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1、 斐林試劑斐林試劑蘇丹蘇丹橘黃色橘黃色紅色紅色磚紅色沉淀磚紅色沉淀紫色紫色蘇丹蘇丹 雙縮脲試劑雙縮脲試劑鑒定物質(zhì)鑒定物質(zhì)試劑試劑實驗現(xiàn)象實驗現(xiàn)象 還原性糖還原性糖(麥芽糖、葡萄糖、果糖麥芽糖、葡萄糖、果糖)脂肪脂肪蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)淀粉淀粉 碘碘 藍(lán)色藍(lán)色 l實驗原理實驗原理目的要求:嘗試用化學(xué)試劑檢測生物組織中糖類、脂肪和蛋白質(zhì)。材料用具: 1.實驗材料:蘋果汁、花生種子、花生汁、馬鈴薯片、 豆?jié){、鮮肝液 2.儀器: 3.試劑:斐林試劑(甲液、乙液)、蘇丹或蘇丹、碘液、雙縮脲試劑(A液、B液)、酒精、蒸餾水方法步驟: 1實驗材料、儀器和試劑的選擇 2設(shè)計記錄表格,記錄預(yù)測結(jié)果 3檢測的方法步驟 (
2、1)還原糖的檢測和觀察; (2)脂肪的檢測和觀察; (3)蛋白質(zhì)的檢測和觀察;選材:含糖量較高的選材:含糖量較高的白色或近于白色白色或近于白色的植物組織的植物組織(排除色素對排除色素對顯色的干擾顯色的干擾),蘋果、梨最好,蘋果、梨最好 。 實驗流程實驗流程(步驟步驟)1.可溶性還原糖可溶性還原糖 制備組織樣液:制備組織樣液:制漿:去皮、切塊、研磨,制漿:去皮、切塊、研磨,過濾:(用單層紗布)過濾:(用單層紗布)取液:取液:(mL)顯色反應(yīng)顯色反應(yīng) 現(xiàn)象:現(xiàn)象: (現(xiàn)配現(xiàn)用,(現(xiàn)配現(xiàn)用,混合后使用)混合后使用)5065.C水浴水浴加熱加熱2min還原糖的檢測和觀察:還原糖的檢測和觀察:還原糖的檢
3、測結(jié)果還原糖的檢測結(jié)果2.脂肪的鑒定脂肪的鑒定 取材:花生種子(浸泡取材:花生種子(浸泡h),去皮,將子葉削成薄片),去皮,將子葉削成薄片 制片:制片:選取最薄的薄片移至載玻片中央選取最薄的薄片移至載玻片中央在薄片上滴加在薄片上滴加蘇丹蘇丹(或蘇丹或蘇丹) 染液染液2 3滴,滴,染色染色min滴加體積分?jǐn)?shù)為滴加體積分?jǐn)?shù)為50%的酒精的酒精溶液溶液12滴,洗滴,洗去浮色去浮色(多余的蘇丹多余的蘇丹 )吸去余液,滴吸去余液,滴1-2滴蒸餾水,蓋上蓋玻片,制成滴蒸餾水,蓋上蓋玻片,制成臨時裝片臨時裝片顯微觀察:顯微觀察: 先在低倍鏡下找到已著色的薄片,后用高倍鏡觀察先在低倍鏡下找到已著色的薄片,后用
4、高倍鏡觀察現(xiàn)象:現(xiàn)象:有被染成有被染成橘黃色橘黃色(或紅色或紅色)的脂肪微粒的脂肪微粒脂肪微粒脂肪微粒脂肪的檢測結(jié)果脂肪的檢測結(jié)果3.蛋白質(zhì)的鑒定蛋白質(zhì)的鑒定 選材與制備選材與制備組織樣液:組織樣液:黃豆組織樣液(或雞蛋蛋清黃豆組織樣液(或雞蛋蛋清稀釋液稀釋液)黃豆浸泡黃豆浸泡 去皮去皮切片切片研磨研磨過濾過濾濾液濾液 顯色反應(yīng)顯色反應(yīng)現(xiàn)象:現(xiàn)象:無色無色紫色或紫紅色紫色或紫紅色(創(chuàng)設(shè)堿性條件創(chuàng)設(shè)堿性條件)(提供提供Cu2+)蛋白質(zhì)的檢測結(jié)果蛋白質(zhì)的檢測結(jié)果 在用雙縮脲試劑鑒定蛋白質(zhì)實驗時,在用雙縮脲試劑鑒定蛋白質(zhì)實驗時,正確的操作是正確的操作是( () )A A2 mL2 mL蛋白稀釋液,先
