臨床免疫學檢驗五年制醫(yī)學檢驗專業(yè)適用

1、緒論 基礎(chǔ)免疫學理論相關(guān)內(nèi)容：抗原、抗體、補體、細胞因子、HLA、免疫系統(tǒng)、免疫應(yīng)答 臨床免疫學抗感染免疫、超敏反應(yīng)、自身免疫、腫瘤免疫、移植免疫 免疫學實驗技術(shù)免疫學檢驗抗原抗體反應(yīng) 抗原抗體反應(yīng)：高度特異性 體內(nèi)：體液免疫效應(yīng) 體外：血清學反應(yīng) (沉淀反應(yīng)、凝集反應(yīng)、補體參與的溶血反應(yīng)、補體結(jié)合試驗、中和試驗、免疫標記技術(shù)) 原理內(nèi)因：Ag、Ab能特異性結(jié)合外因：Ag、Ab結(jié)合的動力 靜電引力（庫侖引力） 范德華力（電子云力） 小于靜電引力 氫鍵 大于范德華力 疏水作用力（作用最大） 鹽析：在高濃度電解質(zhì)（如NaCl）存在的條件下，NaCl可先與Ab分子結(jié)合（在Ab未與Ag相遇時），排斥H

2、2O分子，從而使Ab蛋白質(zhì)優(yōu)先沉降 特點：1. 特異性：交叉反應(yīng)（cross-reaction）：抗體對具有相同或相似抗原表位的不同抗原的反應(yīng)。先決條件：存在共同Ag表位意義：免疫學診斷：外斐氏反應(yīng)用變形桿菌OX19、OX2、OXk做抗原查血清抗體，診斷斑疹傷寒（立克次氏體感染所致） 免疫病理損害（Eg：鏈球菌感染后易導(dǎo)致腎小球腎炎，原因是鏈球菌與人體腎小球基底膜有共同Ag表位所致）2. 最適比例Ab過剩，前帶 （可溶性抗原抗體復(fù)合物）Ag過剩，后帶 （可溶性抗原抗體復(fù)合物）Ab、Ag合適比例 沉淀物 等價帶 （沉淀物） 抗體（等價帶范圍不同） R型抗體 家兔免疫血清 較寬 大多數(shù)小動物 H型

3、抗體 馬免疫血清 較窄 人和多數(shù)大動物3. 可逆性：Ag+AbAgAb原因：非共價鍵結(jié)合，不是化學反應(yīng) 影響因素自身因素：Ag：理化性質(zhì)、抗原表位數(shù)目及種類 Ab：來源（R型or H型）、特異性、親和性、濃度外界環(huán)境條件：電解質(zhì)：0.9%NaCl，if濃度過高，會鹽析 pH：68，if小于3，酸凝集；過高，堿變性 溫度：37沉淀反應(yīng)及免疫電泳 顆粒型抗原 凝集反應(yīng) eg：細菌、RBC 可溶性抗原 沉淀反應(yīng) eg：血清蛋白溶液、多糖抗原 沉淀反應(yīng)（precipitation reaction）：可溶性抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合，在電解質(zhì)存在，兩者比例恰當時，可出現(xiàn)肉眼可見的沉淀現(xiàn)象 Ag：沉淀原 Ab沉

4、淀素 實驗中為使抗原抗體比例（數(shù)量）恰當，應(yīng)稀釋Ag 分類 液相沉淀：絮狀沉淀、環(huán)狀沉淀、免疫比濁測定 凝膠擴散：雙擴、單擴 凝膠免疫電泳：免疫電泳、對流免疫、火箭免疫 絮狀沉淀試驗出現(xiàn)絮狀/塊狀沉淀玻片法：檢測病毒（定性）試管法：方陣滴定（半定量） 環(huán)狀沉淀反應(yīng)測抗原（法醫(yī)血跡鑒定） 免疫透射濁度測定法檢測IgG、IgA、IgM、C3 凝膠擴散（agar immunodiffusion）：可溶性抗原與相應(yīng)抗體在電解質(zhì)存在下，在瓊脂基質(zhì)中擴散，當兩者相遇，比例恰當時結(jié)合，可出現(xiàn)肉眼可見的沉淀線 雙擴（double immunodiffusion）原理：可溶性抗原和抗體在含有電解質(zhì)的瓊脂凝膠板的

5、對應(yīng)孔中，兩者各自向四周凝膠中擴散，當二者相對應(yīng)時即發(fā)生特異性反應(yīng)，在濃度比例合適處形成可見的白色沉淀線方法： 制瓊脂板（3ml 1.5%NS瓊脂） 打孔（雙孔型/三角孔型/梅花孔型） 加樣（平孔沿加滿） 擴散（37，24h觀察結(jié)果）用途： 雙孔型：已知Ag測未知Ab，or已知Ab測未知Ag 三角孔型：抗原性質(zhì)分析 梅花孔型：測Ag有效稀釋度優(yōu)點：簡單、易行、用途廣缺點：敏感性低、出結(jié)果慢、只定性，不能定量 單擴（single immunodiffusion）原理：將一定量抗體混澆于瓊脂內(nèi)，置于凝膠孔中的定量抗原向四周擴散，抗原與相應(yīng)抗體在比例合適處形成白色沉淀環(huán)，其大小與抗原濃度成正比方法：

6、 已知抗體+瓊脂制板，打孔 在瓊脂板小孔中加梯度抗原 抗原向四周擴散形成沉淀環(huán) 抗原濃度與沉淀環(huán)直徑呈線性關(guān)系，繪制標準曲線 從標準曲線上查出并計算出待測標本含量用途：定量測定IgG、IgA、IgM、C3等含量 影響電泳的因素溶液的pH，常用89，蛋白質(zhì)帶負電溶液的離子強度，越高，泳動慢，一般0.020.2M電場強度，越高，越快，一般46V/cm（瓊脂長），約40V左右電滲作用：電場中液體對于一固體的固定相對移動的現(xiàn)象，電滲方向與電泳方向相反 對流免疫電泳（counter-immunoelectrophoresis）原理：定向加速的免疫雙擴（雙擴+電場，使抗原、抗體相對泳動）方法：Ag、Ab分

