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文檔簡介
1、39.(15分)家蠶細(xì)胞具有高效表達(dá)外源基因能力。將人干擾素基因?qū)爰倚Q細(xì)胞并大規(guī)模培養(yǎng),可以提取干擾素用于制藥。(1)進(jìn)行轉(zhuǎn)基因操作前,需用_酶短時(shí)處理幼蠶組織,以便獲得單個(gè)細(xì)胞。(2)為使干擾素基因在家蠶細(xì)胞中高效表達(dá),需要把來自cDNA文庫的干擾素基因片段正確插入表達(dá)載體的_和_之間;若要檢測干擾素基因在家蠶細(xì)胞中是否表達(dá),可以采用的方法有 、 。(3)通過PCR技術(shù)可大量獲取目的基因。PCR反應(yīng)體系主要包括:擴(kuò)增緩沖液(含Mg2+)、水,4種脫氧核糖苷酸、模板DNA、_和_。(4)培養(yǎng)家蠶細(xì)胞時(shí),貼壁生長的細(xì)胞會產(chǎn)生接觸抑制。通常將多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反應(yīng)器中,這樣可以_,增加培
2、養(yǎng)的細(xì)胞數(shù)量,也有利于空氣交換。答案:39. (1)胰蛋白酶(或膠原蛋白酶) (2)啟動子; 終止子; 分子雜交技術(shù); 抗原-抗體雜交技術(shù)(符合題意即可) (1分)(3)TaqDNA聚合酶(熱穩(wěn)定DNA聚合酶); 與干擾素基因特異性配對的DNA引物 (4)增大細(xì)胞貼壁生長的附著面積 40凝乳酶能凝固牛奶成奶酪,傳統(tǒng)上凝乳酶只能從小牛的胃中提取,價(jià)格昂貴。1990年,美國輝瑞公司生產(chǎn)出了食品產(chǎn)業(yè)所需的第一個(gè)基因工程產(chǎn)品CHYMAX牌凝乳酶,其化學(xué)組成與從小牛體內(nèi)提取的完全相同,但其更加物美價(jià)廉。生產(chǎn)過程如下
3、圖,據(jù)圖回答問題:基因工程技術(shù)生產(chǎn)凝乳酶的過程凝乳酶基因限制酶切割位點(diǎn)質(zhì)粒重組質(zhì)粒(1)過程中從小牛體內(nèi)提取的凝乳酶基因通常需要通過 技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增,該技術(shù)的原理是 。(2)基因工程的操作程序主要包括四個(gè)步驟,其核心是圖中過程 (填序號),在該過程中重要使用的工具酶是 。 (3)過程中理想的受體細(xì)胞是大腸桿菌,該類生物具有的特點(diǎn)是 ,要想把重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌,首先必須用 處理大腸桿菌,使其轉(zhuǎn)化為 細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒和大腸桿菌在緩沖液中混合培養(yǎng)完成轉(zhuǎn)化過程。 (4)過程將小牛凝乳酶基因轉(zhuǎn)入大腸桿菌后,能夠準(zhǔn)確表達(dá)的主要原因是 九、降鈣素是一種多肽類激素,臨床上用于治療骨質(zhì)疏松癥等。人的降鈣素活
4、性很低,半衰期較短。某科研機(jī)構(gòu)為了研發(fā)一種活性高、半衰期長的新型降鈣素,將能人工合成降鈣素的DNA與大腸桿菌的DNA分子進(jìn)行重組,并成功地在大腸桿菌中得以表達(dá)。57圖1示人工合成降鈣素DNA的過程。從預(yù)期新型降鈣素的功能出發(fā),推測相應(yīng)的脫氧核苷酸序列,并人工合成了兩條72個(gè)堿基的DNA單鏈,兩條鏈通過18個(gè)堿基對形成部分雙鏈DNA片段,再利用Klenow酶補(bǔ)平,獲得雙鏈DNA。從功能看,Klenow酶是一種_酶,合成的雙鏈DNA有_個(gè)堿基對。58圖2示利用基因工程獲得產(chǎn)品的過程。獲取目的基因的方法除圖1顯示的方法外還有 。59對圖2中a點(diǎn)的操作方法為 。60獲得的雙鏈DNA經(jīng)酶切后插入到大腸桿
