第十一章流式細(xì)胞技術(shù)與流式細(xì)胞儀

1、 第十一章 流式細(xì)胞技術(shù)與流式細(xì)胞儀首 頁(yè)習(xí) 題習(xí)題參考答案習(xí) 題 名詞解釋 選擇題 簡(jiǎn)答題 一、名詞解釋1流式細(xì)胞儀2流式細(xì)胞術(shù)3狹縫掃描流式細(xì)胞儀4測(cè)量區(qū)5. 樣品流6鞘液流7側(cè)向角散射8延遲時(shí)間9熒光靈敏度10分選收獲率11分選速度12分選純度13長(zhǎng)通濾光片14短通濾光片15帶通濾光片16. 細(xì)胞自發(fā)熒光17零分辨率的流式系統(tǒng)二、選擇題 【A型題】 在五個(gè)選項(xiàng)中選出一個(gè)最符合題意的答案（最佳答案）。1流式細(xì)胞儀中的鞘液和樣品流在噴嘴附近組成一個(gè)圓形流束，自噴嘴的圓形孔噴出，與水平方向的激光束垂直相交，相交點(diǎn)稱為（ ）A敏感區(qū)B測(cè)量區(qū)C激光區(qū)D計(jì)算區(qū)E觀察區(qū)2 流式細(xì)胞儀使用的染色細(xì)胞受激

2、光照射后發(fā)出熒光，同時(shí)產(chǎn)生（ ）A電離輻射B光散射C電磁輻射D光反射E光電子3 流式細(xì)胞儀中的光電倍增管接收（ ）A散射光B熒光C激光D射線E反光4流式細(xì)胞儀中的光電二級(jí)管接收（ ）A散射光B熒光C激光D射線E反光5通過(guò)測(cè)量區(qū)的液柱斷裂成一連串均勻液滴的原因是在（ ）A在流動(dòng)室上加上了頻率為30kHz的信號(hào)B在測(cè)量區(qū)上加上了頻率為30kHz的信號(hào)C在壓電晶體上加上了頻率為30kHz的信號(hào)D在光電倍增管上加上了頻率為30kHz的信號(hào)E在光電二級(jí)管上加上了頻率為30kHz的信號(hào)6將懸浮分散的單細(xì)胞懸液，經(jīng)特異熒光染料染色后，放人樣品管，懸浮在樣品管中的單細(xì)胞懸液形成樣品流垂直進(jìn)入流式細(xì)胞儀的流動(dòng)室

3、，動(dòng)力來(lái)自于（ ）A激光B壓電晶體C氣體壓力D熒光E散射光7流動(dòng)室軸心至外壁的鞘液向下流動(dòng)，形成包繞細(xì)胞懸液的是（ ）A鞘液流B細(xì)胞流C散射光D熒光E測(cè)量區(qū)8各類細(xì)胞的特性信息在測(cè)量區(qū)被測(cè)定的時(shí)間為（ ）A在細(xì)胞形成液滴以前B在細(xì)胞形成液滴以后C在細(xì)胞形成液滴過(guò)程中D在細(xì)胞形成液滴前后E在細(xì)胞形成液滴一小時(shí)9樣品流在鞘流的環(huán)包下形成流體動(dòng)力學(xué)聚焦，使樣品流不會(huì)脫離液流的軸線方向，并且保證每個(gè)細(xì)胞通過(guò)（ ）A熒光照射區(qū)B散射光照射區(qū)C激光照射區(qū)DX光照射區(qū)E太陽(yáng)光照射區(qū)10前向角散射可以檢測(cè)（ ）A細(xì)胞膜厚薄B被測(cè)細(xì)胞的大小C細(xì)胞質(zhì)多少D核膜的折射率EDNA含量11在對(duì)細(xì)胞膜表面抗原的熒光檢測(cè)時(shí)

