HPLC法測(cè)定鹽酸度洛西汀的含量及有關(guān)物質(zhì)

1、HPLC法測(cè)定鹽酸度洛西汀的含量及有關(guān)物質(zhì)(1)【關(guān)鍵詞】 高效液相色譜法；鹽酸度洛西汀；含量；有關(guān)物質(zhì)摘要 目的：建立HPLC法測(cè)定鹽酸度洛西汀的含量和有關(guān)物質(zhì)。方法：采用ODS2C18（4.6 mm250 mm，5 m）色譜柱，流動(dòng)相為0.025 mol/L磷酸二氫鉀溶液乙腈甲醇（322），流速為1.0 mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為290 nm。結(jié)果：在9.045.0 g/mL范圍內(nèi)，色譜峰面積與濃度呈良好的線性關(guān)系，r=0.9999；回收率100.2%（RSD=0.75%，n=9），最低檢測(cè)限4 ng/mL。結(jié)論：該法準(zhǔn)確、簡(jiǎn)便、靈敏，可用于鹽酸度洛西汀的含量測(cè)定及有關(guān)物質(zhì)檢查。關(guān)鍵詞 高效

2、液相色譜法；鹽酸度洛西汀；含量；有關(guān)物質(zhì)Determination of contents of duloxetine hydrochloride and its related substances with HPLCZHUO Zhi1, WANG Qing2 (1.Chongqing Institute For Drug Control, Chongqing 401121, China; 2. Chongqing Shenghuaxi Pharmaceupical CO. LTD, Chongqing 400061, China)Abstract Objective:To establis

3、h an HPLC method to detemine duloxetine hydrochloride and its related substances. Methods: A Diamonsil ODS2C18 column (4.6 mm250 mm, 5 m) was used with the mobile phase of 0.025 mol/L potassium dihydrogen phosphateacetonitrilemethol (322) at the detection wavelength of 290 nm. The flow rate was 1.0

4、mL/min. Results: The calibration curve was linear in the range of 9.045.0 g/mL, r=0.9999. The average recovery was 100.2% (RSD=0.75%, n=9). The minimum detection amount of duloxetine hydrochloride was 4 ng. Conclusions: This method is accurate, simple and sensitive, and it can be used for the assayo

5、rrelated substances control of duloxetine hydrochloride.Key words HPLC; Duloxetine hydrochloride; Content; Related substances鹽酸度洛西汀1（Duloxetine hydrochloride）為一種口服選擇性5羥色胺（5HT）和去甲腎上腺素再攝取抑制劑（SSNIR），主要用于治療抑郁癥和各種抑郁狀態(tài)及疼痛性軀體癥狀，也用于治療婦女應(yīng)激性尿失禁癥，至今未見其含量及相關(guān)物質(zhì)測(cè)定的報(bào)道。本文參考其類似物的測(cè)定方法2-5建立了HPLC法測(cè)定其含量及相關(guān)物質(zhì)，方法準(zhǔn)確可靠，操作簡(jiǎn)便

6、。1 儀器與試藥島津SPD10Avp型高效液相色譜儀，SPDM10Avp二極管陣列檢測(cè)器，CLASSVP6.2色譜工作站；島津UV2401PC紫外分光光度儀。鹽酸度洛西汀對(duì)照品（HPLC面積歸一化法測(cè)定含量為98.6%）由重慶圣華曦藥業(yè)公司實(shí)驗(yàn)室精制，鹽酸度洛西?。ㄅ?hào)：030301、030302、030303）、膠囊（批號(hào)：030414、030415、030416）及輔料為重慶某公司提供。乙腈、甲醇均為色譜純，磷酸二氫鉀為分析純，試驗(yàn)用水為去離子水。2 方法與結(jié)果2.1 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)色譜柱：Diamonsil ODS2C18柱（4.6 mm250 mm，5 m）；流動(dòng)相：0.02

7、5 mol/L磷酸二氫鉀溶液乙腈甲醇（322）；流速：1.0 mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng)：290 nm；進(jìn)樣量：20 L。在此色譜條件下，空白輔料對(duì)測(cè)定無(wú)干擾，鹽酸度洛西汀色譜峰的理論塔板數(shù)為4 534，主峰的保留時(shí)間約為8 min，見圖1。圖1 鹽酸度洛西汀色譜圖略2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線取鹽酸度洛西汀對(duì)照品45.0 mg，精密稱定，置100 mL量瓶中，加流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻。分別精密量取該溶液2.0、4.0、6.0、8.0、10.0 mL置100 mL量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，制成系列溶液。在上述色譜條件下，精密量取以上溶液各20 L注入液相色譜儀，記錄色譜圖。以峰面積A對(duì)濃度C進(jìn)行

8、線性回歸，回歸方程為：A=49432.5C 1951.81，r=0.9999（n=6）。結(jié)果表明鹽酸度洛西汀濃度在9.045 g/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，在信噪比S/N=3時(shí)，最低檢測(cè)限為4 ng。2.3 穩(wěn)定性試驗(yàn)取含量測(cè)定項(xiàng)下的同一份供試品溶液，在上述色譜條件下，室溫下放置0、2、4、8、16、24 h后測(cè)定峰面積，結(jié)果顯示供試品溶液的峰面積基本一致（RSD=0.21%），說(shuō)明溶液在室溫下24 h內(nèi)穩(wěn)定。2.4 精密度試驗(yàn)取含量測(cè)定項(xiàng)下的同一份供試品溶液，在上述色譜條件下自動(dòng)連續(xù)進(jìn)樣6次，結(jié)果峰面積RSD=0.32%。2.5 峰純度檢測(cè)取鹽酸度洛西汀膠囊樣品測(cè)定項(xiàng)下的供試品溶液，用SPDM

