610苦榆順達(dá)灌腸液的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究

1、苦榆順達(dá)灌腸液的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究王淑君1，劉衛(wèi)紅 2，張曉堅(jiān)1，張國(guó)偉3（1、鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院，河南，鄭州450052；2、河南中醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院，河南，鄭州450003；3、泉州市第一人民醫(yī)院，福建，泉州362000）摘要：目的 制定苦榆順達(dá)灌腸液的制備方法及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。方法 采用薄層色譜法作苦參、蛇床子的定性鑒別；采用高效液相色譜法測(cè)定灌腸液中沒食子酸的含量。結(jié)果 制劑穩(wěn)定，質(zhì)量控制方法可行，沒食子酸進(jìn)樣量在0.07220.3612 g濃度范圍內(nèi)與峰面積呈良好的線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)為0.9997，方法平均回收率為97.8%,（RSD=1.03%）。結(jié)論 該灌腸液制備工藝可行，質(zhì)量控制方法簡(jiǎn)便

2、、準(zhǔn)確。關(guān)鍵詞：苦榆順達(dá)灌腸液；制備工藝；質(zhì)量控制Preparation and Quality control of Kuyushunda EnemaWANG Shujun1，LIU Weihong2，ZHANG Xiaojian1，ZHANG Guowei3(1.Department of Pharmary， the First Affiliated Hospital of Zhengzhou University ，Zhengzhou450052 ，China；2.The Central Laboratory， the First Affiliated Hospital of Henan

3、 college of TCM ，Zhengzhou450003 ，China；3.Quanzhou first People，s Hospital，F(xiàn)ujian Quanzhou 362000，China)Abstract ： OBJECTIVE：To establish the preparation and quality control methods of Kuyushunda Enema .Methods: Radix Sophorae Flavescentis and Radix Sanguisorbae were identified by TLC and to determi

4、ne the content of Gallic acid by HPLC. Results: The preparation was stable and the methods was feasible in quality control ， The calibration curve of Gallic acid was a good linear relation within the range of 0.07220.3612µ (r=0.9997) .the average recoveries was 97.8% (RSD=1.03%） .Conclusion:The

5、 method were convenient，accurate and could be used for preparation and quatity control of Kuyushunda Enema .Key Words：Kuyushunda EnemaL；TLC；HPLC；Preparation ；Quality control 苦榆順達(dá)灌腸液是苦參、生地榆、蛇床子、敗醬草、薏苡仁等藥物經(jīng)適宜工藝制成的澄清液體灌腸劑，具清熱利濕、化瘀解毒作用，經(jīng)臨床證明，對(duì)濕熱毒邪蘊(yùn)結(jié)之大腸癌有顯著的治療作用，現(xiàn)就質(zhì)量控制報(bào)道如下：1 儀器與試藥 日本島津LC-10AT型高效液相色譜儀，SPD

6、-10A型紫外檢測(cè)器。電子天平（Sartorius 德國(guó)）；超聲提取器（KQ-5200DB，昆山超聲儀器有限公司）；PBQI型薄層自動(dòng)鋪板儀（重慶南岸新力實(shí)驗(yàn)電器廠）；pHS-3C精密pH計(jì)（上海雷磁）；硅膠G（青島海洋化工廠）；苦參堿對(duì)照品（中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)：0805200203）；蛇床子對(duì)照藥材（中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)：10309902）；沒食子酸對(duì)照品，由中國(guó)藥品生物制品檢定所提供，批號(hào)：110784200202；甲醇，色譜純；水，超純水；其余試劑均為分析純。苦榆順達(dá)灌腸液，由本院制劑室提供（批號(hào)分別為051102、051108、051109）；缺味陰性對(duì)照：按處方分別

7、配成相應(yīng)的缺味處方藥，模擬制劑工藝，加相應(yīng)輔料制備。 2 質(zhì)量控制2. 1 性狀 本品為紅棕色澄明液體，味苦、澀。2. 2 理化鑒別 取本品20 mL，水浴濃縮至稠膏狀，加乙醇20 mL，加熱回流20 min，濾過，濾液滴加氨試液調(diào)節(jié)pH至89，靜置，過濾，取沉淀物少量，加水2 mL使溶解，加1% FeCl3 試液3滴，溶液呈蘭黑色沉淀。2. 3 薄層鑒別2. 3. 1 苦參 取本品5mL，加氨試液3 mL，加水15 mL，混勻，加氯仿振搖提取3 次，每次15 mL，分取氯仿液，合并蒸干，殘?jiān)右掖? mL使溶解，作為供試品溶液。另取苦參堿對(duì)照品，加乙醇制成每1 mL含0.5 mg的溶液，作為

8、對(duì)照品溶液。照薄層色譜法1試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5 µL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以醋酸乙酯-乙醇濃氨水（5：1：0.5）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以稀碘化鉍鉀試液。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的橙色斑點(diǎn)，圖1為經(jīng)等高線處理的薄層色譜圖1。2. 3. 2 蛇床子 取鑒別（1）項(xiàng)下的供試品溶液作為供試品溶液；取蛇床子對(duì)照藥材1 g，加氯仿10 mL，浸漬過夜，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)右掖? mL使溶解，作為對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法1試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5µL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以石油醚（3060）-醋酸乙酯-甲酸（15：5：2）為展

