芳香烴和代謝產(chǎn)物測(cè)節(jié)定

1、芳香烴和代謝產(chǎn)物測(cè)節(jié)定第四節(jié)第四節(jié) 苯乙烯苯乙烯苯乙烯（苯乙烯（styrene），別名乙烯基苯，俗稱(chēng)蘇合香烯，），別名乙烯基苯，俗稱(chēng)蘇合香烯，是無(wú)色至淡黃色折射率很高的油狀液體。具有芳香氣是無(wú)色至淡黃色折射率很高的油狀液體。具有芳香氣味。味。難溶于水，與乙醇、乙醚混溶。難溶于水，與乙醇、乙醚混溶。遇熱、明火、氧化劑易燃。遇熱、明火、氧化劑易燃。苯乙烯體內(nèi)代謝產(chǎn)物有苯羥乙酸和苯乙醛酸苯乙烯體內(nèi)代謝產(chǎn)物有苯羥乙酸和苯乙醛酸（phenylglyoxalic acid，PGA）二二 代謝和生物監(jiān)測(cè)指標(biāo)代謝和生物監(jiān)測(cè)指標(biāo)苯乙烯是制造聚苯乙烯塑料的單體，與丁二烯可制苯乙烯是制造聚苯乙烯塑料的單體，與丁二烯

2、可制成丁苯橡膠，與二乙烯苯制備離子交換樹(shù)脂，也作成丁苯橡膠，與二乙烯苯制備離子交換樹(shù)脂，也作為造漆、制藥、塑料等的原料或中間體以及溶劑。為造漆、制藥、塑料等的原料或中間體以及溶劑。蒸汽主要經(jīng)呼吸道吸入，液體苯乙烯可經(jīng)皮膚和消蒸汽主要經(jīng)呼吸道吸入，液體苯乙烯可經(jīng)皮膚和消化道吸收?；牢?。苯乙烯刺激作用比苯強(qiáng)。苯乙烯刺激作用比苯強(qiáng)。中毒主要表現(xiàn)為中樞神經(jīng)系統(tǒng)抑制癥狀，并以眼，中毒主要表現(xiàn)為中樞神經(jīng)系統(tǒng)抑制癥狀，并以眼，喉的刺激癥狀最為突出。喉的刺激癥狀最為突出。同時(shí)可出現(xiàn)頭疼、頭暈、疲乏、惡心、嘔吐等癥狀；同時(shí)可出現(xiàn)頭疼、頭暈、疲乏、惡心、嘔吐等癥狀；慢性中毒對(duì)血液和肝臟有輕度損害作用，同時(shí)出現(xiàn)

3、慢性中毒對(duì)血液和肝臟有輕度損害作用，同時(shí)出現(xiàn)神經(jīng)衰弱癥狀。神經(jīng)衰弱癥狀。代謝和生物監(jiān)測(cè)指標(biāo)代謝和生物監(jiān)測(cè)指標(biāo)代謝和生物監(jiān)測(cè)指標(biāo)代謝和生物監(jiān)測(cè)指標(biāo)圖圖 4-7 苯乙烯在大鼠體內(nèi)的代謝途徑苯乙烯在大鼠體內(nèi)的代謝途徑尿中苯乙醇酸，苯乙醛酸為體內(nèi)苯乙烯主要代謝產(chǎn)物，尿中苯乙醇酸，苯乙醛酸為體內(nèi)苯乙烯主要代謝產(chǎn)物，可作為生物監(jiān)測(cè)指標(biāo)；職業(yè)接觸苯乙烯后，呼出氣或肺可作為生物監(jiān)測(cè)指標(biāo)；職業(yè)接觸苯乙烯后，呼出氣或肺泡中及血中苯乙烯的量甚少，但可以作為確認(rèn)實(shí)驗(yàn)。但泡中及血中苯乙烯的量甚少，但可以作為確認(rèn)實(shí)驗(yàn)。但是要注意取樣時(shí)間。是要注意取樣時(shí)間。三三 樣品采集及保持樣品采集及保持1 呼出氣呼出氣 用玻璃采集管采

4、集呼出去，由于樣品中苯乙烯濃度用玻璃采集管采集呼出去，由于樣品中苯乙烯濃度低，除防止污染外，還要避免玻璃器皿對(duì)苯乙烯的吸低，除防止污染外，還要避免玻璃器皿對(duì)苯乙烯的吸附。然后熱解吸，氣相色譜分析。附。然后熱解吸，氣相色譜分析。2 尿樣尿樣取班后或班前尿取班后或班前尿80-100 mL，保存，待測(cè)定分析。，保存，待測(cè)定分析。四四 呼出氣中苯乙烯的測(cè)定呼出氣中苯乙烯的測(cè)定氣相色譜測(cè)定氣相色譜測(cè)定注意事項(xiàng)：注意事項(xiàng)：1 注意苯乙烯標(biāo)準(zhǔn)氣的測(cè)定注意苯乙烯標(biāo)準(zhǔn)氣的測(cè)定2 解析效率偏和低，注意校正。解析效率偏和低，注意校正。五五 尿中苯乙醇酸和苯乙醛酸的測(cè)定尿中苯乙醇酸和苯乙醛酸的測(cè)定 尿中苯乙醇酸（尿中

5、苯乙醇酸（MA）及苯乙醛酸（）及苯乙醛酸（PGA）的測(cè)定方法主要有氣相色譜法和高效液相色的測(cè)定方法主要有氣相色譜法和高效液相色譜法。氣相測(cè)定時(shí)需要前處理，因不能直接譜法。氣相測(cè)定時(shí)需要前處理，因不能直接測(cè)定測(cè)定PGA，需要將，需要將PGA轉(zhuǎn)化為轉(zhuǎn)化為MA，并酯化，并酯化，而液相可以直接測(cè)定。而液相可以直接測(cè)定。第五節(jié)第五節(jié) 苯并苯并a芘芘苯并苯并a芘（芘（benzoapyrene, BaP）是有機(jī)物和含碳燃料）是有機(jī)物和含碳燃料熱解過(guò)程的產(chǎn)物。常溫下為淺黃色針狀結(jié)晶。熱解過(guò)程的產(chǎn)物。常溫下為淺黃色針狀結(jié)晶。它是一種由它是一種由5個(gè)苯環(huán)構(gòu)成的多環(huán)芳烴，性質(zhì)穩(wěn)定。個(gè)苯環(huán)構(gòu)成的多環(huán)芳烴，性質(zhì)穩(wěn)定。易

6、溶于有機(jī)溶劑中。易溶于有機(jī)溶劑中。常溫下不與濃硫酸作用，但能溶于濃硫酸，能與硝酸、常溫下不與濃硫酸作用，但能溶于濃硫酸，能與硝酸、氯磺酸起化學(xué)反應(yīng)，可利用這一性質(zhì)來(lái)消除苯并氯磺酸起化學(xué)反應(yīng)，可利用這一性質(zhì)來(lái)消除苯并a芘。芘。在堿性條件下穩(wěn)定在堿性條件下穩(wěn)定苯并苯并a芘致癌性強(qiáng)，常被人們作為人體研究多芘致癌性強(qiáng)，常被人們作為人體研究多環(huán)芳烴類(lèi)化合物（環(huán)芳烴類(lèi)化合物（PAHs）的代表，）的代表，1-羥基芘是羥基芘是芘的一個(gè)主要代謝產(chǎn)物。芘的一個(gè)主要代謝產(chǎn)物。苯并苯并a芘主要來(lái)源于石油，煤，天然氣，木材等不芘主要來(lái)源于石油，煤，天然氣，木材等不完全燃燒，以及瀝青和汽車(chē)尾氣。爐灶和卷煙的煙完全燃燒，以

7、及瀝青和汽車(chē)尾氣。爐灶和卷煙的煙霧。霧。二二 代謝和生物監(jiān)測(cè)指標(biāo)代謝和生物監(jiān)測(cè)指標(biāo)代謝和生物監(jiān)測(cè)指標(biāo)代謝和生物監(jiān)測(cè)指標(biāo)苯并苯并a芘常以細(xì)微晶狀態(tài)被吸附于煙塵顆粒上，可以通過(guò)對(duì)芘常以細(xì)微晶狀態(tài)被吸附于煙塵顆粒上，可以通過(guò)對(duì)水和土壤的污染而進(jìn)入食物鏈。水和土壤的污染而進(jìn)入食物鏈。苯并苯并a芘是已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的芘是已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的200多種多環(huán)芳烴中最主要的也是毒性多種多環(huán)芳烴中最主要的也是毒性最大的環(huán)境和食品污染物。最大的環(huán)境和食品污染物。可通過(guò)吸入、食入、經(jīng)皮膚吸收等途徑進(jìn)入人體內(nèi)，是多環(huán)可通過(guò)吸入、食入、經(jīng)皮膚吸收等途徑進(jìn)入人體內(nèi)，是多環(huán)芳烴中毒性最大的一種強(qiáng)烈致癌物，對(duì)眼睛、皮膚有刺激作芳烴中毒性最大的

