殘留溶劑測定法檢驗標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

1、1 .目的：建立殘留溶劑測定法（二部）檢驗標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程，并按規(guī)程進行檢驗， 保證檢驗操作規(guī)范化。2 .依據(jù)：2.1. 中華人民共和國藥典2010年版二部。3 .范圍：適用于所有用殘留溶劑測定法（二部）測定的供試品。4 .責(zé)任：檢驗員、質(zhì)量控制科主任、質(zhì)量管理部經(jīng)理對本規(guī)程負(fù)責(zé)。5 .正文：5.1. 藥品中的殘留溶劑系指在原料藥或輔料的生產(chǎn)中，以及在制劑制備過程中使用的，但在工藝過程中未能完全去除的有機溶劑。藥品中常見的殘留溶劑及限度見附表1,除另有規(guī)定外，第一、第二、第三類溶劑的殘留限度應(yīng)符合表1中的規(guī)定；對其他溶劑，應(yīng)根據(jù)生產(chǎn)工藝的特點，制定相應(yīng)的限度，使其符合產(chǎn)品規(guī) 范、藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)

2、范（GMP）或其他基本的質(zhì)量要求。5.2. 本法照氣相色譜法（附錄V E）測定。5.3. 色譜柱5.3.1. 毛細(xì)管柱：除另有規(guī)定外，極性相近的同類色譜柱之間可以互換使用。5.3.1.1. 非極性色譜柱：固定液為100%的二甲基聚硅氧烷的毛細(xì)管柱。5.3.1.2. 極性色譜柱：固定液為聚乙二醇（PEG-20M）的毛細(xì)管柱。5.3.1.3. 中性色譜柱：固定液為（35%二苯基-（65%）甲基聚硅氧烷、（50% 二苯基-（50%二甲基聚硅氧烷、（35%二苯基-（65%）二甲基聚硅氧烷、（14% 氟丙基苯基-（86%二甲基聚硅氧烷、（6%氟丙基苯基-（94%二甲基聚硅氧 烷的毛細(xì)管柱等。5.3.1.

3、4. 弱極性色譜：柱固定液為（5%）苯基-（95%）甲基聚硅氧烷、（5%） 二苯基-（95%）二甲基硅氧烷的毛細(xì)管柱等。5.3.2. 填充柱：以直徑為0.180.25mm的二乙烯苯-乙基乙烯苯型高分子多孔小 球或其他適宜的填料作為固定相。5.4. 系統(tǒng)適用性試驗。5.4.1. 用待測物的色譜峰計算，毛細(xì)管色譜柱的理論板數(shù)一般不低于5000;填充柱的理論板數(shù)一般不低于1000。1.5。5.4.2. 色譜圖中，待測物色譜峰與其相鄰色譜峰的分離度應(yīng)大于5.4.3. 以內(nèi)標(biāo)法測定時，對照品溶液連續(xù)進樣 5次，所得待測物與內(nèi)標(biāo)物峰面 積之比的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD不大于5%;若以外標(biāo)法測定，所得待測物峰面

4、積 的RSDS不大于10%。5.5. 供試品溶液的制備。5.5.1. 頂空進樣：除另有規(guī)定外，精密稱取供試品 0.11g,通常以水為溶劑； 對于非水溶性藥物，可采用 N, N-二甲基甲酰胺、二甲基亞碉或其他適宜溶劑； 根據(jù)供試品和待測溶劑的溶解度，選擇適宜的溶劑且應(yīng)不干擾待測溶液的測定。 根據(jù)各品種項下殘留溶劑的限度規(guī)定配制供試品溶液，其濃度應(yīng)滿足系統(tǒng)定量測 定的需要。5.5.2. 溶液直接進樣：精密稱取供試品適量，用水或合適的有機溶劑使溶解；根 據(jù)各品種項下殘留溶劑的限度規(guī)定配制供試品溶液，其濃度應(yīng)滿足系統(tǒng)定量測定 的需要。5.6. 對照品溶液的制備：精密稱取各品種項下規(guī)定檢查的有機溶劑適量

