微生物限檢查方法驗(yàn)證方案

1、驗(yàn) 證 文 件文件名稱：阿戈美拉汀片（25mg)微生物限度檢查方法驗(yàn)證方案文件編號： 部 門簽 名日 期制 定 人QCQC驗(yàn)證管理員QA質(zhì)量管理部部長批 準(zhǔn) 人質(zhì)量負(fù)責(zé)人 揚(yáng) 子 江 藥 業(yè) 集 團(tuán) 四 川 海 蓉 藥 業(yè) 有 限 公 司目錄一、驗(yàn)證概述21.驗(yàn)證對象22.驗(yàn)證原因23.驗(yàn)證目的24.驗(yàn)證要求2二、驗(yàn)證組織機(jī)構(gòu)和職責(zé)31.職責(zé)32.組織機(jī)構(gòu)4三、驗(yàn)證風(fēng)險(xiǎn)評估及范圍51.嚴(yán)重性（S）52.可能性（O）53.可檢測性（D）64.風(fēng)險(xiǎn)優(yōu)先數(shù)量等級判定（RPN）6四、驗(yàn)證實(shí)施計(jì)劃17五、驗(yàn)證準(zhǔn)備181.驗(yàn)證依據(jù)182.驗(yàn)證條件18六、驗(yàn)證內(nèi)容20七、驗(yàn)證異常情況處理28八、驗(yàn)證結(jié)論29

2、九、再驗(yàn)證周期30十、附 件31一、驗(yàn)證概述1.驗(yàn)證對象本次驗(yàn)證的對象為阿戈美拉汀片（25mg）微生物限度檢查法。2.驗(yàn)證原因?qū)Π⒏昝览∑?5mg）微生物限度檢查法進(jìn)行適用性驗(yàn)證。3.驗(yàn)證目的確認(rèn)阿戈美拉汀片（25mg)微生物限度檢查法的可靠性。4.驗(yàn)證要求驗(yàn)證過程需嚴(yán)格按方案中規(guī)定的步驟進(jìn)行。對于驗(yàn)證過程中出現(xiàn)的所有偏差，應(yīng)查明原因并得到有效處理后，驗(yàn)證方可進(jìn)入下一步驟。二、驗(yàn)證組織機(jī)構(gòu)和職責(zé)1.職責(zé)1.1.質(zhì)量受權(quán)人驗(yàn)證文件的批準(zhǔn)。組織驗(yàn)證工作的實(shí)施及各部門的協(xié)調(diào)，保證驗(yàn)證工作有序的進(jìn)行。1.2.質(zhì)量管理部現(xiàn)場監(jiān)督保證整個操作過程按照驗(yàn)證計(jì)劃進(jìn)行。負(fù)責(zé)驗(yàn)證方案的審核，及操作過程中對驗(yàn)證

3、文件修訂的審核工作。驗(yàn)證文件的歸檔工作。按照驗(yàn)證方案要求對操作過程中的樣品抽樣檢測。涉及到的儀器儀表的校驗(yàn)，以及一些相關(guān)的化驗(yàn)工作。1.3.質(zhì)量控制實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)驗(yàn)證文件的起草工作。負(fù)責(zé)驗(yàn)證文件的審核工作。驗(yàn)證方案起草人員現(xiàn)場對操作過程進(jìn)行指導(dǎo)。對驗(yàn)證實(shí)施過程中資料和數(shù)據(jù)進(jìn)行匯總并完成驗(yàn)證報(bào)告。需要時(shí)與相關(guān)部門的協(xié)調(diào)工作。1.4.供應(yīng)部按照驗(yàn)證物資采購計(jì)劃進(jìn)行物資采購。2.組織機(jī)構(gòu)2.1驗(yàn)證領(lǐng)導(dǎo)小組姓名職務(wù)驗(yàn)證職務(wù)驗(yàn)證工作職責(zé)質(zhì)量負(fù)責(zé)人驗(yàn)證總負(fù)責(zé)人驗(yàn)證文件審核、批準(zhǔn)質(zhì)量管理部部長領(lǐng)導(dǎo)小組組員驗(yàn)證文件審核QA主管驗(yàn)證文件審核QC主管驗(yàn)證文件審核供應(yīng)部部長保證驗(yàn)證物料的提供驗(yàn)證管理員驗(yàn)證文件審核、歸檔

