組織中的糖、脂、蛋白質

1、三、生物組織中糖類、脂肪和蛋白質檢測三、生物組織中糖類、脂肪和蛋白質檢測的原理的原理 連一連連一連 糖類的檢測糖類的檢測蛋白質的檢測蛋白質的檢測脂肪的檢測脂肪的檢測 1 1實驗步驟實驗步驟50%酒精的作用酒精的作用洗掉浮色洗掉浮色現(xiàn)配現(xiàn)用現(xiàn)配現(xiàn)用2 2實驗注意問題實驗注意問題注：非還原糖注：非還原糖( (如蔗糖如蔗糖) )斐林試劑斐林試劑 現(xiàn)象現(xiàn)象: :(1)(1)還原糖鑒定實驗還原糖鑒定實驗 淺藍色淺藍色 Cu(OH)2的顏色的顏色 1.1.還原性糖與非還原性糖：還原性糖與非還原性糖： 還原性糖：還原性糖： 非還原性糖：非還原性糖：有還原性基團有還原性基團游離醛基或酮基的糖；游離醛基或酮基的

2、糖；如如:葡萄糖、果糖、麥芽糖、乳糖、纖維二糖。葡萄糖、果糖、麥芽糖、乳糖、纖維二糖。淀粉、纖維素、蔗糖、糖原。淀粉、纖維素、蔗糖、糖原。斐林試劑（現(xiàn)配現(xiàn)用）斐林試劑（現(xiàn)配現(xiàn)用）還原性糖（醛基）還原性糖（醛基）斐林試劑斐林試劑磚紅色沉淀磚紅色沉淀3.反應原理反應原理: 還原糖中的醛基被還原糖中的醛基被Cu(OH)Cu(OH)2 2氧化，氧化，Cu(OH)Cu(OH)2 2被還原為被還原為CuCu2 2O O2.鑒定還原糖的試劑：鑒定還原糖的試劑：為什么不用植物的葉或西瓜與西紅柿的果實為什么不用植物的葉或西瓜與西紅柿的果實? ?？由于葉片中葉綠素的顏色較深，西瓜與西紅柿的果實由于葉片中葉綠素的顏

3、色較深，西瓜與西紅柿的果實顏色為紅色，顏色為紅色，對于鑒定時的顏色反應起著掩蓋作用，對于鑒定時的顏色反應起著掩蓋作用，導致實驗現(xiàn)象不明顯導致實驗現(xiàn)象不明顯，因此，也不宜作實驗材料。，因此，也不宜作實驗材料。 2 2實驗注意問題實驗注意問題(1)(1)還原糖鑒定實驗還原糖鑒定實驗 淺色淺：淺色淺：不能用綠色葉片、西瓜、血液等材料，防不能用綠色葉片、西瓜、血液等材料，防止顏色的干擾。止顏色的干擾。 還原糖含量高：還原糖含量高：不能用馬鈴薯不能用馬鈴薯(含淀粉含淀粉)、甘蔗、甜、甘蔗、甜菜菜(含蔗糖含蔗糖)4.4.材料的要求材料的要求: :（2 2）鑒定淀粉的方法：）鑒定淀粉的方法：碘碘碘化鉀溶液（

4、碘化鉀溶液（藍色藍色）（3 3）脂肪的鑒定）脂肪的鑒定 1 1方法：方法：染色時間染色時間脂肪滴顏色脂肪滴顏色橘黃色橘黃色紅色紅色2323分分鐘鐘1 1分分鐘鐘蘇丹III蘇丹IV3 3鑒定脂肪的實驗材料鑒定脂肪的實驗材料最好選擇富含脂肪的種子，如花生種子（取其子葉）。最好選擇富含脂肪的種子，如花生種子（取其子葉）。 2 2實驗注意問題實驗注意問題P18 2種方法種方法2.2.試劑試劑3 3在下列四支試管中分別加入一些物質。甲試管：在下列四支試管中分別加入一些物質。甲試管：豆?jié){；乙試管：人體必需的豆?jié){；乙試管：人體必需的8 8種氨基酸溶液；丙試管：種氨基酸溶液；丙試管：牛奶和蛋白酶；丁試管：人血

