生脈散加味方抗家兔動脈粥樣硬化的實驗研究

1、生脈散加味方抗家兔動脈粥樣硬化的實驗研究農(nóng) 慧1盛慶壽1農(nóng) 釗2(1.廣州中醫(yī)藥大學2005級博士研究生,廣東廣州 510405;2.廣西水產(chǎn)學校,廣西南寧 530021關(guān) 鍵 詞:動脈粥樣硬化; 生脈散加味方; 中醫(yī)藥療法中圖分類號:R285.8 文獻標識碼:A 文章編號:1671-7813(200604-0373-02祖國醫(yī)學對于冠心病的防治,既往多著眼于活血化瘀,改善血液流變學,少有針對動脈粥樣硬化斑塊的穩(wěn)定性做相關(guān)的研究。筆者在臨證中,從祖國醫(yī)學整體觀念出發(fā),結(jié)合現(xiàn)代醫(yī)學的研究成果,自擬生脈散加味方,以益氣養(yǎng)陰法為主,防治動脈脈粥樣硬化。本實驗研究復方藥物在抗動脈粥樣硬化斑塊方面的療效

2、并試圖探討其中可能的機理。1實驗材料和方法動物雄性純種新西蘭大白兔32只體重1.5 0. 5kg,1個半月齡(由廣西醫(yī)科大學動物實驗中心提供。實驗藥品生脈散加味方(生曬參、麥冬、五味子、當歸、穿心蓮組成由廣西中醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院制劑室用水提濃縮法,按1:1比例制備。膽固醇由中國醫(yī)藥集團上?；瘜W試劑公司提供,批號: F20031015。洛伐他汀膠囊由江蘇揚子江藥業(yè)集團公司生產(chǎn),批號:03101601。主要試劑和儀器總膽固醇(TC試劑盒,甘油三酯(TG試劑盒,高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C,低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C試劑盒(以上由伊利康生物技術(shù)有限公司提供,批號20041106;超氧化物歧化酶

3、(S OD試劑盒,丙二醛(M DA試劑盒(由南京建成生物工程公司提供,批號: SOD20040724,M DA20040712;美國貝克曼CX-5CE全自動生化分析儀。實驗分組實驗動物隨機分為4組,即正常對照組(簡稱正常組、模型組,中藥生脈散加味治療組(簡稱中藥組,西藥洛伐他汀膠囊對照組(簡稱西藥組,每組8只。造模方法1、2每組的飼料量為56g/kg/天。正常組給予普通飼料,其余各組在普通飼料中混合加入膽固醇1g/只/天,豬油5g/只/天,待全部吃完后補充足量飼料,連續(xù)63天。給藥劑量及方法1從第33天起,灌胃給藥,每天1次。正常組、模型組灌蒸餾水55m l/天;中藥組灌生脈散加味方水提藥液2

4、1.81m l/kg/天,西藥組灌洛伐他汀膠囊2. 5m g/只/天。連續(xù)用藥30天。2檢測指標血脂、S OD、M DA動態(tài)變化實驗第33天、63天家兔在空腹禁食8小時(不禁水后,從耳中央動脈取血2m,l分離血清,用全自動生化分析儀測定:TC、TG、HDL-C、LDL-C。SOD活力用黃嘌呤氧化酶法測定,M DA含量用T B A法測定。按試劑盒說明操作。病理形態(tài)學檢查實驗結(jié)束后,處死家兔,分離主動脈,縱行剖開,冰鹽水沖洗,觀察新鮮標本的主動脈內(nèi)膜病變情況。內(nèi)膜粥樣斑塊用油紅O染色,顯微鏡微機圖像處理系統(tǒng)測量油紅O染色陽性的面積并計算出斑塊占主動脈內(nèi)膜的百分比,觀察病理改變。數(shù)據(jù)處理組間比較方差

5、齊時用方差分析,方差不齊用對數(shù)轉(zhuǎn)換后用方差分析,自身前后比較用配對樣本t檢驗。參數(shù)表示用:均數(shù) 標準差( X s。3結(jié)果血脂檢測結(jié)果用藥后,自身前后對照:中藥組T C下降(P<0.05、TG升高(P<0.05,H DL-C下降(P<0.01,LDL-C無差異(P>0.05;西藥的血清TC、TG降低(P<0.05,H DL-C下降(P<0.01,LDL-C升高,但無意義(P>0.05。模型組血清TC、TG明顯升高(P<0.01,HDL-C下降(P<0.01,LDL-C升高,但差異無意義(P>0.05。用藥后,組間比較:中藥組與西藥組間T

