液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀校準(zhǔn)規(guī)范

1、福建省地方計(jì)量技術(shù)規(guī)范 JJF（閩）10322010液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀校準(zhǔn)規(guī)范Calibration Specification for Liquid Chromatography Mass Spectrometers20100301發(fā)布 20100310實(shí)施福 建 省 質(zhì) 量 技 術(shù) 監(jiān) 督 局 發(fā)布液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用JJF（閩）10322010儀校準(zhǔn)規(guī)范Calibration Specification for Liquid Chromatography Mass spectrometers本規(guī)范經(jīng)福建省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局于2010年03月01日批準(zhǔn)，并自2010年03月10日起施行。歸 口

2、 單 位：福建省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局起 草 單 位：福建省計(jì)量科學(xué)技術(shù)研究所本規(guī)范由起草單位負(fù)責(zé)解釋本規(guī)范主要起草人：許 航（福建省計(jì)量科學(xué)技術(shù)研究所） 參加起草人： 楊乙強(qiáng)（泉州市產(chǎn)品質(zhì)量檢驗(yàn)所） 林 峰（福建省計(jì)量科學(xué)技術(shù)研究所） 陳小燕（福建省計(jì)量科學(xué)技術(shù)研究所） 蔡澤兵（漳州市計(jì)量所） 羅 峰（福建省計(jì)量科學(xué)技術(shù)研究所）目 錄1 范圍(1)2 引用文獻(xiàn)(1)3 術(shù)語(yǔ)和計(jì)量單位(1)3.1大氣壓離子化（atmospheric pressure ionization, API）(1)3.2質(zhì)荷比；m/z(1)3.3質(zhì)量范圍（mass range）(1)3.4原子質(zhì)量單位u（atomic mass

3、 unit）(1)3.5 分辨力（resolution）(1)3.6 信噪比（signal-to-noise ratio, S/N）(1)4 概述(2)5 計(jì)量性能要求(2)6 校準(zhǔn)條件(3)6.1實(shí)驗(yàn)室環(huán)境要求(3)6.2校準(zhǔn)設(shè)備及標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(3)7 校準(zhǔn)項(xiàng)目和校準(zhǔn)方法(3)7.1分辨力（3)7.2質(zhì)量準(zhǔn)確性（3)7.3質(zhì)量范圍（3)7.4信噪比（3)7.4.1 ESI正離子(4)7.4.2 ESI負(fù)離子(4)7.4.3 APCI正離子(4)7.5整機(jī)定量及定性重復(fù)性(4)8 校準(zhǔn)結(jié)果的處理(4)9 復(fù)校時(shí)間間隔(5)附錄 A 校準(zhǔn)證書(shū)內(nèi)頁(yè)格式（供參考）(6)附錄B 校準(zhǔn)記錄格式(7)液相色譜

4、質(zhì)譜聯(lián)用儀校準(zhǔn)記錄(7)液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀校準(zhǔn)記錄（續(xù)頁(yè)）(8)附錄C 不確定度評(píng)定(9)附錄D 碘化銫鈉（NaCSI）離子質(zhì)量（m/z）(10)液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀校準(zhǔn)規(guī)范1 范圍本規(guī)范適用于離子阱（QIT）、單級(jí)四極桿(Q)和三重四級(jí)桿(Q-Q-Q)液相色譜大氣壓離子化質(zhì)譜聯(lián)用儀（Liquid Chromatography Atmospheric Pressure Ionization Mass Spectrometers，簡(jiǎn)稱LC-APIMS）的校準(zhǔn)。其他類型液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀的校準(zhǔn)檢測(cè)可參照此規(guī)范進(jìn)行。2 引用文獻(xiàn) GB/T 6041-2002 質(zhì)譜分析方法通則JJG（教委）003-19

5、96有機(jī)質(zhì)譜儀檢定規(guī)程JJS K0136-2004 高效液相色譜法-質(zhì)譜分析法一般規(guī)則使用本規(guī)范時(shí)，應(yīng)注意使用上述引用文獻(xiàn)的現(xiàn)行有效版本。3 術(shù)語(yǔ)和計(jì)量單位3.1 大氣壓離子化（atmospheric pressure ionization, API）指在大氣壓條件下的質(zhì)譜離子化技術(shù)的總稱，主要包括電噴霧離子化（electrospray ionization ESI）和大氣壓化學(xué)離子化（atmospheric chemical ionization, APCI）。3.2 質(zhì)荷比；m/z 離子的質(zhì)量數(shù)和核電荷數(shù)之比。3.3 質(zhì)量范圍（mass range）質(zhì)譜儀能檢測(cè)的最低和最高質(zhì)荷比。3.4