8、一種強(qiáng)烈致癌物，對(duì)眼睛、皮膚有刺激作用；是致畸原及誘變劑，長(zhǎng)期生活在含用；是致畸原及誘變劑，長(zhǎng)期生活在含BaP的空氣環(huán)境中，的空氣環(huán)境中，可造成慢性中毒，是導(dǎo)致肺癌的最重要的因素之一?？稍斐陕灾卸?，是導(dǎo)致肺癌的最重要的因素之一。代謝和生物監(jiān)測(cè)指標(biāo)代謝和生物監(jiān)測(cè)指標(biāo)苯并苯并a芘分子內(nèi)基本上沒(méi)有極性基團(tuán)和解離基團(tuán)，因此較容易芘分子內(nèi)基本上沒(méi)有極性基團(tuán)和解離基團(tuán)，因此較容易穿透細(xì)胞的脂蛋白膜。進(jìn)入體內(nèi)的穿透細(xì)胞的脂蛋白膜。進(jìn)入體內(nèi)的BaP在微粒體混合功能氧化在微粒體混合功能氧化酶系的芳烴羥化酶作用下，代謝活化為多環(huán)芳烴環(huán)氧化物，與酶系的芳烴羥化酶作用下，代謝活化為多環(huán)芳烴環(huán)氧化物，與DNA、RNA

9、和蛋白質(zhì)大分子結(jié)合而呈現(xiàn)致癌作用，成為終致癌和蛋白質(zhì)大分子結(jié)合而呈現(xiàn)致癌作用，成為終致癌物。物。有的進(jìn)一步代謝，形成帶有羥基的化合物，最后可與葡萄糖醛有的進(jìn)一步代謝，形成帶有羥基的化合物，最后可與葡萄糖醛酸、硫酸或谷胱甘肽結(jié)合從尿中排出。酸、硫酸或谷胱甘肽結(jié)合從尿中排出。1-羥基芘是芘的最要代謝產(chǎn)物，可以作為生物監(jiān)測(cè)指標(biāo)。羥基芘是芘的最要代謝產(chǎn)物，可以作為生物監(jiān)測(cè)指標(biāo)。代謝和生物監(jiān)測(cè)指標(biāo)代謝和生物監(jiān)測(cè)指標(biāo)三三 樣品采集及保存樣品采集及保存 一般采集接觸者班后尿樣，用玻璃瓶采樣，一般采集接觸者班后尿樣，用玻璃瓶采樣，當(dāng)日進(jìn)行前處理和分析，不然，冰箱保存，待當(dāng)日進(jìn)行前處理和分析，不然，冰箱保存，待

10、測(cè)定。測(cè)定。四四 尿中尿中1-羥基芘的測(cè)定羥基芘的測(cè)定尿中尿中1-羥基芘的測(cè)定，目前常用高效液相色譜法和同羥基芘的測(cè)定，目前常用高效液相色譜法和同步熒光測(cè)定法。步熒光測(cè)定法。同步熒光測(cè)定法：同步熒光測(cè)定法：1 原理原理 尿樣經(jīng)含尿樣經(jīng)含-葡萄糖苷酯酶的乙酸緩沖溶液水解，葡萄糖苷酯酶的乙酸緩沖溶液水解，正己烷萃取，正己烷萃取，NaOH溶液反萃取，水相萃取液進(jìn)行同溶液反萃取，水相萃取液進(jìn)行同步熒光光譜掃描，步熒光光譜掃描，ex315 nm， em405 nm起始掃描，起始掃描，峰值在峰值在440nm，外標(biāo)法定量。，外標(biāo)法定量。尿中尿中1-羥基芘的測(cè)定羥基芘的測(cè)定2 樣品處理和測(cè)定樣品處理和測(cè)定 每

11、每20 mL尿樣，加尿樣，加10 mL乙酸緩沖液，此緩沖液乙酸緩沖液，此緩沖液中含有中含有2000單位的單位的-葡萄糖苷酯酶，葡萄糖苷酯酶，37 oC保溫保溫1h后，用鹽酸調(diào)節(jié)后，用鹽酸調(diào)節(jié)pH=2-3。經(jīng)酶水解后的尿樣，。經(jīng)酶水解后的尿樣，加入正己烷萃取，再用加入正己烷萃取，再用NaOH水溶液反萃取。水溶液反萃取。最后用同步熒光光譜測(cè)定。最后用同步熒光光譜測(cè)定。尿中尿中1-羥基芘的測(cè)定羥基芘的測(cè)定3 注意事項(xiàng)注意事項(xiàng)（1）用正己烷，環(huán)己烷和二氯甲烷有機(jī)溶劑萃?。┯谜和椋h(huán)己烷和二氯甲烷有機(jī)溶劑萃取尿樣，以正己烷的效果最好，后二者的回收結(jié)果尿樣，以正己烷的效果最好，后二者的回收結(jié)果不理想，二