4、2.2.驗(yàn)證實(shí)施小組姓名職務(wù)確認(rèn)職務(wù)確認(rèn)工作職責(zé)生物組組組長實(shí)施小組組長驗(yàn)證文件審核、現(xiàn)場指導(dǎo)化驗(yàn)員實(shí)施小組組員文件起草、操作培訓(xùn)、現(xiàn)場指導(dǎo)按要求進(jìn)行操作及數(shù)據(jù)整理，填寫相關(guān)數(shù)據(jù)，及檢查相關(guān)項(xiàng)按要求進(jìn)行操作及數(shù)據(jù)整理，填寫相關(guān)數(shù)據(jù)，及檢查相關(guān)項(xiàng)儀器管理員確保所有儀器設(shè)備正常運(yùn)行三、驗(yàn)證風(fēng)險(xiǎn)評估及范圍根據(jù)SOP6-00001驗(yàn)證管理規(guī)程對驗(yàn)證的相關(guān)要求，對檢測過程中可能影響檢測結(jié)果的因素進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)分析。風(fēng)險(xiǎn)定性標(biāo)準(zhǔn)如下：1.嚴(yán)重性（S）： 危害可能產(chǎn)生后果的程度。嚴(yán)重程度分為十個等級，如下：權(quán)重嚴(yán)重性等級在產(chǎn)品質(zhì)量或法規(guī)方面可能導(dǎo)致的后果對產(chǎn)品造成的后果10極高可能會導(dǎo)致藥監(jiān)部門吊銷藥品生產(chǎn)許可證

5、或撤銷GMP證書可能會導(dǎo)致檢測結(jié)果不準(zhǔn)確或不可靠，直接影響產(chǎn)品質(zhì)量9非常高8很高可能會產(chǎn)生不符合GMP的關(guān)鍵缺陷，或者導(dǎo)致上市藥品召回7高6中等可能會產(chǎn)生不符合GMP、SOP的重要缺陷可能導(dǎo)致檢測結(jié)果產(chǎn)生重大偏差，對產(chǎn)品質(zhì)量有較大影響5低可能會產(chǎn)生不符合GMP、SOP的一般缺陷可能導(dǎo)致檢測結(jié)果產(chǎn)生偏差，對產(chǎn)品質(zhì)量有一定影響4很低可能會產(chǎn)生不符合GMP、SOP的一般缺陷可能導(dǎo)致檢測結(jié)果產(chǎn)生偏差，但在可接受范圍3輕微2很輕微不違反GMP、SOP的輕微缺陷對產(chǎn)品檢測無影響或影響可以忽略1無2.可能性（O）：影響檢測結(jié)果的事件發(fā)生的可能性頻率或概率，建立以下等級：權(quán)重發(fā)生的可能性等級確認(rèn)標(biāo)準(zhǔn)可能的失效

6、率10很高幾乎是不可避免的。1/291/38高一般與以前異常情況時(shí)有發(fā)生，且為主要因素。1/871/206中等一般與以前異常情況時(shí)有發(fā)生，但不是主要因素。1/8051/400權(quán)重發(fā)生的可能性等級確認(rèn)標(biāo)準(zhǔn)可能的失效率4中等一般與以前異常情況時(shí)有發(fā)生，但不是主要素。1/20003低很少幾次與相似的情況發(fā)生。1/150002很低很少幾次與幾乎完全相同的情況發(fā)生。1/1500001極低異常情況不大可能發(fā)生，幾乎完全相同的異常情況也未發(fā)生過。1/15000003.可檢測性（D）： 檢測到異常情況存在的能力的程度，定義如下：權(quán)重可檢測性等級確認(rèn)標(biāo)準(zhǔn)10幾乎不可能沒有已知的控制方法能找出異常情況。9很微小現(xiàn)

7、行控制方法找出異常情況的可能性很微小。8微小現(xiàn)行控制方法找出異常情況的可能性微小。7很小現(xiàn)行控制方法找出異常情況的可能性很小。6小現(xiàn)行控制方法找出異常情況的可能性小。5中等現(xiàn)行控制方法找出異常情況的可能性中等。4中上現(xiàn)行控制方法找出異常情況的可能性中等偏上。3高現(xiàn)行控制方法找出異常情況的可能性高。2很高現(xiàn)行控制方法找出異常情況的可能性很高。1幾乎肯定現(xiàn)行控制方法幾乎肯定能找出異常情況，已知相似過程的可靠的檢測控制方法。4.風(fēng)險(xiǎn)優(yōu)先數(shù)量等級判定（RPN） 4.1.風(fēng)險(xiǎn)等級判定標(biāo)準(zhǔn)的確定等級低風(fēng)險(xiǎn)上限(不包括)高風(fēng)險(xiǎn)下限(包括)嚴(yán)重性輕微：對產(chǎn)品質(zhì)量的影響：可能導(dǎo)致檢測結(jié)果產(chǎn)生偏差，但在可接受范圍

8、。(分值：3分)低：對產(chǎn)品質(zhì)量對影響：可能會導(dǎo)致檢測結(jié)果不準(zhǔn)確或不可靠，直接影響產(chǎn)品質(zhì)量。(分值：5分)等級低風(fēng)險(xiǎn)上限(不包括)高風(fēng)險(xiǎn)下限(包括)可能性低：很少幾次與相似的情況發(fā)生。(分值：3分)偶爾發(fā)生的失敗。(分值：5分)可檢測性高：現(xiàn)行控制方法找出異常情況的可能性高。(分值：3分)中等：現(xiàn)行控制方法找出異常情況的可能性中等。(分值：5分)RPN3×3×3=275×5×5=1254.2.風(fēng)險(xiǎn)等級判定標(biāo)準(zhǔn)判定公式（測量范圍1-10）RPN風(fēng)險(xiǎn)等級是否可接受是否須采取措施RPN=S×O×D1RPN27低是否27RPN125中否提高可檢

