_細(xì)胞工程試題卷答案

1、2014-2015年第二學(xué)期細(xì)胞工程試卷答案一、填空題1、目前，體外受精成功的標(biāo)志至少是看受精卵可以發(fā)育至囊胚期階段。2、動物細(xì)胞培養(yǎng)需要防止污染問題，顯著污染的標(biāo)志是PH顯著改變，細(xì)胞外形模糊,甚至出現(xiàn)漂浮的集落。3、超數(shù)排卵是向動物體注射某些促性腺激素，對卵巢產(chǎn)生作用促進(jìn)排卵。4、動物細(xì)胞培養(yǎng)時，細(xì)胞主要以聚集體形式存在。5、細(xì)胞融合實驗最常用的生物促融劑是仙臺病毒（HVJ）。6、胚胎工程中最關(guān)鍵的技術(shù)是體外受精和胚胎移植。7、克隆動物制備主要是通過不同來源的細(xì)胞核移植實現(xiàn)的。8、動物細(xì)胞體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基包括：天然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基和無血清培養(yǎng)基。9、動物細(xì)胞培養(yǎng)一般經(jīng)過：原代培養(yǎng)、傳代培

2、養(yǎng)和衰退期三個階段。消化法傳代是實驗室動物細(xì)胞培養(yǎng)的傳代方法。10、干細(xì)胞從來源上可分為胚胎干細(xì)胞和成體干細(xì)胞兩種。從功能上可分為單能干細(xì)胞、多能干細(xì)胞和全能干細(xì)胞。11、HAT選擇培養(yǎng)基中有三種關(guān)鍵成分：次黃喋吟（H）、氨基蝶吟（A）、胸腺喀噬（T）。12、影響超數(shù)排卵效果的因素包括供體年齡、供體品種差異、激素劑量、卵巢狀況等。13、動物多倍體培育常用的物理方法包括：溫度激變（溫度休克法）、水靜壓法、機(jī)械損傷、輻射高鹽堿法等。14、女性細(xì)胞在問期出現(xiàn)的三角形或半月狀的染色體，稱為Barr's小體。15、哺乳動物的Y染色體上有一個性別遺傳控制因子，稱為睪丸決定因子。16、大量產(chǎn)生單克隆

3、抗體的方法主要有雜交瘤細(xì)胞體接種法和體外培養(yǎng)法。17、卵母細(xì)胞成熟的一些標(biāo)志包括：發(fā)生泡破裂、染色體凝集、紡錘體形成、極體排出、透明帶軟化、卵丘細(xì)胞擴(kuò)散。18、滅菌方法有高壓蒸汽滅菌、干熱滅菌、燃燒滅菌、射線滅菌。19、細(xì)胞超低溫儲貯存分快諫冷凍法和逐步冷凍法。20、組織培養(yǎng)細(xì)胞一代生長過程潛伏期、指數(shù)增長期、停止期三階段。、名詞解釋1、細(xì)胞工程：應(yīng)用細(xì)胞生物學(xué)和分子生物需的方法，通過類似于工程學(xué)的步驟，在細(xì)胞整體水平或細(xì)胞器水平上，按照人們的意愿來改變細(xì)胞的遺傳物質(zhì)以獲得新型生物或特種細(xì)胞產(chǎn)品的綜合性科學(xué)技術(shù)。2、細(xì)胞融合：將不同來源的原生質(zhì)體相融合并使之分化再生、形成新物種或新品種的技術(shù)。

4、3、接觸抑制：當(dāng)兩個細(xì)胞由于移動而相互靠近發(fā)生接觸時，細(xì)胞不再運(yùn)動，這種由細(xì)胞接觸而抑制細(xì)胞運(yùn)動的現(xiàn)象稱接觸抑制，是某些貼附型細(xì)胞生長特征之一'o4、傳代培養(yǎng)：將原代培養(yǎng)的細(xì)胞繼續(xù)轉(zhuǎn)接培養(yǎng)的過程。細(xì)胞的體外大量增殖以及細(xì)胞系的建立是通過傳代培養(yǎng)實現(xiàn)的。5、固定化培養(yǎng)：將動物細(xì)胞與非水溶性載體結(jié)合起來，在生物反應(yīng)器中進(jìn)行大規(guī)模培養(yǎng)的方法。6、貼附型細(xì)胞：必須依賴于貼壁或錨定于其他物體的表面才能生長的細(xì)胞。7、分批式培養(yǎng)：指先將細(xì)胞和培養(yǎng)液一次性裝入反應(yīng)器進(jìn)行培養(yǎng)，細(xì)胞不斷生長，同時產(chǎn)物也不斷形成，經(jīng)過一段時間的培養(yǎng)后終止培養(yǎng)，一次性收獲細(xì)胞和產(chǎn)物。8、細(xì)胞融合：兩個或兩個以上來源相同或不