4、通常使用（ ）A線性放大器B指數(shù)放大器C對(duì)數(shù)放大器D整數(shù)放大器E函數(shù)放大器12一般對(duì)DNA倍體測(cè)量時(shí)采用（ ）A熒光信號(hào)的面積B散射光信號(hào)的面積C前向角散射信號(hào)面積和寬度D散射光信號(hào)的寬度E熒光信號(hào)的寬度13熒光信號(hào)的寬度常用來(lái)區(qū)分（ ）A淋巴細(xì)胞B紅細(xì)胞C白細(xì)胞D雙聯(lián)體細(xì)胞E單倍體細(xì)胞14光譜重疊校正的最有效方法是使用（ ）A放大電路B熒光電路C散射光電路D衰減電路E雙激光立體光路15若每秒鐘產(chǎn)生4萬(wàn)個(gè)水滴,每秒鐘流出的細(xì)胞是1000個(gè)，則平均每40個(gè)水滴中有（ ）A三個(gè)水滴是有細(xì)胞的B二個(gè)水滴是有細(xì)胞的C四個(gè)水滴是有細(xì)胞的D.一個(gè)水滴是有細(xì)胞的E五個(gè)水滴是有細(xì)胞的16流式細(xì)胞術(shù)對(duì)HIV感染

5、者或AIDS發(fā)病者進(jìn)行區(qū)別是通過(guò)（ ）A測(cè)DNA凋亡峰B胞質(zhì)抗原含量測(cè)定C動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)T細(xì)胞亞群D測(cè)凋亡調(diào)節(jié)蛋白EDNA倍體含量測(cè)定17下落的水滴通過(guò)一對(duì)平行板電極形成的靜電場(chǎng)時(shí)，帶正電荷的水滴向（ ）A帶負(fù)電的電極板偏轉(zhuǎn)B帶正電的電極板偏轉(zhuǎn)C不偏轉(zhuǎn)D前向角偏轉(zhuǎn)E側(cè)向角偏轉(zhuǎn)18什么是鑒別良、惡性腫瘤的特異指標(biāo)為（ ）A非特異性酯酶含量測(cè)定B胞質(zhì)抗原含量測(cè)定CDNA含量測(cè)定D過(guò)氧化物酶含量測(cè)定EDNA倍體含量測(cè)定19衡量流式細(xì)胞儀檢測(cè)微弱熒光信號(hào)的重要指標(biāo)是（ ）A靈敏度的高低B熒光強(qiáng)度C散射光大小D精密度大小E準(zhǔn)確度的高低20分辨率是衡量?jī)x器測(cè)量精度的指標(biāo)，通常用（ ）A誤差值表示B標(biāo)準(zhǔn)差值表示C

6、靈敏度值表示D變異系數(shù)值表示E精密度值表示21與前向角散射密切相關(guān)的是（ ）A細(xì)胞直徑B細(xì)胞直徑的平方C細(xì)胞核的形狀D血小板數(shù)量E病毒性質(zhì)22流式細(xì)胞儀測(cè)定的標(biāo)本，不論是外周血細(xì)胞,還是培養(yǎng)細(xì)胞，首先要保證是（ ）A單倍體細(xì)胞懸液B雙倍體細(xì)胞懸液C紅細(xì)胞懸液D白細(xì)胞懸液E單細(xì)胞懸液23.光路與流路校正的主要目是確保（ ）A激光光路穩(wěn)定B樣品流穩(wěn)定C激光光路與樣品流處于正交狀態(tài)D熒光光光路與樣品流處于正交狀態(tài)E散射光光路與樣品流處于正交狀態(tài)24為保證樣品檢測(cè)時(shí)儀器處于最佳工作狀態(tài)，PMT校準(zhǔn)采用（ ）A樣品B質(zhì)控品C鞘液D生理鹽水E緩沖液25為保證儀器在計(jì)數(shù)時(shí)的準(zhǔn)確性，流式細(xì)胞儀應(yīng)建立絕對(duì)計(jì)數(shù)（

7、 ）A樣品B細(xì)胞C鞘液D細(xì)菌E標(biāo)準(zhǔn)品26樣品和鞘液管道應(yīng)用漂白粉液清洗的間隔時(shí)間為（ ）A每月B每天C每季度D每周E每年27FCM顯示激光器開(kāi)啟錯(cuò)誤,引起故障的可能原因是（ ）A激光器關(guān)閉B激光器門打開(kāi)C流式細(xì)胞儀連接錯(cuò)誤D清洗液少了E數(shù)據(jù)太大，難以處理28FCM顯示清洗液高度警示,引起故障的可能原因是（ ）A激光器關(guān)閉B激光器門打開(kāi)C流式細(xì)胞儀連接錯(cuò)誤D清洗液少了E清洗液傳感器失靈29FCM顯示數(shù)據(jù)處理速率錯(cuò)誤,引起故障的可能原因是（ ）A數(shù)據(jù)太大，難以處理B激光器門打開(kāi)C流式細(xì)胞儀連接錯(cuò)誤D清洗液少了E清洗液傳感器失靈【X型題】 每題的備選答案中有兩個(gè)或者兩個(gè)以上正確答案。1流式細(xì)胞儀綜合

8、了（ ）A激光技術(shù)B電子技術(shù)C流體力學(xué)D生物化學(xué)E計(jì)算機(jī)技術(shù)2流式細(xì)胞儀廣泛應(yīng)用于 （ ）A細(xì)胞生物學(xué)B物理學(xué)C免疫學(xué)D電子學(xué)E血液學(xué)3FCM在細(xì)胞生物學(xué)研究中，應(yīng)用頻繁的領(lǐng)域是（ ）A細(xì)胞周期BDNA倍體C細(xì)胞表面受體D細(xì)胞表面抗原E病毒表面抗體4生物學(xué)顆粒的內(nèi)容包括（ ）ADNABRNAC蛋白質(zhì)D染色體E細(xì)菌5染色的細(xì)胞受激光照射后發(fā)出熒光，同時(shí)產(chǎn)生光散射。這些信號(hào)分別被（ ）A光電倍增管熒光檢測(cè)器接收B細(xì)胞檢測(cè)器接收C激光檢測(cè)器接收D光電二極管散射光檢測(cè)器接收EDNA檢測(cè)器接收6.計(jì)算機(jī)通過(guò)儲(chǔ)存、計(jì)算、分析流式細(xì)胞檢測(cè)到的數(shù)字化信息，就可得到（ ）A離子多少B細(xì)胞的大小C核酸含量D酶的性

9、質(zhì)E抗原的性質(zhì)7流式細(xì)胞儀根據(jù)其結(jié)構(gòu)不同又可分（ ）A一般流式細(xì)胞儀B高級(jí)流式細(xì)胞儀C特殊流式細(xì)胞儀D狹縫掃描流式細(xì)胞儀E零點(diǎn)流式細(xì)胞儀8流式細(xì)胞儀根據(jù)功能不同可分為（ ）A臨床型B普通型C科研型D特殊性E靈敏型9流式細(xì)胞儀的結(jié)構(gòu)可分為（ ）A流動(dòng)室及液流驅(qū)動(dòng)系統(tǒng)B激光光源及光束成形系統(tǒng)C光學(xué)系統(tǒng)D信號(hào)檢測(cè)與存貯、顯示、分析系統(tǒng)E細(xì)胞分選系統(tǒng)10流動(dòng)室的類型有（ ）A在室內(nèi)檢測(cè)的流動(dòng)室B激發(fā)型流動(dòng)室C在空氣中檢測(cè)的流動(dòng)室D熒光流動(dòng)室E顯微檢測(cè)流動(dòng)室11屬于FCM光學(xué)系統(tǒng)的是（ ）A透鏡B濾光片C小孔D流動(dòng)室E分選系統(tǒng)12FCM光學(xué)系統(tǒng)主要分為（ ）A長(zhǎng)通濾片B短通濾片C高通濾片D低通濾片E帶通