5、，采用與制備供試品溶液相同的方法和溶劑制備對照品溶液；如用水作溶劑，應(yīng)先將待測有機溶劑溶解在50%C甲基亞碉或N,N-二甲基甲酰胺溶液中，再用水逐步稀釋。 若為限度檢查，根據(jù)殘留溶劑的限度規(guī)定確定對照品溶液的濃度；若為定量測定，為保證定量結(jié)果的正確性，應(yīng)根據(jù)供試品中殘留溶劑的實際殘留量確定對照品溶 液的濃度；通常對照品溶液的色譜峰面積不宜超過供試品溶液中對應(yīng)的殘留溶劑 的色譜峰面積2倍。必要時，應(yīng)重新調(diào)整供試品溶液或?qū)φ掌啡芤旱臐舛取?.7. 測定法。5.7.1. 第一法（毛細(xì)管柱頂空進樣等溫法）。5.7.1.1. 當(dāng)需要檢查有機溶劑的數(shù)量不多，且極性差異較小時，可采用此法。5.7.1.2.

6、色譜條件：柱溫一般為40100C；常以氮氣為載氣，流速為每分鐘 1.02.0ml;以水為溶劑時頂空瓶平衡溫度為 7085C,頂空瓶平衡時間為30 60分鐘；進樣口溫度為200c ;如采用火焰離子化檢測器（FID）,溫度為250C。 5.7.1.3.測定法：取對照品溶液和供試品溶液，分別連續(xù)進樣不少于2次，測定待測峰的峰面積。5.7.1.4. 對色譜圖中未知有機溶劑的鑒別，可參與附表 2進行初篩。5.7.2. 第二法（毛細(xì)管柱頂空進樣系統(tǒng)程序升溫法）。1.1. 2.1.當(dāng)需要檢查的有機溶劑數(shù)量較多，且極性差異較大時，可采用此法。1.2. 22色譜條件：柱溫一般先在40c維持8分鐘，再以每分鐘8c

7、的升溫速率 升至120C,巳t持10分鐘；以氮氣為載氣，流速為每分鐘 2.0ml ;以水為溶劑時 頂空瓶平衡溫度為7085C,頂空瓶平衡時間為3060分鐘；進樣口溫度為 200C ;如采用FID檢測器，進樣口溫度為250C。5723具體到某個品種的殘留溶劑檢查時，可根據(jù)該品種項下殘留溶劑的組成 調(diào)整升溫程序。5.724. 測定法：取對照品溶液和供試品溶液，分別連續(xù)進樣不少于2次，測定待測峰的峰面積。5.725. 對色譜圖中未知有機溶劑的鑒別，可參考附表3進行初篩。5.7.3. 第三法（溶液直接進樣法）。5.7.3.1. 可采用填充柱，亦可采用適宜極性的毛細(xì)管柱。5.7.3.2. 測定法：取對照

8、品溶液和供試品溶液，分別連續(xù)進樣23次，測定待測 峰的峰面積。5.7.3.3. 計算法。5.7.3.3.1. 限度檢查：除另有規(guī)定外，按品種項下規(guī)定的供試品溶液濃度測定。以內(nèi)標(biāo)法測定時，供試品溶液所得被測溶劑峰面積與內(nèi)標(biāo)峰面積之比不得大于對 照品溶液的相應(yīng)比值。以外標(biāo)法測定時，供試品溶液所得被測溶劑峰面積不得大 于對照品溶液的相應(yīng)峰面積。5.7.3.3.2. 定量測定：按內(nèi)標(biāo)法或外標(biāo)法計算各殘留溶劑的量。5.8. 【附注】。5.8.3. 除另有規(guī)定外，頂空條件的選擇。5.8.3.1. 應(yīng)根據(jù)供試品中殘留溶劑的沸點選擇頂空平衡溫度。對沸點較高的殘留 溶劑，通常選擇較高的平衡溫度；但此時應(yīng)兼顧供試

9、品的熱分解特性， 盡量避免 供試品產(chǎn)生的揮發(fā)性熱分解產(chǎn)物對測定的干擾。5.8.3.2. 頂空平衡時間一般為3045分鐘，以保證供試品溶液的氣-液兩相有足夠 的時間達到平衡。頂空平衡時間通常不宜過長，如超過 60分鐘，可能引起頂空 瓶的氣密性變差，導(dǎo)致定量準(zhǔn)確性的降低。5.8.3.3. 對照品溶液與供試品溶液必須使用相同的頂空條件。5.8.4. 定量方法的驗證。5.8.4.1. 當(dāng)采用頂空進樣時，供試品與對照品處于不完全相同的基質(zhì)中，故應(yīng) 考慮氣液平衡過程中的基質(zhì)效應(yīng)（供試品溶液與對照品溶液組成差異對頂空氣-液平衡的影響）。由于標(biāo)準(zhǔn)加入法可以消除供試品溶液基質(zhì)與對照品溶液基質(zhì)不 同所致的基質(zhì)效應(yīng)