6、原子質(zhì)量單位u（atomic mass unit）以質(zhì)量的1/12為一個(gè)質(zhì)量單位。3.5 分辨力（resolution）分辨兩個(gè)相鄰質(zhì)譜峰的能力(R)。以某離子峰高50%處的寬度（簡(jiǎn)稱半峰寬）表示，記為W1/2，單位u。3.6 信噪比（signal-to-noise ratio, ）在質(zhì)量色譜圖中，待測(cè)樣品信號(hào)強(qiáng)度與基線噪聲的比值，記為。4 概述液相色譜大氣壓離子化質(zhì)譜聯(lián)用儀(Liquid chromatography-atmospheric pressure ionization mass spectrometry, LC-APIMS)，主要由高效液相色譜儀，離子源，質(zhì)量分析器，檢測(cè)器，數(shù)據(jù)

7、采集及分析系統(tǒng)組成（如圖1.）。樣品經(jīng)色譜柱分離，由離子源離子化產(chǎn)生帶有一定電荷、質(zhì)量數(shù)的離子，離子在不同場(chǎng)中的運(yùn)動(dòng)行為不同，各種類型的質(zhì)量分析器利用該原理把電離子按質(zhì)荷比（m/z）分開(kāi)，得到依質(zhì)量順序排列的質(zhì)譜圖。通過(guò)對(duì)質(zhì)譜圖的分析處理，進(jìn)行定性、定量分析。圖1. LC-APIMS組成框圖5 計(jì)量性能要求LC-APIMS各項(xiàng)技術(shù)指標(biāo)見(jiàn)表1表1 LC-APIMS主要技術(shù)指標(biāo)技術(shù)指標(biāo)要 求分辨力（R）1 u質(zhì)量準(zhǔn)確性（）± 0.5 u質(zhì)量范圍*上限不低于1000 u信噪比ESI正離子 10 pg利血平，S/N50：1 10 pg利血平，S/N50：1APCI正離子 10 pg利血平，S

8、/N20：1 10 pg利血平，S/N20：1ESI負(fù)離子100 pg氯霉素，S/N20：1 100 pg氯霉素，S/N20：1整機(jī)定量重復(fù)性*RSD6%整機(jī)定性重復(fù)性*RSD2%*注：此處質(zhì)量范圍指分辨力和質(zhì)量準(zhǔn)確性均滿足技術(shù)指標(biāo)要求的儀器質(zhì)荷比范圍。6 校準(zhǔn)條件6.1 實(shí)驗(yàn)室環(huán)境要求 儀器室內(nèi)不得有強(qiáng)烈的機(jī)械振動(dòng)和電磁干擾，不得存放與實(shí)驗(yàn)無(wú)關(guān)的易燃、易爆和強(qiáng)腐蝕性氣體或試劑。 實(shí)驗(yàn)室溫度：2030；相對(duì)濕度：70。6.2 校準(zhǔn)設(shè)備及標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 利血平-70%乙腈水溶液：10.0 pg/L； 氯霉素-70%乙腈水溶液：10.0 pg/L； 碘化銫鈉-異丙醇水溶液：2 g/L碘化鈉，50 ng/

9、L碘化銫溶于50%異丙醇水溶液； 微量注射器：10 L，分度為0.1 uL。7 校準(zhǔn)項(xiàng)目和校準(zhǔn)方法 儀器穩(wěn)定后，執(zhí)行自動(dòng)調(diào)諧，直到自動(dòng)調(diào)諧通過(guò)后，開(kāi)始以下校準(zhǔn)。7.1 分辨力 按照調(diào)諧的條件，注入調(diào)諧液，考察附錄D中35個(gè)主要離子峰的分辨力，以半峰寬的最大值為儀器的分辨力W1/2。7.2 質(zhì)量準(zhǔn)確性儀器調(diào)諧過(guò)后，按照調(diào)諧的條件，注入碘化銫鈉調(diào)諧液，記錄附錄D中的主要離子的實(shí)測(cè)質(zhì)荷比，根據(jù)公式（1）計(jì)算質(zhì)量準(zhǔn)確性。 (1)式中第i個(gè)離子三次測(cè)量平均值，u；第i個(gè)離子理論值，u。7.3 質(zhì)量范圍將碘化銫鈉調(diào)諧溶液由質(zhì)譜進(jìn)樣口注入，并調(diào)入該類型的質(zhì)量校準(zhǔn)文件進(jìn)行調(diào)諧和校準(zhǔn)。使用標(biāo)準(zhǔn)荷質(zhì)比范圍（m/z

10、為50-2200）， 選擇SCAN模式，以碘化銫鈉溶液為調(diào)諧液進(jìn)行全范圍掃描，考察分辨力和質(zhì)量準(zhǔn)確性均滿足技術(shù)指標(biāo)要求的質(zhì)荷比范圍。7.4 信噪比以自動(dòng)或手動(dòng)調(diào)諧時(shí)確定的最佳值作為校準(zhǔn)參數(shù)。采用70：30乙腈水溶液為流動(dòng)相，使用C或相當(dāng)者為色譜分離柱。 ESI正離子注入10 pg的利血平溶液，選擇SIM模式（或MRM模式），提取特征離子（或m/z609特征離子的m/z195子離子），根據(jù)公式（2）計(jì)算信噪比。 (2)式中：提取離子（）的峰高； 基線噪聲。 ESI負(fù)離子注入100 pg的氯霉素溶液，選擇SIM模式（或MRM模式），提取m/z 321特征離子（或m/z 321特征離子的m/z 15