7、別在瓊制板上不同孔內(nèi)，Ag在負極，Ab在正極，電泳 電壓：46V/cm（瓊脂長度） 時間：45分鐘1小時 pH：8.6用途：檢測HBsAg、AFP優(yōu)點：耗時短、反應(yīng)敏感性強 免疫電泳（immunoelectrophoresis）原理：Ag區(qū)帶電泳+雙擴結(jié)合方法：Ag電泳分出區(qū)帶 Ag、Ab免疫雙擴用途：分析復(fù)雜Ag的組分（人全血清組分的分析）、多發(fā)性骨髓瘤等疾病的測定優(yōu)點：用樣品量小，特異性高、分辨力強凝集反應(yīng) 凝集反應(yīng)（Agglutination）細菌、細胞等顆粒性抗原懸液加入相應(yīng)抗體，在電解質(zhì)存在下，兩者特異性結(jié)合，出現(xiàn)肉眼可見得凝聚塊Ag：凝集原 Ab：凝集素凝集反應(yīng)應(yīng)稀釋抗體 沉淀試驗

8、和凝集試驗的比較抗原性質(zhì) 可溶性Ag 顆粒性Ag稀釋對象 抗原 抗體結(jié)果現(xiàn)象 沉淀現(xiàn)象 凝集現(xiàn)象敏感性 低 高 分類： 直接凝集反應(yīng) 玻片法 試管法間接凝集反應(yīng) （正向）間接（血、膠乳）凝集試驗 反向間接（血、膠乳）凝集試驗 間接凝集抑制試驗 協(xié)同凝集試驗 直接凝集反應(yīng)（direct agglutination）細菌、螺旋體、細胞等顆粒性抗原（抗原時細胞表面結(jié)構(gòu)）在適當電解質(zhì)參與下，直接與相應(yīng)抗體結(jié)合，出現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象 玻片法與試管法的區(qū)別 玻片法 試管法原理 已知抗體測未知抗原 已知抗原測未知抗體的效價 定性 半定量用途 ABO血型鑒定 肥達氏反應(yīng) 菌種鑒定 外斐氏反應(yīng) 間接凝集反應(yīng)（

9、indirect agglutination or passive agglutination）將可溶性抗原或抗體吸附在某種載體微球上，使之成為顆粒性抗原或抗體，然后再與相應(yīng)的抗體或抗原結(jié)合，出現(xiàn)載體微球的凝集現(xiàn)象載體的要求：不干預(yù)免疫反應(yīng)、顆粒大小均勻常用載體種類：紅細胞（綿羊、家兔、人O型）聚苯乙烯膠乳顆粒（人工合成高分子材料）等活性炭粒、硅酸鋁顆粒 致敏微粒/致敏顆粒：吸附有抗原或抗體的載體顆粒間接凝集試驗命名（根據(jù)載體不同）血凝試驗（以RBC為載體）乳膠凝集試驗（以膠乳顆粒為載體） （正向）間接（血、膠乳）凝集試驗原理：將已知的可溶性抗原吸附于顆粒性載體上，檢測未知抗體 反向間接（血、

10、膠乳）凝集試驗原理：將已知抗體吸附于顆粒性載體上，檢測未知抗原實例：檢測HBsAg、AFP等 間接凝集抑制試驗原理：待測樣本（可溶性Ag？）+已知Ab +已知致敏Ag顆粒（已成為顆粒性Ag） 觀察是否有凝集現(xiàn)象（不凝集為陽性，凝集為陰性）實例：檢測小便中絨毛膜促性腺激素（HCG） 協(xié)同凝集試驗（coagglutination）原理：實質(zhì)為反向間接凝集反應(yīng)實例：葡萄球菌A蛋白（SPA）能非特異性地與IgG的Fc段結(jié)合，當與特異性抗原相遇時，IgG的Fab段與抗原結(jié)合，出現(xiàn)金葡菌的凝集現(xiàn)象（屬特殊間接凝集試驗）用途：用已知抗體檢測未知抗原，用于多種抗原的檢測免疫標記技術(shù) 免疫標記技術(shù)的原理用可以微

11、量檢測的標記物（示蹤物質(zhì)）標記抗原或抗體，作為試劑，與相應(yīng)抗體或抗原結(jié)合反應(yīng)后，測定抗原抗體復(fù)合物中的標記物，從而推斷所測抗體或抗原有無及量的多少免疫標記技術(shù)=免疫技術(shù)+標記技術(shù)免疫技術(shù)：抗原抗體反應(yīng)（特異性）示蹤物標記：酶、熒光素、同位素（靈敏性）特點：高特異性、高靈敏性 分類免疫標記技術(shù) 放射免疫技術(shù) 酶免疫組化技術(shù) 雙抗體夾心法 免疫酶技術(shù) 競爭抑制法 免疫熒光技術(shù) 酶聯(lián)免疫吸附技術(shù) 雙抗原夾心法 其他標記技術(shù) 間接法 雙位點一點法 常用標記物熒光素、酶、同位素、膠體金、可發(fā)光化學物質(zhì) 免疫熒光技術(shù)（IF） 免疫熒光顯微技術(shù)（定性） 免疫熒光測定技術(shù)（定量）原理：用熒光素標記抗原或抗體，

12、與待測標本中相應(yīng)抗體或抗原結(jié)合，通過檢測熒光，確定標本中有無待測的抗體或抗原 常用熒光素異硫氰酸熒光黃（FITC） 黃綠色四乙基羅丹明（RB200） 橘紅色四甲基異硫氰酸羅丹明（TRITC） 橙紅色 熒光顯微鏡主要組成A. 白熾光源（超高壓汞燈） 紫外光or蘭紫光B. 兩組濾光板 激發(fā)濾板 激發(fā)光譜 抑制濾板 抑制紫外光or蘭紫光，只許熒光通過C. 顯微鏡 普通光學顯微鏡光路程序：白熾光源發(fā)射紫外光or蘭紫光激發(fā)濾板紫外光被檢物（熒光染色標本）紫外光+熒光抑制濾板熒光（我們?nèi)庋垡姡?一般免疫熒光顯微技術(shù)均標記抗體 片子制作：切片、涂片、印片 熒光抗體染色法直接法：待測標本固定（Ag？）+*Ab

13、*AgAb 用途：檢測抗原 優(yōu)點：快，直接，干擾因素少 缺點：每檢測一種抗原要標記一種熒光抗體，較麻煩間接法（用得最多）Step1：熒光素標記抗抗體（如熒光素標記的羊抗人IgG）Step2：已知Ag固定+待測標本（Ab？）洗，+熒光標記的抗抗體洗，熒光顯微鏡鏡檢優(yōu)點：制備一種熒光標記二抗（抗抗體）可用于多種Ab檢測 靈敏度高補體法Step1：熒光素標記抗補體Step2：已知Ag固定+待測標本（Ab？）+補體洗，+熒光標記的抗補體洗，熒光顯微鏡鏡檢優(yōu)點：靈敏度高，制備一種熒光抗補體用于多種檢測缺點：干擾因素多，補體不穩(wěn)定，易失活，該法少用雙標記法用兩種熒光素（FITC、羅丹明）分別標記針對同一A