9、測性及或降低風(fēng)險(xiǎn)產(chǎn)生的可能性來降低最終風(fēng)險(xiǎn)水平125RPN1000高否注：當(dāng)1RPN27，但嚴(yán)重性S×發(fā)生可能性O(shè)為10×2或9×2時(shí)，仍需按中等以上風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行后續(xù)控制。是4.3.風(fēng)險(xiǎn)控制流程圖與相關(guān)人員溝通并記錄接受該風(fēng)險(xiǎn)的依據(jù)RPN是否在低風(fēng)險(xiǎn)區(qū)區(qū) 否RPN是否在中風(fēng)險(xiǎn)區(qū)或高風(fēng)險(xiǎn)區(qū)，SO值為10×2或9×2是組長將評估結(jié)果進(jìn)行匯總，提出風(fēng)險(xiǎn)控制措施是嚴(yán)重性、發(fā)生可能性、可檢測性權(quán)重是否可降低降低嚴(yán)重性、發(fā)生可能性、提高可檢測性風(fēng)險(xiǎn)管理委員會及決策人審核批準(zhǔn)否組長提出采取中止、暫停項(xiàng)目或風(fēng)險(xiǎn)自留、風(fēng)險(xiǎn)回避或后備措施重新完善風(fēng)評報(bào)告4.4.風(fēng)險(xiǎn)評

10、估過程4.4.1.風(fēng)險(xiǎn)識別采用5M1E分析法從人、機(jī)、料、法、環(huán)等方面進(jìn)行分析：方法驗(yàn)證異常料人機(jī)培養(yǎng)箱，凈化工作臺對照培養(yǎng)基、檢查用培養(yǎng)基、檢定菌、干熱/濕熱滅菌指示條 驗(yàn)證方案編寫人員電子天平，pH計(jì)，干熱滅菌烘箱，滅菌器緩沖液、消毒劑、純化水無菌器具、無菌手套/衣服試驗(yàn)人員控制菌檢驗(yàn)結(jié)果不符合實(shí)驗(yàn)組菌種回收率不達(dá)標(biāo)樣品儲存環(huán)境驗(yàn)證方法不正確 培養(yǎng)環(huán)境及觀察環(huán)境 驗(yàn)證所依據(jù)的檢驗(yàn)操作規(guī) 程培養(yǎng)基、緩沖液、無菌器具、消毒劑的制備方法潔凈區(qū)環(huán)境（供試品溶液檢查環(huán)境）測環(huán)法4.5. 阿戈美拉汀片（25mg）微生物限度檢查方法驗(yàn)證風(fēng)險(xiǎn)分析：序號項(xiàng)目潛在的失效模式潛在的失效后果嚴(yán)重性S潛在失效造成原

11、因發(fā)生可能性O(shè)現(xiàn)有控制措施可檢測性DRPN責(zé)任及目標(biāo)完成日期措施結(jié)果采取措施SODRPN01驗(yàn)證方案編寫人員編寫人員未按照“6-00014-01微生物限度檢查方法驗(yàn)證操作管理規(guī)程規(guī)定編寫驗(yàn)證方案。驗(yàn)證方法錯誤，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果不可靠。8人員培訓(xùn)考評不到位。2嚴(yán)格按照“6-00014-01微生物限度檢查方法驗(yàn)證操作管理規(guī)程規(guī)定編寫驗(yàn)證方案1162015.10.20 對驗(yàn)證方案編寫人員進(jìn)行培訓(xùn)和考評，合格后方可進(jìn)行驗(yàn)證方案的編寫工作。811802試驗(yàn)人員試驗(yàn)人員未按照編寫驗(yàn)證方案進(jìn)行操作。操作不正確，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果不可靠。8試驗(yàn)人員培訓(xùn)不到位。2對實(shí)驗(yàn)人員進(jìn)行驗(yàn)證方案培訓(xùn)116方案批準(zhǔn)后一個工作日完成驗(yàn)

12、證方案培訓(xùn)檢測前培訓(xùn)驗(yàn)證方案，試驗(yàn)嚴(yán)格按驗(yàn)證方案實(shí)施。811803培養(yǎng)箱，凈化工作臺儀器沒有經(jīng)過計(jì)量、確認(rèn)，或不在計(jì)量、確認(rèn)效期內(nèi)。導(dǎo)致檢測環(huán)境和培養(yǎng)環(huán)境不符合要求，最終導(dǎo)致驗(yàn)證試驗(yàn)失敗。6使用人員使用前未對使用的設(shè)備進(jìn)行校準(zhǔn)日期進(jìn)行檢查。2編寫驗(yàn)證方案前檢查所使用儀器的校準(zhǔn)日期112設(shè)備使用人員使用前對設(shè)備的計(jì)量效期、確認(rèn)效期進(jìn)行確認(rèn)，在效期內(nèi)方可使用。611604電子天平，pH計(jì)，干熱滅菌烘箱，滅菌器儀器沒有經(jīng)過計(jì)量、確認(rèn)，或不在計(jì)量、確認(rèn)效期內(nèi)。導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn)異常。8使用人員使用前未對使用的設(shè)備進(jìn)行檢查確認(rèn)。2編寫驗(yàn)證方案前檢查所使用儀器的校準(zhǔn)日期116設(shè)備使用人員使用前對設(shè)備的計(jì)量效

