣(或吸取100 mL或200 mL液體試樣)，置于250 mL500 mL定氮瓶中，加數(shù)粒玻璃珠、5 mL15 mL硝酸一高氯酸混合液。以下按1211自“放置片刻”起依法操作，但定容后的溶液每10 mL相當(dāng)于2 g或2 mL試樣。d.含酒精性飲料或含二氧化碳飲料：吸取1000 mL或2000mL，試樣，置于250 mL500 mL定氮瓶中，加數(shù)粒玻璃珠，先用小火加熱除去乙醇或二氧化碳，再加5 mL10 mL硝酸一高氯酸混合液，混勻后，以下按1211自“放置片刻”起依法操作，但定容后的溶液每10mL相當(dāng)于2mL試樣。e.含糖量

34、高的食品：稱取500 g或100 g試樣，置于250 mL500mL定氮瓶中，先加少許水使?jié)駶?，加?shù)粒玻璃珠,5 mLl0mL硝酸一高氯酸混合后，搖勻。緩緩加入5 mL或10 mL硫酸，待作用緩和停止起泡沫后，先用小火緩緩加熱(糖分易炭化)，不斷沿瓶壁補(bǔ)加硝酸一高氯酸混合液，待泡沫全部消失后，再加大火力，至有機(jī)質(zhì)分解完全，發(fā)生白煙，溶液應(yīng)澄明無色或微帶黃色，放冷。以下按1211自“加20 mL水煮沸”起依法操作。f.水產(chǎn)品：取可食部分試樣搗成勻漿，稱取500 g或1000 g(海產(chǎn)藻類、貝類可適當(dāng)減少取樣量)，置于250 mL500 mL定氮瓶中，加數(shù)粒玻璃珠，5 mL10 mL硝酸一高氯酸混

35、合液，混勻后，以下按1211自“沿瓶壁加入5 mL或10 mL硫酸”起依法操作。(2)硝酸·硫酸法以硝酸代替硝酸一高氯酸混合液進(jìn)行操作。(3)灰化法a.糧食、茶葉及其他含水分少的食品：稱取5.00 g磨碎試樣，置于坩堝中，加l g氧化鎂及10mL硝酸鎂溶液，混勻，浸泡4 h。于低溫或置水浴鍋上蒸干，用小火炭化至無煙后移人馬弗爐中加熱至550，灼燒3 h4 h，冷卻后取出。加5 mL水濕潤后，用細(xì)玻棒攪拌，再用少量水洗下玻棒上附著的灰分至坩堝內(nèi)。放水浴上蒸干后移人馬弗爐550灰化2 h，冷卻后取出。加5rnL水濕潤灰分，再慢慢加入10mL鹽酸(1+1)，然后將溶液移人50mL容量瓶中，

36、坩堝用鹽酸(1+1)洗滌3次，每次5 mL，再用水洗滌3次，每次5 mL，洗液均并人容量瓶中，再加水至刻度，混勻。定容后的溶液每10 mL相當(dāng)于1 g試樣，其加入鹽酸量不少于(中和需要量除外)15 mL，全量供銀鹽法測定時，不必再加鹽酸。 按同一操作方法做試劑空白試驗。b.植物油：稱取500 g試樣，置于50mL瓷坩堝中，加10 g硝酸鎂，再在上面覆蓋2 g氧化鎂，將坩堝置小火上加熱，至剛冒煙，立即將坩堝取下，以防內(nèi)容物溢出，待煙小后，再加熱至炭化完全。將坩堝移至馬弗爐中，550以下灼燒至灰化完全，冷后取出。加5 mL水濕潤灰分，再緩緩加入15 mL鹽酸(1+1)，然后將溶液移人50 mL容量

37、瓶中，坩堝用鹽酸(1+1)洗滌5次，每次5 ml，洗液均并入容量瓶中，加鹽酸(1+1)至刻度，混勻。定容后的溶液每10 mL相當(dāng)于1 g試樣，相當(dāng)于加入鹽酸量(中和需要量除外)15 mL。按同一操作方法做試劑空白試驗。c.水產(chǎn)品：取可食部分試樣搗成勻漿，稱取500 g，置于坩堝中，加1 g氧化鎂及0 mL硝酸鎂溶液，混勻，浸泡4 h以下按a自“于低溫或置水浴鍋上蒸干”起依法操作。3.2.5分析步驟吸取一定量的消化后的定容溶液(相當(dāng)于5 g試樣)及同量的試劑空白液，分別置于150mL錐形瓶中，補(bǔ)加硫酸至總量為5 mL，加水至50 mL55 mL。(1)標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制吸取0、20、40、60、80