14、g上不同抗原表位的抗體，對同一標本染色，當Ag有兩種相應(yīng)抗原表位存在時，可同時見到黃綠和橙紅兩種熒光 免疫熒光顯微技術(shù)優(yōu)缺點優(yōu)點：特異性、敏感性高 快速 可定位 既可測Ag又可測Ab缺點：需要熒光顯微鏡 存在非特異熒光干擾（原因是自發(fā)抗體不純，交叉反應(yīng)、技術(shù)問題） 定性測定、判斷結(jié)果不客觀 制備片子難保存（熒光猝滅） 時間分辨熒光免疫測定（液相檢測）原理：用銪（Eu）等具有較長熒光壽命的稀土金屬作熒光標記物來標記Ab或Ag，從而檢測標本中相應(yīng)Ag或Ab的新技術(shù)特點：利用時間分辨熒光儀延緩檢測時間，排除非特異性干擾熒光 靈敏度可達0.21ng/ml免疫酶技術(shù) 優(yōu)點：較IF、RIA更優(yōu)越，敏感、安

15、全、穩(wěn)定、易觀察結(jié)果 原理：利用酶標記Ag或Ab后不改變Ag、Ab反應(yīng)特異性，同時又不影響酶的活性，結(jié)合在AgAb上的酶催化底物，生成有色產(chǎn)物，根據(jù)產(chǎn)物顏色深淺推測出待測物中相應(yīng)物質(zhì)（Ag、Ab）有無及含量多少Ag+AbEAgAbE+底物 呈色反應(yīng) 特點特異性：Ag、Ab反應(yīng)敏感性：酶的高效催化作用 分類酶免疫組織化學染色技術(shù)（免疫組化）酶免疫測定法（酶聯(lián)免疫吸附試驗，ELISA） 常用的酶辣根過氧化物酶HRP：鐵卟啉蛋白質(zhì)，能進入細胞內(nèi)，酶活性強，酶結(jié)合物可長期保存，最適Ph為5.5左右堿性磷酸酶葡萄糖氧化酶 純度：RZ：反映酶含量與蛋白含量之比（最好RZ為3.0左右） 活性：每1mg酶中所

16、具有的活性單位，應(yīng)大于250u/mg 底物系統(tǒng)：供氫體、受氫體 HRP的底物鄰苯二胺（OPD）反應(yīng)體系中作為供氫體：DH2+H2O2HRPD+2H2O 供氫體 受氫體 有色產(chǎn)物特點：有色產(chǎn)物為黃色，空白對照接近無色，敏感度高，有致癌作用四甲基聯(lián)苯胺（TMB）特點：有色產(chǎn)物為藍色，無致癌作用酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA） 原理將酶分子與Ab或Ag連接成一酶結(jié)合物（酶標記物），當它與固相載體中相應(yīng)Ag或Ab相遇，形成酶標記的AgAb復(fù)合物，加入底物，酶催化底物，生成有色產(chǎn)物，根據(jù)顏色深淺可測出溶液中Ag或Ab的量 有關(guān)術(shù)語及試劑包被（coat）：將Ag或Ab吸附在固相載體上的過程，又稱固相化或吸附

17、 包被后不能被洗脫 包被緩沖液：pH：9.6CB（碳酸鹽緩沖液）洗滌（wash）：pH：7.27.4PBS（磷酸鹽緩沖液）酶結(jié)合物：酶標抗體或酶標抗原終止液：2M H2SO4OPD（鄰苯二胺）：酶催化后有色產(chǎn)物為黃色，H2SO4終止后橙色（棕色）TMB（四甲基聯(lián)苯胺）：酶催化后有色產(chǎn)物為藍色，H2SO4終止后黃色雙抗夾心法 步驟包被已知Ab洗滌加待測標本（測Ag？）洗滌加酶標Ab洗滌加底物加終止液觀察結(jié)果 用途檢測抗原，包被的抗體與酶標抗體屬同一種類抗體，每檢測一種抗原就需制備相應(yīng)的酶標抗體，較麻煩間接法測抗體 步驟包被已知Ag+待測標本（測Ab？）反應(yīng)一段時間后，洗滌加酶標抗抗體（酶標羊抗人

18、IgG）洗滌加底物加終止液，觀察結(jié)果 用途測抗體，每標記一種抗抗體可以用于多種抗體的檢測雙位點一步法 步驟包被抗體A+待測標本+酶標抗體B洗滌，+底物終止液，觀察結(jié)果 用途檢測Ag，Ag至少含A、B兩個抗原表位競爭法 步驟待測管：已知Ab包被+待測標本（Ag？）洗滌，+酶標Ag洗滌，+底物顯色應(yīng)用親和素和生物素的ELISA親和素（avidin）糖蛋白，一分子由四個亞基組成，每一亞基可以與一分子生物素結(jié)合生物素（biotin）維生素H，可與蛋白質(zhì)、糖類、酶類等結(jié)合，與親和素特異結(jié)合后極穩(wěn)定生物素 生物素 親和素生物素 生物素 ELISA結(jié)果的判定肉眼判定：與陽性、陰性對照顏色比較 若待檢孔顯色淺

19、于陰性對照則判定為陰性 若待檢孔顯色深于或等于陽性對照則判定為陽性 若待檢孔顯色介于陰性與陽性對照之間則判定為弱陽性酶標光度儀檢測A492值（吸光率）：比色法 與陽性、陰性對照測定值比較 P/N比值：大于2.0為陽性，小于2.0為陰性 P：positive（待測吸光度值） N：negative ELISA試驗的影響因素（一）固相載體常用：聚苯乙烯特點：吸附Ag或Ab的能力強，一旦吸附后，不能被洗脫 形狀多試管、珠、微孔板（酶標板）、分軟、硬板（最常用） 一次性使用，不可回收酶標板要求：吸附性能好、空白值低、透明度高、板批間、孔間性能相近（二）抗原、抗體Ag：需純化Ab：需效價高、親和力強、純化