5、加蛋白稀釋液,先加0.1 g/mL0.1 g/mL的的NaOHNaOH溶液,再加溶液,再加4 4滴滴0.01 g/mL0.01 g/mL的的CuSOCuSO4 4溶液溶液B B2 mL2 mL蛋白稀釋液,先加蛋白稀釋液,先加4 4滴滴0.01 g/mL0.01 g/mL的的CuSOCuSO4 4溶液,再加入溶液,再加入0.1 g/mL0.1 g/mL的的NaOHNaOH溶液溶液C C2 mL2 mL蛋白稀釋液,同時加入蛋白稀釋液,同時加入0.1 g/mL0.1 g/mL的的NaOHNaOH和和0.01 g/mL0.01 g/mL的的CuSOCuSO4 4混合液混合液D D在在NaOHNaOH和
6、和CuSOCuSO4 4混合液中加入混合液中加入2 mL2 mL蛋白蛋白稀釋液稀釋液4.淀粉的鑒定淀粉的鑒定取材:馬鈴薯勻漿取材:馬鈴薯勻漿檢測:檢測:碘液碘液2滴滴現(xiàn)象:現(xiàn)象: 搖勻后變成藍(lán)色搖勻后變成藍(lán)色例題。在例題。在“鑒定生物組織中的糖類、脂肪和蛋鑒定生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì)白質(zhì)”的實驗中,對實驗材料的選擇敘述中,錯的實驗中,對實驗材料的選擇敘述中,錯誤的是誤的是( () )A A甘蔗莖、甜菜的塊根等都含有較多的糖且近甘蔗莖、甜菜的塊根等都含有較多的糖且近于白色,因此可以用于進(jìn)行還原糖的鑒定于白色,因此可以用于進(jìn)行還原糖的鑒定B B花生種子含脂肪多且子葉肥厚,是用于脂肪花生種子含
7、脂肪多且子葉肥厚,是用于脂肪鑒定的理想材料鑒定的理想材料C C大豆種子蛋白質(zhì)含量高,是用于蛋白質(zhì)鑒定大豆種子蛋白質(zhì)含量高,是用于蛋白質(zhì)鑒定的理想植物組織材料的理想植物組織材料D D馬鈴薯塊莖中淀粉含量較高,是用于淀粉鑒馬鈴薯塊莖中淀粉含量較高,是用于淀粉鑒定的理想材料定的理想材料問題探討問題探討:1、在做還原糖、蛋白質(zhì)鑒定的實驗時,為什么要留出、在做還原糖、蛋白質(zhì)鑒定的實驗時,為什么要留出一部分樣液?一部分樣液?作對照作對照2、使用雙縮脲試劑時為什么、使用雙縮脲試劑時為什么B液只能加液只能加34滴而不能滴而不能過量?過量? 過量的雙縮脲試劑過量的雙縮脲試劑B B會與試劑會與試劑A A反應(yīng),使溶
8、液呈藍(lán)色,反應(yīng),使溶液呈藍(lán)色,而掩蓋生成的紫色。而掩蓋生成的紫色。3、為什么斐林試劑要現(xiàn)配現(xiàn)用,不能放置太久?為什么斐林試劑要現(xiàn)配現(xiàn)用,不能放置太久? 時間太長,時間太長,Cu(OH)Cu(OH)2 2懸濁液就沉淀在試管底部而懸濁液就沉淀在試管底部而無法參與反應(yīng)。無法參與反應(yīng)。l深化深化比較項比較項目目試劑及成試劑及成分分原理原理溶液濃度溶液濃度方法方法加熱加熱與否與否結(jié)結(jié)果果可溶還可溶還原糖的原糖的鑒定鑒定斐林試劑斐林試劑NaOHNaOH和和CuSOCuSO4 4磚磚紅紅色色沉沉淀淀蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)的鑒定的鑒定雙縮脲試雙縮脲試劑劑NaOHNaOH和和CuSOCuSO4 4溶溶液液呈呈紫紫色色4、
9、斐林試劑與雙縮脲試劑兩者有何不同?、斐林試劑與雙縮脲試劑兩者有何不同?新配制新配制的的Cu(OH)2溶液溶液在堿性在堿性環(huán)境下環(huán)境下的的Cu2+NaOH濃度為濃度為0.1g/mLCuS04濃度為濃度為0.05g/mLNaOH濃度為濃度為0.1g/mLCuS04濃度為濃度為0.01g/mL先把先把NaOH溶液和溶液和CuSO4溶液溶液混合混合,而后而后立即使用立即使用。先先加入加入Na0H1mL,然,然后后再加再加CuS044滴,搖勻。滴,搖勻。(不能過量不能過量)水浴水浴加熱加熱不不需需要要5、實驗的材料的選擇和處理有什么要求?、實驗的材料的選擇和處理有什么要求?材料的選擇材料的選擇材料的處理
10、材料的處理還原性糖的鑒定還原性糖的鑒定脂肪的鑒定脂肪的鑒定含糖高,顏色為含糖高,顏色為白色的植物組織,白色的植物組織,如蘋果和梨如蘋果和梨富含脂肪的種子富含脂肪的種子,如花生,如花生浸泡浸泡34小時小時/蛋白質(zhì)的鑒定蛋白質(zhì)的鑒定富含蛋白質(zhì)的富含蛋白質(zhì)的黃豆或雞蛋清黃豆或雞蛋清黃豆需浸泡黃豆需浸泡1-2天,天,雞蛋清要先稀釋雞蛋清要先稀釋淀粉的鑒定淀粉的鑒定馬鈴薯馬鈴薯/ 各種可供實驗的材料各種可供實驗的材料梨梨 黃桃黃桃 胡蘿卜胡蘿卜 黃豆黃豆 花生種子花生種子 小麥種子小麥種子 其中適合于鑒定其中適合于鑒定可溶性還原糖可溶性還原糖的是的是 ,理由是,理由是梨的組織細(xì)胞梨的組織細(xì)胞 ,你打算用
11、什么試劑鑒定你打算用什么試劑鑒定? 。 小麥種子不如花生種子更適合用來鑒定脂肪,這是小麥種子不如花生種子更適合用來鑒定脂肪,這是因為因為 ,你打,你打算用什么試劑鑒定算用什么試劑鑒定? . 例例 做生物組織中可溶性還原糖、脂肪、蛋做生物組織中可溶性還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定實驗時,需要根據(jù)實驗需要選擇不同的白質(zhì)的鑒定實驗時,需要根據(jù)實驗需要選擇不同的實驗材料。請根據(jù)下表所列各種材料回答問題:實驗材料。請根據(jù)下表所列各種材料回答問題:梨梨 顏色為白色,并且糖含量較高顏色為白色,并且糖含量較高 斐林試劑斐林試劑脂肪含量不如花生高,也不容易做切片脂肪含量不如花生高,也不容易做切片 用蘇丹用蘇丹或蘇丹
12、或蘇丹試劑試劑小麥種子中糖類化合物小麥種子中糖類化合物 含量很高,卻不適合用含量很高,卻不適合用來鑒定來鑒定 _,這是因為,這是因為 _。 適合于鑒定蛋白質(zhì)的是適合于鑒定蛋白質(zhì)的是 ,理由是,理由是 ,鑒定所用的試劑是,鑒定所用的試劑是 。 蛋白質(zhì)含量高蛋白質(zhì)含量高 黃豆和花生黃豆和花生 雙縮脲試劑雙縮脲試劑淀粉淀粉 可溶性還原糖可溶性還原糖 淀粉是非還原糖且不溶于水淀粉是非還原糖且不溶于水 1.前項為生物組織,中項為鑒定所用的化學(xué)試劑,后項為反應(yīng)結(jié)果所產(chǎn)生的顏色,其中錯誤的一項是()A.蘋果、斐林試劑、磚紅色 B.花生種子、蘇丹染液、橘紅色C.黃豆、雙縮脲試劑、紫色 D.卵清蛋白、蘇丹染液、紅色當(dāng)堂檢測當(dāng)堂檢測2.下列能與斐林試劑反應(yīng)生成磚紅色沉淀的是( )葡萄糖 果糖 蔗糖 麥芽糖 淀粉 纖維素A. B. C.D.知識結(jié)構(gòu)生物組織中還原糖、脂肪和蛋白質(zhì)三種有機物的鑒定實驗生物組織中還原糖、脂肪和蛋白質(zhì)三
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