10、的影響，故通常采用標(biāo)準(zhǔn)加入法驗證定量方法的準(zhǔn)確性；當(dāng)標(biāo) 準(zhǔn)加入法與其他定量方法的結(jié)果不一致時，應(yīng)以標(biāo)準(zhǔn)加入法的結(jié)果為準(zhǔn)。5.8.5. 干擾峰的排除：供試品中的未知雜質(zhì)或其揮發(fā)性熱降解物易對殘留溶劑的 測定產(chǎn)生干擾。干擾作用包括在測定的色譜系統(tǒng)中未知雜質(zhì)或其揮發(fā)性熱降解產(chǎn) 物與待測物的結(jié)構(gòu)相同（如甲氧基熱裂解產(chǎn)生甲醇）。當(dāng)測定的殘留溶劑超出限 度，但未能確定供試品中是否有未知雜質(zhì)或其揮發(fā)性熱降解物對測定有干擾作用 時，應(yīng)通過試驗排除干擾作用的存在。對第一類干擾作用，通常采用在另一種極 性不同的色譜柱系統(tǒng)中對相同供試品再進行測定，比較不同色譜系統(tǒng)中對相同供試品再進行測定，比較不同色譜系統(tǒng)中測定結(jié)果

11、的方法。如兩者結(jié)果一致，則可以排除測定中有共出峰的干擾。對第二類干擾作用，通常要通過測定已知不含該 溶劑的對照樣品來加以判斷。5.8.6. 含氮堿性化合物的測定。5.8.6.1. 普通氣相色譜儀中的不銹鋼管路、進樣器的襯管等對有機胺等含氮堿性 化合物具有較強的吸附作用，致使其檢出靈敏度降低，應(yīng)采用惰性的硅鋼材料或 鍥鋼材料管路；采用溶液直接進樣法測定時，供試品溶液應(yīng)不呈酸性，以免待測 物與酸反應(yīng)后不易汽化。5.8.6.2. 通常采用弱極性的色譜柱或其填料預(yù)先經(jīng)堿處理過的色譜柱分析含氮堿 性化合物，如果采用胺分析專用柱進行分析，效果更好。5.8.6.3. 對不宜采用氣相色譜法測定含氮堿性化合物，

12、如N-甲基叱咯烷酮等，可采用其他方法如離子色譜法等測定。5.8.7. 檢測器的選擇：對含鹵素元素的殘留溶劑如三氯甲烷等，采用電子捕獲檢 測器（ECD）,易得到高的靈敏度。5.8.8. 由于不同的實驗室在測定同一供試品時可能采用了不同的實驗方法，當(dāng)測定結(jié)果處于合格與不合格邊緣時，以采用內(nèi)標(biāo)或標(biāo)準(zhǔn)加入法為準(zhǔn)。5.8.9. 頂空平衡溫度一般應(yīng)低于溶解供試品所用溶劑的沸點10c以下，能滿足檢測靈敏度即可；對于沸點過高的溶劑，如甲酰胺、2-甲氧基乙醇、2-乙氧基乙醇、乙二醇、N-甲基叱咯烷酮等，用頂空進樣測定的靈敏度不如直接進樣，一般不宜用頂空進樣方法測定。5.8.10. 利用保留值定性是氣相色譜中最常

13、用的定性方法。色譜系統(tǒng)中載氣的流速、載氣的溫度和柱溫等的變化都會使保留值改變，從而影響定性結(jié)果。校正相 對保留時間（RART只受柱溫和固定相性質(zhì)的影響，以此作為定性分析參數(shù)較可 靠。應(yīng)用中通常選用甲烷測定色譜系統(tǒng)的死體積（ 益）RART= kzlst' R -t0式中tR為組分的保留時間；t'R為參比物的保留時間。附表1:藥品中常見的殘留溶劑及限度溶劑名稱限度溶劑名稱限度第一類溶劑第二類溶劑（應(yīng)該避免使用）（應(yīng)該限制使用）苯0.0002二氧六環(huán)0.038四氯化碳0.00042-乙氧基乙醇0.0161, 2-二氯乙烷0.0005乙二醇0.0621, 1-二氯乙烷0.0008甲酰胺

