合成抗菌藥分析

1、合成抗菌藥分析第一節(jié)第一節(jié) 喹喏酮類藥物的分析喹喏酮類藥物的分析一、化學(xué)結(jié)構(gòu)與性質(zhì)一、化學(xué)結(jié)構(gòu)與性質(zhì)R1OCOOH1 12 23 34 45 56 67 78 8NR2R3R4R5X4-喹諾酮喹諾酮吡啶酮酸吡啶酮酸【發(fā)展概況與分代】u 分代分代 代表藥代表藥 u第一代第一代(1962-1969) (1962-1969) 萘啶酸萘啶酸( (nalidixic acidnalidixic acid) ) 第二代第二代(1969-1979) (1969-1979) 吡哌酸吡哌酸( (pipemidic acid,PPApipemidic acid,PPA） 第三代第三代(1980-1996) (19

2、80-1996) 諾氟沙星諾氟沙星(norfloxacin) (norfloxacin) ( (氟喹諾酮類氟喹諾酮類) ) 第四代第四代(1997-) (1997-) 莫西沙星莫西沙星(moxifloxacin)(moxifloxacin) ( (新型氟喹諾酮類新型氟喹諾酮類) ) 萘啶酸萘啶酸NNOOOH第一代喹諾酮類抗菌藥第一代喹諾酮類抗菌藥NNNONOOHHN 吡哌酸吡哌酸第第二二代喹諾酮類抗菌藥代喹諾酮類抗菌藥NOOOHFNHN第三代喹諾酮類抗菌藥第三代喹諾酮類抗菌藥 氟喹諾酮類氟喹諾酮類 6位引入氟原子，位引入氟原子，7 位引入哌嗪基位引入哌嗪基諾氟沙星諾氟沙星左氧氟沙星左氧氟沙星1

3、.酸堿兩性酸堿兩性: 含有羧基和堿性氮原子，故顯含有羧基和堿性氮原子，故顯酸堿兩性，易溶于酸和堿。酸堿兩性，易溶于酸和堿。R1OCOOH1 12 23 34 45 56 67 78 8NR2R3R4R5X理化性質(zhì)理化性質(zhì)3.旋光性：左氧氟沙星具有旋光性，氧氟沙星旋光性：左氧氟沙星具有旋光性，氧氟沙星、環(huán)丙沙星等無旋光性。、環(huán)丙沙星等無旋光性。4.分解反應(yīng)：遇光照可分解，使用前后均應(yīng)注分解反應(yīng)：遇光照可分解，使用前后均應(yīng)注意避光。意避光。2.紫外吸收光譜特征紫外吸收光譜特征5.與金屬與金屬離子絡(luò)合反應(yīng)離子絡(luò)合反應(yīng): 極易和金屬離子如鈣、鎂極易和金屬離子如鈣、鎂、鐵、鋅等形成螯合物、鐵、鋅等形成螯

4、合物 3,4-位羧基和羰基位羧基和羰基R1OCOOH1 12 23 34 45 56 67 78 8NR2R3R4R5X二、鑒別試驗(yàn)二、鑒別試驗(yàn)1.與丙二酸的反應(yīng)與丙二酸的反應(yīng) 喹諾酮類藥物為叔胺化合物，與丙二酸在酸酐中喹諾酮類藥物為叔胺化合物，與丙二酸在酸酐中共熱時(shí)，有棕色、紅色、紫色或藍(lán)色呈現(xiàn)。共熱時(shí)，有棕色、紅色、紫色或藍(lán)色呈現(xiàn)。R1OCOOH1 12 23 34 45 56 67 78 8NR2R3R4R5X示例示例: ChP2010 諾氟沙星乳膏的鑒別諾氟沙星乳膏的鑒別 【鑒別】 取含量測定項(xiàng)下供試品溶液取含量測定項(xiàng)下供試品溶液5ml，置水浴上蒸干，殘?jiān)屑颖峒s，置水浴上蒸干，殘

5、渣中加丙二酸約50mg與酸酐與酸酐1ml, 在水浴中加熱約在水浴中加熱約10分鐘分鐘，溶液顯紅棕色。，溶液顯紅棕色。2、紫外、紫外-可見分光光度法可見分光光度法3、薄層色譜法、薄層色譜法4、高效液相色譜法、高效液相色譜法5、 紅外光譜法紅外光譜法三、特殊雜質(zhì)檢查三、特殊雜質(zhì)檢查有關(guān)物質(zhì)有關(guān)物質(zhì): 工藝雜質(zhì)、降解產(chǎn)物工藝雜質(zhì)、降解產(chǎn)物ChP2010檢查喹諾酮類藥物有關(guān)物質(zhì)主要采檢查喹諾酮類藥物有關(guān)物質(zhì)主要采用用HPLC法法1.右氧氟沙星；2.左氧氟沙星：手手性配位體與金屬離子生成配性配位體與金屬離子生成配合物，與對映體發(fā)生交換，合物，與對映體發(fā)生交換，生成一對可逆的非對映體復(fù)生成一對可逆的非對映