38、、100mI。砷標(biāo)準(zhǔn)使用液(相當(dāng)0、20、40、60、80、100 ug)，分別置于150 mi錐形瓶中，加水至40 mL，再加10 mL硫酸(1+1)。(2)用濕法消化液于試樣消化液、試劑空白液及砷標(biāo)準(zhǔn)溶液中各加3 mL碘化鉀溶液(150 g/L)、05 mL酸性氯化亞錫溶液，混勻，靜置15 1Tln。各加入3 g鋅粒，立即分別塞上裝有乙酸鉛棉花的導(dǎo)氣管，并使管尖端插入盛有4 mL銀鹽溶液的離心管中的液面下，在常溫下反應(yīng)45 min后，取下離心管，加三氯甲烷補(bǔ)足4 mL，用1 cm比色杯，以零管調(diào)節(jié)零點，于波長520 nm處測吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。(3)用灰化法消化液取灰化法消化液及試劑空白

39、液分別置于150 mL錐形瓶中。吸取0、20、40、60、80、100mL砷標(biāo)準(zhǔn)使用液(相當(dāng)0、20、40、60、80、100 Fg砷)，分別置于150 mL錐形瓶中，加水至435 mL，再加65 mL鹽酸。以下按132自“于試樣消化液”起依法操作。3.2.6結(jié)果計算X= (A1-A2) ×1000/ (m×V2)/(V1×1000) 式中：x試樣中砷的含量，單位為毫克每千克或毫克每升(mg/kg或nag/L)；A測定用試樣消化液中砷的質(zhì)量，單位為微克(pg)；A試劑空白液中砷的質(zhì)量，單位為微克(Pg)；m試樣質(zhì)量或體積，單位為克或毫升(g或mL)；V試樣消化液的

40、總體積，單位為毫升(mL)；U測定用試樣消化液的體積，單位為毫升(mL)。計算結(jié)果保留兩位有效數(shù)字。3.2.7精密度在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨立測定結(jié)果的絕對差值不得超過算術(shù)平均值的10。無機(jī)砷的測定本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了各類食品中總無機(jī)砷的測定方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于各類食品中總無機(jī)砷的測定。本方法檢出限：原子熒光光譜分析法：固體試樣004 mg/kg，液體試樣0004 mg/L；銀鹽法01 mg/kg。線性范圍：10 pg100 pg。3.3氫化物原子熒光光度法3.3.1原理食品中的砷可能以不同的化學(xué)形式存在，包括無機(jī)砷和有機(jī)砷。在6 mol/L鹽酸水浴條件下，無機(jī)砷以氯化物形式被提取，實現(xiàn)無機(jī)砷和有機(jī)砷

41、的分離。在2 mol/L鹽酸條件下測定總無機(jī)砷。3.3.2試劑（1）鹽酸溶液(1+1)：量取250 mL鹽酸，慢慢倒入250 mL水中，混勻。（2）氫氧化鉀溶液(2 g/L)：稱取氫氧化鉀2 g溶于水中，稀釋至1 000 m1。（3）硼氫化鉀溶液(7 g/L)：稱取硼氫化鉀35 g溶于500 mL，2 g/L氫氧化鉀溶液中。（4）碘化鉀(100 g/L)一硫脲混合溶液(50 g/L)：稱取碘化鉀10 g，硫脲5 g溶于水中，并稀釋至100 mL,混勻。（5）三價砷(As”)標(biāo)準(zhǔn)液：準(zhǔn)確稱取三氧化二砷0132 0 g，加100 g/L氫氧化鉀1mL和少量亞沸蒸餾水溶解，轉(zhuǎn)入100 mL容量瓶中定

42、容。此標(biāo)準(zhǔn)溶液含三價砷(As)1 mg/mL。使用時用水逐級稀釋至標(biāo)準(zhǔn)使用液濃度為三價砷(As)1 Fg/mL。冰箱保存可使用7天。3.3.3儀器 玻璃儀器使用前經(jīng)15硝酸浸泡24 h。（1）原子熒光光度計。（2）恒溫水浴鍋。3.3.4分析步驟試祥處理:a.固體試樣：稱取經(jīng)粉碎過80目篩的干樣250 g(稱樣量依據(jù)試樣含量酌情增減)于25 mL具塞刻度試管中，加鹽酸(1+1)溶液20 mL混勻，或稱取鮮樣500 g(試樣應(yīng)先打成勻漿)于25 mL具塞刻度試管中，加5 mL鹽酸，并用鹽酸(1+1)溶液稀釋至刻度，混勻。置于60水浴鍋18 h，其間多次振搖。使試樣充分浸提。取出冷卻，脫脂棉過濾，取