5、同的細(xì)胞合并成一個細(xì)胞的過程。9、胚胎工程：對動物早期胚胎或配子所進(jìn)行的多種顯微操作和處理技術(shù)，如胚胎移植、體外受精、胚胎分割、胚胎體外培養(yǎng)等，以加速繁育經(jīng)濟(jì)動物，培育優(yōu)良品種，挽救瀕危動物。10、精子獲能：精子在雌性動物生殖道發(fā)生生理變化后，獲得穿透卵子的透明帶能力的過程。11、超排：以各種外源性促性腺激素誘發(fā)動物卵巢使其有更多的卵泡，并排出更多的具有受精能力的卵子。12、核移植技術(shù)：利用顯微操作技術(shù)將一種動物的細(xì)胞核移入同種或異種動物的去核成熟卵細(xì)胞的技術(shù)。13、發(fā)育阻滯：體外受精的早期胚胎在體外發(fā)育中往往會停止在某一階段不再發(fā)育的現(xiàn)象。14、生長因子：一類通過與特異的高親和的細(xì)胞膜受體結(jié)

6、合，調(diào)節(jié)細(xì)胞生長與其他細(xì)胞功能等多效應(yīng)的多肽類物質(zhì)。15、體細(xì)胞克?。簩游矬w細(xì)胞經(jīng)過抑制培養(yǎng)使其處于休眠狀態(tài)，利用細(xì)胞核移植技術(shù)將核導(dǎo)入去核卵細(xì)胞，培育成早期胚胎移植至受體，妊娠產(chǎn)仔培育出與核供體一樣的成體動物的一種細(xì)胞工程技術(shù)。16、單克隆抗體：經(jīng)過免疫的哺乳類動物單一的B淋巴細(xì)胞可以分泌單一性抗體，這種具有特異性的、同質(zhì)性的抗體為單克隆抗體。17、胞質(zhì)體：除去細(xì)胞核后由膜包裹的無核細(xì)胞。18、細(xì)胞系：經(jīng)過在培養(yǎng)后而形成的具有增殖能力、特性專一、類型均勻的培養(yǎng)細(xì)胞。19、細(xì)胞株：將所得到的純凈細(xì)胞群以一定的密度接種在1mm厚的薄層固體培養(yǎng)基上，進(jìn)行平板培養(yǎng)形成的細(xì)胞團(tuán)。20、永久細(xì)胞系：大

7、多數(shù)細(xì)胞系在有限的代數(shù)以不變的形式增殖，當(dāng)超過有限世代后，在體外永久存活下發(fā)育成永久細(xì)胞系或連續(xù)細(xì)胞系。三、選擇題1、下列關(guān)于動物細(xì)胞培養(yǎng)的有關(guān)敘述中正確的是（D）A.細(xì)胞的癌變發(fā)生于原代培養(yǎng)向傳代培養(yǎng)的過渡過程中B.動物細(xì)胞培養(yǎng)液常含有葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、生長素和動物血清等C.動物細(xì)胞培養(yǎng)的目的是獲得大量的細(xì)胞分泌蛋白D.動物細(xì)胞培養(yǎng)前和培養(yǎng)過程中都要用胰蛋白酶處理2、下列不屬于動物細(xì)胞工程應(yīng)用的是（C）A.大規(guī)模生產(chǎn)干擾素，用于抵抗病毒引起的感染B.為大面積燒傷的病人提供移植的皮膚細(xì)胞C.大規(guī)模生產(chǎn)食品添加劑，香料等D.利用胚胎移植技術(shù)，加快優(yōu)良種畜的繁殖3、“生物導(dǎo)彈”是指（D）A.

8、單克隆抗體B.雜交瘤細(xì)胞C.產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細(xì)胞D.在單抗上連接抗癌藥物4、用于動物細(xì)胞培養(yǎng)的組織和細(xì)胞大都取自胚胎或出生不久的幼齡動物的器官或組織，其主要原因是這樣的組織細(xì)胞（D）A.容易產(chǎn)生各種變異B.C.取材十分方便D.5、用動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)使細(xì)胞傳到A.原代細(xì)胞C.細(xì)胞系B.D.具有更強(qiáng)的全能性分裂增殖的能力強(qiáng)50代以后仍能傳下的傳代細(xì)胞稱（C）傳代細(xì)胞細(xì)胞株6、能提高良種家畜繁殖能力的細(xì)胞工程技術(shù)是（C）A.組織培養(yǎng)B.細(xì)胞融合C.胚胎移植D.細(xì)胞核移植7、下列有關(guān)動物細(xì)胞培養(yǎng)和胚胎工程的敘述中，錯誤的是（B）A.選擇胚胎干細(xì)胞作為核供體進(jìn)行核移植可提高動物克隆的成功率B.在人胚

