人工蟲草提取物對缺血心肌的保護作用及其機制

1、人工蟲草提取物對缺血心肌的保護作用及其機制 08-05-24 16:37:00 編輯：studa20 作者：韓冰，王澤君，王天，李紫，張雷明，劉珂【關鍵詞】 人工蟲草菌絲；,缺血；,心肌；,保護摘要：目的研究人工蟲草提取物對缺血心肌的保護作用及其機制。 方法通過結扎大鼠左冠狀動脈前降支（LAD）造成急性心肌缺血模型，觀察人工蟲草水提取物（Water extract from cultural mycelium,WE）、醇提取物（Ethanal extract from cultural mycelium,EE）、醋酸乙酯提取物(Ethyl acetate extract from cultur

2、al mycelium,EA)和石油醚提取物（Petroleum ether extract from cultural mycelium,PE）對心肌梗死面積（MIS）、血清磷酸肌酸肌酶（CK-MB）、乳酸脫氫酶（LDH）、丙二醛（MDA）、一氧化氮（NO）、一氧化氮合酶（NOS）及超氧化物歧化酶（SOD）的影響。結果WE，EE和 PE可明顯減小MIS，降低CK-MB及LDH活性，減少MDA含量，增高NO含量，提高NOS和SOD活性。結論 WE，EE和 PE對缺血心肌具有保護作用，其機制與WE，EE和 PE提高NOS和SOD活性從而擴張冠狀動脈和抗脂質過氧化有關。關鍵詞：人工蟲草菌絲； 缺血

3、； 心?。?保護Abstract：ObjectiveTo evaluate the effects of extracts from cultural mycelium of Cordyceps sinensis on myocardial infarction and explore the possible mechanisms involved in it. MethodsRats were treated with water extract from cultural mycelium（WE）,ethanal extract from cultural mycelium（EE）,et

4、hyl acetate extract from cultural mycelium (EA) and petroleum ether extract from cultural mycelium（PE）for 7 days before myocardial infarction induced by coronary occlusion. The myocardial infarct size(MIS), creatine phosphokinase(CKMB) activity, lactate dehydrogenase(LDH) activity, nitric oxide (NO)

5、 content, malondial dehyde(MDA) content， nitric oxide synthase (NOS) and superoside dismutase (SOD) activity were measured.ResultsWE，EE and EA significantly reduced MIS, exerted notable inhibition in the elevation of CK-MB activity, LDH activity and MDA content, markedly increased NO level, NOS and

6、SOD activities. ConclusionThe results indicated that WE, EE and EA showed a capacity to resist ischemic damage and the mechanisms were correlated with mediating NOS and SOD activity at least, in part.Key words：Cultural mycelium of Cordyceps sinensis; Ischemic; Cardiocytes; Protection 冬蟲夏草Cordyceps s

7、inensis是我國的傳統(tǒng)中藥，為麥角菌寄生在蝙蝠蛾幼蟲上的干燥子座和蟲體，其性味甘平，具補肺益腎、止血化痰之功效。由于冬蟲夏草產地局限，產量稀少，現(xiàn)多用人工培養(yǎng)品，人工培養(yǎng)的冬蟲夏草稱為蟲草菌絲體或簡稱蟲草。冬蟲夏草富含多種氨基酸、多糖、有機酸、微量元素、核苷、肽類和甾醇等多種化學成分，藥理作用廣泛，對心血管系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)和中樞神經系統(tǒng)等都有調節(jié)作用。近年來，有關蟲草對心血管系統(tǒng)作用的研究表明，蟲草有明顯降壓及負性頻率作用1，2；清除自由基作用3，4和抗心律失常作用5等，但有關人工蟲草提取物對心肌缺血損傷的影響尚未見報道。因此本文通過結扎大鼠左冠狀動脈前降支造成急性心肌缺血模型，觀察了人工蟲

8、草水提取物、醇提取物、醋酸乙酯提取物和石油醚提取物對缺血心肌的影響并對其作用機制進行了探討。1 器材1.1 動物Wistar大鼠，雄性，體重250 300 g，山東綠葉天然藥物研究開發(fā)有限公司實驗動物中心提供。合格證號200106005。1.2 藥品與試劑人工蟲草水提取物（WE）、醇提取物（EE）、乙酸乙酯提取物(EA)、石油醚提取物（PE）,由山東綠葉天然藥物研究開發(fā)有限公司提供；復方丹參片，山東省東營仙河制藥廠，批號030937；氯化硝基四氮唑藍（NBT），上海前進試劑廠；血清磷酸肌酸肌酶（CK-MB）、乳酸脫氫酶（LDH）、丙二醛（MDA）、一氧化氮（NO）、一氧化氮合酶（NOS）及超氧

9、化物歧化酶（SOD）試劑盒均購自南京建成生物工程公司。1.3 儀器722E型可見分光光度計，上海光譜儀器有限公司；TDL-40B 臺式離心機上海安亭科學儀器廠。2 方法2.1 動物分組與給藥70只雄性Wistar大鼠隨機分成7組，每組10只。分別為假手術組（Sham）、心肌缺血模型組（Model）、復方丹參組(DS) 、人工蟲草菌絲體水提取物組（WA）、醇提取物組（EE）、醋酸乙酯提取物組（EA）、石油醚提取物組（PE）。Sham 與Model給予羧甲基纖維素鈉100 mg/kg灌胃，DS，WA，EE，EA和PE分別給予復方丹參338 mg/kg，人工蟲草菌絲體水提取物12 mg/kg，醇提取

10、物12 mg/kg，醋酸乙酯提取物12 mg/kg，石油醚提取物12 mg/kg灌胃。灌胃1次/d，連續(xù)7 d。2.2 心肌缺血模型建立6末次給藥1 h后烏拉坦1 000 mg/kg ip麻醉大鼠，仰位固定于手術臺上，自左側34肋間開胸，暴露心臟，以0號線于肺動脈圓錐及左心耳間結扎冠狀動脈左前降支，將心臟送回胸腔，擠出胸腔內血液和氣體，迅速關閉胸腔，開胸時間不超過30 s，假手術組僅置縫線而不結扎冠狀動脈。24 h后烏拉坦1 000 mg/kg ip麻醉大鼠，腹主動脈插管取血，離心（3 000 r/min，10 min）分離得血清樣品，按試劑盒操作說明測定血清中CK-MB，LDH，NOS，SOD活性及NO，MDA含量；取血后立即打開大鼠胸腔，剪取心臟后用生理鹽水洗凈心腔內積血，去掉心房組織及脂肪，稱重，將