14、0.0221, 1, 1- 三氯乙烷0.15正己烷0.029第二類溶劑甲醇0.3（應(yīng)該限制使用）2-甲氧基乙醇0.005乙睛0.041甲基基酮0.005氯本0.036甲基環(huán)己烷0.118三氯甲烷0.006N-甲基口比咤咯烷酮0.053環(huán)己烷0.388硝基甲烷0.0051,2-二氯乙烯0.187口比咤0.02二氯甲烷0.06四氫曝吩0.0161,2-二甲基乙烷0.01四氫化泰0.01N, N-二甲基乙酰胺0.109四氫吠喃0.072N, N-二甲基甲酰胺0.088甲苯0.0891,1,2-三氯乙烯0.008一甲苯0.217溶劑名稱限度溶劑名稱限度第三類溶劑（藥品GMP第三類溶劑（藥品或其他質(zhì)量要

15、求限制使GMP或其他質(zhì)量要用）求限制使用）醋酸0.5甲基異基酮0.5內(nèi)酮0.5異丁醇0.5甲氧基苯0.5正戊烷0.5止醇0.5正戊醇0.5仲丁醇0.5止丙醇0.5乙酸酯0.5異丙醇0.5叔丁基甲基醍0.5乙酸丙酯0.5異丙基苯0.5第四類溶劑（尚無足二甲基業(yè)硼0.5夠毒理學(xué)資料）乙醇0.51,1-二乙氧基丙烷乙酸乙酯0.51,1-二甲氧基甲烷乙醛0.52,2-二甲氧基丙烷甲酸乙酯0.5甲酸0.5異丙醒正庚烷0.5甲基異內(nèi)基酮乙酸異酯0.5甲基四氫吠喃乙酸異丙酯0.5石油醒乙酸甲酯0.5三氯醋酸3-甲基-1-丁醇酮0.50.5三氟醋酸 通常含有60%間二甲苯、14%對二甲苯、9%鄰二甲苯和17%

16、乙苯。 藥品生產(chǎn)企業(yè)在使用時應(yīng)提供該類溶劑在制劑中殘留水平的合理性論證報 告。附表2常見有機溶劑在等溫法測定時相對于丁酮的保留值參考值非極性色譜柱極性色譜柱溶劑名稱tR/minRART溶劑名稱tR/minRART柱溫40 C柱溫40c甲醇1.8280.126正戊烷1.6820.032乙醇2.0900.268正己烷1.7870.075乙睛2.1790.315乙醛1.8420.097內(nèi)酮2.2760.3681.9260.131異丙醇2.3560.411異丙醒1.9430.138正戊烷2.4870.481叔丁基甲基醍2.0050.163乙醛2.4890.482正庚烷2.0210.169甲酸乙酯2.5

17、220.501環(huán)己烷2.1590.225二甲氧基甲烷2.5840.5341,1-二氯乙烯2.2090.2451,1-二氯乙烯2.6090.547二甲氧基甲烷2.2430.259乙酸甲酯2.6350.561甲基環(huán)己烷2.4050.324二氯甲烷2.6550.572內(nèi)酮2.8760.515硝基甲烷2.8070.654甲酸乙酯2.9670.551止丙醇2.9820.748乙酸甲酯3.0000.5641,2-二氯乙烯3.109.8171, 2-二氯乙烯3.3470.705叔丁基甲基醍3.2520.894四氫吠喃3.4030.727.酮3.4491.000甲基四氫吠喃3.4810.758仲丁醇3.666