11、2子離子），根據(jù)公式（2）計(jì)算信噪比。7.4.3 APCI正離子注入10 pg的利血平溶液，選擇SIM模式（或MRM模式），提取特征離子（或m/z 609特征離子的m/z 195子離子），根據(jù)公式（2）計(jì)算信噪比。7.5 整機(jī)定量及定性重復(fù)性以C或相當(dāng)者為色譜分離柱，采用70：30乙腈水溶液為流動(dòng)相，參照7.4的條件進(jìn)行測(cè)量，分別記錄質(zhì)量色譜圖中相應(yīng)的峰面積和保留時(shí)間，重復(fù)測(cè)量6次，根據(jù)公式（3），以峰面積的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差計(jì)算定量重復(fù)性，以保留時(shí)間的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差計(jì)算定性重復(fù)性： 式中：相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差，%； 第i次測(cè)量峰面積或保留時(shí)間； 峰面積或保留時(shí)間的算術(shù)平均值。8 校準(zhǔn)結(jié)果的處理根據(jù)校準(zhǔn)結(jié)果，

12、發(fā)校準(zhǔn)證書(shū)，所有校準(zhǔn)項(xiàng)目及其結(jié)果均應(yīng)在證書(shū)中反映。校準(zhǔn)結(jié)果的表達(dá)按照J(rèn)JF 1071-2000技術(shù)規(guī)范的要求，包含標(biāo)題、實(shí)驗(yàn)室名稱和地址、送校單位的名稱和地址、校準(zhǔn)日期、校準(zhǔn)所用測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)的溯源性及有效性說(shuō)明、校準(zhǔn)環(huán)境等方面內(nèi)容。9 復(fù)校時(shí)間間隔液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀的復(fù)校時(shí)間間隔由客戶自定，建議不超過(guò)2年，更換重要部件、維修或?qū)x器性能有懷疑時(shí)，應(yīng)隨時(shí)校準(zhǔn)。附錄 A校準(zhǔn)證書(shū)內(nèi)頁(yè)格式（供參考）本次校準(zhǔn)所使用的主要計(jì)量標(biāo)準(zhǔn)器具名稱 型號(hào)規(guī)格 不確定度/準(zhǔn)確度 證書(shū)編號(hào)校準(zhǔn)地點(diǎn)及環(huán)境條件 地點(diǎn)： 溫度： 相對(duì)濕度： 其它：本次校準(zhǔn)所依據(jù)的技術(shù)規(guī)范(代號(hào)、名稱)：校準(zhǔn)數(shù)據(jù)/結(jié)果：電離源： 質(zhì)量分析器類型

13、：1. 質(zhì)量范圍2. 質(zhì)量準(zhǔn)確性3. 分辨力4. 信噪比5. 定量重復(fù)性6. 定性重復(fù)性 附錄B 校準(zhǔn)記錄格式 液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀校準(zhǔn)記錄委托單位記錄編號(hào)樣品名稱型號(hào)規(guī)格生產(chǎn)廠出廠編號(hào)標(biāo)準(zhǔn)器名稱型號(hào)規(guī)格儀器號(hào)證書(shū)編號(hào)技術(shù)特征技術(shù)依據(jù)溫度校準(zhǔn)地點(diǎn)相對(duì)濕度%校準(zhǔn)項(xiàng)目：電離源類型:質(zhì)量分析器類型:1. 分辨力：2. 質(zhì)量準(zhǔn)確性：理論值(u)實(shí)測(cè)值(u)平均值(u)誤差(u)校準(zhǔn)校準(zhǔn)日期核驗(yàn)證書(shū)編號(hào) （共 2頁(yè) 第 1 頁(yè)）液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀校準(zhǔn)記錄（續(xù)頁(yè)）委托單位記錄編號(hào)理論值(u)實(shí)測(cè)值(u)平均值(u)誤差(u)3.質(zhì)量范圍：6. 信噪比S/N：7. 定量重復(fù)性：測(cè)量次數(shù)123456平均值RSD峰面積8. 定性重復(fù)性：測(cè)量次數(shù)123456平均值RSD遷移時(shí)間備注：本液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀信噪比測(cè)量結(jié)果的不確定度：U = , k = 2 。不確定度計(jì)算依據(jù)：MLYJS-EX-XXXX液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀信噪比的測(cè)量不確定度評(píng)定。 （共2 頁(yè) 第 2 頁(yè)）附錄C不確定度評(píng)定液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀校準(zhǔn)的各項(xiàng)指標(biāo)中，主要對(duì)信噪比進(jìn)行不確定度評(píng)價(jià)，不確定度主要來(lái)自：1） n次測(cè)量相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差，A類，記為：u