12、氯甲烷分層不好。不理想，二氯甲烷分層不好。（2）在濃度以下的尿樣有不明原因的干擾。）在濃度以下的尿樣有不明原因的干擾。第四章內(nèi)容結(jié)束第四章內(nèi)容結(jié)束-謝謝大家謝謝大家第五章第五章 芳香族硝基和氨基化合物及代謝產(chǎn)物的測(cè)定芳香族硝基和氨基化合物及代謝產(chǎn)物的測(cè)定芳香族硝基和氨基化合物芳香族硝基和氨基化合物（aromatic amino-and nitro-compounds）是由苯或其同系物苯環(huán)）是由苯或其同系物苯環(huán)上不同位置的氫原子被一個(gè)或幾個(gè)硝基或氨基上不同位置的氫原子被一個(gè)或幾個(gè)硝基或氨基取代后所生成的化合物。取代后所生成的化合物。芳香族硝基氨基化合物主要引起血液及肝、腎等損害，但機(jī)芳香族硝基氨

13、基化合物主要引起血液及肝、腎等損害，但機(jī)制不同。制不同。1 苯胺使血紅蛋白形成高鐵血紅蛋白，此外還有苯肼，亞硝苯胺使血紅蛋白形成高鐵血紅蛋白，此外還有苯肼，亞硝酸鹽等。酸鹽等。2 大多數(shù)則是代謝后產(chǎn)生了苯基羥氨和苯醌亞胺具有很強(qiáng)的大多數(shù)則是代謝后產(chǎn)生了苯基羥氨和苯醌亞胺具有很強(qiáng)的形成高鐵血紅蛋白的能力。形成高鐵血紅蛋白的能力。苯基羥胺還可以使谷胱甘肽減少，使細(xì)胞膜失去保護(hù)，發(fā)生苯基羥胺還可以使谷胱甘肽減少，使細(xì)胞膜失去保護(hù)，發(fā)生破裂，產(chǎn)生溶血作用。此外還可以使株蛋白變性。破裂，產(chǎn)生溶血作用。此外還可以使株蛋白變性。硝基苯，硝基苯胺，二硝基苯，三硝基苯硝基苯，硝基苯胺，二硝基苯，三硝基苯（TNT

14、）等所致職業(yè)性肝臟損害比較常見(jiàn)，）等所致職業(yè)性肝臟損害比較常見(jiàn)，肝臟病理主要表現(xiàn)為肝實(shí)質(zhì)改變，脂肪變性，肝臟病理主要表現(xiàn)為肝實(shí)質(zhì)改變，脂肪變性，肝硬化，肝萎縮。肝硬化，肝萎縮。三硝基甲苯還對(duì)眼晶體有損害作用。三硝基甲苯還對(duì)眼晶體有損害作用。苯的氨基和硝基化合物的生物監(jiān)測(cè)指標(biāo)主要是苯的氨基和硝基化合物的生物監(jiān)測(cè)指標(biāo)主要是血中高鐵血紅蛋白及尿或血中各種代謝產(chǎn)物。血中高鐵血紅蛋白及尿或血中各種代謝產(chǎn)物。第一節(jié)第一節(jié) 苯苯 胺胺一一 理化特性理化特性苯胺（苯胺（aniline）為無(wú)色油狀液體，易揮發(fā)，具有特殊）為無(wú)色油狀液體，易揮發(fā)，具有特殊氣味，久置顏色可變?yōu)樽厣?。微溶于水，易溶于苯、氣味，久置顏?/p>