6、C比較無差異(P>0.05,中藥組的TG較西藥組高(P<0.01;中藥組、西藥組與模型組比較TC有一定程度的下降(P<0.05、TG 明顯低于模型組(P<0.01;各造模組HDL-C下降(P< 0.01,組間比較無差異(P>0.05,LDL-C治療前后無差異,組間比較無差異(P>0.05。結(jié)果見表1。表1 用藥前后各組家兔的血脂含量比較( X s, mmo l/L組別n TC TG HDL-C LDL-C模型組用藥前24.34 0.55!5.06 0.75!4.95 0.11!17.45 0.89!用藥后830.40 1.8110.47 1.032.3

7、7 0.3918.85 0.99#中藥組用藥前24.47 0.45!4.66 0.86!4.98 0.11!17.15 0.63!用藥后822.06 2.49%&#5.76 0.84%*2.84 0.57#17.14 3.17#西藥組用藥前24.47 0.43!4.45 1.30!4.84 0.11!17.62 1.30!用藥后821.40 2.84%&2.58 1.00%*2.59 0.1020.02 3.41# 與正常組比較:!P<0.01;自身前后對照:P?<0.01,%P<0.05,#P>0.05;與模型組比較: *P<0.01,&

8、P<0.05,P>0.05;與洛伐他汀西藥組比較:P<0.01,#P>0.05血清SOD、MDA檢查結(jié)果用藥后,自身前后對照:中藥組的SOD升高但無顯著意義(P>0.05;西藥組、模型組SOD下降(P<0.01;中藥組、西藥組的M DA在治療后下(373(降(P<0.01,模型組M DA升高(P<0.01。用藥后,組間比較 中藥組SOD與西藥組、模型組比較有差異(P<0.01,西藥組與模型組比較無差異(P>0.05;中藥組、西藥組間M DA無差異(P>0.05,與模型組比較有顯著差異(P<0.01。結(jié)果見表2。表2用藥前后

9、各組家兔SOD、MDA的比較結(jié)果( X s組 別n SOD(U/m lM DA(nm ol/m l中藥組用藥前131.71 17.24*99.24 11.38*用藥后8162.70 34.96#*#70.62 19.63*#!西藥組用藥前138.51 34.31*99.64 11.73*用藥后886.51 8.49*66.59 22.67*# 與正常組比較:*P<0.01;自身前后對照:P<0.01,#P> 0.05;與模型組比較:#P<0.01,P>0.05;與西藥組比較:P< 0.01,!P>05病理形態(tài)學觀察肉眼觀察:正常組家兔主動脈內(nèi)膜白色,光

10、滑平整,未見異常病變。各造模組家兔主動脈可見血管內(nèi)膜分布有大小形狀各異的病灶呈黃色,扁平或輕微隆起,斑點狀、片狀或條紋狀,后者與動脈縱軸平行。病變以主動脈弓及主動脈分叉處分布較集中、明顯。其中模型組有1例主動脈弓處病變嚴重,肉眼觀為明顯隆起于內(nèi)膜表面的灰黃橢圓形斑塊。各造模組家兔肉眼觀,心臟外為大量脂肪包裹,正常組家兔的心臟外只有少量脂肪附著。鏡下觀察:中藥組、西藥組所形成的動脈粥樣硬化斑塊占主動脈內(nèi)膜的百分比與模型組比較有顯著差異(P<0.01,兩組間比較無差異(P>0.05。結(jié)果見表3。表3各組家兔動脈粥樣斑塊占主動脈內(nèi)膜的百分比( X s,%組別n百分比(%正常組80.00