13、期、確認(rèn)效期進(jìn)行確認(rèn)。在效期內(nèi)方可使用。8118序號項(xiàng)目潛在的失效模式潛在的失效后果嚴(yán)重性S潛在失效造成原因發(fā)生可能性O(shè)現(xiàn)有控制措施可檢測性DRPN責(zé)任及目標(biāo)完成日期措施結(jié)果采取措施SODRPN05對照培養(yǎng)基、檢查用培養(yǎng)基、檢定菌、干熱/濕熱滅菌指示條對照培養(yǎng)基、檢查用培養(yǎng)基、檢定菌、干熱/濕熱滅菌指示條，失效。導(dǎo)致驗(yàn)證失敗。6未對照培養(yǎng)基、檢查用培養(yǎng)基、檢定菌、干熱/濕熱滅菌指示條進(jìn)行期間核查。使用前未對效期進(jìn)行檢查確認(rèn)。2對照培養(yǎng)基、檢查用培養(yǎng)基、檢定菌、干熱/濕熱滅菌指示條進(jìn)行期間核查。使用前未對效期進(jìn)行檢查確認(rèn)。112對耗材管理人員進(jìn)行培訓(xùn)，嚴(yán)格執(zhí)行“2-01012-11培養(yǎng)基的制備和

14、保管管理規(guī)程”和“2-01013-07檢定菌管理規(guī)程”規(guī)定的核查周期。試驗(yàn)人員使用前對有效期進(jìn)行檢查確認(rèn)，合格后方可投入使用。811806緩沖液、消毒劑、純化水緩沖液、消毒劑、純化水配制不正確或過有效期或性狀明顯異常。導(dǎo)致驗(yàn)證失敗。61.未嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)要求制備緩沖液和消毒劑。2.使用前未對緩沖液、消毒劑、純化水進(jìn)行效期和性狀確認(rèn)。2對實(shí)驗(yàn)人員進(jìn)行驗(yàn)證方案培訓(xùn)112對緩沖液、消毒劑、純化水的管理人員進(jìn)行培訓(xùn)，抽查期間核查效果。8118序號項(xiàng)目潛在的失效模式潛在的失效后果嚴(yán)重性S潛在失效造成原因發(fā)生可能性O(shè)現(xiàn)有控制措施可檢測性DRPN責(zé)任及目標(biāo)完成日期措施結(jié)果采取措施SODRPN07無菌器具、無菌

15、手套/衣服無菌器具、無菌手套/衣服，過有效期或被污染。導(dǎo)致驗(yàn)證失敗。61.未.嚴(yán)格按照“2-01022-05質(zhì)量控制實(shí)驗(yàn)室消毒劑、無菌器具管理規(guī)程”制備無菌器具和“2-01000-07質(zhì)量控制實(shí)驗(yàn)室管理規(guī)程”制備無菌衣服。2.使用前未確認(rèn)無菌器具、無菌手套/衣服進(jìn)行效期、包裝確認(rèn)。2使用前對無菌器具、無菌手套/衣服的制備方法、有效期及包裝的完整性進(jìn)行檢查。1121.嚴(yán)格按照“2-01022-05質(zhì)量控制實(shí)驗(yàn)室消毒劑、無菌器具管理規(guī)程”制備無菌器具和“2-01000-07質(zhì)量控制實(shí)驗(yàn)室管理規(guī)程”制備無菌衣服。2.使用前對無菌器具、無菌手套/衣服的有效期及包裝的完整性進(jìn)行確認(rèn)。無誤后方可投入使用6

16、11608驗(yàn)證依據(jù)所用檢驗(yàn)操作規(guī)程驗(yàn)證方案依據(jù)的檢驗(yàn)操作規(guī)程不正確。導(dǎo)致驗(yàn)證失敗。8驗(yàn)證依據(jù)所用檢驗(yàn)操作規(guī)程未經(jīng)批準(zhǔn)。1檢驗(yàn)操作規(guī)程審核批準(zhǔn)后進(jìn)行驗(yàn)證方案編寫18所用檢驗(yàn)操作規(guī)程在驗(yàn)證編寫前對其與現(xiàn)行版藥典進(jìn)行比對。8118序號項(xiàng)目潛在的失效模式潛在的失效后果嚴(yán)重性S潛在失效造成原因發(fā)生可能性O(shè)現(xiàn)有控制措施可檢測性DRPN責(zé)任及目標(biāo)完成日期措施結(jié)果采取措施SODRPN09培養(yǎng)基、緩沖液、無菌器具、無菌衣服/手套、消毒劑的制備方法試驗(yàn)人員未按 “2-01022-05質(zhì)量控制實(shí)驗(yàn)室消毒劑、無菌器具管理規(guī)程”、“2-01000-07質(zhì)量控制實(shí)驗(yàn)室管理規(guī)程”和“2-01012-11培養(yǎng)基的制備和保管管

17、理規(guī)程”制備相關(guān)檢驗(yàn)用物料。導(dǎo)致驗(yàn)證失敗。7人員培訓(xùn)考評不到位。2對“2-01022-05質(zhì)量控制實(shí)驗(yàn)室消毒劑、無菌器具管理規(guī)程”、“2-01000-07質(zhì)量控制實(shí)驗(yàn)室管理規(guī)程”和“2-01012-11培養(yǎng)基的制備和保管管理規(guī)程進(jìn)行培訓(xùn)114對其人員進(jìn)行“2-01022-05質(zhì)量控制實(shí)驗(yàn)室消毒劑、無菌器具管理規(guī)程”、“2-01000-07質(zhì)量控制實(shí)驗(yàn)室管理規(guī)程”和“2-01012-11培養(yǎng)基的制備和保管管理規(guī)程培訓(xùn)，考評合格后上崗。711710驗(yàn)證方法不正確1.驗(yàn)證方案編寫不正確。2.未嚴(yán)格按照驗(yàn)證方案開展驗(yàn)證工作。導(dǎo)致驗(yàn)證失敗。8檢測方案未經(jīng)批準(zhǔn)。1對驗(yàn)證方案進(jìn)行審核181.驗(yàn)證方案審核批準(zhǔn)

18、后方可開展確驗(yàn)證工作。2.驗(yàn)證方案培訓(xùn)后方可實(shí)施。8118序號項(xiàng)目潛在的失效模式潛在的失效后果嚴(yán)重性S潛在失效造成原因發(fā)生可能性O(shè)現(xiàn)有控制措施可檢測性DRPN責(zé)任及目標(biāo)完成日期措施結(jié)果采取措施SODRPN11控制菌檢驗(yàn)結(jié)果不符合實(shí)驗(yàn)組無菌落生長，供試品可能有抑菌性。導(dǎo)致驗(yàn)證失敗。101.供試品可能對試驗(yàn)菌存在抑制作用。2.試驗(yàn)人員判斷錯誤。2采用薄膜過濾法或者培養(yǎng)基稀釋法消除產(chǎn)品抑菌性120方案批準(zhǔn)后15個工作日1.可考慮采用薄膜過濾法或者培養(yǎng)基稀釋法消除產(chǎn)品抑菌性。2.對實(shí)驗(yàn)室人員進(jìn)行培訓(xùn)，結(jié)果觀察時(shí)實(shí)施復(fù)核制度。10111012實(shí)驗(yàn)組菌種回收率不達(dá)標(biāo)各實(shí)驗(yàn)組菌落回收率高于或低于標(biāo)準(zhǔn)范圍。導(dǎo)

19、致驗(yàn)證失敗。101.供試品可能對試驗(yàn)菌存在抑制作用。2.試驗(yàn)人員計(jì)數(shù)錯誤。2采用薄膜過濾法或者培養(yǎng)基稀釋法消除產(chǎn)品抑菌性120方案批準(zhǔn)后15個工作日1.可考慮采用薄膜過濾法或者培養(yǎng)基稀釋法消除產(chǎn)品抑菌性。2.對實(shí)驗(yàn)室人員進(jìn)行培訓(xùn)，結(jié)果觀察時(shí)實(shí)施復(fù)核制度。101110序號項(xiàng)目潛在的失效模式潛在的失效后果嚴(yán)重性S潛在失效造成原因發(fā)生可能性O(shè)現(xiàn)有控制措施可檢測性DRPN責(zé)任及目標(biāo)完成日期措施結(jié)果采取措施SODRPN13樣品儲存環(huán)境樣品儲存環(huán)境溫度、濕度異常。不符合樣品規(guī)定的存放環(huán)境。導(dǎo)致樣品被污染或失效。7樣品存放環(huán)境溫濕度控制不當(dāng)。2嚴(yán)格控制樣品存放環(huán)境溫濕度114每天定期觀察每天定期觀察樣品存放

20、室的溫濕度，若異常，及時(shí)采取措施調(diào)整。711714培養(yǎng)環(huán)境及觀察環(huán)境培養(yǎng)箱培養(yǎng)環(huán)境溫濕度和觀察環(huán)境異常。培養(yǎng)計(jì)數(shù)結(jié)果不準(zhǔn)確，導(dǎo)致驗(yàn)證失敗。7培養(yǎng)箱溫濕度控制不準(zhǔn)確及觀察方法不正確。2每日定期觀察培養(yǎng)箱溫濕度114每天定期觀察1.每天定期觀察培養(yǎng)箱的溫度，若異常，及時(shí)采取措施。2.對觀察方法進(jìn)行培訓(xùn)。7117序號項(xiàng)目潛在的失效模式潛在的失效后果嚴(yán)重性S潛在失效造成原因發(fā)生可能性O(shè)現(xiàn)有控制措施可檢測性DRPN責(zé)任及目標(biāo)完成日期措施結(jié)果采取措施SODRPN15潔凈區(qū)環(huán)境（供試品溶液檢查環(huán)境）1.潔凈區(qū)溫濕度、壓差異常。2.潔凈區(qū)環(huán)境被污染。影響驗(yàn)證結(jié)果。71.檢測環(huán)境溫濕度、壓差控制不當(dāng)。2.未定期