20、（三）試驗條件1. 包被：一般用pH9.6CB，0.05M，有利于蛋白質(zhì)吸附 濃度：0.1100ug/ml，常用10ug/ml 時間、溫度：4過夜或37，13h 量：100ul 封閉：用0.15%牛血清白蛋白緩沖液浸泡0.5小時2. Ag-Ab反應(yīng)的條件微堿性有利于Ag-Ab結(jié)合，故用pH7.4PBS洗滌去污劑有利于Ag-Ab形成，洗液中加0.05%Tween-20Ag、Ab反應(yīng)時間、溫度：37、40min3. 洗滌采用pH7.27.4PBS洗滌，規(guī)一化，每次浸泡12min，拍干，共洗滌34次4. 酶促反應(yīng)條件溫度：37時間：10minpH：5.5底物量：一致5. 排除干擾：多設(shè)對照 ElIS

21、A應(yīng)設(shè)哪些對照，why？陽性對照：排除假陰性；陰性對照：排除假陽性；酶結(jié)合物對照：加酶步加入，無色；底物對照：步加入，無色；空白對照：只加終止液，無色 膜載體的酶免疫測定斑點-ELISA：特點，固相載體為硝酸纖維素膜，酶促反應(yīng)后在膜上形成有色沉淀物免疫印跡法（IBT） 應(yīng)用（所有標記技術(shù)）病原體的診斷及研究病毒、細菌等傳染病的診斷（測抗原或抗體）病毒、細菌表面抗原的研究某些疾病的診斷某些微量物質(zhì)有關(guān)疾病的診斷腫瘤的診斷及定位自身抗體檢測協(xié)助自身免疫病診斷寄生蟲疾病的診斷等免疫學方面的研究T、B細胞的發(fā)生、演化、表面抗原改變等的研究微量物質(zhì)的檢測體內(nèi)：微量蛋白質(zhì)、激素、酶等抗原；藥物、糖等半抗原

22、工農(nóng)業(yè)：微生物、微量物質(zhì)等化學發(fā)光免疫分析技術(shù) 發(fā)光免疫技術(shù)是將發(fā)光系統(tǒng)與免疫反應(yīng)相結(jié)合，來檢測抗原、或抗體的方法 化學發(fā)光免疫測定化學發(fā)光酶免疫測定（CLEIA）試驗前部分與ELISA一樣，改變所加底物，使產(chǎn)物能發(fā)光，用儀器檢測發(fā)光強度，判斷結(jié)果（如酶是用辣根過氧化物酶，常用底物是魯米諾或其衍生物）化學發(fā)光標記免疫測定（CLIA）是用化學發(fā)光劑作為標記物直接標記抗原或抗體的免疫測定方法金免疫技術(shù) 采用膠體金作為標記物 膠體金：又稱金溶膠，是金鹽（氯金酸）被還原（還原劑：檸檬酸鈉）成原子金后的金顆粒懸液 膠體金的特性膠體性質(zhì)：顆粒穩(wěn)定均勻，分散懸浮，1100nm呈色性：顏色與顆粒大小有關(guān)25n

23、m，橙黃色；1020nm，酒紅色；3080nm，紫紅色斑點金免疫滲濾試驗（DIGFA） 原理采用膠體金標記抗體，以硝酸纖維素膜為載體，使抗原抗體反應(yīng)和洗滌在同一滲濾膜上，反應(yīng)后根據(jù)在膜上的顏色判斷結(jié)果斑點免疫層析試驗（DICA） 原理以硝酸纖維素膜為載體，利用微孔膜毛細管作用，使膜一端的液體慢慢向另一端滲移，猶如層析 用金標記免疫法（斑點免疫層析試驗）測HCG的原理對于HCG陽性標本，尿中HCG與金標記的鼠抗人HCG單抗結(jié)合形成免疫復(fù)合物，隨層析作用向上移動，至檢測線與鼠抗人HCG抗體結(jié)合而聚集顯色，在檢測線未結(jié)合的金標記鼠抗人HCG單抗（IgG）隨著尿液上行，到達質(zhì)控線與羊抗鼠IgG（二抗）

24、結(jié)合而顯色，作為質(zhì)控對照；對于HCG陰性標本，尿中無HCG與金標記的鼠抗人HCG單抗結(jié)合形成免疫復(fù)合物，隨層析作用向上移動，至檢測線與鼠抗人HCG抗體不結(jié)合而不顯色，在檢測線未結(jié)合的金標記鼠抗人HCG單抗（IgG）隨著尿液上行，到達質(zhì)控線與羊抗鼠IgG（二抗）結(jié)合而顯色，作為質(zhì)控對照；若試紙條無效，金標鼠抗人IgG單抗隨層析作用向上移動，到達質(zhì)控線，無羊抗鼠IgG（二抗）或破壞失效，不結(jié)合而不顯色，作為質(zhì)控對照免疫血清的制備 概述免疫血清：含有某種抗體的血清。它是免疫化學和細胞免疫的主要試劑，其質(zhì)量的好壞由Ab的效價、特異性決定來源：由Ag免疫動物而來（Ag可以是純Ag，如白蛋白，也可以是復(fù)雜

25、Ag，如人全血清） 免疫血清的制備主要程序：選擇免疫動物-選擇抗原-（應(yīng)用佐劑）-進行免疫-（間隔，多途徑）試血-放血-純化-鑒定-保存動物的選擇：1.常用動物：哺乳類較多：馬、羊、豬、猴、兔豚鼠等；禽類：雞2.選擇原則：免疫的Ag與動物的種類要求越遠越好（即免疫原性好）；與免疫血清的量有關(guān)：所需量大，用馬、羊、猴等大動物；所需量小，用兔、豚鼠等小動物；動物的個體狀態(tài)：雄性、適齡、健康、無感染；其它：根據(jù)實驗的特殊要求?？乖臈l件：具有良好的抗原決定簇（表位）：易被LC識別而產(chǎn)生Ab；具有可靠的純度；足夠大的分子量及相對復(fù)雜的空間結(jié)構(gòu)；注射量：嚴格掌握。寧可小，一般用25µg/kg動

26、物；量大可出現(xiàn)免疫抑制佐劑的應(yīng)用：佐劑（adjuvant）：同Ag一起或預(yù)先注入機體，能增強機體對該Ag的免疫應(yīng)答或改變免疫應(yīng)答類型的物質(zhì)（多用于可溶性Ag，顆粒性Ag一般不用佐劑）使用佐劑的目的：增加Ag的免疫原性，從而提高抗血清的效價福氏不完全佐劑（FIA）組成：羊毛脂石臘油，二者比例為4：1制備：將Ag溶液逐滴加入羊毛脂和石蠟油中，不斷研磨，使Ag均勻混于佐劑中，形成“油包水”乳劑要形成“油包水”乳劑的原因：延緩Ag在體內(nèi)的破壞和消失，并緩慢釋放Ag；刺激單核-巨噬細胞對抗原的處理和提呈能力；促進淋巴細胞的增殖、分化從而增強機體的免疫應(yīng)答福氏完全佐劑（FCA）組成：羊毛脂石臘油卡介苗表現(xiàn)

27、：促進、誘發(fā)Ag產(chǎn)生強大、持久的細胞免疫反應(yīng)；促使機體合成新的Ig種類特點：卡介苗同Ag一起加入到羊毛脂和石蠟油中，幾滴即可；免疫效果更好；注射局部易形成肉芽腫，潰爛，但對Ab生成無危害注射途徑：常用的有：靜脈、皮內(nèi)、皮下、淋巴結(jié)、腹腔，采用一種途徑多點注射可溶性Ag：常選用皮內(nèi)或皮下（皮內(nèi)易引起細胞免疫反應(yīng)，對產(chǎn)生Ab有利）顆粒性Ag：常選用靜脈或腹腔若Ag量少，可直接注射淋巴結(jié)注射間隔及次數(shù)：單次注射：Ab生成慢、持續(xù)時間短、效價低，但特異性好再次注射：注射兩次，Ab效價上升快，持續(xù)時間長間隔一定時間多次注射：Ab效價高、生成時間長，但特異性差，一般為715天一般采用后兩種注射方法注射量：

28、蛋白質(zhì)Ag一般注射14mg/次，注射量過大易形成免疫耐受試血：末次Ag注射后，測定血清中Ab的效價，若Ab達到所需效價，即刻放血，若未達到，繼續(xù)追加免疫一次放血：直接頸動脈放血或直接心臟穿刺抽血，然后分離出血清，即可得到AbAb效價判定：以出現(xiàn)明顯凝集現(xiàn)象的（記為+凝集）抗體最高稀釋度為該抗體的效價（滴度Titer）鑒定：Ab效價的鑒定：可溶性Ag：雙擴，梅花孔型；顆粒性Ag：用直接凝集試驗，試管法Ab特異性的鑒定：雙擴法（雙孔型）方法：在瓊脂上打兩排孔，左邊一側(cè)一孔加粗Ag（Ag粗提物），一孔加純Ag（特異性Ag），右邊一側(cè)兩孔分別加抗血清，放37，24h結(jié)果：若抗血清與粗Ag和純Ag之間皆

29、出現(xiàn)一條沉淀線，且兩條線融合，則說明動物易產(chǎn)生單價特異性Ab；若與純Ag出現(xiàn)一條線，與粗Ag出現(xiàn)多條線，則說明有雜AbAb純度的鑒定：SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳，若出現(xiàn)多條電泳帶，即提示抗血清中雜蛋白較多，需進一步純化保存：小包裝低溫保存：-20，避免反復(fù)凍融，可保存5年，效價不下降冰凍干燥保存：用冰凍干燥器使免疫血清形成凍干粉，可保存510年4加防腐劑保存：可保存半年免疫球蛋白的分離提純 目的有利標記；減少非特異反應(yīng)；有利Ig定量 分離提純方法（原理）：一般選用23種，或同一方法反復(fù)進行23次鹽析法：在不同濃度的中性鹽中蛋白質(zhì)會脫水，降低帶電電勢，親水性變?yōu)槭杷裕肿娱g相互凝聚而沉淀（鹽析

30、作用）。不同蛋白質(zhì)鹽析所需中性鹽的濃度不同，故可分離不同蛋白質(zhì)。常用中性鹽：硫酸銨分析純試劑離子交換層析法：利用不同的蛋白質(zhì)在緩沖溶液中所帶電荷不同，與某一載體上的具有相反電荷的離子基團進行吸附，然后進行解脫，達到純化蛋白質(zhì)目的。常用載體：纖維素DEAE，帶正電，吸附帶負電的Alb、球蛋白凝膠過濾法：凝膠顆粒是網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，當分子大小不同的混合物通過凝膠柱時，分子大的先下來，分子小的嵌入凝膠顆粒的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)中后下來，從而將分子大小不同的物質(zhì)分離開來，即為分子篩的作用。常用凝膠：葡聚糖凝膠、聚丙烯酰胺凝膠、瓊脂糖凝膠，分離Ig多用G150親和層析法：利用抗原抗體的結(jié)合具有特異性、可逆性，將純化抗原先交

31、聯(lián)到載體（瓊脂糖珠）上，制成親和層析柱，當Ab（Ig）通過時，與抗原特異性結(jié)合在柱上，Ab中雜質(zhì)流出。然后通過改變緩沖液 pH、離子強度，使Ab解脫下來。單克隆抗體及應(yīng)用 概述克?。簾o性繁殖的細胞株單克隆：由一個細胞無性繁殖而來的一個細胞株（一團細胞），其中所有細胞特性完全一樣 單克隆抗體（McAb or mAb）針對Ag分子表面某一抗原決定簇（又稱表位）而產(chǎn)生的抗體分子，稱McAb由一個B細胞克隆產(chǎn)生的識別單一抗原表位的同源抗體。 制備McAb的方法雜交瘤技術(shù)、基因工程技術(shù) 雜交瘤技術(shù)制備單克隆抗體的原理及簡要步驟原理：能產(chǎn)生抗體的小鼠B(漿)細胞與小鼠骨髓瘤細胞雜交能生成分泌單克隆抗體的雜

32、交瘤細胞簡要步驟：1.制備能產(chǎn)生單抗的雜交瘤細胞2.克隆化雜交瘤細胞3.篩選雜交瘤細胞 4.擴大培養(yǎng)單克隆雜交瘤細胞5.收集單抗并鑒定6.純化單抗 B細胞（漿細胞）特點能產(chǎn)生抗體，但不能在體外長期培養(yǎng)，細胞內(nèi)含HGPRT酶和TK酶，可通過旁路途徑合成DNA 骨髓瘤細胞特點能在體外長期培養(yǎng)，不含HGPRT和TK酶 雜交瘤細胞含兩種共性既能產(chǎn)生抗體，在體外能長期培養(yǎng)；同時含有HGPRT和TK酶，可通過旁路途徑合成DNA HAT培養(yǎng)液的作用(次黃嘌呤、氨基蝶呤、胸腺嘧啶）氨基蝶呤是抗代謝的藥物，能阻斷內(nèi)源性合成DNA（合成DNA的主要途徑），選出雜交瘤細胞 漿細胞/瘤細胞雜交瘤細胞：可以生長HAT培