15、可變?yōu)樽厣?。微溶于水，易溶于苯、乙醇、乙醚和四氯化碳等有機(jī)溶劑。乙醇、乙醚和四氯化碳等有機(jī)溶劑。苯胺體內(nèi)代謝產(chǎn)物為對(duì)氨基苯酚，為無(wú)色、白色或淡苯胺體內(nèi)代謝產(chǎn)物為對(duì)氨基苯酚，為無(wú)色、白色或淡黃色結(jié)晶，易溶于熱水，難溶于三氯甲烷和苯。溶液黃色結(jié)晶，易溶于熱水，難溶于三氯甲烷和苯。溶液在空氣中逐漸變成紫色?？缮A，遇無(wú)機(jī)酸成鹽。在空氣中逐漸變成紫色?？缮A，遇無(wú)機(jī)酸成鹽。二二 代謝和生物監(jiān)測(cè)指標(biāo)代謝和生物監(jiān)測(cè)指標(biāo)苯胺主要由人工合成，自然界中少量存在于煤焦油中。苯胺主要由人工合成，自然界中少量存在于煤焦油中。苯胺廣泛用于印染，燃料制造，橡膠硫化劑及促進(jìn)劑，苯胺廣泛用于印染，燃料制造，橡膠硫化劑及促進(jìn)劑

16、，照相顯影劑，塑料，離子交換樹(shù)脂，香水，制藥等生照相顯影劑，塑料，離子交換樹(shù)脂，香水，制藥等生產(chǎn)過(guò)程。產(chǎn)過(guò)程。經(jīng)呼吸道，皮膚和消化道進(jìn)入體內(nèi)。皮膚吸收是中毒經(jīng)呼吸道，皮膚和消化道進(jìn)入體內(nèi)。皮膚吸收是中毒的主要原因。的主要原因。苯胺進(jìn)入體內(nèi)被氧化成毒性更大的苯基羥胺，再轉(zhuǎn)化苯胺進(jìn)入體內(nèi)被氧化成毒性更大的苯基羥胺，再轉(zhuǎn)化為對(duì)氨酚，與硫酸和葡萄糖醛酸結(jié)合，經(jīng)尿排出。為對(duì)氨酚，與硫酸和葡萄糖醛酸結(jié)合，經(jīng)尿排出。代謝和生物監(jiān)測(cè)指標(biāo)代謝和生物監(jiān)測(cè)指標(biāo)苯胺中毒苯胺中毒重度中毒重度中毒 高鐵血紅蛋白高鐵血紅蛋白50%中度中毒中度中毒 高鐵血紅蛋白高鐵血紅蛋白30-50%輕度中毒輕度中毒 高鐵血紅蛋白高鐵血紅蛋

17、白10-30%苯胺接觸者血液中高鐵血紅蛋白和尿中對(duì)氨基酚苯胺接觸者血液中高鐵血紅蛋白和尿中對(duì)氨基酚的含量明顯升高，所以，血樣和尿樣常用作接觸的含量明顯升高，所以，血樣和尿樣常用作接觸苯胺的生物監(jiān)測(cè)指標(biāo)。苯胺的生物監(jiān)測(cè)指標(biāo)。三三 樣品采集和保存樣品采集和保存 苯胺在體內(nèi)代謝速度快，需在班末或班苯胺在體內(nèi)代謝速度快，需在班末或班后后2h內(nèi)采樣，用玻璃瓶收集，常溫下帶回實(shí)內(nèi)采樣，用玻璃瓶收集，常溫下帶回實(shí)驗(yàn)室于驗(yàn)室于4 oC冰箱中保存。在采樣前應(yīng)了解受檢冰箱中保存。在采樣前應(yīng)了解受檢者是否服用藥物（如磺胺，撲熱息痛等），者是否服用藥物（如磺胺，撲熱息痛等），并做好記錄。并做好記錄。四四 尿中對(duì)氨基苯

18、酚的測(cè)定尿中對(duì)氨基苯酚的測(cè)定測(cè)定方法：分光光度法、高效液相色譜法和薄層層測(cè)定方法：分光光度法、高效液相色譜法和薄層層析法。析法。分光光度法：靛酚藍(lán)光度法，鹽酸萘乙二胺光度法分光光度法：靛酚藍(lán)光度法，鹽酸萘乙二胺光度法及及4-二甲氨基苯甲醛光度法。二甲氨基苯甲醛光度法。分光光度法干擾嚴(yán)重，或者操作繁瑣，目前液相是分光光度法干擾嚴(yán)重，或者操作繁瑣，目前液相是最理想的方法。最理想的方法。尿中對(duì)氨基苯酚的測(cè)定尿中對(duì)氨基苯酚的測(cè)定（一）鹽酸萘乙二胺光度法（一）鹽酸萘乙二胺光度法1 原理原理 尿樣加鹽酸水解后，于中性溶液中用二尿樣加鹽酸水解后，于中性溶液中用二乙萃取對(duì)氨基酚。再反萃取至鹽酸溶液中，經(jīng)乙萃取