9、胎發(fā)育過程中只有受精卵具有全能性C.胚胎分割時用胰蛋白酶將卵裂球中的細(xì)胞分散開D.連續(xù)細(xì)胞系大多數(shù)具有異倍體核形8、下列說確的是（A）A.細(xì)胞培養(yǎng)過程中需要定期更換培養(yǎng)液B.體外細(xì)胞培養(yǎng)只需加入抗生素，無需無菌培養(yǎng)C.ES細(xì)胞貼壁培養(yǎng)便可保持未分化狀態(tài)D.成體干細(xì)胞的分化能力比胚胎干細(xì)胞的分化能力強(qiáng)9、細(xì)胞株的特點(diǎn)是（A）A.遺傳物質(zhì)發(fā)生改變，具有癌變特點(diǎn)，可以無限傳代B.遺傳物質(zhì)沒有改變，可以無限傳代C.遺傳物質(zhì)沒有改變，不可無限傳代D.遺傳物質(zhì)發(fā)生改變，不可無限傳代10、利用動物細(xì)胞融合技術(shù)可獲得雜交瘤細(xì)胞，下列說法不正確的是（B）A.需經(jīng)篩選過程方可獲得B.可分泌多種特異性抗體C.具有雙

10、親細(xì)胞的遺傳物質(zhì)D.體外培養(yǎng)條件下可大量繁殖11、下列不屬于單克隆抗體在實踐上應(yīng)用的實例是（D）A.利用同位素標(biāo)記的單克隆抗體定位診斷月中瘤、心血管畸形等疾病B.利用免疫病毒清除異體骨髓移植中的供體骨髓T細(xì)胞C.制成“生物導(dǎo)彈”將藥物定向地帶到癌細(xì)胞所在部位D.將抗藥菌的某基因引入小鼠細(xì)胞12、下列關(guān)于細(xì)胞工程的敘述，錯誤的是（C）A.植物細(xì)胞融合必須先制備原生質(zhì)體B.試管嬰兒技術(shù)包括人工受精和胚胎移植兩方面C.經(jīng)細(xì)胞核移植培育出新個體只有一個親本的遺傳性狀D.用于培養(yǎng)的植物器官屬于外植體13、下列不屬于細(xì)胞重組的方式（C）A.胞質(zhì)體與完整細(xì)胞重組形成胞質(zhì)雜種B.微細(xì)胞與完整細(xì)胞重組形成微細(xì)胞

11、異核體C.核體與完整細(xì)胞重組形成重組細(xì)胞D.胞質(zhì)體與核體重新組合形成重組細(xì)胞14、動物細(xì)胞的超低溫保存技術(shù)不包括（C）A.冷凍保護(hù)法B.常規(guī)冷凍法C.冰凍法D.玻璃化凍存法15、在影響體細(xì)胞胚發(fā)生的激素因素中，應(yīng)用最廣泛的是（B）A.IBAB.2,4-DC.IAAD.BA16、只能使動物細(xì)胞融合的常見誘導(dǎo)方法是（A）A.滅活的病毒B.PEGC.電刺激D.離心17、下列關(guān)于哺乳動物胚胎發(fā)育和胚胎工程的敘述，正確的是（D）A.卵裂期胚胎中細(xì)胞數(shù)目和有機(jī)物總量在不斷增加B.胚胎干細(xì)胞具有細(xì)胞核大、核仁小和蛋白質(zhì)合成旺盛等特點(diǎn)C.胚胎分割時需將原腸胚的細(xì)胞質(zhì)均等分裂D.胚胎干細(xì)胞是一類未分化細(xì)胞，可以

12、從早期胚胎中分離出來18、制備單克隆抗體所采用的細(xì)胞工程技術(shù)包括（A）細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞融合胚胎移植細(xì)胞核移植B.C.D.19、下列關(guān)于動物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述正確的是（B）A.培養(yǎng)中的人效應(yīng)T細(xì)胞產(chǎn)生單克隆抗體A. 培養(yǎng)中的人效應(yīng)B細(xì)胞產(chǎn)生單克隆抗體B. 任何成熟紅細(xì)胞經(jīng)過培養(yǎng)能形成細(xì)胞株用胰蛋白酶處理肝臟組織可獲得整個肝臟20、動物細(xì)胞工程常用的技術(shù)手段中，最基礎(chǔ)的是（A）A.動物細(xì)胞培養(yǎng)B.動物細(xì)胞融合C.單克隆抗體D.胚胎核移植四、判斷題1、體細(xì)胞胚又叫胚狀體，是指離體培養(yǎng)條件下經(jīng)過受精過程而形成的胚胎類似物。（X）2、顆粒性白細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞都屬于多形型細(xì)胞。（X）3、傳代培養(yǎng)或收獲細(xì)胞