21、對潔凈區(qū)進(jìn)行清潔和消毒。3.未定期監(jiān)測潔凈區(qū)的環(huán)境。2每天定期觀察潔凈區(qū)溫濕度、壓差114每天定期觀察1.每天定期觀察潔凈區(qū)溫濕度、壓差，若異常，及時(shí)采取措施調(diào)整。2.按照SOP規(guī)定定期對潔凈區(qū)環(huán)境進(jìn)行清潔和消毒；3.按照“2-01000-07質(zhì)量控制實(shí)驗(yàn)室管理規(guī)程”規(guī)定定期對潔凈區(qū)環(huán)境進(jìn)行監(jiān)測并出具報(bào)告。71174.6. 阿戈美拉汀片（25mg）微生物限度檢查方法驗(yàn)證的不可接受風(fēng)險(xiǎn)匯總：編號項(xiàng)目/功能RPN（S×O×D）風(fēng)險(xiǎn)等級01控制菌檢驗(yàn)結(jié)果不符合20（10×2×1）中02實(shí)驗(yàn)組菌種回收率不達(dá)標(biāo)20（10×2×1）中注：當(dāng)1RP

22、N27，但嚴(yán)重性S×發(fā)生可能性O(shè)為10×2或9×2時(shí)，仍需按中等以上風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行后續(xù)控制。四、驗(yàn)證實(shí)施計(jì)劃1.確認(rèn)前培訓(xùn)方案批準(zhǔn)后1個工作日完成驗(yàn)證方案培訓(xùn)。2.組織實(shí)施確認(rèn)方案批準(zhǔn)后15個工作日完成驗(yàn)證方案的實(shí)施工作。3.出具報(bào)告 驗(yàn)證方案實(shí)施完成后5個工作日出具報(bào)告。 五、驗(yàn)證準(zhǔn)備1.驗(yàn)證依據(jù)1.1.中國藥典(2015年版) 四部：（1105）非無菌產(chǎn)品微生物限度檢查：微生物計(jì)數(shù)法；（1106）非無菌產(chǎn)品微生物限度檢查：控制菌檢查法。 1.2.非無菌產(chǎn)品微生物限度檢查：微生物計(jì)數(shù)法(SOP2-02567)；非無菌產(chǎn)品微生物限度檢查：控制菌檢查法（SOP2-0256

23、8）2.驗(yàn)證條件2.1.試驗(yàn)環(huán)境檢測日期房間名稱房間編號潔凈級別試驗(yàn)溫度相對溫度環(huán)境測試報(bào)告書編號及結(jié)論環(huán)境監(jiān)測報(bào)告復(fù)印件微生物限度檢查室1207-5C+A陽性室1212-5C+A2.2.使用的主要儀器及設(shè)備：儀器及設(shè)備名稱型號設(shè)備管理編號校驗(yàn)有效期至生產(chǎn)廠家校準(zhǔn)報(bào)告復(fù)印件電子天平pH計(jì)立式壓力蒸汽滅菌器（制備無菌器具）恒溫干燥箱自動漩渦混合儀生化培養(yǎng)箱（需氧菌）生化培養(yǎng)箱（霉菌和酵母菌）生化培養(yǎng)箱（控制菌）立式壓力蒸汽滅菌器(滅活)生物安全柜凈化工作臺2.3.菌種菌種名稱檢定菌編號配制菌液編號菌液有效期至菌種來源金黃色葡萄球菌CMCC（B）26003大腸埃希菌CMCC（B）44102銅綠假單

24、胞菌CMCC（B）10104枯草芽孢桿菌CMCC（B）63501白色念珠菌CMCC（F）98001黑曲霉CMCC（F）980032.4.培養(yǎng)基培養(yǎng)基名稱配制批號干粉批號干粉來源培養(yǎng)基適用性檢查報(bào)告復(fù)印件胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基麥糠凱液體培養(yǎng)基麥糠凱瓊脂培養(yǎng)基2.5.稀釋液及溶液、消毒劑稀釋液及溶液（消毒劑）名稱配制批號有效期至pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液pH6.8無菌磷酸鹽緩沖液0.9%無菌氯化鈉溶液含0.05%（ml/ml）聚山梨酯80的0.9%無菌氯化鈉溶液0.2%新潔爾滅溶液75%乙醇溶液2.6.實(shí)驗(yàn)方法 中國藥典(2015年