43、4 mL濾液于10 mL容量瓶中，加碘化鉀硫脲混合溶液1 mL正辛醇(漓泡劑)8滴，加水定容。放置10 min后測試樣中無機(jī)砷。如渾濁，再次過濾后測定。同時做試劑空白試驗。注：試樣浸提冷卻后，過濾前用鹽酸(1+1)溶液定容至25 mL。b.液體試樣：取4mL試樣于10mL，容量瓶中，加鹽酸(1+1)溶液4mL，碘化鉀一硫脲混合溶液1mL，正辛醇8滴，定容混勻，測定試樣中總無機(jī)砷。同時做試劑空白試驗。3.3.5儀器參考操作條件光電倍增管(PMT)負(fù)高壓；340 V；砷空心陰極燈電流；40 mA；原子化器高度：9 ulm；載氣流速600 Ml/min讀數(shù)延遲時間：2 s讀數(shù)時間：12 s讀數(shù)方式：

44、峰面積標(biāo)液或試樣加人體積：05 mL。3.3.6標(biāo)準(zhǔn)系列無機(jī)砷測定標(biāo)準(zhǔn)系列：分別準(zhǔn)確吸取1 g/mL三價砷(As)標(biāo)準(zhǔn)使用液o、0.05、0.1、0.25、0.5、1.0 mL于10 mL容量瓶中，分別加鹽酸(1+1)溶液4 ml。碘化鉀一硫脲混合溶液1 mL，正辛醇8滴，定容各相當(dāng)于含三價砷(As)濃度0、5.0、10.0、25.0、50.0、100.0 ng/mL。3.3.7結(jié)果計算試樣中無機(jī)砷含量按式(4)進(jìn)行計算X (C1-C2)F/m×1000/(1000×1000)(4) 式中：x試樣中無機(jī)砷含量，單位為毫克每千克或毫克每升(mg/kg或mg/L)c試樣測定液中

45、無機(jī)砷濃度，單位為納克每毫升(ng/mL)；G試劑空白濃度，單位為納克每毫升(ng/mL)；m試樣質(zhì)量或體積，單位為克或毫升(g或mL)； F固體試樣：F=10 mL×25 ml/4 mL；液體試樣：F一10 mL。3.4銀鹽法3.4.1原理試樣在6 mol/L鹽酸溶液中，經(jīng)70水浴加熱后，無機(jī)砷以氯化物的形式被提取，經(jīng)碘化鉀、氯化亞錫還原為三價砷，然后與鋅粒和酸產(chǎn)生的新生態(tài)氫生成砷化氫，經(jīng)銀鹽溶液吸收后，形成紅色膠態(tài)物，與標(biāo)準(zhǔn)系列比較定量。3.4.2試劑（1）鹽酸。三氯甲烷。辛醇。（2）鹽酸溶液(1+1)：量取100 mL鹽酸加水稀釋至200 mL，混勻。（3）碘化鉀溶液(150

46、g/L)：稱取15 g碘化鉀，加水溶解至100 mL，混勻，臨用時現(xiàn)配。（4）酸性氯化亞錫溶液：稱取40 g氯化亞錫(s力ck·2H2()，加鹽酸溶解并稀釋至100 mL，加人數(shù)顆金屬錫粒。（5）乙酸鉛溶液(100 g/L)：稱取10 g乙酸鉛，加水溶解至100 ml，混勻。（6）乙酸鉛棉花：用乙酸鉛溶液(100 g/L)浸透脫脂棉后，壓除多余溶液，并使疏松，在100以下干燥后，貯存于玻璃瓶中。369銀鹽溶液：稱取o25 g二乙基二硫代胺基甲酸銀(C：H)zNCS2Ag，用少量三氯甲烷溶解，加人18 mL三乙醇胺，再用三氯甲烷稀釋至100 mL。放置過夜，濾入棕色瓶中冰箱保存。（7）

47、砷標(biāo)準(zhǔn)儲備液(100 mg/mL)：GBW(E)080385。（8）砷標(biāo)準(zhǔn)使用液(100 mg/mL)：精確吸取砷標(biāo)準(zhǔn)儲備液，用水逐級稀釋至100 ug/mL。3.4.3儀器（1）分光光度計。GB/T 5009112003（2）恒溫水浴箱。（3）測砷裝置。3.4.4分析步驟（1）試樣處理a.固體干試樣：稱取100 g10.00 g經(jīng)研磨或粉碎的試樣，置于100 mL具塞錐形瓶中，加入20 mL40 mL鹽酸溶液(1+1)，以浸沒試樣為宜，水浴保溫1 h，取出冷卻后，用脫脂棉或單層紗布過濾，用20mL30 mL水洗滌錐形瓶及濾渣，合并濾液于測砷錐形瓶中，使總體積約50 mL左右。b.蔬菜、水果：稱取100 g1000 g打成勻漿或剁成碎末的試樣，置100 mL具塞錐形瓶中加入等量的濃鹽酸，再