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1、西南大學(xué) 網(wǎng)絡(luò)與繼續(xù)教育學(xué)院 歡迎您! %E9%97%AB%E6%96%87%E9%BE%99 同學(xué) 學(xué)號(hào): 窗體頂端單項(xiàng)選擇題 1、 下列哪一項(xiàng)引起DNA移碼突變?1. DNA鏈缺失一個(gè)核苷酸 2. DNA中的胞嘧啶轉(zhuǎn)換為尿嘧啶 3. DNA中的腺嘌呤轉(zhuǎn)換為鳥嘌呤 4. DNA中的鳥嘌呤顛換為胸腺嘧啶 2、 下列有關(guān)DNA復(fù)制的論述,哪一項(xiàng)是正確的?1. 隨從鏈?zhǔn)沁B續(xù)合成的 2. 新鏈合成的方向與復(fù)制叉前進(jìn)方向相反者,稱領(lǐng)頭鏈 3. 新鏈合
2、成的方向與復(fù)制叉前進(jìn)方向相同者,稱領(lǐng)頭鏈 4. 領(lǐng)頭鏈?zhǔn)遣贿B續(xù)合成的 3、 下列何者是DNA復(fù)制的底物?1. dTTP 2. dGDP 3. ATP 4. dUTP 4、 在蛋白質(zhì)的生物合成過程中,下列哪一步?jīng)]有mRNA參與1. 翻譯的模板與核糖體結(jié)合 2. 氨酰tRNA識(shí)別密碼子 3. 起始因子的釋放 4. 催化肽鍵的形成 5、 下列有關(guān)DNA聚合酶I的論述,哪一項(xiàng)是錯(cuò)誤的?1. 沒有5-3,外切酶活性 2. 是復(fù)制酶,又是修復(fù)酶 3. 有3-5外切酶活性 4. 有5
3、一3聚合活性 6、在原核生物復(fù)制子中以下哪種酶除去RNA引發(fā)體并加入脫氧核糖核苷酸?( )1. F. DNA聚合酶III 2. DNA聚合酶II 3. DNA聚合酶I 4. 外切核酸酶MFI 5. DNA連接酶 7、 參與DAN復(fù)制的酶和蛋白質(zhì)因子包括:DNA聚合酶III;解鏈蛋白和解旋蛋白;DNA聚合酶I;RNA聚合酶;DNA連接酶。它按如下順序工作:1. 、 2. 、 3. 、 4. 、 5. 、 8、證明DNA是遺傳物質(zhì)的兩個(gè)關(guān)鍵性實(shí)驗(yàn)是:肺炎球菌在老鼠體內(nèi)的毒性和T2噬菌體感染大腸桿菌。這兩個(gè)實(shí)驗(yàn)中主要
4、的論點(diǎn)證據(jù)是( )。1. DNA是不能在生物體間轉(zhuǎn)移的,因此它一定是一種非常保守的分子 2. 生物體吸收的外源DNA(而并非蛋白質(zhì))改變了其遺傳潛能 3. 從被感染的生物體內(nèi)重新分離得到DNA作為疾病的致病劑 4. 真核心生物、原核生物、病毒的DNA能相互混合并彼此替代 5. DNA突變導(dǎo)致毒性喪失 9、下列除哪個(gè)外都是原核細(xì)胞中蛋白質(zhì)生物合成的必要步驟:1. 氨酰-tRNA與核糖體的70S亞基結(jié)合 2. 氨酰-tRNA與核糖體的30S亞基結(jié)合 3. 氨酰-tRNA合成酶催化氨基酸與核糖體結(jié)合
5、60; 4. 70S的核糖體分離形成30S和50S兩個(gè)亞基 10、Shine-Dalgarno順序(SD-順序)是指:( )。1. 啟動(dòng)基因的順序特征 2. 在DNA分子的起始碼上游8-13個(gè)核苷酸處的順序 3. 在mRNA分子的起始碼上游8-13個(gè)核苷酸處的順序 4. 16srRNA3'端富含嘧啶的互補(bǔ)順序 11、 細(xì)菌DNA復(fù)制過程中不需要:1. 一小段RNA作引物 2. 限制性內(nèi)切酶的活性 3. 脫氧三磷酸核苷酸 4. DNA片段作模板 12、DNA在10nm纖絲中壓縮多少倍?(
6、60; )1. 40倍 2. 10倍 3. 6倍 4. 240倍 13、 下列有關(guān)DNA聚合酶III的論述,哪一項(xiàng)是錯(cuò)誤的?1. 有5-3聚合活性 2. 有5-3,外切酶活性 3. 有3-5外切酶活性 4. 是復(fù)制酶 14、蛋白質(zhì)生物合成的方向是( )。1. 從CN端 2. 定點(diǎn)雙向進(jìn)行 3. 從NC端 4. 從N端、C端同時(shí)進(jìn)行 15、 小白鼠的基因組比E.co1i的基因組長600多倍,但是復(fù)制所需要的時(shí)間僅長10倍因?yàn)椋?. 小白鼠基因組含有多個(gè)復(fù)制起點(diǎn),E.c