9、開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈（365 nm）下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的藍(lán)色熒光斑點(diǎn)，圖2為經(jīng)等高線處理的薄層色譜圖1。2. 4 含量測(cè)定2、3 色譜條件 色譜柱：Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18（4.6mm×150 mm，5m）；流動(dòng)相：甲醇-0.1%磷酸（8：92）；流速：0.8mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng)：273 nm；柱溫：室溫。 對(duì)照品溶液的制備 精密稱取沒食子酸對(duì)照品0.903 mg，置25 mL量瓶中，加甲醇使溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得（每1mL含沒食子酸0.03612mg）。 供試品溶液的制備 精密量取本品

10、5 mL，置具塞50 mL錐形瓶中，精密加入甲醇至刻度，密塞，搖勻，靜置，取上清液濾過，取續(xù)濾液，即得。 陰性對(duì)照液制備 陰性對(duì)照品溶液的制備，按處方比例及制法制備缺地榆的陰性對(duì)照樣品，按供試品溶液的制備方法同法制成陰性對(duì)照溶液。 線性關(guān)系的考察 精密吸取上述對(duì)照品溶液2、4、6、8、10L進(jìn)樣，并以進(jìn)樣量（X）為橫坐標(biāo)，峰面積（Y）為縱坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，得回歸方程：Y =3614.182X +39.570，r=0.9997。表明沒食子酸在0.07220.3612 g的范圍內(nèi)與其色譜峰面積積分值呈良好的性線關(guān)系。 精密度試驗(yàn) 分別精密吸取上述0.03612 mg/mL的沒食子酸對(duì)照品溶液，在相

11、同的色譜條件下連續(xù)進(jìn)樣6次，進(jìn)樣量5L，測(cè)得其峰面積積分值基本一致，RSD=0.82%（n=6）。表明精密度良好。 重復(fù)性試驗(yàn) 取同一批樣品（批號(hào)：051102）6份，精密稱定，按“供試品溶液制備”項(xiàng)下方法操作，平行制備6份樣品，在上述色譜條件下進(jìn)行分析測(cè)定，結(jié)果沒食子酸的平均含量為0.042%， RSD為1.02%（n=6）。結(jié)果表明該方法重現(xiàn)性較好。 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取同一份供試品溶液，室溫下靜置，分別于0，2，4，8，12h，按上述色譜條件測(cè)定，結(jié)果五次測(cè)得的沒食子酸峰面積的RSD為1.1%，表明供試品溶液在12h內(nèi),穩(wěn)定性良好。 回收率試驗(yàn) 取含量為0.041% 的樣品6 份，精密量取2.

12、5 mL并分別精密添加濃度為每1mL含0.565 mg的沒食子酸對(duì)照品溶液2 mL，按供試品的制備與測(cè)定方法在上述色譜條件下進(jìn)行含量測(cè)定，測(cè)得平均回收率為98.44%,RSD為0.98%（n =6）。結(jié)果見表1表1 回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果(n =6)Table 1 Result of recovery test( n =6)序號(hào)取樣量(mg)加入量(mg)測(cè)得量(mg)回收率(%)平均回收率(%)RSD(%)11.0251.1302.12597.321.0251.1302.14198.831.0251.1302.12096.997.81.0341.0251.1302.13598.251.0251.13

13、02.14599.161.0251.1302.11896.7 樣品的測(cè)定 分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各5L,注入液相色譜儀,測(cè)定3 個(gè)批號(hào)樣品,測(cè)定結(jié)果分別為0.042%、0.044%、0.041%。3 結(jié)果與討論31 處方組成為苦參200g，生地榆200g，蛇床子150g，薏苡仁300 g，吐溫-80、甲殼素、明膠等適量。32 預(yù)試時(shí)做處方中藥物的配伍及苦參與生地榆、蛇床子的沉淀物在人工腸液中的溶解性試驗(yàn)，結(jié)果可知：苦參不宜與其他藥物共煎，制備中沉淀劑甲殼素、明膠的使用可除去大分子可溶性鞣質(zhì)，之后再次醇沉較順利地解決了細(xì)小沉淀的祛除問題，并且穩(wěn)定性大為提高，制劑在一年內(nèi)澄明度合格。有

14、關(guān)本制劑穩(wěn)定性研究，有待今后進(jìn)一步討論。33 經(jīng)篩選試驗(yàn)結(jié)果吐溫-80 以0.5% 做溶劑最佳。34 因苦參中所含苦參堿、氧化苦參堿及蛇床子所含蛇床子素均不穩(wěn)定，以此為指標(biāo)制定含量測(cè)定方法穩(wěn)定性較差，故選擇地榆中沒食子酸做為含量測(cè)定指標(biāo)。參考文獻(xiàn)1 陳忠東，雷頌.多功能薄層層析用紫外檢測(cè)燈的制作及薄層圖譜處理J。中國(guó)藥業(yè)，2007，16（8）：35.2 鄭文媛，劉法錦.地榆配方顆粒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究J .中華醫(yī)學(xué)研究雜志，2006，6（7）：737738.3.王漢平，楊志靈，蔣軍.高效液相色譜法測(cè)定蝎子七中沒食子酸的含量J.中國(guó)藥房，2005,16（10）：780781. 圖 1 苦參的薄層色譜圖1、陰性對(duì)照品 2、苦參堿對(duì)照品 3、供試品 Fig 1 TLC chrom