XXXX年careHPV產(chǎn)品培訓(xùn)

1、Sample & Assay Technologies12013年年careHPV 產(chǎn)品培訓(xùn)產(chǎn)品培訓(xùn) Sample & Assay Technologies2HPV與子宮頸癌HPV致癌過程致癌過程2008年諾貝爾醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)獲得者：楚爾年諾貝爾醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)獲得者：楚爾.豪森豪森Sample & Assay Technologies3確定疾病疾病病理預(yù)防疾病子宮頸癌的預(yù)防史組織細(xì)胞分子2003年1925年1942年1996年2001年2006年2012年一級(jí)預(yù)防二級(jí)預(yù)防三級(jí)預(yù)防宮頸癌陰道鏡PAPLBCTBSHC2careHPVGardasilHPVCervarixSample &am

2、p; Assay Technologies4陰道鏡+組織活檢1925年德國學(xué)者HansHinselman發(fā)明了陰道鏡（colposcope）Sample & Assay Technologies5陰道鏡+組織活檢CT=結(jié)締組織 BM=基底膜L1=基底細(xì)胞（1層）L2= 副基底細(xì)胞（2層）L3=中間層細(xì)胞（約8層）L4=表層細(xì)胞（約5至6層）L5=脫落的表層鱗狀細(xì)胞 ）正常宮頸上皮結(jié)構(gòu)Sample & Assay Technologies6陰道鏡+組織活檢CIN 宮頸上皮內(nèi)瘤變（ Cervical intraepithelial neoplasia ）CIN1：上皮層的下1/3細(xì)

3、胞成熟紊亂，伴細(xì)胞核異型。CIN2伴挖空細(xì)胞變化：上皮層下1/2的結(jié)構(gòu)紊亂并出現(xiàn)符合惡性和病毒感染的細(xì)胞學(xué)標(biāo)準(zhǔn)。CIN3：幾乎全層的上皮細(xì)胞結(jié)構(gòu)紊亂，細(xì)胞和胞核顯著異型，可見典型和不典型核分裂。正常宮頸上皮 宮頸管（A=宮頸外口，B=宮頸峽部，C=宮頸腺體的分布區(qū)域）Sample & Assay Technologies7陰道鏡+組織活檢 根據(jù)Hamperl的分類：I=CIN2，II=原位癌累及腺體，III=早期間質(zhì)浸潤，IV=微小浸潤癌， IV a= 明顯間質(zhì)浸潤，IVb= 明顯向外生長(zhǎng)的腫塊(見 TNM 和 FIGO分類)。.微浸潤性鱗狀細(xì)胞癌癌前病變的演變和癌Sample &am

4、p; Assay Technologies8細(xì)胞學(xué)（CTOLOGY）- PAP（巴氏涂片）巴氏涂片（PAP SMEAR）于1943年P(guān)apanikolaou發(fā)表文獻(xiàn)報(bào)道巴氏分級(jí)巴氏分級(jí)巴氏I級(jí)正常涂片中沒有不正常細(xì)胞。巴氏級(jí)炎癥炎癥引起的細(xì)胞異形改變。巴氏級(jí)核異質(zhì)細(xì)胞變化嚴(yán)重，可能由炎癥或腫瘤引起，但不能肯定，需進(jìn)一步隨診檢查確診。巴氏級(jí)可疑癌高度懷疑是宮頸癌。巴氏級(jí)癌確定是宮頸癌。Georgios Papanikolaou (1883-1962) Sample & Assay Technologies9細(xì)胞學(xué)（CTOLOGY）- PAP（巴氏涂片）巴氏涂片巴氏涂片法的特點(diǎn)：巴氏涂片法

5、的特點(diǎn)：n厚度不均，細(xì)胞重疊多，背景不干凈n假陰性率高，檢測(cè)結(jié)果可信度低液基細(xì)胞液基細(xì)胞學(xué)的特點(diǎn)：液基細(xì)胞學(xué)的特點(diǎn)：n薄層涂片，結(jié)構(gòu)清晰，背景干凈。n提高了陽性檢測(cè)率，減少了漏診。Sample & Assay Technologies10細(xì)胞學(xué)（CTOLOGY）- LBC（液基細(xì)胞學(xué)）LBC（液基細(xì)胞學(xué)）-ThinPrep （HOLOGIC）、SurePath（BD）SurePath cytology collection systemThinPrep cytology collection systemSurePath梯度離心細(xì)胞富集技術(shù)ThinPrep膜吸附技術(shù)Sample &am