18、1.117四氯化碳3.6350.821正己烷3.8981.2421,1,1-三氯乙烷3.6530.828異丙醒3.9081.247乙酸乙酯3.8100.891乙酸乙酯3.9131.250乙酸異丙酯3.9800.960三氯甲烷3.9541.272甲醇4.0620.993四氫吠喃4.2641.439酮4.0791.000異丁醇4.2641.4401,2-二甲氧基乙烷4.6041.2121,2-二氯乙烷4.5171.576甲基異內(nèi)基酮4.7161.2571,1,1-三氯乙烷4.8081.733二氯甲烷4.7581.274甲基異內(nèi)基酮4.9761.823異丙醇4.8221.3001,2-二甲氧基乙烷4

19、.9851.828乙醇4.9751.362苯5.2811.988苯4.9771.362乙酸異丙酯5.3112.004乙酸丙酯6.0201.784止醇5.3402.019三氯乙烯6.6432.035四氯化碳5.4702.089甲基異基酮7.2022.261環(huán)己烷5.5832.150乙睛7.3682.328甲基四氫吠喃5.6762.201乙酸異酯7.4972.380三氯乙烯6.7602.785三氯甲烷7.9852.577二氧六環(huán)6.8232.819仲丁醇8.3902.7406.9572.8918.7462.884正庚烷7.4343.148止丙醇9.2383.083乙酸丙酯4.4783.172二氧六

20、環(huán)10.3353.526甲基環(huán)己烷8.6283.7921,2-二氯乙烷10.8273.724甲基異基酮8.7382.851乙酸丁酯11.0123.7993-甲基-1-丁醇8.8703.922甲基基酮11.4863.990口比咤9.2834.145甲烷1.60211.1805.168柱溫80c正戊醇11.3825.276異丁醇3.5773.045甲烷1.594止醇4.4604.334柱溫80 c硝基甲烷4.8854.948乙酸異酯3.6112.099異丙基苯5.2885.543甲基基酮3.8592.345口比咤5.6256.035乙酸丁酯4.2992.7783-甲基-1-丁醇5.9346.486

21、氯苯5.2533.726氯苯6.4397.223甲氧基苯7.4365.890正戊解7.3328.527異丙基苯8.1486.589.酮2.1761.000酮2.5021.000甲烷1.491甲烷1.493柱溫120c柱溫120c甲氧基苯3.8379.890四氫化泰8.06729.609四氫化泰7.42724.484酮1.6301.000酮1.6501.000甲烷1.405甲烷1.404附表3常見有機溶劑在程序升溫法測定時相對于丁酮的保留值參考值非極性色譜柱極性色譜柱溶劑名稱tR/minRART溶劑名稱tR/minRART甲醇1.8460.127正戊烷1.6910.033乙醇2.1210.272

22、正己烷1.8070.076乙睛2.2010.314乙醛1.8560.094內(nèi)酮2.3030.3671.9570.131異丙醇2.4010.419異丙醒1.9660.135正戊烷2.5120.477叔丁基甲基醍2.0530.167乙醛2.5190.481正庚烷2.0630.171甲酸乙酯2.5440.494環(huán)己烷2.2170.228二甲氧基甲烷2.6110.5291,1-二氯乙烯2.2670.2461,1-二氯乙烯2.6230.535二甲氧基甲烷2.3030.260乙酸甲酯2.6650.558甲基環(huán)己烷2.4880.328二氯甲烷2.6740.562內(nèi)酮2.9880.513硝基甲烷2.8390.

23、649甲酸乙酯3.0940.552止丙醇3.0510.760乙酸甲酯3.1260.5641,2-二氯乙烯3.1280.8011, 2-二氯乙烯3.5110.707叔丁基甲基醍3.3020.892四氫吠喃3.5610.725.酮3.5071.000甲基四氫吠喃3.6530.759仲丁醇3.7561.131四氯化碳3.8210.822正己烷3.9661.2411,1,1-三氯乙烷3.8330.826異丙醒3.9710.244乙酸乙酯4.0170.894乙酸乙酯3.9811.249乙酸異丙酯4.2070.964三氯甲烷4.0050.262甲醇4.2950.997四氫吠喃4.3870.462酮4.3031.000異丁醇4.3971.4681,2-二甲氧基乙烷4.8751.2121,2-二氯乙烷4.61241.581甲基異內(nèi)基酮5.0051.2601,1,1-三氯乙烷4.8431.702二氯甲烷5.0411.273甲基異內(nèi)基酮5.0871.830異丙醇5.0691.2841,2-二甲氧基乙烷5.0991.83