10、濾片13當(dāng)細(xì)胞攜帶熒光素標(biāo)記物，通過(guò)激光照射區(qū)時(shí)，細(xì)胞內(nèi)不同物質(zhì)分別產(chǎn)生（ ）A激光信號(hào)B散射光信號(hào)C熒光信號(hào)D離子信號(hào)E反射信號(hào)14散射光分為（ ）A后向角散射B前向角散射C反向角散射D側(cè)向角散射E正向角散射15目前采用前向角散射和側(cè)向角散射這兩個(gè)參數(shù)組合，可區(qū)分經(jīng)裂解紅細(xì)胞處理后外周血中的（ ）A淋巴細(xì)胞群體B單核細(xì)胞群體C血小板群體D粒細(xì)胞群體E紅細(xì)胞群體16目前采用前向角散射和側(cè)向角散射這兩個(gè)參數(shù)組合，可區(qū)分未進(jìn)行裂解紅細(xì)胞處理的全血樣品中的（ ）A淋巴細(xì)胞群體B單核細(xì)胞群體C血小板群體D粒細(xì)胞群體E紅細(xì)胞群體17線性放大測(cè)量適合于檢測(cè)（ ）A細(xì)胞膜表面抗原的分布B單核細(xì)胞含量C總蛋白

11、質(zhì)含量DRNA含量EDNA含量18屬于細(xì)胞分選器組成內(nèi)容的是（ ）A細(xì)胞分布B水滴形成C分選邏輯電路D水滴充電E水滴偏轉(zhuǎn)19影響延遲時(shí)間的因素為（ ）A平均延遲時(shí)間的不準(zhǔn)確性B噴射液流的變化C水滴分離點(diǎn)的變化D細(xì)胞本身對(duì)水滴形成條件的影響E水滴的性質(zhì)20流式細(xì)胞儀在免疫學(xué)中的應(yīng)用包括（ ）A淋巴細(xì)胞功能分析B淋巴細(xì)胞及其亞群分析C化療藥物對(duì)腫瘤細(xì)胞的凋亡機(jī)制D腫瘤細(xì)胞的免疫檢測(cè)E免疫分型21分選指標(biāo)主要包括（ ）A分選速度B分選靈敏度C分選純度D分選精密度E分選收獲率22保證熒光信號(hào)產(chǎn)生的非常關(guān)鍵技術(shù)是（ ）A熒光染料的選擇B標(biāo)記染色方法C鞘液的選擇D細(xì)胞的選擇E細(xì)胞的分離23FCM室內(nèi)應(yīng)注意

12、（ ）A配空調(diào)B避光C防塵D除濕E不用除濕三、簡(jiǎn)答題1簡(jiǎn)述流式細(xì)胞儀生物學(xué)顆粒分析原理。2簡(jiǎn)述流式細(xì)胞儀細(xì)胞分選原理。3流式細(xì)胞儀依據(jù)什么進(jìn)行分類? 各類型有什么特點(diǎn)?4流式細(xì)胞儀主要應(yīng)用在哪些領(lǐng)域？5流式細(xì)胞儀的基本結(jié)構(gòu)由哪幾部分組成？6流式細(xì)胞儀的液流系統(tǒng)的功能？7流式細(xì)胞儀的流動(dòng)室的作用是什么？8流式細(xì)胞儀的光源有什么特點(diǎn)？9流式細(xì)胞儀的光學(xué)系統(tǒng)組成和各種濾光片的作用是什么?10流式細(xì)胞儀所檢測(cè)的信號(hào)有哪些？這些信號(hào)所代表的意義和作用是什么？11流式細(xì)胞儀信號(hào)的測(cè)量方式和校正方法是什么？12流式細(xì)胞儀分選器的組成和細(xì)胞分選原理是什么？13流式細(xì)胞儀的主要性能指標(biāo)有哪些?14流式細(xì)胞儀操作

13、技術(shù)的質(zhì)量控制主要涉及哪幾個(gè)方面？15.流式細(xì)胞儀通常出現(xiàn)的故障及排除方法是什么? 習(xí)題參考答案 一、名詞解釋1流式細(xì)胞儀：是以激光為光源，集流體力學(xué)、電子物理技術(shù)、光電測(cè)量技術(shù)、計(jì)算機(jī)技術(shù)、細(xì)胞熒光化學(xué)和單克隆抗體等技術(shù)為一體的新型高科技儀器。2流式細(xì)胞術(shù)：應(yīng)用流式細(xì)胞儀對(duì)于處在快速直線流動(dòng)狀態(tài)中的生物顆粒進(jìn)行快速的、多參數(shù)的定量分析和分選的技術(shù)稱為流式細(xì)胞術(shù)。3狹縫掃描流式細(xì)胞儀：被檢細(xì)胞直徑大于激光光斑直徑，當(dāng)細(xì)胞通過(guò)光束時(shí)，細(xì)胞各部分被依次先后掃描，得到一維的細(xì)胞輪廓組方圖，可計(jì)算出細(xì)胞直徑大小、核直徑大小、核漿比例等一系列的形態(tài)學(xué)信息的流式細(xì)胞儀。4測(cè)量區(qū)：鞘液流和樣品流在噴嘴附近組

14、成一個(gè)圓柱流束，自噴嘴的圓形孔噴出，與水平方向的激光束垂直相交，相交點(diǎn)稱為測(cè)量區(qū)。5. 樣品流：將特異熒光染料染色的單細(xì)胞懸液放人樣品管，在氣體壓力作用下，懸浮在樣品管中的單細(xì)胞經(jīng)管道進(jìn)入流式細(xì)胞儀的流動(dòng)室，沿流動(dòng)室的軸心向下流動(dòng)所形成的流束稱為樣品流。6鞘液流：流動(dòng)室軸心至外壁的鞘液也向下流動(dòng)，形成包繞樣品流的流束稱為鞘液流。7側(cè)向角散射： 側(cè)向角散射是指與激光束正交900方向的散射光信號(hào)。8延遲時(shí)間：由細(xì)胞通過(guò)測(cè)量區(qū)到小水滴分離的時(shí)間大約為幾十毫秒，這個(gè)時(shí)間稱為延遲時(shí)間。9熒光靈敏度：以能檢測(cè)到最少的異硫氰酸熒光素分子來(lái)表示，即微球上最少標(biāo)有多少個(gè)FITC分子時(shí)剛好能被檢測(cè)到，即為熒光靈敏

15、度。10分選收獲率：指被分出的細(xì)胞占原來(lái)溶液中該細(xì)胞的百分比。11分選速度：分選速度指每秒可提取所要細(xì)胞的個(gè)數(shù)。12分選純度：分選純度指要分選的目的細(xì)胞占分選出細(xì)胞的百分比。13長(zhǎng)通濾光片：能使特定波長(zhǎng)以上的光通過(guò)，特定波長(zhǎng)以下的光不能通過(guò)的濾光片稱為長(zhǎng)通濾光片。14短通濾光片：與長(zhǎng)通濾光片相反，特定波長(zhǎng)以下的光通過(guò)，特定波長(zhǎng)以上的光被吸收或返回。15帶通濾光片：帶通濾光片允許一定波長(zhǎng)范圍內(nèi)的光通過(guò)，一般濾光片上有兩個(gè)數(shù)值，一個(gè)為允許通過(guò)波長(zhǎng)的中心值，另一個(gè)為允許通過(guò)光波段的范圍。如BP500/50表示其允許475nm525nm波長(zhǎng)的光通過(guò)。16細(xì)胞自發(fā)熒光：細(xì)胞自身在激光照射下發(fā)出微弱的熒光

16、信號(hào)，稱為細(xì)胞自發(fā)熒光。17零分辨率的流式系統(tǒng)：一般流式細(xì)胞儀的激光光斑為橢圓形，光斑直徑大于被檢細(xì)胞體積，只能提供細(xì)胞內(nèi)某種生物化學(xué)成分的參數(shù)，不能對(duì)細(xì)胞形態(tài)以亞細(xì)胞形態(tài)進(jìn)行分辨，所以稱之為零分辨率的流式系統(tǒng)。二、選擇題【A型題】1B 2B 3B 4A 5C 6C 7A 8A 9C 10B 11C 12A 13D 14E 15D 16C 17A 18E 19A 20D 21B 22E 23C 24B 25E 26D 27B 28E 29A 【X型題】1ABCE 2ACE 3ABCD 4ABCDE 5AD 6BCDE 7AD 8AC 9ABCDE 10ACE11ABC 12ABE 13B C

17、14BD 15ABD 16CE 17CDE 18BCDE 19ABCD 20ABCD21ABCE 22ABDE 23ABCD三、簡(jiǎn)答題1簡(jiǎn)述流式細(xì)胞儀生物學(xué)顆粒分析原理。答：經(jīng)特異熒光染料染色后的樣品沿流動(dòng)室的軸心向下流動(dòng)，流動(dòng)室軸心至外壁的鞘液也向下流動(dòng)，形成包繞細(xì)胞懸液的鞘液流，鞘液和樣品流在噴嘴附近組成一個(gè)圓柱流束，與水平方向的激光束垂直相交。染色的細(xì)胞受激光照射后發(fā)出熒光，這些信號(hào)分別被光電倍增管接收，經(jīng)過(guò)計(jì)算機(jī)儲(chǔ)存、計(jì)算、分析這些數(shù)字化信息，就可得到細(xì)胞的大小、活性、核酸含量、酶和抗原的性質(zhì)等物理和生化指標(biāo)。2簡(jiǎn)述流式細(xì)胞儀細(xì)胞分選原理。答：當(dāng)某類細(xì)胞的特性與要分選的細(xì)胞相同時(shí)，流式

18、細(xì)胞儀就會(huì)在這類細(xì)胞形成液滴時(shí)給含有這類細(xì)胞的液滴充以特定的電荷，帶有電荷的液滴向下落入偏轉(zhuǎn)板間的靜電場(chǎng)時(shí)，依所帶電荷的不同分別向左偏轉(zhuǎn)或向右偏轉(zhuǎn)，落入指定的收集器內(nèi)，不帶電的液滴不發(fā)生偏轉(zhuǎn)，垂直落入廢液槽中被排出，從而達(dá)到細(xì)胞分類收集的目的。3流式細(xì)胞儀依據(jù)什么進(jìn)行分類? 各類型有什么特點(diǎn)?答：流式細(xì)胞儀根據(jù)功能不同可分為臨床型和科研型。臨床型只有分析功能，沒(méi)有分選功能，儀器的光路調(diào)節(jié)系統(tǒng)固定，自動(dòng)化程度高，操作簡(jiǎn)便，易學(xué)易掌握?？蒲行图扔蟹治龉δ苡钟蟹诌x功能，可快速將所感興趣的細(xì)胞分選出來(lái)，并可將單個(gè)或指定個(gè)數(shù)的細(xì)胞分選到特定的容器里，同時(shí)可選配多種波長(zhǎng)和類型的激光器，適用于更廣泛更靈活的

19、科學(xué)研究。流式細(xì)胞儀根據(jù)其結(jié)構(gòu)不同又可分為一般流式細(xì)胞儀和狹縫掃描流式細(xì)胞儀。前者的激光光斑為橢圓形，光斑直徑大于被檢細(xì)胞體積，只能提供細(xì)胞內(nèi)某種生物化學(xué)成分的參數(shù)，不能對(duì)細(xì)胞形態(tài)和亞細(xì)胞形態(tài)進(jìn)行分辨。狹縫掃描流式細(xì)胞儀是一種高分辨率的檢測(cè)儀器，被檢細(xì)胞直徑大于激光光斑直徑，細(xì)胞通過(guò)光束時(shí)各部分被依次掃描，根據(jù)熒光信號(hào)的先后，就可得到一維的細(xì)胞輪廓組方圖，可計(jì)算出細(xì)胞直徑大小、核直徑大小、核漿比例等一系列的形態(tài)學(xué)信息。4流式細(xì)胞儀主要應(yīng)用在哪些領(lǐng)域？答：流式細(xì)胞儀主要有下面的應(yīng)用領(lǐng)域：免疫學(xué)、血液學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、腫瘤學(xué)、AIDS病檢測(cè)、自身免疫性疾病相關(guān)HLA抗原的分析和藥物學(xué)。5流式細(xì)胞儀的

