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1、【選修1第一輪復(fù)習(xí)導(dǎo)學(xué)案】專題2 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用課題1 微生物的實驗室培養(yǎng)【考點1】相關(guān)核心概念1、微生物:是指肉眼看不見或看不清楚的微小生物的總稱。主要包括:細(xì)菌(原核生物 如大腸桿菌、枯草桿菌、乳酸菌、硝化細(xì)菌、醋酸菌);真菌(真核生物 如酵母菌、毛霉菌);病毒(非細(xì)胞生物 如噬菌體、HIV、煙草花葉病毒)2、 菌落 細(xì)菌(真菌)在固體培養(yǎng)基上大量繁殖時,就會形成一個肉眼可見的子細(xì)胞群體。3、 微生物培養(yǎng)目的 獲得純化菌種用于生產(chǎn)或科學(xué)研究;4、 微生物培養(yǎng)成功的關(guān)鍵,需要注意什么?(1)、 ;(2)、 ;【考點2】、培養(yǎng)基1、概念:人們按照微生物對 不同需求,配制出滿足其 的營養(yǎng)基質(zhì)
2、。2、營養(yǎng)成分成分水無機鹽碳源氮源備注舉例水Nacl、KHPO4、MgSO4等無機物:無機物:還需滿足微生物生長對PH、氧氣、特殊營養(yǎng)的要求有機物:有機物:2、種類、按物理性質(zhì)分類分類不同點用途例子液體培養(yǎng)基 瓊脂(凝固劑)工業(yè)生產(chǎn)酒、醋、泡菜葡萄糖溶液培養(yǎng)酵母菌固體培養(yǎng)基 瓊脂(凝固劑)微生物的分離、鑒定培養(yǎng)肺炎雙球菌、按用途(功能)分類分類用途例子選擇培養(yǎng)基加入某物質(zhì),抑制雜菌生長,促進(jìn)所需微生物生長以尿素作為唯一氮源的培養(yǎng)基篩選出分解尿素細(xì)菌鑒別培養(yǎng)基根據(jù)微生物代謝特點,加入指示劑或化學(xué)試劑鑒定加入伊紅-美藍(lán)鑒定大腸桿菌、按成分分類分類概念例子天然培養(yǎng)基化學(xué)成分不明確的天然物質(zhì)枯草、牛糞
3、等配制培養(yǎng)基合成培養(yǎng)基化學(xué)成分已知的化學(xué)物質(zhì)牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基【考點3】、無菌技術(shù)1、 定義:指在微生物培養(yǎng)過程中,所有防止 的方法。2、 類型無菌技術(shù)定義方法消毒通過物理或化學(xué)方法,殺死 和一部分芽孢。乳制品消毒食具、刀剪、注射器的消毒手、水源消毒滅菌通過物理或化學(xué)方法,殺死 包括 適用于實驗室的金屬器械(鑷、剪、接種環(huán)等)、玻璃試管口和瓶口等適用于耐高溫的玻璃器皿、瓷器、玻璃注射器等適用于普通培養(yǎng)基、生理鹽水等【考點4】、實驗操作(大腸桿菌的純化培養(yǎng))步驟(一)、制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基1、制備原則 根據(jù)培養(yǎng)微生物的營養(yǎng)和環(huán)境條件考慮(1)、目的明確:根據(jù)培養(yǎng)微生物的種類及培養(yǎng)目的選擇材