6、p; Assay Technologies11細(xì)胞學(xué)（CTOLOGY）- TBS（The Bethesda System）2001 TBS（上皮細(xì)胞異常（上皮細(xì)胞異常 ）-鱗狀細(xì)胞鱗狀細(xì)胞 * 非典型鱗狀細(xì)胞（ASC） - 意義不明(ASC-US) - 不除外上皮內(nèi)高度病變(ASC-H) * 鱗狀上皮內(nèi)低度病變（LSIL）* 鱗狀上皮內(nèi)高度病變（HSIL） * 鱗狀細(xì)胞癌-腺細(xì)胞腺細(xì)胞 * 非典型（AGC） * 頸管原位腺癌（AIS） * 腺癌Sample & Assay Technologies12ASC-US：非典型鱗狀細(xì)胞：非典型鱗狀細(xì)胞-意義不明確意義不明確Sample &am

7、p; Assay Technologies13鱗狀上皮低度病變（鱗狀上皮低度病變（LISL）Sample & Assay Technologies14鱗狀上皮高度病變（鱗狀上皮高度病變（HISL）Sample & Assay Technologies15Marie-Helene Mayrand, M.D.,2007Sample & Assay Technologies16細(xì)胞學(xué)技術(shù)流程Sample & Assay Technologies17盡管細(xì)胞學(xué)篩查的廣泛應(yīng)用，但腺癌的死亡率卻在增加美國子宮頸腺細(xì)胞癌的發(fā)生增加Age-adjusted rates per

8、100,000 women in the US0123456789101973197719781982198319871988199219931996鱗鱗癌癌腺癌腺癌A=宮頸外口B=宮頸峽部C=宮頸腺體的分布區(qū)域Sample & Assay Technologies18digene HC2- Hybrid Capture 2雜交捕獲第二代技術(shù)HC2 在分子水平上檢測(cè)在分子水平上檢測(cè)WHO認(rèn)定的認(rèn)定的13種高危型種高危型HPV病毒病毒（當(dāng)前（當(dāng)前HPV檢測(cè)的金標(biāo)準(zhǔn)）檢測(cè)的金標(biāo)準(zhǔn)）1、DNA變性2、全長(zhǎng)RNA雞尾酒探針雜交3、抗體捕獲4、二抗結(jié)合5、信號(hào)檢測(cè)HC2 檢測(cè)原理檢測(cè)原理Samp

9、le & Assay Technologies19Marie-Helene Mayrand, M.D.,2007Sample & Assay Technologies20宮頸癌篩查方法敏感性比較Sample & Assay Technologies21Sample & Assay Technologies22HC2 HPV檢測(cè)作為宮頸癌的初篩手段：中國匯總分析檢測(cè)作為宮頸癌的初篩手段：中國匯總分析高危型高危型HPV DNA檢測(cè)可作為宮頸癌初檢測(cè)可作為宮頸癌初篩方法的有效性研究篩方法的有效性研究中國以人群為中國以人群為基礎(chǔ)的基礎(chǔ)的17個(gè)篩查研究綜合分析個(gè)篩查研究綜

10、合分析Sample & Assay Technologies23CIN2+平均敏感性平均敏感性96.3%CIN3+平均敏感性平均敏感性97.5%HC2 HPV檢測(cè)作為宮頸癌的初篩手段：中國匯總分析檢測(cè)作為宮頸癌的初篩手段：中國匯總分析Sample & Assay Technologies24確定疾病疾病病理預(yù)防疾病組織細(xì)胞分子2003年1925年1942年1996年2001年2008年2012年一級(jí)預(yù)防二級(jí)預(yù)防三級(jí)預(yù)防宮頸癌陰道鏡PAPLBCTBSHC2ASCUS分流（FDA 1999）GardasilHPVCervarixHC230歲以上婦女聯(lián)合細(xì)胞學(xué)篩查（FDA 2003）

11、HC225-64歲婦女宮頸癌初篩（EUROGIN）Sample & Assay Technologies25子宮頸癌篩查方案Sample & Assay Technologies26發(fā)展中國家子宮頸癌發(fā)病數(shù)量占全球總數(shù)的85%子宮頸癌篩查面臨的現(xiàn)狀69.2 69.17.745.3發(fā)達(dá)國家發(fā)達(dá)國家發(fā)展中國家發(fā)展中國家乳腺癌宮頸癌IARC, Globacan 2008Sample & Assay Technologies27宮頸癌篩查的挑戰(zhàn)宮頸癌篩查的挑戰(zhàn)TextTextTextTextTextText水電專有實(shí)驗(yàn)室冷藏運(yùn)輸條件專業(yè)技術(shù)人員醫(yī)療條件Sample &