20、基本結(jié)構(gòu)由哪幾部分組成？答：流式細(xì)胞儀的結(jié)構(gòu)可分為流動(dòng)室及液流驅(qū)動(dòng)系統(tǒng)，激光光源及光束成形系統(tǒng)，光學(xué)系統(tǒng)，信號(hào)檢測(cè)與存貯、顯示、分析系統(tǒng)，細(xì)胞分選系統(tǒng)等五個(gè)部分。6流式細(xì)胞儀的液流系統(tǒng)的功能？答：流動(dòng)室內(nèi)充滿了鞘液,鞘液的作用是將樣品流環(huán)包。鞘液流是一種穩(wěn)定流動(dòng)的液體，操作人員無(wú)法隨意改變其流動(dòng)的速度，樣品流在鞘流的環(huán)包下形成流體動(dòng)力學(xué)聚焦，使樣品流不會(huì)脫離液流的軸線方向，并且保證每個(gè)細(xì)胞通過(guò)激光照射區(qū)的時(shí)間相等，從而得到準(zhǔn)確的細(xì)胞熒光信息。7流式細(xì)胞儀的流動(dòng)室的作用是什么？答：流動(dòng)室由石英玻璃制成，并在石英玻璃中央開(kāi)一個(gè)孔徑為430m×180m的長(zhǎng)方形孔，供細(xì)胞單個(gè)流過(guò)，檢測(cè)區(qū)在該

21、孔的中心，這種流動(dòng)室的光學(xué)特性良好，流速較慢，因而細(xì)胞受照時(shí)間長(zhǎng)，可收集的細(xì)胞信號(hào)光通量大，配上廣角收集透鏡，可獲得很高的檢測(cè)靈敏度和測(cè)量精度。8流式細(xì)胞儀的光源有什么特點(diǎn)？答：激光是一種相干光源，它能提供單波長(zhǎng)、高強(qiáng)度及穩(wěn)定性高的光照，所以激光是細(xì)胞微弱熒光快速分析的理想光源。由于細(xì)胞的快速流動(dòng)，每個(gè)細(xì)胞經(jīng)過(guò)光照區(qū)的時(shí)間僅為1s左右，且細(xì)胞所攜帶熒光物質(zhì)被激發(fā)出的熒光信號(hào)強(qiáng)弱，與被照射的時(shí)間和激發(fā)光的強(qiáng)度有關(guān)，因此細(xì)胞必須達(dá)到足夠的光照強(qiáng)度。9流式細(xì)胞儀的光學(xué)系統(tǒng)組成和各種濾光片的作用是什么?答：流式細(xì)胞儀的光學(xué)系統(tǒng)是由若干組透鏡、濾光片和小孔組成，它們分別將不同波長(zhǎng)的熒光信號(hào)送入不同的電子

22、探測(cè)器。濾光片分三類，主要作用是：長(zhǎng)通濾光片使特定波長(zhǎng)以上的光通過(guò)，特定波長(zhǎng)以下的光不能通過(guò)；短通濾光片使特定波長(zhǎng)以下的光通過(guò)，特定波長(zhǎng)以上的光被吸收或返回；帶通濾光片允許一定波長(zhǎng)范圍內(nèi)的光通過(guò)。10流式細(xì)胞儀所檢測(cè)的信號(hào)有哪些？這些信號(hào)所代表的意義和作用是什么？答：流式細(xì)胞儀所檢測(cè)的信號(hào)有散射光和熒光信號(hào)。 散射光信號(hào)：散射光分為前向角散射和側(cè)向角散射，兩個(gè)參數(shù)組合，可區(qū)分經(jīng)裂解紅細(xì)胞處理后外周血白細(xì)胞中淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞和粒細(xì)胞三個(gè)細(xì)胞群體，或在未進(jìn)行裂解紅細(xì)胞處理的全血樣品中找出血小板和紅細(xì)胞等細(xì)胞群體。 熒光信號(hào)：一種是細(xì)胞自身在激光照射下發(fā)出微弱的熒光信號(hào)，另一種是經(jīng)過(guò)特異熒光素標(biāo)記細(xì)胞后，受激發(fā)照射得到的熒光信號(hào)，通過(guò)對(duì)這類熒光信號(hào)的檢測(cè)和定量分析能了解所研究細(xì)胞的存在和定量。11流式細(xì)胞儀信號(hào)的測(cè)量方式和校正方法是什么？答：流式細(xì)胞儀信號(hào)的測(cè)量方