7、o1i的基因組只含有一個(gè)復(fù)制起點(diǎn)。 2. 染色質(zhì)蛋白加速小白鼠DNA的復(fù)制。 3. 小白鼠DNA聚合酶合成新鏈的速度比E.co1i DNA聚合酶快60倍。 4. 在細(xì)胞中小白鼠基因組不全部復(fù)制。 16、 DNA半保留復(fù)制時(shí),如果一個(gè)完全放射標(biāo)記的雙鏈DNA分子在不含放射物的溶液中復(fù)制兩輪,共產(chǎn)生四個(gè)DNA分子,其放射性為:1. 半數(shù)分子的兩條鏈有放射性 2. 半數(shù)分子無放射性 3. 所有分子有放射性 4. 一個(gè)分子的兩條鏈都有放射性 17、 下列敘述正確的是:1. E. 氨酰-tRNA合成酶催化氨基酸與mRNA結(jié)合。 2. t
8、RNA與氨基酸通過反密碼子相互識(shí)別。 3. tRNA的作用是攜帶相應(yīng)的氨基酸到核糖體上,參與蛋白質(zhì)的合成 4. 蛋白質(zhì)的生物合成發(fā)生在線粒體內(nèi)。 18、 下列與DNA解鏈無關(guān)的是:1. 單鏈DNA結(jié)合蛋白 2. 拓?fù)洚悩?gòu)酶 3. DNA Helicase 4. DNA酶 19、真核生物的延伸因子是( )。1. EF1 2. EFTu 3. EFG 4. EF2 20、 氨酰tRNA合成酶可以:1. 識(shí)別密碼子 2. 識(shí)別氨基酸 3. 識(shí)別mRNA 4. 識(shí)別反密碼子
9、 21、 在E.co1i細(xì)胞中DNA聚合酶I的作用主要是:1. 岡崎片段的連接 2. DNA合成的起始 3. 切除RNA引物 4. DNA復(fù)制 22、從一個(gè)復(fù)制起點(diǎn)可分出幾個(gè)復(fù)制叉?( )1. 1 2. 3 3. 2 4. 4個(gè)以上5. 4 23、 大腸桿菌DNA連接酶的催化活性是:1. 以ATP作能源 2. 催化兩條游離的單鏈DNA分子形成磷酸二酯鏈 3. 在雙螺旋DNA一條鏈斷開處形成磷酸二酯鍵 4. 以DNA作能源 24、 染色質(zhì)非組蛋白的功能不包括1. 復(fù)制 2. 結(jié)構(gòu) 3
10、. 核小體包裝 4. 染色體分離 25、 當(dāng)細(xì)胞喪失端粒酶活性后,不會(huì)出現(xiàn)以下哪種情形?1. C. 分裂30-50次后,出現(xiàn)衰老跡象并死亡 2. 大量體細(xì)胞具有了無限分裂的能力 3. 隨著細(xì)胞每次分裂,端粒逐漸縮短 4. 免疫系統(tǒng)逐步喪失某些防御機(jī)制 多項(xiàng)選擇題 26、蛋白質(zhì)生物合成過程中,下列哪些步驟需要消耗能量( ) 1. 氨基酸分子的活化形成 2. 氨酰tRNA進(jìn)入核糖體A位 3. 核糖體移位 4. 70S起始復(fù)合物的形
11、成 5. 肽鍵 27、細(xì)胞器DNA能夠編碼下列哪幾種基因產(chǎn)物? 1. 4.5SrRNA 2. tRNA 3. 小亞基rRNA 4. mRNA 5. 5SrRNA 6. 大亞基rRNA 28、下列哪些基因組特性隨生物的復(fù)雜程度增加而上升?( ) 1. 基因組大小 2. 單個(gè)基因的平均大小 3. 基因組中基因的密度 4. 基因數(shù)量
12、29、下列哪些因子是真核生物蛋白質(zhì)合成的起始因子( ) 1. eIF4A 2. eIF2 3. IF1 4. eIF4 5. IF2 30、下列關(guān)于DNA復(fù)制的說法正確的有: 1. 涉及RNA引物的形成 2. 需要DNA聚合酶 3. 按全保留機(jī)制進(jìn)行 4. 需要DNA連接酶的作用 31、 下述特征是所有(原核生物、真核生物和病毒)復(fù)制起始位點(diǎn)都共有的是: 1. 多聚體DNA結(jié)合蛋白專一性識(shí)別這些短的重復(fù)序列
13、0; 2. 起始位點(diǎn)旁側(cè)序列是A-T豐富的,能使DNA螺旋解開 3. 起始位點(diǎn)是形成穩(wěn)定二級(jí)結(jié)構(gòu)的回文序列 4. 起始位點(diǎn)是包括多個(gè)短重復(fù)序列的獨(dú)特DNA片段 32、滾環(huán)復(fù)制( ) 1. 產(chǎn)生的復(fù)制子總是雙鏈環(huán)狀拷貝 2. 是噬菌體DNA在細(xì)菌中最通常的一種復(fù)制方式 3. 是細(xì)胞DNA的主要復(fù)制方式 4. 復(fù)制子中編碼切口蛋白的基因的表達(dá)是自動(dòng)調(diào)節(jié)的 5. 可以使復(fù)制子大量擴(kuò)增 33、蛋白質(zhì)生物合成中的終止密碼是(
14、60; )。 1. UAA 2. UAU 3. UAC 4. UAG 5. UGA 34、 對(duì)于一個(gè)特定的起點(diǎn),引發(fā)體的組成包括( ) 1. 在起始位點(diǎn)與DnaG引發(fā)酶相互作用的一個(gè)寡聚酶 2. 一個(gè)防止DNA降解的單鏈結(jié)合蛋白 3. DnaB解旋酶、DnaG引發(fā)酶和DNA聚合酶 4. DnaB解旋酶和附加的DnaC、DnaT、PriA等蛋白 35、DNA的變性( ) 1. 可以由低溫產(chǎn)生 2. 包括氫鍵的斷裂 3
15、. 包括雙螺旋的解鏈 4. 是磷酸二酯鍵的斷裂 5. 是可逆的 36、DNA分子中的超螺旋( ) 1. 是真核生物DNA有比分裂過程中固縮的原因 2. 可在一個(gè)閉合的DNA分子中形成一個(gè)左手雙螺旋。負(fù)超螺旋是DNA修飾的前提,為酶接觸DNA提供了條件 3. 在線性和環(huán)狀DNA中均有發(fā)生。纏繞數(shù)的增加可被堿基配對(duì)的改變和氫鍵的增加所抑制 4. 僅發(fā)生于環(huán)狀DNA中。如果雙螺旋在圍繞其自身的軸纏繞后(即增加纏繞數(shù))才閉合,則雙螺旋在扭轉(zhuǎn)力的作用下,處于靜止
16、0; 5. 是雙螺旋中一條鏈繞另一條鏈的旋轉(zhuǎn)數(shù)和雙螺旋軸的回轉(zhuǎn)數(shù)的總和 37、蛋白質(zhì)生物合成具有下列哪些特征( )。 1. 合成肽鏈由C端向N端不斷延長 2. 新生肽鏈需加工才能成為活性蛋白質(zhì) 3. 每延長一個(gè)氨基酸必須經(jīng)過進(jìn)位、轉(zhuǎn)肽、移位、脫落 4. 需要消耗能量 5. 氨基酸必須活化落四個(gè)步驟 判斷題 38、核糖體的活性中心“A”位和“P”位都主要在大亞基上。1. A.2. B.×
17、60;39、密碼子在mRNA上的閱讀方向?yàn)?3。1. A. 2. B.×40、每種氨基酸只能有一種特定的tRNA與之對(duì)應(yīng)。1. A.2. B.× 41、拓?fù)洚悩?gòu)酶I之所以不需要ATP來斷裂和重接DNA鏈,是因?yàn)榱姿岫ユI的能量被暫儲(chǔ)存在酶活性位點(diǎn)的磷酸酪氨酸連接處。1. A. 2. B.×42、DNA的復(fù)制需要DNA聚合酶和RNA聚合酶。1. A. 2. B.×43、只要子鏈和親本鏈中的一條或兩條被甲基化,大腸桿菌中的錯(cuò)配校正系統(tǒng)就可以把它們區(qū)別開來,但如果兩條鏈都沒
18、有甲基化則不行。1. A.2. B.× 44、在真核生物染色體DNA復(fù)制期間,會(huì)形成鏈狀DNA。1. A.2. B.× 45、在先導(dǎo)鏈上DNA沿53方向合成,在后隨鏈上則沿35方向合成。1. A.2. B.× 46、氨基酸活化時(shí),在氨酰-tRNA合成酶的催化下,由ATP供能,消耗個(gè)高能磷酸鍵。1. A.2. B.× 47、構(gòu)成密碼子和反密碼子的堿基都只是A、U、C、G。1. A.2. B.× 48、衛(wèi)星DNA在強(qiáng)選擇壓力下存在。1. A
19、.2. B.× 主觀題49、 大腸桿菌某一多肽基因的編碼鏈的序列是:5ACAATGTATGGTAGTTCATTATCCCGGGCGCAAATAACAAACCCGGGTTTC3(1)寫出該基因的無意義鏈的序列以及它編碼的mRNA的序列。(2)預(yù)測它能編碼多少個(gè)氨基酸。(3)標(biāo)出該基因上對(duì)紫外線高敏感位點(diǎn)。參考答案:答案:(1)某一基因的編碼鏈的堿基序列與其編碼的mRNA的序列是一致的,只不過是用U代替了T。因此該基因編碼的mRNA的序列是:5ACAAUGUAUGGUAGUUCAUUAUCCCGGGCGCAAAUAACAAACCCGGGUUUC3該基因的無
20、意義鏈的序列編碼鏈互補(bǔ):5GAAACCCGGGTTTGTTATTTGCGCCCGGGATAATGAACTACCATACATTGT3(2)能編碼9個(gè)氨基酸的多肽,因?yàn)樵搈RNA所含有的ORF序列為:AUGGUAGUUCAUUAUCCCGGGCGCAAAUAA(3)5ACAATGTATGGTAGTTCATTATCCCGGGCGCAAATAACAAACCCGGGTTTC3 50、現(xiàn)分離了一DNA片段,可能含有編碼多肽的基因的前幾個(gè)密碼子組成如下:5-CGCAGGATCAGTCGATGTCCTGTG -3 3-GCGTCCTAGTCAGCTACAGGACAC-5&
21、#160; (1)哪一條鏈作為轉(zhuǎn)錄的模板鏈?(2)mRNA的順序是什么?(3)此mRNA能形成二級(jí)結(jié)構(gòu)嗎?(4)翻譯從哪里開始?朝哪個(gè)方向進(jìn)行?(5)此DNA最可能是從原核細(xì)胞還是真核細(xì)胞中分離的?為什么?參考答案:(1)由于這段DNA片段含有編碼多肽的基因的起點(diǎn),則ATG序列會(huì)存在于其中一條鏈上。從給出的DNA片段可以看出 5-CGCAGGATCAGTCGATGTCCTGTG-3 鏈為編碼鏈(有意義鏈),而3-GCGTCCTAGTCAGCTACAGGACAC-5鏈為模板鏈(無意義鏈)。(2)mRNA的順序?yàn)椋?-CGCAGGAUCAGUCGUCGAUGUCCUGUG -3(3)m
22、RNA能形成二級(jí)結(jié)構(gòu)(4)翻譯從AUG起始密碼子開始,按5- 3方向進(jìn)行。(5)此DNA樣品可能是從原核細(xì)胞中分離得到的。因?yàn)樵趍RNA的起始密碼子的上游有AGGA序列,是原核生物mRNA的SD序列的特征,能與16S rRNA互補(bǔ)配對(duì)。 51、題目.docx參考答案:答案:1(5' m7G cap) + 100(exon 1)+ 50(exon 2)+ 25(exon 3)+ 200poly(A)tail = 376 堿基 52、盡管DNA聚合酶催化聚合反應(yīng)既需要模板,又需要引物。但下面的單鏈DNA卻可以直接作為DNA聚合酶的有效的底物。試解釋其中的原因,并寫出由DNA聚合
23、酶催化而形成的終產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)。3- OH-TGGCTCATAGCCGGAGCCCTAACCGTAGACCACGAATAGCATTAGGp -5參考答案:答案1.docx答案.jpg53、簡述真核生物轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控機(jī)制? 參考答案:答:真核生物在轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控主要是通過反式作用因子、順式作用元件和RNA聚合酶的相互作用來完成的,主要是反式作用因子結(jié)合順式作用元件后影響轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合物的形成過程。A、轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合物的形成:真核生物RNA聚合酶識(shí)別的是由通用轉(zhuǎn)錄因子與DNA形成的蛋白質(zhì)-DNA復(fù)合物,只有當(dāng)一個(gè)或多個(gè)轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合到DNA上,形成有功能的啟動(dòng)子,才能被RNA聚合酶所
24、識(shí)別并結(jié)合。轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合物的形成過程為:TFD結(jié)合TATA盒;RNA聚合酶識(shí)別并結(jié)合TFD-DNA復(fù)合物形成一個(gè)閉合的復(fù)合物;其他轉(zhuǎn)錄因子與RNA聚合酶結(jié)合形成一個(gè)開放復(fù)合物。在這個(gè)過程中,反式作用因子的作用是:促進(jìn)或抑制TFD與TATA盒結(jié)合;促進(jìn)或抑制RNA聚合酶與TFD-DNA復(fù)合物的結(jié)合;促進(jìn)或抑制轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合物的形成。B、反式作用因子:一般具有三個(gè)功能域(DNA識(shí)別結(jié)合域、轉(zhuǎn)錄活性域和結(jié)合其他蛋白結(jié)合域);能識(shí)別并結(jié)合上游調(diào)控區(qū)中的順式作用元件;對(duì)基因的表達(dá)有正性或負(fù)性調(diào)控作用。54、簡述蛋白質(zhì)生物合成過程。 參考答案:蛋白質(zhì)合成可分四個(gè)步驟,以大腸桿菌為例:(1)氨基酸的活化:游離
25、的氨基酸必須經(jīng)過活化以獲得能量才能參與蛋白質(zhì)合成,由氨酰-tRNA合成酶催化,消耗1分子ATP,形成氨酰-tRNA。(2)肽鏈合成的起始:由起始因子參與,mRNA與30S小亞基、50S大亞基及起始甲酰甲硫氨酰-tRNA(fMet-tRNAt)形成70S起始復(fù)合物,整個(gè)過程需GTP水解提供能量。(3)肽鏈的延長:起始復(fù)合物形成后肽鏈即開始延長。首先氨酰-tRNA結(jié)合到核糖體的A位,然后,由肽酰轉(zhuǎn)移酶催化與P位的起始氨基酸或肽?;纬呻逆I,tRNAf或空載tRNA仍留在P位最后核糖體沿mRNA53方向移動(dòng)一個(gè)密碼子距離,A位上的延長一個(gè)氨基酸單位的肽酰-tRNA轉(zhuǎn)移到P位,全部過程需延伸因子EF-
26、Tu、EF-Ts,能量由GTP提供。(4)肽鏈合成終止,當(dāng)核糖體移至終止密碼UAA、UAG或UGA時(shí),終止因子RF1、RF-2識(shí)別終止密碼,并使肽酰轉(zhuǎn)移酶活性轉(zhuǎn)為水解作用,將P位肽酰-tRNA水解,釋放肽鏈,合成終止。 55、 基因與多肽鏈有什么關(guān)系?參考答案:多肽鏈?zhǔn)腔虻木幋a產(chǎn)物,基因的堿基序列與蛋白質(zhì)分子中氨基酸的序列之間的對(duì)應(yīng)關(guān)系是通過遺傳密碼實(shí)現(xiàn)的。 56、區(qū)別可誘導(dǎo)和可阻遏的基因調(diào)控。 參考答案:答:在可誘導(dǎo)的系統(tǒng)中,操縱子只有在誘導(dǎo)物存在時(shí)才開放,沒有誘導(dǎo)物時(shí)阻礙物結(jié)合在操縱子上阻止結(jié)構(gòu)基因的轉(zhuǎn)錄。存在誘導(dǎo)物時(shí),它與阻遏物結(jié)合,使之變構(gòu)不再與操縱子
27、結(jié)合,打開操縱子。酶的誘導(dǎo)是分解途徑特有的,誘導(dǎo)物就是酶的底物或者底物的類似物。在可阻礙系統(tǒng)中操縱子被終產(chǎn)物所關(guān)閉。不存在終產(chǎn)物時(shí),阻礙物不能結(jié)合到操縱子上,因此操縱子開放;存在終產(chǎn)物時(shí),它結(jié)合到阻礙物上,改變后者的構(gòu)象,使其能結(jié)合到操縱子上,關(guān)閉操縱子。酶阻礙是合成代謝的特點(diǎn)。 57、簡述分子生物學(xué)在醫(yī)藥工業(yè)中的應(yīng)用。參考答案:1、DNA重組技術(shù)與新藥研究;(1)重組微生物是生產(chǎn)有用小分子代謝產(chǎn)物的反應(yīng)器;(2)研制亞單位和合成肽疫苗;(3)應(yīng)用基因工程技術(shù)生產(chǎn)細(xì)胞因子、激素及血液因;(4)利用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物或轉(zhuǎn)基因植物生產(chǎn)藥用蛋白;(5)開發(fā)第二代生物技術(shù)藥品,如糖(糖肽+有機(jī)小分子
28、化合物)、核酸(反義核苷酸和肽核酸)和脂類(脂蛋白酶基因LPL基因)等藥物。2、藥物基因組學(xué)和藥物蛋白質(zhì)組學(xué)等生物技術(shù)手段已成為全新的現(xiàn)代藥物研究的方法,對(duì)于發(fā)現(xiàn)新的藥物治療靶,鑒定先導(dǎo)化合物,論證它們的藥理作用,研究它們的代謝規(guī)律及毒副作用的有效方法和提高藥物發(fā)現(xiàn)和藥物研究的速度和效率,指導(dǎo)臨床研究和市場化策略等方面發(fā)揮重大的作用。 58、RNA的功能主要是參與蛋白質(zhì)的生物合成,起著遺傳信息由DNA到蛋白質(zhì)的中間傳遞體核心功能,此外它的功能多樣性還表現(xiàn)在哪些方面?參考答案:20世紀(jì)80年代對(duì)RNA的研究揭示了RNA功能的多樣性,發(fā)現(xiàn)它不僅僅作為遺傳信息由DNA到蛋白質(zhì)的中間傳遞體
29、的核心功能,還有以下5種功能:控制蛋白質(zhì)的生物合成;作用于RNA轉(zhuǎn)錄后的加工與修飾;參與基因表達(dá)的調(diào)控;具有生物催化劑的功能;遺傳信息的加工與進(jìn)化。RNA所具有的諸多功能都與生物機(jī)體的生長發(fā)育密切相關(guān),它的核心作用是基因表達(dá)的信息加工和調(diào)節(jié)。 59、衰減作用如何調(diào)控E.coli中色氨酸操縱子的表達(dá)?參考答案:答:衰減作用根據(jù)tRNATrp的數(shù)量去調(diào)節(jié)Trp操縱子的表達(dá),而tRNATrp的數(shù)量又取決于細(xì)胞中Trp的水平.Trp操縱子mRNA前導(dǎo)序列很長,包括了編碼一個(gè)長14個(gè)氨基酸的多肽所需的全部遺傳信息(包括一個(gè)AUG起始密碼和一個(gè)UGA終止密碼)。這個(gè)多肽含有兩個(gè)相鄰的Trp殘基
30、,因此色氨酰-tRNA對(duì)前導(dǎo)肽的翻譯是必不可少的。衰減作用發(fā)生的必要條件是:(1)翻譯產(chǎn)生前導(dǎo)多肽;(2)轉(zhuǎn)錄和翻譯的偶聯(lián)。這樣,當(dāng)RNA聚合酶轉(zhuǎn)錄前導(dǎo)序列的同時(shí)核糖體就緊接著結(jié)合到新生的mRNA上翻譯產(chǎn)生前導(dǎo)肽。mRNA的前導(dǎo)序列包括兩對(duì)相似的反向重復(fù)序列(圖A7.7中用1,2,3和4表示)。序列2與序列1和3部分互補(bǔ),這樣1+2或2+3或3+4或1+2和3+4都能通過堿基配對(duì)形成莖環(huán)結(jié)構(gòu)。由序列3和4配對(duì)形成的莖環(huán)結(jié)構(gòu)與Trp操縱子的終止子基本相同。和終止子一樣,在其莖的3一側(cè)具有7個(gè)連續(xù)的U形成的尾巴。當(dāng)形成這種衰減子結(jié)構(gòu)時(shí),它就能像終止子一樣使轉(zhuǎn)錄終止。注意到兩個(gè)Trp密碼位于序列1內(nèi)
31、,而且前導(dǎo)肽的終止密碼在序列l(wèi)和2之間。這樣,如果色氨酸的量是充足的,那么,tRNATrp的含量也能夠使前導(dǎo)肽的翻譯進(jìn)行到終止密碼UGA。結(jié)合的核糖體覆蓋了l和2兩個(gè)區(qū)域,這樣1和2、2和3兩個(gè)序列就不能形成莖環(huán)結(jié)構(gòu),這就使3,4兩個(gè)序列形成衰減子環(huán)并起到終止子的作用,導(dǎo)致RNA聚合酶分子脫離DNA模板。另一方面,如果色氨酸缺乏,那么存在的色氨酰-tRNA也很少,導(dǎo)致核糖體停止在兩個(gè)Trp密碼之前,這樣核糖體僅蓋住區(qū)域l,并在序列4被轉(zhuǎn)錄之前,序列2和序列3形成莖環(huán)結(jié)構(gòu)。這個(gè)結(jié)構(gòu)的形成阻止了序列3與序列4形成終止子結(jié)構(gòu)。于是,出現(xiàn)通讀,切操縱子的其他部分被繼續(xù)轉(zhuǎn)錄。事實(shí)上,是mRNA上核糖體所
32、在的位置決定mRNA的二級(jí)結(jié)構(gòu)和衰減作用是否發(fā)生。 60、舉例說明生物信息學(xué)的研究方法參考答案:答:生物信息學(xué)是把基因組DNA序列信息分析作為源頭,找到基因組序列中代表蛋白質(zhì)和RNA基因的編碼區(qū);同時(shí),闡明基因組中大量存在的非編碼區(qū)的信息實(shí)質(zhì),破譯隱藏在DNA序列中的遺傳語言規(guī)律;在此基礎(chǔ)上,歸納、整理與基因組遺傳信息釋放及其調(diào)控相關(guān)的轉(zhuǎn)錄譜和蛋白質(zhì)譜的數(shù)據(jù),從而認(rèn)識(shí)代謝、發(fā)育、分化、進(jìn)化的規(guī)律。 生物信息學(xué)還利用基因組中編碼區(qū)的信息進(jìn)行蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)的模擬和蛋白質(zhì)功能的預(yù)測,并將此類信息與生物體和生命過程的生理生化信息相結(jié)合,闡明其分
33、子機(jī)理,最終進(jìn)行蛋白質(zhì)、核酸的分子設(shè)計(jì)、藥物設(shè)計(jì)和個(gè)體化的醫(yī)療保健設(shè)計(jì)。 首先,它需要一定的計(jì)算能力,包括相應(yīng)的軟、硬設(shè)備。要有各種數(shù)據(jù)庫或者能與國際、國內(nèi)的數(shù)據(jù)庫系統(tǒng)進(jìn)行有效的交流。要有發(fā)達(dá)、穩(wěn)定的互聯(lián)網(wǎng)絡(luò)系統(tǒng);同時(shí),生物信息學(xué)需要強(qiáng)有力的創(chuàng)新算法和軟件。沒有算法創(chuàng)新,生物信息學(xué)就無法獲得持續(xù)的發(fā)展。最后,它要與實(shí)驗(yàn)科學(xué),特別是與自動(dòng)化的大規(guī)模高通量的生物學(xué)研究方法與平臺(tái)技術(shù)建立廣泛、緊密的聯(lián)系。這些技術(shù),既是產(chǎn)生生物信息數(shù)據(jù)的主要方法,又是驗(yàn)證生物信息學(xué)研究結(jié)果的關(guān)鍵手段。61、怎樣證明DNA是遺傳物質(zhì)?參考答案:62、簡述RNAi的原理和應(yīng)用。參考答案:RNA干擾( RNA i
34、nterference, RNAi)是指雙鏈RNA誘導(dǎo)同源mRNA 降解導(dǎo)致基因表達(dá)抑制的現(xiàn)象,又稱基因沉默,是一種轉(zhuǎn)錄后基因沉默(post- transcriptional gene silencing, PTGS)現(xiàn)象,是生物體在進(jìn)化過程中抵御病毒感染及防御重復(fù)序列和突變引起基因組不穩(wěn)定的保護(hù)機(jī)制。RNA干擾(RNA interference, RNAi)是指在進(jìn)化過程中高度保守的、由雙鏈RNA(double-stranded RNA,dsRNA)誘發(fā)的、同源mRNA高效特異性降解的現(xiàn)象。 其機(jī)制分兩步:()長雙鏈被細(xì)胞源性的雙鏈特異的核酸酶切成個(gè)堿基對(duì)的短雙鏈,稱為小干擾性( )。小干擾
35、性與細(xì)胞源性的某些酶和蛋白質(zhì)形成復(fù)合體,稱為誘導(dǎo)的沉默復(fù)合體( ,),該復(fù)合體可識(shí)別與小干擾性有同源序列的,并在特異的位點(diǎn)將該切斷。 它的應(yīng)用:1.RNAi在探索基因功能中的應(yīng)用:由于RNAi技術(shù)可以利用siRNA或siRNA表達(dá)載體快速、經(jīng)濟(jì)、簡便的以序列特異方式剔除目的基因表達(dá),所以現(xiàn)在已經(jīng)成為探索基因功能的重要研究手段。同時(shí)siRNA表達(dá)文庫構(gòu)建方法的建立,使得利用RNAi技術(shù)進(jìn)行高通量篩選成為可能,對(duì)闡明信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路、發(fā)現(xiàn)新的藥物作用靶點(diǎn)有重要意義。 2.RNAi在基因治療領(lǐng)域中的應(yīng)用:RNAi作為一種高效的序列特異性基因剔除技術(shù)在傳染性疾病和惡性腫瘤基因治療領(lǐng)域發(fā)
36、展極為迅速。在利用RNAi技術(shù)對(duì)HIV-1、乙型肝炎、丙型肝炎等進(jìn)行基因治療研究中發(fā)現(xiàn),選擇病毒基因組中與人類基因組無同源性的序列作為抑制序列可在抑制病毒復(fù)制的同時(shí)避免對(duì)正常組織的毒副作用。同時(shí)將抑制序列選擇在特定的位點(diǎn),可對(duì)部分有明確基因突變的惡性腫瘤細(xì)胞如含有BCL/ABL或AML1/MTG8融合基因的白血病細(xì)胞產(chǎn)生凋亡誘導(dǎo)作用。此外尚可通過使用腫瘤特異性啟動(dòng)子如hTERT啟動(dòng)子、survivin啟動(dòng)子或組織特異性啟動(dòng)子如酪氨酸酶啟動(dòng)子、骨鈣素啟動(dòng)子引導(dǎo)針對(duì)某些癌基因或抗凋亡分子的siRNA或shRNA表達(dá),從而達(dá)到特異性殺傷腫瘤細(xì)胞的目的。63、幾種不同真核生物的RNA聚合酶分別轉(zhuǎn)錄哪些
37、RNA?參考答案:真核生物RNA聚合酶轉(zhuǎn)錄45S rRNA前體,經(jīng)轉(zhuǎn)錄后加工產(chǎn)生5.8S rRNA、18S rRNA和28S rRNA。RNA聚合酶轉(zhuǎn)錄所有mRNA前體和大多數(shù)的核內(nèi)小RNA(scRNA)。RNA聚合酶轉(zhuǎn)錄tRNA、5S rRNA、U6snRNA和不同的胞質(zhì)小RNA(sc RNA)等小分子轉(zhuǎn)錄物。 64、研究DNA的一級(jí)結(jié)構(gòu)有什么重要的生物學(xué)意義?參考答案:所謂DNA的一級(jí)結(jié)構(gòu)就是指DNA分子中的核苷酸排列順序。生物的遺傳信息通過核苷酸不同的排列順序儲(chǔ)存在DNA分子中,DNA分子4種核苷酸千變?nèi)f化的序列排列即反映了生物界物種的多樣性。為了闡明生物的遺傳信息,首先要測
38、定生物基因組的序列。迄今已經(jīng)測定基因組序列的生物數(shù)以百計(jì)。DNA分子的一級(jí)結(jié)構(gòu)是DNA分子內(nèi)堿基的排列順序,DNA分子以密碼子的方式蘊(yùn)藏了所有生物的遺傳信息,任何一段DNA序列都可以反映出它的高度個(gè)體性或種族特異性。DNA一級(jí)結(jié)構(gòu)決定了二級(jí)結(jié)構(gòu),折疊成空間結(jié)構(gòu)。這些高級(jí)結(jié)構(gòu)又決定和影響著一級(jí)結(jié)構(gòu)的信息功能。研究DNA的一級(jí)結(jié)構(gòu)對(duì)闡明遺傳物質(zhì)結(jié)構(gòu)、功能以及它的表達(dá)、調(diào)控都是極其重要的。 65、hnRNA轉(zhuǎn)變成mRNA的加工過程包括哪幾步?參考答案:hnRNA轉(zhuǎn)變成mRNA的加工過程包括:5端形成特殊的帽子結(jié)構(gòu)(m7G5ppp5N1mpN2p-);在鏈的3端切斷并加上多聚腺苷酸(polyA);通過剪接除去由內(nèi)含子轉(zhuǎn)錄而來的序列;鏈內(nèi)部的核苷被甲基化。 66、PCR的基本原理? 參考答案:答:PCR是在試管中進(jìn)行的DNA復(fù)制反應(yīng),基本原理是依據(jù)細(xì)胞內(nèi)DNA半保留復(fù)制的機(jī)理,以及體外DNA分子于不同溫度下雙鏈和單鏈可以互相轉(zhuǎn)變的性質(zhì),人為地控制體外合成系統(tǒng)的溫度,以促使雙鏈DNA變成單鏈,單鏈DNA與人工合成的引物退火,然后耐熱DNA聚合酶以dNTP為原料使引物沿著單鏈模板延伸為雙鏈DNA。PCR全過程每一步的轉(zhuǎn)
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