33、養(yǎng)液中氨基蝶呤阻止DNA合成；但其含有HGPRT、TK酶，可通過旁路途徑合成DNA雜交瘤技術(shù)制備McAb 制備雜交瘤細胞制備能產(chǎn)生McAb的小鼠B細胞：Ag免疫Ba1b/c小鼠測抗體取脾制備脾細胞懸液計數(shù)細胞融合：脾細胞（B）+小鼠骨髓瘤細胞雜交（脾細胞15X107/ml，瘤細胞1078/ml）融合劑：40%聚乙二醇（PEG）篩選：培養(yǎng)過程中加入HAT培養(yǎng)液，培養(yǎng)14天，存活細胞為雜交瘤細胞 鑒定：將篩選出的能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細胞進行鑒定方法：檢測雜交瘤細胞培養(yǎng)的上清液中有無目的Ab，常用ELISA、IF間接法包被已知Ag+雜交瘤細胞培養(yǎng)上清（Ab？）洗滌，+酶標羊抗鼠IgG洗滌，+底物根

34、據(jù)顯色判斷有無特異Ab 克隆化有限稀釋法：特異性雜交瘤細胞稀釋：710個/ml，取0.1ml/孔，反復(fù)稀釋培養(yǎng)，經(jīng)ELISA間接法篩選、檢測特異抗體顯微操作法：直接在顯微鏡下取單個雜交瘤細胞培養(yǎng)、測特異抗體（篩選和克隆化應(yīng)反復(fù)交叉進行） 凍存或擴大培養(yǎng)在液氮中凍存鑒定后的雜交瘤細胞備用，需要時復(fù)蘇擴大培養(yǎng)（增殖），可得到大量單克隆抗體體外法：將雜交瘤細胞在細胞培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，傳代體內(nèi)法：將雜交瘤細胞注入小鼠腹腔內(nèi)，利用它具有瘤細胞的特點能大量繁殖，產(chǎn)生腹水，腹水中有大量的單抗 鑒定聚丙烯酰胺凝膠鑒定單克隆抗體的純度用ELISA、免疫電泳法鑒定抗體特異性 純化鹽析法、離子交換層析法、凝膠過濾法

35、、親和層析法（任選12種） 雜交瘤技術(shù)制McAb的優(yōu)缺點優(yōu)點：制備的單抗特異性高、效價高、產(chǎn)量高缺點：需特殊條件、無菌操作、難得到穩(wěn)定細胞株；抗體為抗鼠的IgG抗體，長期用于人體不利 人源單克隆抗體單克隆抗體為人IgG，用于人基因工程抗體 基因工程抗體在基因水平上對編碼抗體的基因進行切割、拼接或修飾，甚至人工合成，然后導(dǎo)入受體細胞內(nèi)表達而產(chǎn)生的抗體（單克隆抗體） 嵌合抗體用DNA 重組技術(shù)將鼠源單抗基因的可變區(qū)（V區(qū)）基因與產(chǎn)生人Ig的恒定區(qū)（C區(qū)）基因相連接，構(gòu)成嵌合基因，導(dǎo)入受體細胞（骨髓瘤細胞），表達出嵌合抗體 嵌合基因：紅色-鼠McAb可變區(qū)基因；綠色-人Ig的恒定區(qū)基因 嵌合抗體：可

36、變區(qū)為鼠McAb部分，其它部分為人Ig部分 構(gòu)建成功的嵌合抗體抗乳腺癌（1986），抗結(jié)腸癌（1987），抗肺癌（1987），抗CEA（癌胚抗原1989），抗HBsAg（1990我國），抗T表面受體BMAO31-IgG（1991我國） 嵌合抗體的優(yōu)點a.免疫原性低，有利于用于人體b.在人體內(nèi)半衰期較鼠單抗長c.在人體內(nèi)生物學作用（如CDC、ADCC）較鼠單抗強d.與人/人雜交瘤比，體外傳代更穩(wěn)定 重構(gòu)抗體（Reshaped Antibody）以人Ig基因為框架，去掉高變區(qū)部分，用鼠單抗高變區(qū)基因連接上，構(gòu)成重構(gòu)基因，倒入受體細胞表達出的抗體 重構(gòu)基因：綠色為人Ig基因（框架），紅色為鼠McAb

37、基因（高變區(qū)部位基因） 重構(gòu)抗體：所有綠色部分均為人源，紅色部分為鼠源（CDR） 單鏈抗體（具有結(jié)合抗原活性的單鏈蛋白）是一種新的重組多肽，由一個人工設(shè)計的短多肽接頭（基因）將編碼輕鏈V區(qū)基因的C末端與編碼重鏈V區(qū)基因的N末端相連接，然后整合到大腸桿菌基因上，表達出具有結(jié)合抗原特性的融合蛋白 單鏈抗體的優(yōu)點分子小，在血清中比McAb或Fab段清除快無Fc段，免疫原性低較McAb更易進入實體瘤細胞周圍微循環(huán)中可將多肽接頭設(shè)計為具有特殊功能的位點如：金屬螯合物、毒素、藥物，用于影像、治療等 單克隆抗體的應(yīng)用細菌學方面用于診斷、研究病毒學方面快速診斷、病毒學研究、病毒性疾病的治療和預(yù)防（單抗用于治療

38、，特異性高，所需量小，減少變態(tài)反應(yīng)發(fā)生）腫瘤方面的應(yīng)用診斷、腫瘤的治療在寄生蟲學方面及其他方面的應(yīng)用補體的檢測及應(yīng)用 補體Complement是存在于人和動物血清中的一組具有酶活性的球蛋白，一般情況下處于未激活狀態(tài) 補體的特性穩(wěn)定性差，各種理化因素都可使之失活：如酸、堿、紫外線照射、劇烈震蕩等實驗室滅活補體的條件為：5630，室溫23天也可自然失活補體檢測必須用新鮮血清 補體的組成1.補體的固有成分：C1-C9,其中C1又包括C1q、C1r、C1s,共9種成分11種蛋白分子。其中C9的分子量最小、C3的含量最高2.補體的調(diào)節(jié)蛋白：如C4調(diào)節(jié)蛋白、C1抑制物、S蛋白等3.補體受體：如C1qR、C