19、對(duì)氨基酚。再反萃取至鹽酸溶液中，經(jīng) 重氮化后，用鹽酸萘乙二胺顯色，于波長(zhǎng)重氮化后，用鹽酸萘乙二胺顯色，于波長(zhǎng)582 nm處比色定量。處比色定量。尿中對(duì)氨基苯酚的測(cè)定尿中對(duì)氨基苯酚的測(cè)定2 樣品處理和測(cè)定樣品處理和測(cè)定尿樣尿樣2 mL 置于比色管中，加置于比色管中，加0.5 mL鹽酸后，于沸水浴中加熱鹽酸后，于沸水浴中加熱水解水解1h，放冷，用氫氧化鈉溶液調(diào)至中性，然后加，放冷，用氫氧化鈉溶液調(diào)至中性，然后加2 mL磷酸磷酸鹽緩沖液，轉(zhuǎn)移至分液漏斗，加鹽緩沖液，轉(zhuǎn)移至分液漏斗，加20 mL二乙，萃取。用鹽酸溶二乙，萃取。用鹽酸溶液反萃取，然后將水相移入液反萃取，然后將水相移入10 mL比色管中，

20、加入比色管中，加入0.4 mL亞硝亞硝酸鈉溶液，搖勻，靜置酸鈉溶液，搖勻，靜置10 min，加，加0.4 mL氨基磺酸銨溶液，氨基磺酸銨溶液，充分搖勻。放置充分搖勻。放置10 min，加，加3 mL鹽酸萘乙二胺溶液，加水至鹽酸萘乙二胺溶液，加水至刻度，混勻于刻度，混勻于60 oC水浴保溫水浴保溫1h，取出防冷至室溫，于波長(zhǎng)，取出防冷至室溫，于波長(zhǎng)582 nm下以尿空白管為參比，測(cè)量吸光度值。下以尿空白管為參比，測(cè)量吸光度值。尿中對(duì)氨基苯酚的測(cè)定尿中對(duì)氨基苯酚的測(cè)定3 注意事項(xiàng)注意事項(xiàng)（1）采樣前要了解受檢查者是否服藥，并記錄。）采樣前要了解受檢查者是否服藥，并記錄。（2）對(duì)氨基酚的氨基重氮化后

21、與鹽酸萘乙二胺顯色的）對(duì)氨基酚的氨基重氮化后與鹽酸萘乙二胺顯色的深度與酸度有關(guān)，酸度應(yīng)控制在深度與酸度有關(guān)，酸度應(yīng)控制在0.05 mol/L為宜。為宜。（3）顯色慢且不穩(wěn)定，因此要注意保溫反應(yīng)時(shí)間并在）顯色慢且不穩(wěn)定，因此要注意保溫反應(yīng)時(shí)間并在30 min內(nèi)測(cè)定。內(nèi)測(cè)定。尿中對(duì)氨基苯酚的測(cè)定尿中對(duì)氨基苯酚的測(cè)定（二）高效液相色譜法（二）高效液相色譜法1 原理原理 尿樣加鹽酸加熱水解后，在酸性條件下用二乙尿樣加鹽酸加熱水解后，在酸性條件下用二乙提取，除去部分干擾物，然后在中性條件下用二乙提提取，除去部分干擾物，然后在中性條件下用二乙提取尿樣中對(duì)氨基酚，用高效液相色譜法測(cè)定。保留時(shí)取尿樣中對(duì)氨基酚

22、，用高效液相色譜法測(cè)定。保留時(shí)間定性，峰高、峰面積定性。間定性，峰高、峰面積定性。尿中對(duì)氨基苯酚的測(cè)定尿中對(duì)氨基苯酚的測(cè)定2 樣品處理和測(cè)定樣品處理和測(cè)定取取2 mL尿樣于尿樣于25 mL試管中，加試管中，加1 mL水和水和1 mL鹽酸，鹽酸，搖勻、加蓋放在沸水浴中加熱搖勻、加蓋放在沸水浴中加熱1 h，冷卻至室溫，加水，冷卻至室溫，加水補(bǔ)足體積補(bǔ)足體積4 mL，二乙萃掉干擾物，水相中加入，二乙萃掉干擾物，水相中加入4 g磷酸磷酸氫二鉀，二乙萃取，取氫二鉀，二乙萃取，取10 L萃取物上清液進(jìn)萃取物上清液進(jìn)HPLC。尿中對(duì)氨基苯酚的測(cè)定尿中對(duì)氨基苯酚的測(cè)定注意事項(xiàng)：注意事項(xiàng)：1 采樣后盡早加酸，低