4、料不同制備培養(yǎng)基。比如:培養(yǎng)硝化細(xì)菌需要加入有機碳源嗎? 。(2)、根據(jù)微生物種類,營養(yǎng)要協(xié)調(diào) (3)、PH適宜; 真菌最適PH:5.06.0 細(xì)菌最適PH:6.57.5 2、制備過程(5個步驟)(1)、計算:根據(jù)培養(yǎng)基配方比例注意事項:、該培養(yǎng)基含 類營養(yǎng),從同化作用角度考慮,培養(yǎng)的大腸桿菌屬于 生物。、蛋白胨(蛋白胨富含有機氮化合物,也含有一些維生素和糖類)可以為微生物提供 營養(yǎng)。、牛肉膏(含有肌酸、肌酸酐、多肽類、氨基酸類、核苷酸類、有機酸類、礦物質(zhì)類及維生素類的水溶性物質(zhì))可以為微生物提供 營養(yǎng)。(2)、稱量注意事項:、用天平稱取牛肉膏、蛋白胨、氯化鈉、瓊脂時,應(yīng)用在天平兩邊托盤放質(zhì)量
5、相等的 。、用量筒量取 100mL(3)、溶化步驟:、溶解牛肉膏后,溶解蛋白胨和氯化鈉。、加入 溶解,補加蒸餾水至 mL。、調(diào)節(jié) 。若溶解后,溶液呈酸性則用1mol/mL 調(diào)節(jié)。呈堿性,用1mol/mL 調(diào)節(jié)。(4)、滅菌 步驟:、用 方法對裝有培養(yǎng)基的錐形瓶進(jìn)行滅菌、用 方法對培養(yǎng)皿進(jìn)行滅菌。思考:如何檢測制備出的培養(yǎng)基滅菌成功? (5)、倒平板討論P17問題:(二)、純化大腸桿菌1、目的:獲得由一個大腸桿菌繁殖而形成的菌落。2、方法:(接種) 、 ;討論P18問題;討論P19問題; 【高考題模擬】 專題二 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用第1節(jié) 微生物的實驗室培養(yǎng)1、將接種后的培養(yǎng)基和一個未接種的培養(yǎng)基
6、都放入37 恒溫箱的目的是()A對比觀察培養(yǎng)基有沒有被微生物利用 B對比分析培養(yǎng)基是否被雜菌污染C沒必要放入未接種的培養(yǎng)基 D為了下次接種時再使用2、下列描述正確的是()A同一種物質(zhì)不可能既作碳源又作氮源 B除水以外的無機物僅提供無機鹽C凡是碳源都能提供能量 D有些無機氮源也能提供能量3、稀釋涂布平板法是微生物培養(yǎng)中的一種常用的接種方法。下列相關(guān)敘述錯誤的是()A操作中需要將菌液進(jìn)行一系列的濃度梯度稀釋B需將不同稀釋度的菌液分別涂布到固體培養(yǎng)基表面C不同濃度的菌液均可在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落D操作過程中對培養(yǎng)基和涂布器等均需進(jìn)行嚴(yán)格滅菌處理4、“篩選”是生物學(xué)中培育生物新類型常用的手段,下列
7、有關(guān)技術(shù)過程中不可能篩選成功的有()A在無氮培養(yǎng)基上篩選根瘤菌 B在不含碳源的培養(yǎng)基中篩選大腸桿菌C用含青霉素的培養(yǎng)基篩選酵母菌和霉菌 D用不含碳源的培養(yǎng)基篩選硝化細(xì)菌5、平板冷凝后,要將平板倒置,其原因是()A接種時再拿起來方便 B在皿底上標(biāo)記日期等方便C正著放置容易破碎 D防止皿蓋上的冷凝水珠落入培養(yǎng)基造成污染6、產(chǎn)生標(biāo)準(zhǔn)形態(tài)菌落的細(xì)菌的最初數(shù)目和培養(yǎng)基分別是()A一個細(xì)菌、液體培養(yǎng)基 B許多細(xì)菌、液體培養(yǎng)基C一個細(xì)菌、固體培養(yǎng)基 D許多細(xì)菌、固體培養(yǎng)基7、下列有關(guān)微生物培養(yǎng)的敘述,正確的是()A在瓊脂固體培養(yǎng)基上長出的單個菌落含有多種細(xì)菌B在培養(yǎng)基中加入青霉素可抑制真菌而促進(jìn)細(xì)菌生長C向