39、3aR等 補體的激活：三條途徑經(jīng)典激活途徑：又稱C1途徑激活劑：IgG、IgM形成的AgAb復(fù)合物參與成分：C1C9激活過程：這是一個連鎖反應(yīng)，缺少其中任何一個組分，連鎖反應(yīng)都不能進行下去旁路激活途徑：又稱C3途徑激活劑：脂多糖、酵母多糖、IgG4和IgA的聚合物（提供接觸表面）參與成分：C3、C5C9、B因子、D因子、P因子甘露糖結(jié)合凝集素途徑：又稱MBL途徑在感染早期，常采用前兩個途徑，產(chǎn)生Ab后采用第一個途徑 補體的生物學作用溶菌、溶細胞作用（MAC效應(yīng)）；調(diào)理作用（C3b、C4b和iC3b）；免疫黏附作用（C3b、C4b）；炎癥介質(zhì)作用：趨化作用（C3a，C5a）過敏毒素作用（C3a，

40、C4a，C5a） 補體的檢測功能檢測：總補體活性的檢測、單一補體活性的檢測（溶血試驗）量的檢測：單一補體量的檢測（免疫比濁法或單擴法） 溶血試驗SRBC+兔抗SRBC抗體（溶血素）+新鮮血清（提供補體）啟動經(jīng)典激活途徑（溶血）指示系統(tǒng)：綿羊紅細胞和溶血素補體來源：多只豚鼠的混合血清 總補體活性檢測：CH50試驗原理：組成和功能完整的補體系統(tǒng)能使致敏羊紅細胞發(fā)生溶血；羊紅細胞的溶血程度與補體的活性成正比概念：在50溶血附近（3070%之間），稍微改變補體量，溶血程度變化明顯，因此以50溶血率來判定終點較100更為敏感檢測結(jié)果處理：最后找到與制備好的50%溶血標準管比較，取吸光度值最接近的一管，則

41、CH50（U/ml）=1/血清用量X稀釋倍數(shù)總補體活性參考范圍：50100U/ml 單一補體活性的檢測（溶血試驗），常用于檢測C3、C4、C1q、B因子等 單一補體量的測定：采用免疫比濁法或單擴法，常檢測C3（含量12001300ug/ml） 補體檢測的臨床意義1.補體量：多見于急性炎癥感染、組織損傷、癌腫2.補體量：見于補體消耗：體內(nèi)有Ag、Ab 反應(yīng)，如SLE、RA等；補體合成：肝臟疾患；補體先天性缺乏：具有遺傳性和家族史 補體結(jié)合試驗原理：補體可與任何一組AgAb復(fù)合物結(jié)合；一旦與某一復(fù)合物結(jié)合后，便不再與另一復(fù)合物結(jié)合結(jié)果判斷：不溶血為陽性，即待測物中有相應(yīng)的Ab或Ag；溶血為陰性，即

42、待測物中無相應(yīng)的Ab或Ag評價：優(yōu)點：該試驗既可測Ag、又可測Ab；Ag既可以是顆粒性Ag、也可是可溶性Ag、甚至可以是塊狀物，因此檢測Ag的范圍廣；可以用于病毒、立克次氏體、細菌等多種病原體的檢測（實際上是測Ag）；比較敏感(0.05g/ml)、特異；結(jié)果判斷明顯：通過有無溶血來觀察，無需特殊儀器檢測。缺點：參與反應(yīng)的物質(zhì)多，影響因素也多；（反應(yīng)體系中有Ag、Ab、C、羊紅細胞、溶血素）；在正式試驗前需要找出幾種物質(zhì)間最恰當?shù)谋壤?，比較復(fù)雜機體免疫功能檢測 免疫應(yīng)答的類型及組成分為非特異性免疫應(yīng)答和特異性免疫應(yīng)答 人體免疫功能的組成成分非特異性免疫應(yīng)答（固有性免疫應(yīng)答）1.皮膚黏膜的機械阻擋

43、作用及局部分泌的抑菌、殺菌物質(zhì)2.吞噬細胞的吞噬作用3.NK細胞對病毒感染靶細胞的殺傷作用4.血液、體液中的抗菌分子：補體、溶菌酶特異性免疫應(yīng)答（適應(yīng)性免疫應(yīng)答）細胞免疫：由TLC主導(dǎo)完成，其效應(yīng)物質(zhì)是致敏TLc(CTL/Th1)體液免疫：由BLC主導(dǎo)完成，其效應(yīng)物質(zhì)是Ab 檢測人細胞免疫和體液免疫最常用的試驗，原理及正常值T細胞的計數(shù)（T細胞表面標志的檢測）特異性抗原的檢測（T細胞表面有一些特異的CD抗原，根據(jù)這些不同的CD抗原可鑒定不同的T細胞群體）CD3+：成熟的總T淋巴細胞的數(shù)量；CD4+：Th細胞；CD8+CTL/Ts；CD4+/CD8+1.5免疫熒光法：用熒光素標記的單抗作為試劑染

44、色淋巴細胞，計算出染上熒光的淋巴細胞百分率，另有免疫細胞化學法T細胞特異性受體（E受體）的檢測（E花環(huán)形成試驗）原理：T淋巴細胞表面含有綿羊紅細胞（SRBC)受體（CD2)，當T淋巴細胞與綿羊紅細胞相遇時，T細胞通過該受體吸附綿羊紅細胞而形成花環(huán)E花環(huán)形成試驗分為Et（總E花環(huán)）和Ea（活性E花環(huán)），區(qū)別如下SRBCEt：1：50100，4，2h，代表T細胞總數(shù)，正常值60%80%；SRBCEa：1：820，4，10min，能形成Ea的Txibao活性強，正常值20%30%T細胞功能的檢測淋巴細胞轉(zhuǎn)化試驗原理：淋巴細胞在某些物質(zhì)刺激下，細胞增殖、分化（如細胞變大、胞漿增多、出現(xiàn)空泡）DNA合成

45、增加（核染色質(zhì)疏松，核仁出現(xiàn)），轉(zhuǎn)化成為淋巴母細胞方法：形態(tài)學檢測法：正常值60%80%同位素摻入法（ 3H-TdR摻入法）原理：T細胞受PHA刺激后，細胞進入增殖周期發(fā)生有絲分裂合成DNA。試驗中當細胞進入S期時，在培養(yǎng)液中加入3H-胸腺嘧啶核苷（3H-TdR)，細胞攝入，合成DNA,據(jù)摻入細胞內(nèi)的同位素量，可推測細胞增殖活躍程度，從而判斷淋巴細胞轉(zhuǎn)化的程度。正常值SI3.0MTT比色法（四甲基偶氮唑鹽）T淋巴細胞介導(dǎo)的細胞毒性檢測細胞毒性T細胞（CTL）的檢測，評價機體細胞免疫水平的指標方法：形態(tài)學方法：淋巴細胞與靶細胞按一定比例加在一起培養(yǎng)一段時間，染色后計數(shù)殘留靶細胞（腫瘤細胞）數(shù)，計