23、溫保存。采樣后盡早加酸，低溫保存。2 尿中對(duì)氨基酚部分以結(jié)合太存在，因此需加酸水解。尿中對(duì)氨基酚部分以結(jié)合太存在，因此需加酸水解。3 注意二次萃取的使用，為了除去干擾物。注意二次萃取的使用，為了除去干擾物。4 用緩沖溶液條件用緩沖溶液條件pH值，方便，簡(jiǎn)單。值，方便，簡(jiǎn)單。第二節(jié)第二節(jié) 硝基苯硝基苯一一 理化特性理化特性硝基苯（硝基苯（nitrobenzene）為無(wú)色或淡黃色具苦杏仁味的油狀液）為無(wú)色或淡黃色具苦杏仁味的油狀液體。見(jiàn)光顏色變深。微溶于水，易溶于乙醇、苯、乙醚及其他體。見(jiàn)光顏色變深。微溶于水，易溶于乙醇、苯、乙醚及其他有機(jī)溶劑。有機(jī)溶劑。硝基苯的體內(nèi)代謝產(chǎn)物為對(duì)硝基酚（硝基苯的體

24、內(nèi)代謝產(chǎn)物為對(duì)硝基酚（p-nitrophenol, PNP）為）為白色或黃色片狀晶體，有強(qiáng)還原性，易被氧化，遇光和暴露在白色或黃色片狀晶體，有強(qiáng)還原性，易被氧化，遇光和暴露在空氣中可變?yōu)榛液稚?。稍溶于水，易溶于乙醇，乙醚和堿液?？諝庵锌勺?yōu)榛液稚?。稍溶于水，易溶于乙醇，乙醚和堿液。溶于苛性堿和堿金屬的碳酸鹽溶液后呈黃色。對(duì)硝基酚還是一溶于苛性堿和堿金屬的碳酸鹽溶液后呈黃色。對(duì)硝基酚還是一種酸堿指示劑，其水溶液顏色隨種酸堿指示劑，其水溶液顏色隨pH改變而改變。改變而改變。二二 代謝和生物檢測(cè)指標(biāo)代謝和生物檢測(cè)指標(biāo)硝基苯主要經(jīng)呼吸道，皮膚，消化道吸收。硝基苯主要經(jīng)呼吸道，皮膚，消化道吸收。反復(fù)接觸

25、可引起肝、腎損傷及貧血，飲酒可增強(qiáng)其毒反復(fù)接觸可引起肝、腎損傷及貧血，飲酒可增強(qiáng)其毒作用。作用。在體內(nèi)大部分轉(zhuǎn)化為對(duì)氨基苯酚和間位或?qū)ξ幌趸?，在體內(nèi)大部分轉(zhuǎn)化為對(duì)氨基苯酚和間位或?qū)ξ幌趸?，?duì)硝基、氨基苯酚可與體內(nèi)葡萄糖醛酸和硫酸結(jié)合經(jīng)對(duì)硝基、氨基苯酚可與體內(nèi)葡萄糖醛酸和硫酸結(jié)合經(jīng)尿排出，少量以原形，二氧化碳和微量苯胺形式由肺尿排出，少量以原形，二氧化碳和微量苯胺形式由肺緩慢排出。緩慢排出。代謝和生物檢測(cè)指標(biāo)代謝和生物檢測(cè)指標(biāo)硝基苯中毒主要產(chǎn)生高鐵血紅蛋白癥，臨床表硝基苯中毒主要產(chǎn)生高鐵血紅蛋白癥，臨床表現(xiàn)為一系列神經(jīng)系統(tǒng)的癥狀，有時(shí)出現(xiàn)溶血性現(xiàn)為一系列神經(jīng)系統(tǒng)的癥狀，有時(shí)出現(xiàn)溶血性貧血和中

26、毒性肝損害。貧血和中毒性肝損害。對(duì)硝基酚和對(duì)氨基酚常作為生物監(jiān)測(cè)指標(biāo)。對(duì)硝基酚和對(duì)氨基酚常作為生物監(jiān)測(cè)指標(biāo)。三三 樣品采集和保存樣品采集和保存1 尿樣尿樣 用聚乙烯塑料瓶收集接觸者班后尿，如果用用聚乙烯塑料瓶收集接觸者班后尿，如果用鄰甲酚分光光度法檢測(cè)對(duì)硝基酚，則鄰甲酚分光光度法檢測(cè)對(duì)硝基酚，則100 mL加加3 d甲甲醛，保存。如用高效液相色譜測(cè)定，則醛，保存。如用高效液相色譜測(cè)定，則100 mL加加3-4 d鹽酸，保存。鹽酸，保存。2 臟器臟器 取胃、腦、肝、肺等臟器作為樣品，一般取取胃、腦、肝、肺等臟器作為樣品，一般取分析量的分析量的3倍，在干燥，潔凈的容器內(nèi)剪碎或搗碎，倍，在干燥，潔凈