6、體復(fù)合物。合物。左氧氟沙星光學(xué)雜質(zhì)（右氧氟沙星）的檢查四、含量測定四、含量測定 非水溶液滴定法非水溶液滴定法 紫外分光光度法紫外分光光度法 高效液相色譜法高效液相色譜法（1）非水溶液滴定法）非水溶液滴定法ChP2010吡哌酸的非水溶液滴定測定吡哌酸的非水溶液滴定測定 【含量測定含量測定】取供試品約取供試品約0.2g，精密稱定，加，精密稱定，加冰醋酸冰醋酸20ml溶解后，加結(jié)晶紫指示液溶解后，加結(jié)晶紫指示液1滴，用高滴，用高氯酸滴定液氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定至溶液顯純藍(lán)色，并滴定至溶液顯純藍(lán)色，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每1ml高氯酸滴高氯酸滴定液定液

7、(0.1mol/L)相當(dāng)于相當(dāng)于30.33mg的的C14H17N5O3。（2）紫外分光光度法）紫外分光光度法ChP2010諾氟沙星乳膏含量的諾氟沙星乳膏含量的UV測定。測定。（3）高效液相色譜法）高效液相色譜法鹽酸洛美沙星：戊烷磺酸鈉離子對鹽酸洛美沙星：戊烷磺酸鈉離子對HPLC測定測定左氧氟沙星：高氯酸鈉離子對左氧氟沙星：高氯酸鈉離子對HPLC測定測定第二節(jié)第二節(jié) 磺胺類藥物分析磺胺類藥物分析 磺胺類藥物的發(fā)現(xiàn)，開創(chuàng)了化學(xué)治療的新紀(jì)磺胺類藥物的發(fā)現(xiàn)，開創(chuàng)了化學(xué)治療的新紀(jì)元元 使死亡率很高的細(xì)菌性傳染疾病得到控制使死亡率很高的細(xì)菌性傳染疾病得到控制.(1)基本結(jié)構(gòu)基本結(jié)構(gòu)對氨基苯磺酰胺對氨基苯磺

8、酰胺芳伯氨基芳伯氨基磺酰胺基磺酰胺基一、化學(xué)結(jié)構(gòu)與性質(zhì)一、化學(xué)結(jié)構(gòu)與性質(zhì)極弱堿性極弱堿性弱酸性弱酸性磺胺嘧啶（磺胺嘧啶（SD）嘧啶環(huán)嘧啶環(huán)磺胺甲噁唑（磺胺甲噁唑（SMZ）5-甲基異噁唑甲基異噁唑(2) 理化性質(zhì)理化性質(zhì) 性狀性狀 本類藥物多為白色或類白色結(jié)晶性本類藥物多為白色或類白色結(jié)晶性 粉末。粉末。在水中幾乎不溶，溶于鹽酸或氫氧化鈉溶在水中幾乎不溶，溶于鹽酸或氫氧化鈉溶液，易溶于乙醇、丙酮。液，易溶于乙醇、丙酮。（2）熔融變色）熔融變色不同的磺胺類藥物以直火加熱熔融后不同的磺胺類藥物以直火加熱熔融后，可呈現(xiàn)不同的顏色。，可呈現(xiàn)不同的顏色。如磺胺可顯紫藍(lán)色，磺胺嘧啶顯紅如磺胺可顯紫藍(lán)色，磺胺

9、嘧啶顯紅棕色等。棕色等。3. 具有酸堿兩性具有酸堿兩性H2NSO2NH2堿性堿性酸性酸性pKa: 78 4. 芳伯胺基反應(yīng)芳伯胺基反應(yīng)重氮化重氮化-偶合反應(yīng)偶合反應(yīng)氧化反應(yīng)氧化反應(yīng)H2NSO2NH25. 磺酰氨基的反應(yīng)磺酰氨基的反應(yīng)沉淀反應(yīng)沉淀反應(yīng)H2NSO2NH26 . 苯環(huán)上的反應(yīng)苯環(huán)上的反應(yīng)鹵代反應(yīng)鹵代反應(yīng)H2NSO2NH2 含氮雜環(huán)含氮雜環(huán)在酸性條件下，可與生物堿沉淀劑在酸性條件下，可與生物堿沉淀劑發(fā)生沉淀反應(yīng)發(fā)生沉淀反應(yīng)7. 取代雜環(huán)的特性取代雜環(huán)的特性1、金屬離子的取代反應(yīng)、金屬離子的取代反應(yīng)與硫酸銅的成鹽反應(yīng)與硫酸銅的成鹽反應(yīng) 活潑活潑H 4CuSO磺胺甲惡唑磺胺甲惡唑NaOH草