25、版) 四部：（1105）非無菌產(chǎn)品微生物限度檢查：微生物計(jì)數(shù)法；（1106）非無菌產(chǎn)品微生物限度檢查：控制菌檢查法。2.7.人員資質(zhì) 驗(yàn)證操作人員應(yīng)具備微生物限度檢查上崗資質(zhì)，且在驗(yàn)證實(shí)施前應(yīng)對其批準(zhǔn)的驗(yàn)證方案進(jìn)行培訓(xùn)，應(yīng)能證明驗(yàn)證人員能依照驗(yàn)證方案正確實(shí)施。培訓(xùn)時(shí)間培訓(xùn)人參加培訓(xùn)人員溯源資料確認(rèn)人： 確認(rèn)日期： 復(fù)核人： 復(fù)核日期： 六、驗(yàn)證內(nèi)容1.供試液的制備1.1.取供試品10g，加pH7.0無菌氯化鈉蛋白胨緩沖液至100ml，充分振搖使混勻，作為1:10的供試液。1.2.取1:10供試品10ml，加pH7.0無菌氯化鈉蛋白胨緩沖液至100ml，充分振搖使混勻，作為1:100的供試液。1

26、.3.取1:100供試品10ml，加pH7.0無菌氯化鈉蛋白胨緩沖液至100ml，充分振搖使混勻，作為1:1000的供試液。 備注：供試液制備若需加溫時(shí)，應(yīng)均勻加熱，且溫度不超過45。供試液從制備至加入檢驗(yàn)用培養(yǎng)基，不得超過1小時(shí)。 2.菌液制備 2.1.接種大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌的新鮮培養(yǎng) 物至胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基中，3035培養(yǎng)1824小時(shí)；分別取上述培養(yǎng)物用0.9%無菌氯化鈉溶液或pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液，依次稀釋至 、 、 、 制成每1ml含菌數(shù)為小于100cfu的菌懸液。 2.2.接種白色念珠菌的新鮮培養(yǎng)物至沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基中，2025培

27、養(yǎng)23 天；取此培養(yǎng)物用0.9%無菌氯化鈉溶液或pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液，依次稀釋至 ，制成每1ml含菌數(shù)為小于100cfu的菌懸液。 2.3.將黑曲霉菌斜面的新鮮培養(yǎng)物接種至沙氏葡萄糖瓊脂斜面培養(yǎng)基上，2025培養(yǎng)5 7天，使大量的孢子成熟。加入3-5ml含0.05%（ml/ml）聚山梨酯80的0.9%無菌氯化鈉溶液或pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液，將孢子洗脫。然后，采用適宜方法吸出孢子懸液至無菌試管內(nèi)，用含0.05%（ml/ml）聚山梨酯80的0.9%無菌氯化鈉溶液或pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液依次稀釋至 ，制成每 1ml 含孢子數(shù)小于100cfu 的孢子懸液。 2.4

28、.上述菌懸液制備后若在室溫下放置，應(yīng)在2小時(shí)之內(nèi)使用；若保存在28，可在24小時(shí)內(nèi)使用。黑曲霉孢子懸液可保存在28，在驗(yàn)證過的貯存有效期內(nèi)使用。3.計(jì)數(shù)方法的驗(yàn)證3.1.需氧菌、霉菌及酵母菌計(jì)數(shù)（平皿法） 所加菌液的體積不得超過供試液體積的1%。為確認(rèn)供試品中的微生物能被充分檢出，首先應(yīng)選擇最低稀釋級的供試液進(jìn)行計(jì)數(shù)方法適用性檢查。3.1.1.試驗(yàn)組 取上述制備好的供試液，加入試驗(yàn)菌液、混勻，使每1ml供試液或每張濾膜過濾的供試液中含菌量不大于100cfu。取 的供試液9.9ml和小于10000cfu的銅綠假單胞菌菌懸液0.1ml混勻后，吸取1ml注入平皿中，立即傾注胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基 15

29、20ml，混勻，凝固，于3035倒置培養(yǎng)3天點(diǎn)計(jì)菌落數(shù)。平行制備2個平皿。取 的供試液9.9ml和小于10000cfu的金黃色葡萄球菌菌懸液0.1ml混勻后，吸取1ml注入平皿中，立即傾注胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基1520ml，混勻，凝固，于3035倒置培養(yǎng)3天點(diǎn)計(jì)菌落數(shù)。平行制備2個平皿。取 的供試液9.9ml和小于10000cfu的枯草芽孢桿菌菌懸液0.1ml混勻后，吸取1ml注入平皿中，立即傾注胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基1520ml，混勻，凝固，于3035倒置培養(yǎng)3天點(diǎn)計(jì)菌落數(shù)。平行制備2個平皿。取 的供試液9.9ml和小于10000cfu的白色念珠菌菌懸液0.1ml混勻后，吸取1ml注入平皿中，立

30、即傾注胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基1520ml，混勻，凝固，于3035倒置培養(yǎng)3天點(diǎn)計(jì)菌落數(shù)。平行制備2個平皿。取 的供試液9.9ml和小于10000cfu的黑曲霉菌懸液0.1ml混勻后，吸取1ml注入平皿中，立即傾注胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基1520ml，混勻，凝固，于3035倒置培養(yǎng)3天點(diǎn)計(jì)菌落數(shù)。平行制備2個平皿。取 的供試液9.9ml和小于10000cfu的白色念珠菌菌懸液0.1ml混勻后，吸取1ml注入平皿中，立即傾注沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基1520ml，混勻，凝固，于2025倒置培養(yǎng)5天點(diǎn)計(jì)菌落數(shù)。平行制備2個平皿。取 的供試液9.9ml和小于10000cfu的黑曲霉菌懸液0.1ml混勻后，吸取1m