5、液中的紅細胞和蒸餾水。牛奶和蛋白酶；丁試管：人血液中的紅細胞和蒸餾水。上述四支試管中加入雙縮脲試劑振蕩后，有紫色反應上述四支試管中加入雙縮脲試劑振蕩后，有紫色反應的是的是( () ) A A甲、丁甲、丁 B B甲、乙、丁甲、乙、丁 C C甲、乙、丙甲、乙、丙 D D甲、丙、丁甲、丙、?。? 4）蛋白質（三肽、多肽）的鑒定）蛋白質（三肽、多肽）的鑒定 2 2實驗注意問題實驗注意問題實驗材料：實驗材料： 最好選用富含蛋白質的生物組織（或器官），最好選用富含蛋白質的生物組織（或器官），植物材料常用的是大豆，動物材料常用的是雞蛋清植物材料常用的是大豆，動物材料常用的是雞蛋清 注注:蛋清作材料，必須稀釋

6、。預留部分組織樣液做對比蛋清作材料，必須稀釋。預留部分組織樣液做對比二苯胺試劑（二苯胺試劑（藍色藍色）（5 5）DNADNA的鑒定的鑒定 P26 P26 混合染色劑：混合染色劑：甲基綠使甲基綠使DNADNA分子顯綠色。分子顯綠色。 吡啰紅使吡啰紅使RNA分子顯紅色。分子顯紅色。試劑：試劑： 4 4用碘液、蘇丹用碘液、蘇丹染液和雙縮脲試劑測得甲、乙、染液和雙縮脲試劑測得甲、乙、丙三種植物的干種子中三大類有機物的顏色反應如下丙三種植物的干種子中三大類有機物的顏色反應如下表，其中表，其中“”的數(shù)量代表顏色反應深淺程度，下列的數(shù)量代表顏色反應深淺程度，下列有關說法不正確的是有關說法不正確的是( ()

7、)種子試劑種子試劑碘液碘液蘇丹蘇丹染液染液 雙縮脲試劑雙縮脲試劑甲甲乙乙丙丙 A. A.乙種子中主要含蛋白質乙種子中主要含蛋白質 B B碘液、蘇丹碘液、蘇丹染液和雙縮脲試劑與相應的物質染液和雙縮脲試劑與相應的物質發(fā)生的顏色反應分別是藍色、橘黃色和紫色發(fā)生的顏色反應分別是藍色、橘黃色和紫色 C C在觀察顏色時有可能用到光學顯微鏡在觀察顏色時有可能用到光學顯微鏡 D D這三種試劑的使用均不需要水浴加熱這三種試劑的使用均不需要水浴加熱A鑒定物質鑒定物質實驗試劑實驗試劑實驗現(xiàn)象實驗現(xiàn)象注意事項注意事項淀粉淀粉斐林試劑斐林試劑沉淀沉淀試劑現(xiàn)用現(xiàn)配、試劑現(xiàn)用現(xiàn)配、沸水浴加熱沸水浴加熱蘇丹蘇丹IIIIII、

8、IVIVIIIIII橘黃色橘黃色IV IV 紅色紅色可用顯微鏡觀察可用顯微鏡觀察 雙縮脲試劑雙縮脲試劑先加先加NaOH,NaOH,后加后加CuSO4CuSO4 二苯胺二苯胺沸水浴加熱沸水浴加熱碘液碘液藍色藍色操作（見下）操作（見下）P102P102黑暗處理黑暗處理對照處理（如遮光）對照處理（如遮光）酒精脫色酒精脫色清水沖洗清水沖洗碘液檢驗碘液檢驗還原性糖還原性糖脂肪脂肪蛋蛋 白白 質質DNA不不同同點點比較項目比較項目斐林試劑斐林試劑雙縮脲試劑雙縮脲試劑使用方法使用方法實質實質反應條件反應條件反應原理反應原理顏色顏色濃度濃度乙液乙液CuSOCuSO4 4濃度為濃度為0.05 0.05 g/mL

9、g/mLB B液液CuSOCuSO4 4濃度為濃度為0.01 0.01 g/mLg/mL相相同同都含有都含有NaOHNaOH、CuSOCuSO4 4兩種成分，且所用兩種成分，且所用NaOHNaOH濃度都是濃度都是0.1 g/mL0.1 g/mL甲液和乙液混合均勻后甲液和乙液混合均勻后即可使用，且現(xiàn)配現(xiàn)用即可使用，且現(xiàn)配現(xiàn)用使用時先加使用時先加A液再加液再加B液液新配制的新配制的Cu(OH)Cu(OH)2 2反應反應堿性條件下的堿性條件下的CuCu2 2需水浴加熱需水浴加熱不需加熱即可反應不需加熱即可反應還原糖中的還原糖中的醛基被醛基被Cu(OH)Cu(OH)2 2氧化，氧化，Cu(OH)Cu(