8、液體培養(yǎng)基中通入氧氣能促進(jìn)破傷風(fēng)桿菌的生長D在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中接種HIV培養(yǎng)后可以觀察其運動8、為了保存菌種的純凈需要進(jìn)行菌種的保藏,下列有關(guān)敘述錯誤的是()A對于頻繁使用的菌種,可以采用臨時保藏的方法B臨時保藏的菌種一般是接種到試管的斜面培養(yǎng)基上C臨時保藏菌種容易被污染或發(fā)生變異D對于需要長期保存的菌種,可以采用低溫4 保藏的方法9、下面的甲圖表示酵母菌、硝化細(xì)菌和乳酸菌在半固體培養(yǎng)基中的生長情況,乙圖表示這三種菌的增殖速度與氧氣濃度之間的關(guān)系,請據(jù)圖回答:(1)、乙圖中c三條曲線依次表示甲圖_號試管中微生物在不同氧氣濃度中的增殖速度。(2)、研究發(fā)現(xiàn),青霉素能破壞細(xì)菌的細(xì)胞壁并在細(xì)菌細(xì)
9、胞的繁殖期起殺菌作用。如果培養(yǎng)基中混雜了這三類微生物,請設(shè)計實驗,利用改變培養(yǎng)基成分等培養(yǎng)條件,將酵母菌和硝化細(xì)菌分離出來。、主要步驟:a分別配制不含_的培養(yǎng)基(A)和加入 的培養(yǎng)基(B),分別滅菌。b分別接種混合液放在適宜條件下培養(yǎng)。c觀察結(jié)果。、結(jié)果:在A培養(yǎng)基上生存的是_,在B培養(yǎng)基上生存的是_。(3)、微生物培養(yǎng)過程中,獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是_。(4)、若想對初步篩選得到的目的菌進(jìn)行純化并計數(shù),可采用的接種方法是_。10、某小組同學(xué)為了調(diào)查湖水中細(xì)菌的污染情況而進(jìn)行了實驗。實驗包括制備培養(yǎng)基、滅菌、接種及培養(yǎng)、菌落觀察計數(shù)。請回答與此實驗相關(guān)的問題:(1)、培養(yǎng)基中含有蛋白胨、淀粉,分
10、別為細(xì)菌培養(yǎng)提供了氮源和_。除此之外,培養(yǎng)基還必須含有的基本成分是_和_。(2)、對培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌,應(yīng)該采用的方法是_。(3)、為了盡快觀察到細(xì)菌培養(yǎng)的實驗結(jié)果,應(yīng)將接種了湖水樣品的平板置于_中培養(yǎng),培養(yǎng)的溫度設(shè)定在37 。要使該實驗所得結(jié)果可靠,還應(yīng)該同時在另一平板上接種_作為對照進(jìn)行實驗。(4)、如果提高培養(yǎng)基中NaCl的濃度,可以用于篩選耐_細(xì)菌,這種培養(yǎng)基(按功能分)被稱為_培養(yǎng)基。(5)、從以下哪些微生物中可以提取到能夠分解玉米秸稈的酶?_。(多選)A釀制果醋的醋酸菌 B生長在腐木上的霉菌C制作酸奶的乳酸菌 D反芻動物瘤胃中生存的某些微生物11、炭疽病是由炭疽桿菌引起的一種人畜共患傳染病。炭疽桿菌兩端截平、呈竹節(jié)狀排列,菌落呈卷發(fā)狀。對炭疽病疑似患者,可根據(jù)噬菌體的宿主專一性,通過實驗確診。(1)、細(xì)菌培養(yǎng):采集疑似患者的樣本,分離培養(yǎng),獲得可疑菌落。(2)、細(xì)菌鑒定:實驗流程如圖所示:、對配制的液體培養(yǎng)基等需采取_方法滅菌;實驗所用液體培養(yǎng)基的碳源為_(填“無機碳”或“有機碳”)。、挑選可疑菌落制片后,用_觀察,可看到呈竹節(jié)狀排列的桿菌。
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