46、算淋巴細胞抑制腫瘤細胞生長的抑制率同位素法：常用51Cr釋放試驗原理：用51Cr標記靶細胞（一般為腫瘤細胞），將它與待測淋巴細胞（效應(yīng)CTL細胞）一起培養(yǎng)，效應(yīng)細胞破壞靶細胞，51Cr釋放出來，測定其51Cr數(shù)量，便可推知效應(yīng)細胞的殺傷能力。特異溶解百分率大于50%為陽性細胞免疫功能體內(nèi)檢測法型超敏反應(yīng)皮試： 型超敏反應(yīng)的本質(zhì)是細胞免疫，所以型超敏反應(yīng)如為陽性，可反映細胞免疫功能好陽性（直徑>0.5cm)：曾感染過結(jié)核菌，細胞免疫功能好陰性(直徑< 0.5cm) ：細胞免疫功能差或從未感染過結(jié)核菌強陽性（直徑>2.5cm)：表明現(xiàn)處于結(jié)核的活動期B細胞數(shù)量的檢測B細胞表面識別

47、抗原受體（BCR，SmIg)（更多用）B細胞表面膜免疫球蛋白，有IgM、IgD型，是B細胞表面標志，識別抗原的受體，有SmIg者為B細胞，常用免疫熒光法檢測，正常值：15%25%B細胞表面抗原的檢測B細胞表面特有的CD抗原有：CD19、CD20，用抗CD20的單抗（免疫熒光法、酶免疫組化法）檢測外周血淋巴細胞，陽性細胞為B淋巴細胞，約占總淋巴細胞的10%15%B細胞功能的檢測血清中Ig的測定人的體液免疫功能正常（B 細胞功能正常），應(yīng)反映在血清中有正常量的免疫球蛋白方法：單項瓊脂擴散試驗、免疫比濁法正常值：IgG：12.0（7.616.60）；IgM：1.3（0.402.20）；IgA：2.0

48、（0.703.50）血型抗體效價的測定反映體內(nèi)IgM水平，正常6月嬰兒抗 A >1：8，或抗 B > 1 : 4; 1歲后抗A>1:16，或抗B > 1：8，如3歲以上抗A或抗B效價仍< 1：4，表示IgM缺乏，提示先天性體液免疫功能缺陷抗原刺激機體后抗體應(yīng)答反應(yīng)（體內(nèi)試驗）將抗原注射到體內(nèi)，一段時間后檢測相應(yīng)抗體效價，如抗體效價低，說明機體體液免疫功能差（如用三聯(lián)傷寒菌苗0.25ml注射，每周1次，連續(xù)3次，抗H應(yīng)為1 ：160，若低，表示體液免疫應(yīng)答功能差）傷寒三聯(lián)菌苗：傷寒桿菌、副甲、副乙傷寒桿菌 淋巴細胞分離技術(shù)原理（密度梯度離心）：不同種類血細胞由于體積

49、、形態(tài)、比重不同，如同其置于同一種離心力作用下，經(jīng)過一定時間離心，就會分在不同的層次中常用的分離液（Ficoll分離液）：淋巴細胞分離液，由聚蔗糖和泛影葡胺組成自身免疫性疾病及其檢測免疫復(fù)合物及檢測 免疫復(fù)合物IC當Ag在體內(nèi)持續(xù)存在或由微生物與宿主細胞不斷釋放入細胞外液時，可引起特異性Ab產(chǎn)生，從而形成免疫復(fù)合物，包括AgAb復(fù)合物和AgAbC復(fù)合物兩種 免疫復(fù)合物致病機理中等大小的IC沉積在體內(nèi)，通過激活補體、血小板致病激活補體：激活C3a、C5a、C567趨化嗜中性粒細胞釋放溶酶體酶引起組織損傷；激活C3a、C5a（過敏毒素）作用與肥大細胞和嗜堿性粒細胞釋放血管活性物質(zhì)血管通透性增加引起

50、組織水腫激活血小板：與血小板上的IgGFc受體結(jié)合使血小板聚集微血栓形成局部出血缺血、壞死常見病損部位：腎小球、關(guān)節(jié)、皮膚所致疾?。貉宀?、類風濕性關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡 IC檢測使用的標準品、出現(xiàn)的問題及WHO推薦的檢測方法標準品：HAHG熱聚合人IgG（不是IC）技術(shù)問題：到目前為止，所有檢測IC 的試驗，還沒有另人滿意的標準化措施;在體外制備的IC還很不穩(wěn)定，因此用人工合成的復(fù)合物作為定量標準不適宜WHO：C1q結(jié)合試驗、膠固素試驗、類風濕因子（RF）試驗、Raji細胞試驗自身免疫性疾病及檢測 自身免疫性疾病AID指機體針對自身組織產(chǎn)生自身抗體或致敏淋巴細胞，而導(dǎo)致自身組織器官損傷或功能

51、障礙 AID的基本特征誘因可有可無/有一定的遺傳傾向/女性患者多見，發(fā)病率隨年齡增長而增加；患者血清中可檢出高效價的自身抗體和（或）自身致敏T 淋巴細胞。一些自身抗體在自身免疫病中呈現(xiàn)交叉重疊現(xiàn)象:即在同一種自身免疫病患者體內(nèi)可檢測到多種自身抗體，而不同的自身免疫病也可存在同一種自身抗體；IgG、IgA、IgM升高，尤其IgG升高明顯；病損局部可發(fā)現(xiàn)有淋巴細胞、漿細胞、嗜酸性粒細胞浸潤及免疫復(fù)合物沉積；免疫抑制劑治療可取得一定療效 常見的AID系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）型：好發(fā)于年輕女性，腎損害，型超敏反應(yīng)，抗核抗體、RF類風濕性關(guān)節(jié)炎（RA）型：小關(guān)節(jié)及周圍組織呈對稱性、多發(fā)性損害，型超敏反應(yīng)，RF（IgM類）自身免疫性溶血性貧血（AIHA）型：型超敏反應(yīng)重癥肌無力（MG）型：型超敏反應(yīng) AID的自身抗體檢測意義病人血清中存在高效價自身抗體是AID的特點之一 抗核抗體ANA的定義抗細胞核抗原成分的自身抗體的總稱，廣義地指抗細胞內(nèi)所有抗原成分的自身抗體的總和.ANA所針對的靶抗原由細胞核擴展到整個