10、綠草綠噁噁磺胺嘧啶磺胺嘧啶黃綠黃綠紫色紫色二、鑒別試驗(yàn)二、鑒別試驗(yàn) 2、重氮化、重氮化偶合反應(yīng)偶合反應(yīng) 芳伯氨基芳伯氨基重氮鹽磺胺嘧啶磺胺甲惡唑2NaNOHCl偶氮化合物偶氮化合物 猩紅色猩紅色橙黃色橙黃色OH-萘酚萘酚3. 鈉鹽反應(yīng)鈉鹽反應(yīng)4. 高效液相色譜法高效液相色譜法5. 紅外分光光度法紅外分光光度法 一般雜質(zhì)：一般雜質(zhì)：氯化物、熾灼殘?jiān)?、重金屬。氯化物、熾灼殘?jiān)?、重金屬?酸度酸度溶液的澄清度與顏色溶液的澄清度與顏色特殊雜質(zhì)特殊雜質(zhì)三、雜質(zhì)檢查三、雜質(zhì)檢查四、含量測定四、含量測定高效液相色譜法高效液相色譜法滴定法：滴定法：非水溶液滴定法、永停滴定法非水溶液滴定法、永停滴定法 高效液相

11、色譜法高效液相色譜法示例：示例：ChP2010復(fù)方磺胺嘧啶片含量的復(fù)方磺胺嘧啶片含量的HPLC測定測定流動(dòng)相：乙腈流動(dòng)相：乙腈-0.3%醋酸銨（醋酸銨（20:80） ChP2010規(guī)定磺胺嘧啶鈉、磺胺嘧啶鋅、規(guī)定磺胺嘧啶鈉、磺胺嘧啶鋅、磺胺甲噁唑、磺胺多辛和磺胺醋酰鈉等原磺胺甲噁唑、磺胺多辛和磺胺醋酰鈉等原料藥和制劑、磺胺嘧啶原料藥采用永停滴料藥和制劑、磺胺嘧啶原料藥采用永停滴定法。定法。2. 永停滴定法永停滴定法（亞硝酸鈉滴定法）（亞硝酸鈉滴定法） 【含量測定含量測定】精密稱定磺胺多辛約精密稱定磺胺多辛約0.6g，置燒杯中，加水，置燒杯中，加水40ml與鹽酸溶液與鹽酸溶液(12)15ml，置

12、電磁攪拌器上，攪拌使溶解，置電磁攪拌器上，攪拌使溶解，再加溴化鉀再加溴化鉀2g，插入鉑，插入鉑-鉑電極后，鉑電極后，將滴定管的尖端插入液面將滴定管的尖端插入液面下約下約2/3處，用亞硝酸鈉滴定液處，用亞硝酸鈉滴定液(0.1mol/L)迅速滴定，迅速滴定，隨滴隨隨滴隨攪拌，至近終點(diǎn)時(shí)，將滴定管的尖端提出液面，用少量水淋攪拌，至近終點(diǎn)時(shí)，將滴定管的尖端提出液面，用少量水淋洗尖端，洗液并入溶液中，繼續(xù)緩緩滴定，至電流計(jì)指針突洗尖端，洗液并入溶液中，繼續(xù)緩緩滴定，至電流計(jì)指針突然偏轉(zhuǎn)，并不再回復(fù)，即為滴定終點(diǎn)。然偏轉(zhuǎn)，并不再回復(fù)，即為滴定終點(diǎn)?；前范嘈粱前范嘈?. 非水溶液滴定法非水溶液滴定法磺胺異噁

13、唑原料藥及片劑磺胺異噁唑原料藥及片劑磺胺異噁唑片磺胺異噁唑片 【含量測定含量測定】取磺胺異噁唑片取磺胺異噁唑片20片，精密稱定，研片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取細(xì)粉適量細(xì)，精密稱取細(xì)粉適量(約相當(dāng)于磺胺異噁唑約相當(dāng)于磺胺異噁唑0.5g)，加二甲基甲酰胺，加二甲基甲酰胺40ml使溶解，加偶氮紫指示液使溶解，加偶氮紫指示液 3 滴，用甲醇鈉滴定液滴，用甲醇鈉滴定液(0.1mol/L)滴定至溶液恰顯滴定至溶液恰顯藍(lán)色，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每藍(lán)色，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每1ml甲醇鈉滴定液甲醇鈉滴定液(0.1mol/L)相當(dāng)于相當(dāng)于26.73mg的的C11H13N3O3S。一、典型藥物