12、Assay Technologies28careHPV的誕生背景比爾&梅琳達(dá)蓋茨基金出資成立國際宮頸癌防治聯(lián)盟（ACCP）帕斯（美國適宜衛(wèi)生科技組織）在ACCP的經(jīng)驗(yàn)基礎(chǔ)上啟動(dòng)START項(xiàng)目PATH與QIAGEN共同協(xié)作下完成了careHPV快速檢測(cè)系統(tǒng)可靠性驗(yàn)證careHPVSTART-UP1999年2003年2008年Sample & Assay Technologies29喬友林 教授 首位獲得IARC獎(jiǎng)?wù)碌闹袊茖W(xué)家Sample & Assay Technologies30比爾.蓋茨夫婦參觀凱杰公司和care HPV檢測(cè)現(xiàn)場(chǎng)演示Sample & Assa

13、y Technologies31careHPV 產(chǎn)品組成振蕩器振蕩器 基因雜交信號(hào)擴(kuò)大儀基因雜交信號(hào)擴(kuò)大儀磁性板架磁性板架控制器控制器care宮頸刷宮頸刷 & 宮頸細(xì)胞保存液宮頸細(xì)胞保存液1ml/管，50管/盒，15-30 保存24個(gè)月 careHPV試劑盒：試劑盒：96測(cè)試/盒，4-25 可保存可保存12個(gè)月個(gè)月Sample & Assay Technologies32 簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、高效簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、高效試劑顏色編碼操作數(shù)字編碼簡(jiǎn)單易學(xué)即可用交流電供電，也可用蓄電池供電，2.5小時(shí)出檢測(cè)結(jié)果實(shí)現(xiàn)即時(shí)檢測(cè)，及時(shí)追蹤careHPV是一套完整的檢測(cè)系統(tǒng)，實(shí)驗(yàn)在15-40度環(huán)境下都可進(jìn)

14、行,無需專用實(shí)驗(yàn)室試劑低溫冷凍成干粉可在常溫下運(yùn)輸試劑盒自帶洗液不需額外準(zhǔn)備Sample & Assay Technologies33careHPV 檢測(cè)原理（HC2 + 磁珠捕獲法）Sample & Assay Technologies34careHPV 臨床驗(yàn)證數(shù)據(jù)35，000人份全球開展careHPV 臨床驗(yàn)證研究的分布區(qū)域Sample & Assay Technologies35careHPV 臨床驗(yàn)證數(shù)據(jù)35，000人份HPVToday 2791.5%95.8%Sample & Assay Technologies36careHPV 最簡(jiǎn)便、可靠的子宮

15、頸癌篩查方法Sample & Assay Technologies37careHPV vs PapcareHPV細(xì)胞學(xué)從分子生物學(xué)層面進(jìn)行檢測(cè)：針對(duì)HPV潛伏期、感染期、亞臨床期、臨床癥狀期、癌癥相關(guān)期均可。可預(yù)測(cè)疾病風(fēng)險(xiǎn)。從形態(tài)學(xué)層面進(jìn)行檢測(cè)：只針對(duì)臨床癥狀期、癌癥相關(guān)期，不可預(yù)測(cè)風(fēng)險(xiǎn)，只能描述當(dāng)前情況。臨床敏感度達(dá)90%，客觀的檢測(cè)方法，不受人為因素的影響，準(zhǔn)確可靠，漏診率低 臨床敏感度50%-70%，專家水平也只有85%左右，主觀的檢測(cè)方法，無法避免人為因素的干擾，結(jié)果有一定的可疑性漏診率高一次檢測(cè)結(jié)果陰性可在3-5年再常規(guī)篩查。必須每年篩查一次對(duì)人員要求低，簡(jiǎn)單培訓(xùn)即可操作，機(jī)

16、器判讀，對(duì)專業(yè)知識(shí)要求低對(duì)人員要求高，必須經(jīng)過專業(yè)培訓(xùn)，人工判讀，必須要有較好的專業(yè)知識(shí)2.5小時(shí)可出結(jié)果，實(shí)現(xiàn)即時(shí)檢測(cè)及時(shí)追蹤難以實(shí)現(xiàn)當(dāng)天出結(jié)果，報(bào)告周期長(zhǎng)Sample & Assay Technologies38careHPV vs PCRcareHPVPCR全長(zhǎng)探針，全長(zhǎng)探針，87.8-95.8% L1片段為引物，缺失而漏診，片段為引物，缺失而漏診，83%左右左右無需無需DNA純化純化酶促反應(yīng)，為避免酶被抑制，需要酶促反應(yīng)，為避免酶被抑制，需要DNA純化純化實(shí)驗(yàn)室條件要求低實(shí)驗(yàn)室條件要求低專門的專門的PCR實(shí)驗(yàn)室（通過臨檢中心認(rèn)證）實(shí)驗(yàn)室（通過臨檢中心認(rèn)證）實(shí)驗(yàn)操作占地面積小，實(shí)驗(yàn)操作占地面積小，140cm寬寬 x 64cm深深 x 64cm高。高。實(shí)驗(yàn)占地面積大，三個(gè)獨(dú)立的實(shí)驗(yàn)區(qū)域最少需