31、l注入平皿中，立即傾注沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基1520ml，混勻，凝固，于2025倒置培養(yǎng)5天點(diǎn)計(jì)菌落數(shù)。平行制備2個平皿。 3.1.2.菌液組取小于100cfu的銅綠假單胞菌菌懸液、金黃色葡萄球菌菌懸液、枯草芽孢桿菌菌懸液、白色念珠菌菌懸液、黑曲霉菌懸液各1ml，注入平皿中，立即傾注胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基約1520ml，混勻，凝固，于3035倒置培養(yǎng)3天點(diǎn)計(jì)菌落數(shù)。各平行制備2個平皿。取小于100cfu的白色念珠菌菌懸液、黑曲霉菌懸液各1ml，立即傾注沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基各1520ml，混勻，凝固，于2025倒置培養(yǎng)5天點(diǎn)計(jì)菌落數(shù)。各平行制備2個平皿。3.1.3.供試品對照組取 的供試液1ml，注

32、入平皿中，分別立即傾注1520 ml溫度不超過45胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基和沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基，混勻，凝固，胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基3035倒置培養(yǎng)3天點(diǎn)計(jì)菌落數(shù)，沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基2025倒置培養(yǎng)5天點(diǎn)計(jì)菌落數(shù)。各組平行制備2個平皿。 3.1.4.結(jié)果判斷3.1.4.1計(jì)算公式：稀釋劑對照組菌數(shù)的回收率稀釋劑對照組的平均菌落數(shù)供試品對照組的平均菌落數(shù)菌液組的平均菌落數(shù)試驗(yàn)組菌數(shù)的回收率試驗(yàn)組的平均菌落數(shù)供試品對照組的平均菌落數(shù)菌液組的平均菌落數(shù) 判定標(biāo)準(zhǔn)：實(shí)驗(yàn)組、稀釋劑對照組（如有）的菌數(shù)回收率應(yīng)在0.52之間。若各試驗(yàn)菌的回收率均符合規(guī)定，照所用的供試液制備方法及計(jì)數(shù)方法進(jìn)行該供試品的需氧菌總

33、數(shù)、霉菌和酵母菌總數(shù)計(jì)數(shù)。 3.1.5試驗(yàn)結(jié)果 供試品批號 、 、 。菌種類型試驗(yàn)次數(shù)菌液組試驗(yàn)組供試品對照組回收率銅綠假單胞菌1平均2平均3平均金黃色葡萄球菌1平均2平均3平均枯草芽孢桿菌1平均2平均3平均白色念珠菌（需氧菌驗(yàn)證）1平均2平均3平均黑曲霉（需氧菌驗(yàn)證）1平均2平均3平均白色念珠菌（霉菌、酵母菌驗(yàn)證）1平均2平均3平均黑曲霉（霉菌、酵母菌驗(yàn)證）1平均2平均3平均 結(jié)果判定： 驗(yàn)證人： 日期： 復(fù)核人： 日期： 4.控制菌檢查4.1.（大腸埃希菌）的驗(yàn)證4.1.1.試驗(yàn)組取 的供試液 ml（取相當(dāng)于1g或1ml供試品的供試液），小于100cfu的大腸埃希菌菌懸液1ml，加至約10

34、0ml的胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基，于3035培養(yǎng)1824小時(shí)。4.1.2.陰性對照組取pH7.0無菌氯化鈉蛋白胨緩沖液10ml，加至約100ml的胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基，于3035培養(yǎng)1824小時(shí)。4.1.3.陽性對照組取小于100cfu的大腸埃希菌菌懸液1ml，加至約100ml的胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基，于3035培養(yǎng)1824小時(shí)。.檢查取上述培養(yǎng)物1ml，接種至含100ml 麥康凱液體培養(yǎng)基內(nèi)培養(yǎng)，4244培養(yǎng)2448小時(shí)。取麥康凱液體培養(yǎng)物劃線接種于麥康凱瓊脂平板上3035培養(yǎng)1872小時(shí)。檢查結(jié)果如下： 第一次試驗(yàn)結(jié)果： 供試品批號 序號步 驟實(shí)驗(yàn)組陽性對照組陰性對照組1胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基，3035培養(yǎng)1824小時(shí)2麥康凱液體培養(yǎng)基，4244培養(yǎng)2448小時(shí)3取麥康凱液體培養(yǎng)物劃線接種于麥康凱瓊脂平板上，3035培養(yǎng)1872小時(shí)。若麥康凱瓊脂培養(yǎng)基平板上有菌落生長，應(yīng)進(jìn)行分離、純化及適宜的鑒定試驗(yàn), 確證是否為大腸埃希菌；若麥康凱瓊脂培養(yǎng)基平板上沒有菌落生長，或雖有菌落生長但鑒定