27、的容器內(nèi)剪碎或搗碎，用用10%的酒石酸酸化，加熱煮沸。的酒石酸酸化，加熱煮沸。樣品采集和保存樣品采集和保存各種揮發(fā)性毒物的餾出順序?yàn)闅淝杷?，醛?lèi)，各種揮發(fā)性毒物的餾出順序?yàn)闅淝杷幔╊?lèi)，酮類(lèi)，苯胺，硝基苯，因硝基苯餾出時(shí)間較晚，酮類(lèi)，苯胺，硝基苯，因硝基苯餾出時(shí)間較晚，所以開(kāi)始用所以開(kāi)始用15%氫氧化鈉溶液吸收一些酸，醛氫氧化鈉溶液吸收一些酸，醛類(lèi)，棄去，然后用類(lèi)，棄去，然后用50%乙醇收集乙醇收集10-30mL餾液，餾液，并盡快檢測(cè)。并盡快檢測(cè)。四四 尿中對(duì)硝基酚的測(cè)定尿中對(duì)硝基酚的測(cè)定（一）鄰甲酚分光光度法（一）鄰甲酚分光光度法1 原理原理 尿樣經(jīng)水解后，結(jié)合的對(duì)硝基酚轉(zhuǎn)化為游離形尿樣經(jīng)水

28、解后，結(jié)合的對(duì)硝基酚轉(zhuǎn)化為游離形式，用有機(jī)溶劑萃取對(duì)硝基酚，再用強(qiáng)氧化銨溶液反式，用有機(jī)溶劑萃取對(duì)硝基酚，再用強(qiáng)氧化銨溶液反萃取，用三氯化鈦還原對(duì)硝基酚，生成的對(duì)氨基酚與萃取，用三氯化鈦還原對(duì)硝基酚，生成的對(duì)氨基酚與鄰甲基酚作用，形成靛酚藍(lán)，于鄰甲基酚作用，形成靛酚藍(lán)，于620 nm波長(zhǎng)處比色定波長(zhǎng)處比色定量。量。尿中對(duì)硝基酚的測(cè)定尿中對(duì)硝基酚的測(cè)定2 樣品處理和測(cè)定樣品處理和測(cè)定 尿樣加水，鹽酸酸化，沸尿樣加水，鹽酸酸化，沸水浴加熱水浴加熱1h，冷卻，加入異戊醇（溶劑為石油，冷卻，加入異戊醇（溶劑為石油醚和乙醚）溶液，萃取。有機(jī)相加氫氧化銨溶醚和乙醚）溶液，萃取。有機(jī)相加氫氧化銨溶液，振蕩，

29、取水相，加鄰甲酚溶液，再加三氯液，振蕩，取水相，加鄰甲酚溶液，再加三氯化鈦，振蕩，至黃色沉淀變?yōu)榈S色沉淀。過(guò)化鈦，振蕩，至黃色沉淀變?yōu)榈S色沉淀。過(guò)濾，在濾，在620 nm波長(zhǎng)下比色定量。波長(zhǎng)下比色定量。尿中對(duì)硝基酚的測(cè)定尿中對(duì)硝基酚的測(cè)定注意事項(xiàng)：注意事項(xiàng)：1 沉淀變?yōu)榈S色，再測(cè)定。沉淀變?yōu)榈S色，再測(cè)定。2 在堿性條件下，在堿性條件下，30 min就可顯色完全，顏色就可顯色完全，顏色在在120 min內(nèi)保持穩(wěn)定。內(nèi)保持穩(wěn)定。（二）高效液相色譜法（二）高效液相色譜法 略略第三節(jié)第三節(jié) 三硝基甲苯三硝基甲苯一一 理化性質(zhì)理化性質(zhì)三硝基甲苯（三硝基甲苯（trinitrotoluene，TNT）難溶于水，）難溶于水，微溶于汽油，石油醚和乙醇，易溶于丙酮，苯，微溶于汽油，石油醚和乙醇，易溶于丙酮，苯，乙酸甲酯，甲苯，四氯化碳，乙醚等，受熱易乙酸甲酯，甲苯，四氯化碳，乙醚等，受熱易爆炸。爆炸。二二