14、的結(jié)構(gòu)一、典型藥物的結(jié)構(gòu)二、化學(xué)性質(zhì)：酸堿兩性、芳伯氨基反應(yīng)、磺酰二、化學(xué)性質(zhì)：酸堿兩性、芳伯氨基反應(yīng)、磺酰胺的反應(yīng)胺的反應(yīng)三、鑒別：硫酸銅（黃綠三、鑒別：硫酸銅（黃綠-紫）；紫）； 芳香第一胺（猩紅）芳香第一胺（猩紅）四、含量測定：四、含量測定：HPLC、非水溶液滴定法、永停滴非水溶液滴定法、永停滴定法定法具有丙二酸呈色反應(yīng)的藥物是：具有丙二酸呈色反應(yīng)的藥物是： 諾氟沙星諾氟沙星 磺胺嘧啶磺胺嘧啶 磺胺甲惡唑磺胺甲惡唑 司可巴比妥司可巴比妥 鹽酸氯丙嗪鹽酸氯丙嗪下列含量測定方法下列含量測定方法,磺胺類藥物未采用的是磺胺類藥物未采用的是: 高效液相色譜法高效液相色譜法 溴酸鉀法溴酸鉀法 永停滴

15、定法永停滴定法 非水溶液滴定法非水溶液滴定法A. 亞硝酸鈉滴定法亞硝酸鈉滴定法亞硝酸鈉滴定法測定磺胺甲惡唑含量時(shí)亞硝酸鈉滴定法測定磺胺甲惡唑含量時(shí), ChP2010選用的指示劑或指示終點(diǎn)的選用的指示劑或指示終點(diǎn)的方法是：方法是： 永停法永停法 外指示劑法外指示劑法 內(nèi)指示劑法內(nèi)指示劑法 淀粉淀粉A.碘化鉀碘化鉀-淀粉淀粉與硫酸銅生成草綠色沉淀的是與硫酸銅生成草綠色沉淀的是 A、磺胺甲噁唑、磺胺甲噁唑 B、磺胺嘧啶、磺胺嘧啶 C、甲氧芐啶、甲氧芐啶 D、磺胺異噁唑、磺胺異噁唑 E、磺胺醋酰鈉、磺胺醋酰鈉 多選題：多選題：磺胺類藥物的鑒別方法有磺胺類藥物的鑒別方法有 A. Kober反應(yīng)反應(yīng) B.

16、 重氮化重氮化-偶合反應(yīng)偶合反應(yīng) C. 與硫酸銅的沉淀反應(yīng)與硫酸銅的沉淀反應(yīng) D. Marquis反應(yīng)反應(yīng) E. 茚三酮反應(yīng)茚三酮反應(yīng) 喹諾酮類藥物采用的鑒別方法有：喹諾酮類藥物采用的鑒別方法有： 硫酸銅反應(yīng)硫酸銅反應(yīng) 紅外分光光度法紅外分光光度法 高效液相色譜法高效液相色譜法 丙二酸反應(yīng)丙二酸反應(yīng)A. 紫外分光光度法紫外分光光度法多選題：多選題：喹諾酮類藥物的含量測定法有：喹諾酮類藥物的含量測定法有：A. 非水溶液滴定法非水溶液滴定法B. 紫外分光光度法紫外分光光度法C. 高效液相色譜法高效液相色譜法D. 熒光分光光度法熒光分光光度法E. 配位滴定法配位滴定法磺胺類藥物的鑒別方法磺胺類藥物的

17、鑒別方法: 紅外光譜法紅外光譜法 烯丙基的反應(yīng)烯丙基的反應(yīng) 與硫酸銅的反應(yīng)與硫酸銅的反應(yīng) 三氯化鐵反應(yīng)三氯化鐵反應(yīng)A.芳香第一胺反應(yīng)芳香第一胺反應(yīng)鹽酸左氧氟沙星膠囊含量測定鹽酸左氧氟沙星膠囊含量測定:取裝量差異項(xiàng)下的內(nèi)容物取裝量差異項(xiàng)下的內(nèi)容物,混勻混勻,精密稱定精密稱定,(約相當(dāng)于左氧氟沙星約相當(dāng)于左氧氟沙星40mg),置置100 ml容容量瓶中，加量瓶中，加0.1 mol/L鹽酸溶液溶解并稀釋至刻度，搖勻鹽酸溶液溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過。精密量取續(xù)濾液，濾過。精密量取續(xù)濾液10ml，置，置100ml容量瓶中，用容量瓶中，用0.1mol/L鹽酸溶液稀釋至刻度，搖勻，精密量取鹽酸溶液稀釋至刻度，搖勻，精密量取