10、OH)2 2被還原為被還原為CuCu2 2O O具有兩個以上肽鍵的化合具有兩個以上肽鍵的化合物在堿性條件下與物在堿性條件下與CuCu2 2反反應生成絡合物應生成絡合物磚紅色磚紅色紫色紫色 5 5根據(jù)根據(jù)“檢測生物組織中的還原糖、脂肪和蛋白檢測生物組織中的還原糖、脂肪和蛋白質質”實驗，回答下列問題：實驗，回答下列問題： (1)(1)鑒定成熟蘋果果肉中存在還原糖所用的試劑是鑒定成熟蘋果果肉中存在還原糖所用的試劑是 ，該試劑與細胞內的還原糖發(fā)生作用，形成，該試劑與細胞內的還原糖發(fā)生作用，形成沉淀。沉淀。 (2)(2)在鑒定花生子葉中脂肪的實驗中，能將脂肪染在鑒定花生子葉中脂肪的實驗中，能將脂肪染成橘

11、黃色的染液是，用其染色時，沖洗浮成橘黃色的染液是，用其染色時，沖洗浮色要用體積分數(shù)為色要用體積分數(shù)為50%50%的酒精，這是因為體積分數(shù)為的酒精，這是因為體積分數(shù)為50%50%的酒精的酒精能能 。 斐林試劑斐林試劑 磚紅色磚紅色 蘇丹蘇丹染液染液 溶解蘇丹溶解蘇丹染液染液 (3)(3)鑒定黃豆組織中存在蛋白質時，向組織樣液中加鑒定黃豆組織中存在蛋白質時，向組織樣液中加入雙縮脲試劑入雙縮脲試劑A A搖勻，再向樣液中加入雙縮脲試劑搖勻，再向樣液中加入雙縮脲試劑B B搖搖勻。其中雙縮脲試劑勻。其中雙縮脲試劑B B的量只有的量只有3 34 4滴，而不能過量，滴，而不能過量，為什么？為什么？。過量的雙縮

12、脲試劑過量的雙縮脲試劑B B會與雙縮脲試劑會與雙縮脲試劑A A反應，使溶液呈反應，使溶液呈藍色，而掩蓋了生成的紫色藍色，而掩蓋了生成的紫色5 5根據(jù)根據(jù)“檢測生物組織中的還原糖、脂肪和蛋白檢測生物組織中的還原糖、脂肪和蛋白質質”實驗，回答下列問題：實驗，回答下列問題： (4) (4)本實驗的注意事項：本實驗的注意事項： 斐林試劑極不穩(wěn)定，其甲液和乙液需斐林試劑極不穩(wěn)定，其甲液和乙液需_，使用時再臨時混合均勻用于實驗。使用時再臨時混合均勻用于實驗。 雙縮脲試劑的使用，應先加雙縮脲試劑的使用，應先加，造成堿性環(huán)境，再加，造成堿性環(huán)境，再加。 在還原糖的鑒定中，對試管中的溶液水浴加熱在還原糖的鑒定中

13、，對試管中的溶液水浴加熱時，試管底部不要觸及時，試管底部不要觸及_；試管口不要朝向；試管口不要朝向_，以免溶液沸騰時沖出試管造成燙，以免溶液沸騰時沖出試管造成燙傷。傷。分別配制、分別配制、儲存儲存 A液液(質量濃度為質量濃度為B液液(質量濃度為質量濃度為0.01 g/mL的的CuSO4溶液溶液) 燒杯底部燒杯底部 實驗者或其他人實驗者或其他人 0.1 g/mL的的NaOH溶液溶液) 5 5根據(jù)根據(jù)“檢測生物組織中的還原糖、脂肪和蛋白質檢測生物組織中的還原糖、脂肪和蛋白質”實驗，回答下列問題：實驗，回答下列問題：細胞內物質或結構的檢測方法細胞內物質或結構的檢測方法(1)淀粉：淀粉：碘液；碘液；(2)還原糖：還原糖：斐林試劑；斐林試劑；(3) 脂肪：脂肪：蘇丹蘇丹或蘇丹或蘇丹染液；染液；(4) 蛋白質：蛋白質：雙縮脲試劑；雙縮脲試劑；(5)O2：(6) CO2：(7)乳酸：乳酸：(8)染色體：染色體：(9)DNA、RNA在細胞中的分布：在細胞中的分布：(10)線粒體：線粒體：(11)酒精：酒精：澄清石灰水或溴麝香草酚藍水溶液澄清石灰水或溴麝香草酚藍水溶液pH試紙；試紙；帶火星木條帶火星木條龍