11、0.00模型組821.19 3.73中藥組89.88 1.01*!西藥組89.91 1.45*與模型組比較P<0.01;!與西藥組比較P>0.054結(jié)論中醫(yī)基礎(chǔ)理論強調(diào)氣在人體生理病理中所起到的重要作用。氣是構(gòu)成人體的最基本物質(zhì),是維持人體生命活動的動力。氣的失常表現(xiàn)在氣虛和氣機失調(diào)。導致老年人氣虛的主要病因是年老體衰。+素問(陰陽應(yīng)象大論,謂:年四十而陰氣自半也。+素問(上古天真論,曰:六八,陽氣衰竭于上。氣虛的病理表現(xiàn)涉及到全身的各個方面,五臟六腑皆可氣虛。心肺氣虛可影響心搏和血流,推動無力,可見心悸或血行遲緩,甚至血瘀。氣虛可導致氣的升降出入異常。同時氣化功能失常,引起血液、

12、津液生成不足,出現(xiàn)陰液不足,臟腑功能失調(diào),津液代謝障礙,以致津液氣化失常,水濕停聚于體內(nèi),水聚成飲,飲聚成痰,痰濁和/或瘀血停留和附著于脈中管壁之上,日久形成AS。故臨床上動脈粥樣硬化亦主要發(fā)生在老年人。因痰濁、血瘀、陰液不足的形成責之于氣虛,根據(jù)治病必求于本的原則,在病變緩解期或靜止期,先治其本,治法當以益氣為主,兼以養(yǎng)陰增液,活血化瘀,清化脈中濁痰。養(yǎng)陰增液還可達到增液行舟活血化瘀的作用。本實驗所用的生脈散加味方即具備上述功效,而長于益氣陰養(yǎng)增液。現(xiàn)代研究表明:生脈散具有體外抗氧化作用3。生脈散中的君藥人參,其主要有效成分是人參皂甙?，F(xiàn)代藥理研究認為:人參皂甙有鈣離子通道阻滯作用、清除自由

13、基、提高SOD活性、抗脂質(zhì)過氧化作用;調(diào)節(jié)異常脂蛋白膽固醇代謝。麥門冬具有活血化瘀的作用,五味子素有擴張血管和清除氧自由基,抑制脂質(zhì)過氧化的作用。當歸是一種抗氧化劑,在體外可以抑制LDL的氧化,還可縮小家兔AS的主動脈粥樣硬化斑塊的面積4。穿心蓮的提取物A P I0134能提高AS家兔血清一氧化氮(NO、環(huán)磷酸鳥苷(c GM P和SOD 活性,降低內(nèi)皮素(ET和脂質(zhì)過氧化物(LPO含量,具有抗氧化、保護內(nèi)皮功能和維護NO/ET平衡的作用5。實驗結(jié)果顯示:生脈散加味方和洛伐他汀組均有降低T C的作用,未發(fā)現(xiàn)升高HDL-C的作用及降低LDL-C的作用。實驗中生脈散加味方的TG在用藥后升高,且有意義

14、(P<0.05,但低于用藥后的模型組,亦有統(tǒng)計學意義,說明在相同的條件下,生脈散加味方有一定的減緩TG升高的作用。生脈散加味方抗AS的機制之一,可能主要是通過降低TC,其對TG也有一定的影響。在用藥前,各組的S OD、MDA因為氧自由基和過氧化脂質(zhì)的增加,而明顯升高。用藥前后,生脈散加味方SOD、M DA差異不顯著(P>0.05,與模型組比較差異明顯(P<0.01。而西藥組、模型組的SOD在用藥63天后顯著下降,說明持續(xù)的高脂血癥、高脂質(zhì)過氧化物、氧自由基的存在對這兩組家兔SOD的活性產(chǎn)生抑制。中藥組的S OD顯著高于西藥組,說明中藥組仍保持著較高的抗氧化能力。實驗結(jié)果提示:

15、生脈散加味方抗A S 的機制之二可能為提高SOD的活性,從而提高機體抗氧化能力,減少氧自由基對血管內(nèi)皮的損傷。參考文獻1張均田.現(xiàn)代藥理實驗方法M.北京:中國協(xié)和醫(yī)科大學、北京醫(yī)科大學聯(lián)合出版社,1993.1259-12602施新猷.醫(yī)學動物實驗方法M.北京:人民衛(wèi)生出版社,1980.2333Ich i k a w a H.In v i tro an tioxidant potenti als of trad iti onal Ch i n esem ed ici ne,Shengma iSan and their relati on to i n v i vo p rot ecti ve effect on ce