9、10Avp二極管陣列檢測(cè)器對(duì)主峰的起點(diǎn)、頂點(diǎn)和終點(diǎn)進(jìn)行峰純度檢測(cè)，結(jié)果主峰的純度因子為1.0000，表明膠囊中的輔料和雜質(zhì)對(duì)鹽酸度洛西汀的含量測(cè)定無(wú)干擾。2.6 回收率試驗(yàn)按處方標(biāo)示量的80%、100%和120%進(jìn)行回收試驗(yàn)。分別取鹽酸度洛西汀對(duì)照品約24、30、36 mg，精密稱定后置100 mL容量瓶中，按處方量加入空白輔料，流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，精密量取10 mL置100 mL容量瓶中，流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，照樣品測(cè)定項(xiàng)下的方法，依法測(cè)定，結(jié)果平均回收率100.2%（RSD=0.75%，n=9）。2.7 樣品測(cè)定精密稱取鹽酸度洛西汀30 mg，加流動(dòng)相溶解并定量稀釋制成30 g/mL

10、的溶液，作為供試品溶液（1）。取鹽酸度洛西汀膠囊10粒，精密稱定，取出內(nèi)容物，囊殼拭凈后再精密稱定，求出平均裝量。精密稱取內(nèi)容物適量（約相當(dāng)于鹽酸度洛西汀30 mg），置100 mL量瓶中，加流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液10 mL置100 mL量瓶中，加流動(dòng)相并稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液（2）。另精密稱取在105 干燥至恒重的鹽酸度洛西汀對(duì)照品適量，同法操作。照上述色譜條件，分別吸取供試品溶液（1）、（2）及對(duì)照品溶液各20 L，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，結(jié)果見表1。2.8 有關(guān)物質(zhì)檢查按上述色譜條件，取本品適量，加流動(dòng)相溶解并制成2 g/m

11、L的溶液，在200400 nm的波長(zhǎng)處掃描，結(jié)果顯示本品在230 nm和290 nm附近均有最大吸收。因290 nm附近吸收峰用于有關(guān)物質(zhì)檢測(cè)的響應(yīng)值低，在此波長(zhǎng)下雜質(zhì)基本不出峰，而230 nm附近吸收峰的響應(yīng)值高，且能夠靈敏地檢測(cè)到雜質(zhì)的存在情況，故選擇230 nm作為本品有關(guān)物質(zhì)的檢測(cè)波長(zhǎng)。表1 樣品含量測(cè)定結(jié)果略取本品適量，加流動(dòng)相溶解并稀釋成0.4 mg/mL溶液，作為供試品溶液。精密量取供試品溶液1 mL，置100 mL量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，作為自身對(duì)照溶液。取對(duì)照溶液20 L注入液相色譜儀進(jìn)行預(yù)示，調(diào)節(jié)檢測(cè)靈敏度，使主峰高約為記錄儀滿刻度的20%，再取供試品溶液20 L

12、注入液相色譜儀，記錄色譜圖至主成分峰保留時(shí)間的2倍。結(jié)果顯示供試品溶液的色譜圖中雜質(zhì)峰面積之和相當(dāng)于1.5%自身對(duì)照溶液的峰面積。 本篇論文是由3COME文檔頻道的網(wǎng)友為您在網(wǎng)絡(luò)上收集整理餅投稿至本站的，論文版權(quán)屬原作者，請(qǐng)不要用于商業(yè)用途或者抄襲，僅供參考學(xué)習(xí)之用，否者后果自負(fù)，如果此文侵犯您的合法權(quán)益，請(qǐng)聯(lián)系我們。3 討論在參考其他西汀類藥物測(cè)定的HPLC方法的基礎(chǔ)上，綜合考慮有機(jī)溶劑的種類、有機(jī)相與水相的比例等因素，選擇了“2.1”項(xiàng)下的色譜條件。在此條件下鹽酸度洛西汀與雜質(zhì)可達(dá)到基線分離，保留時(shí)間適中，輔料不干擾測(cè)定。峰純度試驗(yàn)表明，本文所建立色譜系統(tǒng)圖2 有關(guān)物質(zhì)檢查略能夠達(dá)到主峰與輔料和雜質(zhì)峰的完全分離，且檢測(cè)靈敏度較高，操作簡(jiǎn)便，結(jié)果準(zhǔn)確可靠。本法除可用于鹽酸度洛西汀及其膠囊的含量測(cè)定外，也可采用自身對(duì)照法或面積歸一化法對(duì)其雜質(zhì)進(jìn)行限度檢查。參考文獻(xiàn)：1 趙 靜, 朱 珠. 治療重癥抑郁和糖尿病周圍神經(jīng)病變的新藥度洛西汀J. 中國(guó)藥學(xué)雜志, 2006, 41(14): 11181120.2 葉顯撐, 王洪泉, 吳 涓, 等. RPHPLC法測(cè)定鹽酸帕羅西汀片的含量J. 中國(guó)現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué)雜志, 2001, 18 (3): 233234