5、菌質(zhì)粒中,篩選含重組質(zhì)粒的大腸桿菌并進(jìn)行DNA測序驗(yàn)證。1)大腸桿菌是理想的受體細(xì)胞,這是因?yàn)樗黖。2)要進(jìn)行重組質(zhì)粒的鑒定和選擇,大腸桿菌質(zhì)粒需要含有_。 61對符合設(shè)計(jì)要求的重組質(zhì)粒進(jìn)行酶切,已知限制酶I的識別序列和切點(diǎn)是GGATCC ,限制酶II的識別序列和切點(diǎn)是GATC。請寫出大腸桿菌質(zhì)粒被限制酶I切割后所形成的DNA片段兩個(gè)末端的堿基序列 。答案:(九) 57. DNA聚合酶 126 58. 從供體細(xì)胞的DNA中直接分離基因59. 用與目的基因同一種限制性內(nèi)切酶切割質(zhì)粒,露出相對應(yīng)的可進(jìn)行堿基配對的DNA鏈60. 1)繁殖快、單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對較少 2)標(biāo)記基因61. 35(8分下
6、圖為我國首例綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬的培育過程示意圖。請據(jù)圖回答:過程和必需用到的酶是 。重組質(zhì)粒除了帶有綠色熒光蛋白基因以外,還必須含有 才能構(gòu)成一個(gè)完整的基因表達(dá)載體。為了獲得更多的豬卵母細(xì)胞,可通過對母豬注射
7、 的方法,做超數(shù)排卵處理,并將所采集到的卵母細(xì)胞在體外培養(yǎng)到_期即可通過顯微操作將其細(xì)胞核去除。早期胚胎的培養(yǎng)液成分較復(fù)雜,除一些無機(jī)鹽和有機(jī)鹽類外,還需添加維生素、激素、氨基酸、核苷酸等營養(yǎng)成分,以及 等物質(zhì)。如果想同時(shí)得到多頭綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬,可通過胚胎分割技術(shù)得以實(shí)現(xiàn)。但應(yīng)選擇 的早期胚胎進(jìn)行操作,且要注意
8、 ,否則會影響分割后胚胎的恢復(fù)和進(jìn)一步發(fā)育。與一般的繁育良種動物方式相比較,胚胎移植的優(yōu)勢是 。答案:35、限制酶和DNA連接酶(缺一不可)啟動子、終止子和標(biāo)記基因(缺一不可)促性腺激素 減數(shù)第二次分裂中期血清發(fā)育良好形態(tài)正常的桑椹胚或囊胚 將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割
9、可充分發(fā)揮雌性優(yōu)良個(gè)體的繁殖潛力37.干擾素是治療癌癥的重要藥物,它必須從血中提取,每升人血只能提取0.5g,所以價(jià)格昂貴?,F(xiàn)在美國加利福尼亞州的基因公司用如下圖的方式生產(chǎn)干擾素。試分析原理和優(yōu)點(diǎn)。(1)從人的淋巴細(xì)胞中取出干擾素基因,一般可采用用 技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增,此基因在基因工程中稱為 。(2)此基因與細(xì)菌的質(zhì)粒相結(jié)合要依靠 酶,其作用部位是 ,然后將目的基因移植到酵母菌體內(nèi),酵母菌在基因工程中叫 。(3)為了明確干擾素基因在酵母菌體內(nèi)能否發(fā)揮功能作用,從分子水平看,首先要檢測其是否 。(4)科學(xué)家在培養(yǎng)轉(zhuǎn)基因植物時(shí),常用 中的質(zhì)粒做運(yùn)載體。質(zhì)粒是基因工程最常用的運(yùn)載體,它具備運(yùn)載體的條件:能
10、夠在宿主細(xì)胞中 并穩(wěn)定地保存;具有多個(gè) ,以便與外源基因連接;具有某些 ,便于進(jìn)行篩選。答案:37(10分)(1)PCR 目的基因 (2)DNA連接 磷酸二酯鍵 受體細(xì)胞 (3)轉(zhuǎn)錄出了mRNA (4)土壤農(nóng)桿菌 復(fù)制 限制酶切點(diǎn) 標(biāo)記基因 48. (8分)、克隆羊的成功轟動世界,它不僅奠定了克隆性治療疾病的基礎(chǔ),又解決了器官移植中供體不足的問題,同時(shí)也給人類帶來了一些過去尚未遇到的問題。下圖為人類對克隆羊技術(shù)的拓展和應(yīng)用,請據(jù)圖回答:(1) 圖中所涉及的現(xiàn)代生物技術(shù)有 和 等。(2) 下列有關(guān)胚胎移植的敘述正確的有 。A. 沖卵指的是從子宮中沖出胚胎,而非沖出卵子B. 只有供、受體生理環(huán)境高
11、度一致,移入受體的胚胎才能被接受C. 供體和受體要進(jìn)行免疫檢查,防止發(fā)生免疫排斥反應(yīng)D. 不同動物胚胎移植的時(shí)間不同,人的胚胎移植最好在原腸胚時(shí)期進(jìn)行(3) 圖中兩個(gè)克隆動物長大后,各方面特征與原型動物相同,這說明 具有全能性,早期胚胎發(fā)育在 階段以前的細(xì)胞是全能細(xì)胞。(4) 使用培養(yǎng)基進(jìn)行胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),通常要加入 等天然成分,除了保證被培養(yǎng)細(xì)胞處于無菌、無毒及充足氧氣的環(huán)境中,還需要保證細(xì)胞生活所需的 。(5) 圖中從“內(nèi)細(xì)胞團(tuán)到胚胎干細(xì)胞”的培養(yǎng)過程中,一般用 處理內(nèi)細(xì)胞團(tuán),使之分散成單個(gè)細(xì)胞。48. 答案: (8分)(1) 核移植 胚胎移植 細(xì)胞培養(yǎng)(任意兩個(gè)) (2) A、B (3
12、) 體細(xì)胞核 桑椹胚(4) 血清 溫度和pH (5) 胰蛋白酶40(15分)I科學(xué)家通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)獲得了含有人生長激素基因的奶牛,如果要加速轉(zhuǎn)基因奶牛的繁育,可以對此轉(zhuǎn)基因奶牛進(jìn)行克?。ㄈ缦聢D所示),請結(jié)合圖示回答下列問題:(1)在進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),要對取自轉(zhuǎn)基因奶牛的組織細(xì)胞進(jìn)行分離,形成單個(gè)細(xì)胞,這個(gè)過程中需要利用 酶處理。(2)形成重組細(xì)胞時(shí)應(yīng)選用 期的卵母細(xì)胞,并去掉其細(xì)胞核的原因是 。(3)如果重組細(xì)胞為貼附性細(xì)胞,則在進(jìn)行原代培養(yǎng)時(shí),會表現(xiàn)出 和 等特點(diǎn)。 (4)圖中犢牛并非是對體細(xì)胞核供體母牛100%的復(fù)制,其原因是主要有 、 。(5)上圖中所示的生物技術(shù)整體被稱為 。其包括的具體
13、生物技術(shù)有 、 等。轉(zhuǎn)基因奶牛的克隆成功,說明了動物_ 具有全能性。 答案:40.I(1)胰蛋白(或膠原蛋白)M中(或減中) 使克隆出的動物個(gè)體的遺傳物質(zhì)幾乎全部來自供體細(xì)胞(或“避免卵細(xì)胞中的遺傳物質(zhì)對后代造成干擾”,其他合理答案可酌情給分。2分)(3)貼壁生長(或細(xì)胞貼壁) 接觸抑制(兩空順序可以顛倒)(4)生物的性狀受細(xì)胞核基因和細(xì)胞質(zhì)基因共同控制 生物的性狀還受環(huán)境因素的影響(兩空順序可以顛倒。其他合理答案可酌情給分)(5)核移植(或體細(xì)胞核移植) 細(xì)胞培養(yǎng) 胚胎移植 體細(xì)胞的細(xì)胞核(2分)13.下圖是單克隆抗體制備流程階段示意圖。(1)_技術(shù)是單克隆抗體技術(shù)的基礎(chǔ)。(2)根據(jù)培養(yǎng)基的
14、用途分類,圖中HAT培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基。(3)單克隆抗體與常規(guī)的血清抗體相比,最大的優(yōu)越性是_。(4)動物細(xì)胞融合除了采用植物細(xì)胞原生質(zhì)體融合常用的誘導(dǎo)劑外,還可以采用_。(5)選出的雜交瘤細(xì)胞既具備骨髓瘤細(xì)胞的_特點(diǎn),又具備淋巴細(xì)胞的_特點(diǎn)。(6)淋巴細(xì)胞是由動物體的_中的_細(xì)胞分化、發(fā)育而來。(7)雜交瘤細(xì)胞從培養(yǎng)基中吸收葡萄糖、氨基酸的主要方式是_。答案:(1)動物細(xì)胞培養(yǎng)(微生物培養(yǎng))(2)選擇(3)特異性強(qiáng),靈敏度高(4)滅活的病毒(5)在體外大量增殖分泌特異性抗體(6)骨髓造血干(7)主動運(yùn)輸(主動吸收)9.下圖表示動物細(xì)胞培養(yǎng)程序圖,請據(jù)圖完成下列問題: (1)過程表示_。(2)
15、過程和用_處理組織塊或貼壁細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞,這樣做的目的是_。(3)和的過程都要把分散的細(xì)胞制成_。(4)過程進(jìn)行的細(xì)胞培養(yǎng)是_,細(xì)胞適于_生長增殖。(5)過程進(jìn)行的細(xì)胞培養(yǎng)是_,一般傳至_代后就不易傳下去了,傳至_代左右時(shí),增殖會逐漸緩慢,以至于完全停止,部分細(xì)胞的_會發(fā)生改變。繼續(xù)培養(yǎng)時(shí),少部分細(xì)胞發(fā)生了_,朝著等同于_的方向發(fā)展。(6)和過程都要放在_中培養(yǎng)。答案:(1)剪碎組織(2)胰蛋白酶解除由于接觸對細(xì)胞生長和繁殖的抑制(3)細(xì)胞懸液(4)原代培養(yǎng)貼壁(5)傳代培養(yǎng)101050細(xì)胞核型突變癌細(xì)胞(6)二氧化碳培養(yǎng)箱12下圖是單克隆抗體的制備過程,請據(jù)圖回答問題:(1)抗體的化學(xué)本
16、質(zhì)是_,主要分布于_中,也分布于組織液及外分泌液中。(2)若想通過過程獲得所需的B淋巴細(xì)胞,應(yīng)先對小鼠進(jìn)行的處理是_,該處理的實(shí)質(zhì)是在小鼠體內(nèi)發(fā)生_的過程。制備單克隆抗體的B淋巴細(xì)胞一般從_中采集。(3)過程除了采用誘導(dǎo)植物細(xì)胞原生質(zhì)體融合的方法外,還可以用_作為誘導(dǎo)劑。細(xì)胞兩兩融合后,可出現(xiàn)_種融合細(xì)胞,用于篩選雜交瘤細(xì)胞的是特定的_培養(yǎng)基。(4)過程中雜交瘤細(xì)胞從培養(yǎng)基中吸收葡萄糖、氨基酸的方式是_。(5)過程要挑選出能產(chǎn)生_的細(xì)胞群繼續(xù)培養(yǎng)?!敬鸢浮?1)球蛋白血清(2)注射(相應(yīng)的)抗原體液免疫脾(3)滅活(仙臺)病毒3選擇(4)主動運(yùn)輸(5)特定抗體(或所需抗體)8.讓羊產(chǎn)牛奶,科學(xué)
17、家對此作了相關(guān)的構(gòu)想,過程如下圖所示。請根據(jù)圖完成有關(guān)問題: (1)圖中涉及的現(xiàn)代生物技術(shù)有_(至少寫三種)。(2)小羊a、小羊b、小羊c的性狀表現(xiàn)_(填“相同”或“不同”),原因是_;小羊a與羊N呢?_,理由是_。(3)若研究發(fā)現(xiàn)羊N細(xì)胞中線粒體發(fā)達(dá),故而它的產(chǎn)奶率高,則小羊a會有這一優(yōu)良性狀嗎?_,判斷依據(jù)是_。(4)有人設(shè)想將羊體細(xì)胞與牛體細(xì)胞進(jìn)行融合,以獲得新物種“羊?!保阏J(rèn)為依據(jù)目前的生物技術(shù)和理論能否實(shí)現(xiàn)這一構(gòu)想?_,你的理由是_。答案:(1)基因工程、核移植、胚胎移植、胚胎分割、動物細(xì)胞培養(yǎng)(2)相同這些個(gè)體都是由同一個(gè)重組細(xì)胞發(fā)育形成的不完全相同小羊a細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)來自羊
18、O,生物體部分性狀屬于細(xì)胞質(zhì)遺傳(3)不會線粒體中的基因一般通過細(xì)胞質(zhì)傳遞給后代,小羊a的細(xì)胞質(zhì)主要來自于羊O(4)不能因?yàn)楦叨确只膭游矬w細(xì)胞的全能性受到限制,由羊體細(xì)胞和牛體細(xì)胞融合得到的雜交細(xì)胞不能正常發(fā)育成完整個(gè)體,即使得到一個(gè)個(gè)體也不能成為一個(gè)新物種,因?yàn)樗荒苷I常ň哂虚_放性,其他合理答案也可以)10.下圖是植物細(xì)胞雜交過程示意圖,請據(jù)圖分析完成下列問題:(1)步驟是_,最常用的方法是_。(2)步驟一般常用的化學(xué)試劑是,目的是_。(3)在利用雜種細(xì)胞培育成為雜種植株的過程中,運(yùn)用的技術(shù)手段是_,其中步驟相當(dāng)于_,步驟相當(dāng)于_。(4)植物體細(xì)胞雜交的目的是獲得新的雜種植株。使_能夠在新的植物體上有所表現(xiàn),其根本原因是_。(5)若遠(yuǎn)緣雜交親本A和B都是二倍體,則雜種植株為_倍體。(6)從理論上講,雜種植株的育性為_。若運(yùn)用傳統(tǒng)有性雜交方法能否實(shí)
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