13、均需使細(xì)胞脫落微載體，通常用酶消化法。（V）4、無限細(xì)胞系大多數(shù)已發(fā)生異倍化，具異倍體核型，有的可能已轉(zhuǎn)為惡性細(xì)胞。（V）5、消化纖維組織一般采用纖維素酶。（X）6、ES細(xì)胞是一種含正常二倍體的具有發(fā)育全能性細(xì)胞。（V）7、根據(jù)X、Y精子DN*量的微小差別，可通過流式細(xì)胞儀進(jìn)行分離。（V）8、玻璃化冷凍法具有快捷簡單、高效的特點(diǎn)，缺點(diǎn)是需要昂貴的冷凍儀器。（x）9、DMS矚于滲透性冷凍保護(hù)劑。（V）10、大量生產(chǎn)單克隆抗體方法有兩種：體外使用培養(yǎng)管培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞，從下沉物中獲取抗體和體瘤細(xì)胞制備血清。（V）11、原代培養(yǎng)分為兩種：組織塊培養(yǎng)和組織塊消化培養(yǎng)。（V）12、等密度沉降分離法主要是根

14、據(jù)細(xì)胞大小不同分離細(xì)胞，細(xì)胞在單位重力作用下，通過密度介質(zhì)，細(xì)胞大，沉降快。（X）13、懸浮培養(yǎng)優(yōu)點(diǎn)是比較容易更換培養(yǎng)基。（x）14、兔的同期發(fā)情只用HCCM可以達(dá)到目的。（V）15、外植體是離體培養(yǎng)的活的動物組織。（X）16、動物發(fā)情配種后，取出胚胎，移入同種或親緣關(guān)系較近的，生理狀態(tài)不必相同的動物輸卵管或子宮。（X）17、天然培養(yǎng)基中的激素有胰島素，生長素和多種生長因子。（X）18、Hanks液和Earle液是兩種常用的BSS8礎(chǔ)溶液。（V）19、成纖維型細(xì)胞起源于胚層與外胚層的細(xì)胞，在體外培養(yǎng)時都可能呈現(xiàn)。（x）20、微載體培養(yǎng)包括實心微載體，多孔微載體。（V）五、簡答題1、影響體細(xì)胞胚

15、發(fā)生的因素(1)培養(yǎng)材料的基因型、生理狀況。(2)培養(yǎng)條件：光照、溫度、俊態(tài)氮、氨基酸、激素等。其中激素的調(diào)控作用，2,4-D是應(yīng)用最為廣泛的生長素，2,4-D的應(yīng)用有規(guī)律性的變化，首先在較高濃度下誘導(dǎo)胚行細(xì)胞的形成，然后降低2,4-D的濃度下產(chǎn)生早期胚胎，一般在球形胚形成后，除去生長素有利于體細(xì)胞胚的繼續(xù)發(fā)育。2、簡述血清在培養(yǎng)液中的主要功能(1)提供對維持細(xì)胞指數(shù)生長的激素(2)提供結(jié)合蛋白，能識別維生素，脂類，金屬等，能結(jié)合或調(diào)節(jié)它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。(3)是細(xì)胞貼壁，鋪展在塑料培養(yǎng)基上所需因子的來源起酸堿度緩沖劑的作用(4)提供蛋白酶抑制劑，使細(xì)胞傳代時使用的胰蛋白酶失活，保護(hù)細(xì)胞不受

16、損傷。3、為什么微載培養(yǎng)系統(tǒng)是目前最有發(fā)展前途的一種培養(yǎng)模式？因為該模式把單層培養(yǎng)和懸浮培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)融匯在一起，具有兩種培養(yǎng)方法的優(yōu)點(diǎn)。(1)比表面積大(2)生物相容性好，無毒無害，有好的黏附性，一般帶正電荷(3)機(jī)械性能強(qiáng)，可攪拌，能保護(hù)細(xì)胞，重復(fù)利用(4)微載體懸浮于培養(yǎng)基中，細(xì)胞生長環(huán)境均一，便于檢測和控制(5)培養(yǎng)基利用率高(6)放大較容易(7)熱穩(wěn)定性好，適合高壓滅菌4、簡述利用雜交瘤細(xì)胞技術(shù)進(jìn)行單克隆抗體大規(guī)模生產(chǎn)的技術(shù)步驟與要點(diǎn)(1)親本細(xì)胞的準(zhǔn)備：致敏B淋巴細(xì)胞，骨髓瘤細(xì)胞的準(zhǔn)備(2)細(xì)胞融合形成雜交瘤細(xì)胞(3)雜交瘤細(xì)胞的篩選：采用HAT選擇性培養(yǎng)基(4)可分泌特異性單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞的